| عنوان |
متن |
| خلاصه طرح به فارسی | بررسی سطح آنتی اکسیدانهای تام بزاق در بیماران مبتلا به پریودنتیت مراجعه کننده به دانشکده دندانپزشکی زاهدان قبل و بعد از جراحی پریودنتال |
| خلاصه طرح به لاتین | Evaluation of total salivary antioxidants level in patients with periodontitis in attending to Zahedan dental school before and after periodontal surgery |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | رادیکالهای آزاد، اتمها یا مولکولهایی هستند که به دلیل داشتن الکترون آزاد، در بدن موجودات بسیار واکنش پذیرند و آسیبهای زیادی را به ماکرومولکولهای بدن جانداران همانند DNA، پروتئینها، لیپیدها و کربوهیدراتها وارد میسازند(1). در بدن سیستمهای خاصی برای مقابله با آسیبهای حاصل از رادیکالهای آزاد وجود دارد که به نام سیستم دفاعی آنتیاکسیدانی معروف است(2). زمانی که بین میزان تولید رادیکالهای آزاد و سیستم دفاعی آنتیاکسیدانی تعادل وجود نداشته باشد، وضعیتی پیش می آید که به آن استرس اکسیداتیو می گویند(3). پارهای از مطالعات نشان داده است که رادیکالهای آزاد در پاتوژنز چندین بیماری شامل:آرتریت روماتوئید ، سندرم دیسترس تنفسی حاد ، سرطان ، سندرم نقص ایمنی اکتسابی (4و5) و بیماری پریودنتال نقش دارند(6و7). بیماری بافتهای پریودنتال شایعترین اختلال التهابی در سطح جهان است و اصلی ترین علت از دست دادن دندانها در بالغین به شمار می رود(8). اسیداوریک ، اسید اسکوربیک وآلبومین جزءآنتی اکسیدانهای مهم دفاعی بدن در مقابل رادیکالهای آزاد می باشند. (9)
Halliwell و همکاران نشان دادند که اسید اوریک یکی از مهمترین آنتی اکسیدانهای موجود در بزاق می باشد (10) .
میزان تولیدآنتی اکسیدانها در بزاق تحریکی بیش از بزاق غیر تحریکی است . اسید اوریک توسط اکسیداسیون هایپو گزانتین و اگزانتین تولید می شود و در بافتهای انسانی به علت کمبود aureate oxidase اسیداوریک به عنوان محصول نهایی متابولیسم پورین تجمع می یابد. در محیط آزمایشگاهی، انتقال آهن وابسته به OH با اسید اوریک بطورموثرتری نسبت به اسید اسکوربیک مهار می شود(11).
برخی از اجزای سیستم دفاعی آنتیاکسیدان نظیر آنزیمهای سوپراکسید دسموتاز، گلوتاتیون پراکسیداز و کاتالاز و همچنین اسید اوریک در بدن ساخته میشود ولی برخی دیگر نظیر ویتامین E، آلفاتوکوفرول، ویتامینC و بتاکاروتن باید از طریق رژیم غذایی تأمین گردد. طی مطالعات مختلف گزارش شده است که بزاق می تواند یک سیستم دفاعی در برابر رادیکالهای آزاد و استرساکسیداتیو ایجاد نماید(12).
محققین به این نتیجه رسیدند که افزایش موضعی سطح آنتیاکسیدان تام محیط دهان و پاکت پریودونتال میتواند نقش مهمی در پاتوژنز پریودونتیت مزمن ایفا نماید. سطح آنتیاکسیدان رابطه تنگاتنگی با وضعیت پریودونتال دارد و سیستم دفاعی آنتیاکسیدان بزاق در بیماران دارای آفت راجعه دچار نقص میباشد.(13) در سال2000 Wadington وهمکاران، مطالعه ای تحت عنوان نقش بالقوه انواع اکسیژن واکنشی در پاتوژنز بیماری پریودنتال انجام دادند. این مطالعه نشان داد که اکسیژن واکنشی می تواند در تخریب مستقیم اجزای بافت همبندی نقش داشته باشد و احتمالا منجر به از دست دادن عملکرد بافتهای پریودنتال می گردد(14).
درسال 2004Brock و همکاران، مطالعه ای تحت عنوان ظرفیت آنتی اکسیدان موضعی وسیستمیک در افراد مبتلا به پریودنتیت و افراد سالم انجام دادند و نتیجه گرفتند که ظرفیت آنتی اکسیدان مایع شیار لثه ای از لحاظ کیفیت وکمیت، مجزای از ظرفیت آنتی اکسیدان پلاسما و بزاق است.کاهش ظرفیت آنتی اکسیدان تام پلاسمامی تواند ناشی از پاسخ التهابی خفیف میزبان در برابر پاتوژنهای پریودنتال باشد. غلظت آنتی اکسیدان مایع شیار لثه در افراد مبتلا به پریودنتیت در مقایسه با گروه سالم بطور معنی داری کمتربود. (001/0P < ). همچنین متوسط میزان آنتی اکسیدان های تام بزاق در افراد مبتلا به پریودنتیت بطور معنی داری کمتر از آنتی اکسیدانهای پلاسما بود(05/0 P <). غلظت آنتی اکسیدان مایع شیار لثه افراد سالم بطور معنی داری بیشتر از بزاق و پلاسما بود(001/0P < ). (15)
در سال 2005، Panjamurthy و همکاران مطالعه ای تحت عنوان شرایط آنتی اکسیدان و پراکسیداسیون لیپید در بیماران مبتلابه پریودنتیت انجام دادند و نتیجه گرفتند که اختلال سیستم دفاعی آنتی اکسیدان اندوژن بدلیل تولید بیش ازحد محصولات پراکسیداسیون لیپید در نواحی التهابی میباشد که می تواند با میزان بالای استرس اکسیداتیو در بیماران مبتلا به پریودنتیت ربط داشته باشد.(16)
در سال 2007Canakci و همکاران، مطالعه ای تحت عنوان ظرفیت تام آنتی اکسیدانهای بزاق و مایع شیارلثه در زنان دچار پره کلامپسی با یا بدون بیماری پریودنتال انجام دادند و نتیجه گرفتندکه آنتی اکسیدانهای سیستمیک و موضعی وظرفیت آنتی اکسیدان تام در بیماری پریودنتال وشرایط پره کلامپسی (preeclamptic) تحت تاثیر قرار می گیرد و در زنان preeclamptic مبتلا به بیماری پریودنتال کمتر است.(17)
در مطالعه Blawanti وهمکاران درسال 2008 که با هدف ارزیابی ویتامین C بزاق و سرم در بیماران پریودنتال انجام شد، مقادیر آنتی اکسیدانی ویتامین C (سرم و بزاق) در 25 بیمار مبتلا به پریودنتیت و10 فرد سالم اندازه گیری شد. مقدار ویتامین C به طورمعنی داری در بیماران مبتلا به پریودنتیت نسبت به گروه کنترل کمتر بود. نتیجه اینکه، آنتی اکسیدان رژیم غذایی می تواند تا حد زیادی برای مقابله با رادیکالهای آزاد در بیماران مبتلا به پریودنتیت مورد استفاده قرار گیرد و منجر به کاهش مقادیرآنتی اکسیدانی بزاق گردد(18).
درمطالعه ای که Kim و همکاران در سال 2008 انجام دادند میزان آنتی اکسیدانهای بزاق را قبل 3-1 ماه پس از درمان افزایش می یابد.(19)
بیماری پریودنتال شایعترین بیماری التهابی در انسان است و کنترل آن نسبتا مشکل می باشد و در برخی افراد علیرغم بهداشت دهانی مطلوب، تحلیل شدید استخوانی و پریودنتیت منتشر رخ می دهد. به نظر می رسد، فاکتورهای دیگری علاوه برمیکروارگانیسمهای پاتوژن موجود در حفره دهان و تجمع پلاک دندانی، در پاتوژنز این بیماری دخیل باشند. باتوجه به اینکه آنتی اکسیدانها نقش بسزایی در مکانسیم دفاعی بدن در برابر رادیکالهای آزاد و استرس اکسیداتیو ایفا می کند، نقصان این سیستم دفاعی می تواند در پاتوژنز بیماری پریودنتال دخیل باشد. در مطالعه حاضر ظرفیت تام آنتی اکسیدان بزاق در افراد مبتلا به مشکلات پریودنتال قبل و پس از درمان مورد مقایسه قرار می گیرد.
|
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 1-میزان آنتیاکسیدان های تام بزاق در بیماران مبتلا به پریودونتیت قبل از درمان جراحی پریودنتال چقدر است؟
2-میزان آنتیاکسیدان های تام بزاق در بیماران مبتلا به پریودنتیت بعد از درمان جراحی پریودنتال چقدر است؟
فرضیات تحقیق:
میزان آنتیاکسیدانهای تام بزاق در مبتلایان به پریودنتیت قبل و پس از درمان جراحی پریودنتال متفاوت است.
|
| هدف کلی طرح | تعیین سطح آنتی اکسیدانهای تام بزاق در بیماران مبتلا به پریودنتیت مراجعه کننده به دانشکده دندانپزشکی زاهدان قبل و بعد از جراحی پریودنتال |
| اهداف اختصاصی | 1-تعیین سطح آنتیاکسیدانهای تام بزاق در افراد مبتلا به پریودونتیت قبل از درمان جراحی پریودنتال.
2-تعیین ظرفیت آنتیاکسیدانهای تام بزاق در افراد مبتلا به پریودونتیت پس از درمان جراحی پریودنتال.
3-مقایسه ظرفیت آنتیاکسیدانهای تام بزاق در افراد مبتلا به پریودنتیت قبل و بعد از درمان جراحی پریودنتال.
|
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | ندارد |
| تعریف واژه های تخصصی | (منطبق باMeSH ): پریودنتیت-انتی اکسیدان-بزاق
Periodontitis, antioxidant, saliva
|
| نوع مطالعه | مقطعی و توصیفی – تحلیلی |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | جامعه مورد مطالعه:
افراد مبتلا به بیماری پریودنتال مراجعه کننده به دانشکده دندانپزشکی زاهدان که معیارهای ورود به مطالعه را داشته باشند.
معیار ورود جهت تشخیص پریودنتیت بدین قرار می باشد:
1-وجود حداقل4 تا 5 دندان در یک کوادرانت با عمق پاکت بیشترمساوی 5.5≤(PPDs) PD
2-خونریزی حین پروبینگ آرام
3- سن بالای 30 سال
لازم بذکراست، کلیه افراد مورد مطالعه می بایست از لحاظ سیستمیک سالم باشند و بیماری زمینه ای نداشته باشند.
معیارهای کلی خروج شامل موارد زیر می باشد:
1) تاریخچه درمان با داروهای ضدالتهابی یا آنتی میکروبیال در عرض 3 ماه گذشته
2)حاملگی
3)تاریخچه ای ازسیگارکشیدن و الکل درگذشته یا درحال حاضر
4)استفاده منظم از دهانشویه ها
5)مصرف ویتامین ها(D,E) در3 ماه گذشته وکلیه ی آنتی اکسیدان های سنتتیک و هرگونه مکمل تغذیه ای خاص(مثل بیماری سیلیاک)
6)ابتلا به پریودونتیت جوانان
|
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | حجم نمونه با توجه به فرمول مقابل و بر اساس مطالعه شماره 19 محاسبه شده است.
|
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | روش نمونه گیری آسان(بر حسب مراجعه بیمار و نمونه های در دسترس) |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | اطلاعات بیماران شامل مشخصات دموگرافیک (سن، جنس، ....) وجود بیماری پریودنتال (عمق پاکت ، خونریزی حین پروبینگ،.....) و بررسی سیستمیک بیمار در یک پرسشنامه جمع آوری می شود.
نام ونام خانوادگی: تاریخ:
جنس :
سن:
میزان آنتی اکسیدان بزاق قبل از جراحی پریودنتال
میزان آنتی اکسیدان بزاق بعد از جراحی پریودنتال
|
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | در ابتدا از میان بیماران مبتلا به پریودنتیت مراجعه کننده به دانشکده دندانپزشکی( گروه سنی بالای 30 سال )افراد واجد شرایط که معیارهای ورود به مطالعه را داشته و جهت درمان نیاز به جراحی فلپ داشته باشند توسط متخصص پریو انتخاب گردیده و درصورت تمایل به همکاری پرسشنامه ای (سن، جنس، ...) برای وی توسط دانشجوی دندانپزشکی تکمیل می گردد.
ارزیابی پریودنتال بیمار بدین طریق صورت می گیرد:
PPD (Periodontal packet depth)(عمق پاکت پریودنتال)در هر6 ناحیه از دندان(مزیوباکال، میدباکال، دیستوباکال ،مزیوپالاتال، میدپالاتال و دیستوپالاتال) و حداقل4 تا 5 دندان در یک کوادرانت با استفاده از پروب (PCP UNC15) Hu-Friedy محاسبه می شود. نواحی که در طی پروبینگ دچار خونریزی شده ثبت می گردد. پس از بررسی وضعیت پریودنتال شخص و ثبت یافته ها در پرسشنامه قبل از درمان SRP(Scaling & Root Planning)، ارزیابی بالینی صورت گرفته و نمونه براق توسط دانشجوی دندانپزشکی جهت بررسی ظرفیت تام آنتی اکسیدان بزاق جمع آوری می گردد.
سپس بیماران فوق تحت درمان جرمگیری قرار می گیرند. پس از درمان جرمگیری جراحی های فلپ مورد نیاز درکوادرانت ها انجام گرفته و پس از اتمام جراحی فلپ و کشیدن بخیه،( توسط متخصص پریو ) نمونه گیری مجدد از بزاق توسط دانشجوی دندانپزشکی صورت می گیرد(همه مراحل کار توسط یک معاینه گر کالیبره صورت می گیرد.)
در این مطالعه نمونه بزاق تحریکی جمع آوری می شود. لازم به ذکراست که نمونه بزاق درحالت ناشتا جمع آوری می شود. ترشح بزاق با چرخاندن یک آدامس طبیعی در دهان برای 1دقیقه تحریک شده و از فرد خواسته می شود داخل یک لوله آزمایش ml50 بزاق را تخلیه کند. بزاق درتیوپ های یکبار مصرف (ازشرکت پارس آرمون ایران) جمع آوری می شود. درصورت ناشتا نبودن فرد مراجعه کننده جلسه جمع آوری بزاق به روز بعد که مراجعه کننده درحالت ناشتا باشد موکول می شود. تیوب ها با ml50 مهار کننده پروتئاز مخلوط می شود و سپس در سانتریفوژ با دور 10000 در دقیقه و دمایoc4 به مدت 15 دقیقه سانتریفوژ می شود تا دبری های سلولی و باکتریایی با سانتریفوژ جدا شود، سپس نمونه بزاق برای انجام آنالیزهای بعدی در دمایoc 20- نگه داری می شود، نمونه ها بایستی در طی 4 هفته آنالیز گردد. حجم بزاق محاسبه گردیده و بلافاصله برای آنالیزشیمیایی به آزمایشگاه بیوشیمی دانشگاه علوم پزشکی (پردیس زاهدان) انتقال داده می شود.
بزاق جمعآوری شده با روش (Plasma of Ferric Reducing Ability ) FRAP از نظر ظرفیت آنتیاکسیدانی تام مورد ارزیابی قرار می گیرد.
این روش بر اساس توانایی بزاق در احیای یونهای Fe (فریک) به Fe (فرو) در حضور مادهای به نام TPTZ (Triypridyl striazine) که به عنوان معرف مورد استفاده قرار میگیرد استوار است، که نتیجه آن کمپلکس آبی رنگ Fe-TPTZ با ماکزیموم جذب در 593 نانومتر میباشد. میزان قدرت احیاکنندگی بزاق از طریق افزایش غلظت کمپلکس فوق توسط دستگاه اسپکتروفوتومتراندازهگیری شد.
محلول های مورد نیاز برای انجام مطالعه عبارت است از:
1- بافر استات 300 میلی مولار با pH=3.6
2- محلول TPTZ 10 میلی مولاردر اسیدکلریدریک 40 میلی مولار
3-محلول Fecl3. 6H2O 20 میلی مولار در آب مقطر
4- محلول کار آماده: 25 میلی لیتر بافر استات + 5/2 میلی لیتر محلول TPTZ + 5/2 میلی لیتر محلول Fecl3. 6H2O
5-محلول FeSO4.7H2O 20 میلی مولار: 278/0 گرم FeSO4.7H2O به حجم 50 میلی لیتر. از این محلول غلظت های 200 تا 1400 میکرومولار تهیه میشود.
مارک تجاری و کارخانه سازنده مواد مورد استفاده در طرح
TPTZ* 50 گرم از شرکت مرک آلمان
*استات سدیم 500 گرم از شرکت مرک آلمان
*سولفات آهن II از شرکت مرک آلمان
*کیت اندازه گیری توتال پروتئین بزاق از شرکت پارس آزمون ایران
BCA (Bicinchoninic acid)* از شرکت سیگما آمریکا *نوک سمپلر زرد و آبی از شرکت گرینر آلمان
|
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | ا
جدول: میزان آنتی اکسیدانهای بزاق در افراد مورد مطالعه قبل و پس از جراحی پریودنتال..................
انتی اکسیدانهای بزاق در بیماران پریودنتال قبل از درمان جراحی بعد از درمان جراحی
میانگین انحراف معیار میانگین انحراف معیار
میزان آنتی اکسیدان بزاق
|
| ملاحظات اخلاقی | بر اساس کد 1 از کدهای مصوب کمیته اخلاق کشوری مبنی بر کسب رضایت آگاهانه این امر رعایت خواهد شد
بر اساس کد 5 از کدهای مصوب کمیته اخلاق کشوری هدف از انجام تحقیق فواید و ماهیت پژوهش به شرکت کنندگان توضیح داده شود
بر اساس کد 17 از کدهای مصوب کمیته اخلاق کشوری اطلاعات مربوط به هر یک از شرکت کنندگان محرمانه باقی خواهد ماند
بر اساس کدهای اخلاقی ذکر شده فرم رضایت آگاهانه تهیه شده و ضمیمه می گردد(ضمیمه 2)
|
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | همکاری بیمار در تهیه نمونه بزاق قبل و پس از درمان |
| کلمات کلیدی | (منطبق باMeSH ): پریودنتیت-انتی اکسیدان-بزاق
Periodontitis, antioxidant, saliva
|
| فهرست منابع و مراجع | 1)Halliwell B. Antioxidant characterization: methodology and mechanism. Biochem Pharmacol 1995; 17(10): 1341-8.
2)Cochranc CG. Cellular injury by antioxidants. Am J Med 1997; 32: 235-55.
3)Halliwell B, Gutteridge JM. The antioxidants of human extracellular fluids. Arch Biochem Biophys 1990; 280(1): 1-8.
4) Halliwell B, Zhao K, Whiteman M. Nitric oxide and peroxynitrite. a personal view of recent controversies. Free Radic Res1999; 31:651–669.
5) McCord JM. Human disease, free radicals, and the oxidant/antioxidant balance. Clin Biochem 1993; 26(7):351–357.
6) Battino M, Bullon P, Wilson M, Newman H. Oxidative injury and inflammatory periodontal diseases: the challenge of antioxidants to free radicals and reactive oxygen species. Crit Rev Oral Biol Med 1999; 10: 458–476.
7) Chapple IL. Reactive oxygen species and antioxydants in inflammatory diseases. J Clin Periodontol 1997; 24: 287–296.
8)Ridgeway EE. Periodontal disease: diagnosis and management. J Am Acad Nurse Pract 2000; 12: 79-83.
9) Ames BN, Cathcart R, Schwiers E, Hochstein P. Uric acid provides an antioxidant defense in humans against oxidant- and radical-caused aging and cancer: a hypothesis. Proc Natl Acad Sci U.S.A.1981; 78:68-58.
10) Halliwell B. Free radicals, antioxidants and human disease: curiosity, cause or consequence. Lancet 1994; 344: 721–724.
11) Moore S, Calder KA, Miller NJ, Rice-Evans C .Antioxidant activity of saliva and periodontal diseases. Free Radic Res1994; 21:417–425.
12) Little J W, Falace DA, Miller CS, Rhodus NL. Dental management of the medically compromised patient. 6th ed. USA, 2008.p.248-250.
13) Esteghamati AR, Zarban A, Doosti M. Evaluation of antioxidant status and oxidative stress markers in type II diabetes mellitus. Iranian J Endocrinology and metabolism 2001; 3(4):239-245.
14) Wadington RJ, Moseley R, Embery G. Reactive oxygen species: a potential role in the pathogenesis of periodontal diseases. Oral Disease 2000; 6(3): 138–151.
15) Brock GR, Butterworth CJ, Matthews JB, Chapple IL. Local and systemic total antioxidant capacity in periodontitis and health. J Clin Periodontol 2004 ; 31(7):515-21.
16) Panjamurthy K, Manoharan S, Ramachandran CR. Lipid peroxidation and antioxidant status in patients with periodontitis. Cell Mol Biol Lett 2005; 10(2):255-64.
17) Canakci V, Yildirim A, Canakci CF, Eltas A, Cicek Y, Canakci H. Total antioxidant capacity and antioxidant enzymes in serum, saliva, and gingival crevicular fluid of preeclamptic women with and without periodontal disease. J Periodonto 2007; 78(8):1602-11.
18) Balwanti S, Anand S. Serum and Salivary Vitamin C in Periodontal Disease. Adv in Med Dent 2008; 2: 26-27.
19) Kim S, Kim O, Kim O, Kim Y, Chung H. Antioxidant profile of whole saliva after scaling and root planning in periodontal disease. Periodontal Implant Sci 2010; 40: 164-171.
|