چاپ صفحه |  صفحه نخست سامانه |  مجری و همکاران |  اطلاعات تفضیلی |  دانلود | علوم پزشکی زاهدان |
| کد طرح | 5469 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی پلی مورفیسم های Ser180Leu (rs8177374 C>T) and -137A/G (rs1893352 A/G) ژن TIRAP/MAL در افراد مبتلا به سل ریوی و افراد سالم شهر زاهدان |
| عنوان لاتین طرح | A/G)TIRAP/MAL gene polymorphisms in pulmonary tuberculosis and healthy in zahedan Evaluation of Ser180Leu (rs8177374 C>T) and -137A/G (rs1893352 |
| نوع طرح | |
| محل اجرای طرح | مدیریت توسعه فناوری سلامت |
| رسته مطالعاتی | بنیادی- کاربردی |
| دانشکده/مرکز | دانشکده پزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز |
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| زهرا پورمنتصری | همکار | اجراء طرح | متخصص | montaserizahra89@yahoo.com |
| محمد نادری | مجری اول | استاد راهنما | دکترای تخصصی | naderi597@gmail.com |
| محمد هاشمی | مجری دوم | مشاوره ایمونوهیستوشیمی نمونه ها | دکترا - PHD | mhd.hashemi@gmail.com |
| محسن طاهری | مشاور | استاد مشاور | دکترای تخصصی | taheri@zaums.ac.ir |
| عنوان | متن |
|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | بررسی پلی مورفیسم های Ser180Leu (rs8177374 C>T) and -137A/G (rs1893352 A/G) ژن TIRAP/MAL در افراد مبتلا به سل ریوی و افراد سالم شهر زاهدان |
| خلاصه طرح به لاتین | A/G)TIRAP/MAL gene polymorphisms in pulmonary tuberculosis and healthy in zahedan Evaluation of Ser180Leu (rs8177374 C>T) and -137A/G (rs1893352 |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | سل (TB) یکی از قدیمی ترین بیماریهای شناخته شده ایست که در انسان ایجاد می شود و در صورت عدم درمان در بیش از 50 درصد موارد بعد از پنج سال با مرگ و میر همراه خواهد بود1 توبرکلوز بعد از HIV دومین علت مرگ و میر ناشی از بیماریهای عفونی در جهان می باشد و در سال 1993 سازمان بهداشت جهانی از این بیماری به عنوان اورژانس بهداشت جهانی یاد کرده است.2 بیش از 90 در صد موارد بیماری و مرگ ناشی از سل در کشور های در حال توسعه بوده است که 75 در صد آنها در گروه سنی فعال از نظر اقتصادی یعنی(54-15)سالگی رخ میدهد.3و4 در ایران شایع ترین نوع سل، سل ریوی بوده، به طوری که سل ریوی اسمیر خلط مثبت 53% کل موارد سل را تشکیل می دهد.سل خارج ریوی نیز 28% کل موارد سل را شامل می شود.در میان استان ها، گلستان و سیستان و بلوچستان بیشترین میزان های بروز و شیوع را در کشور دارا هستند.بر طبق آخرین آمار منتشره وزارت بهداشت(از جمعیت تحت پوشش دانشگاه ها)، میزان بروز بیماری سل به ترتیب در زابل و زاهدان 7/109 و 6/36 در 100000 نفر جمعیت در سال 88 گزارش شده است.5 TB معمولاً ریه را درگیر می کند هر چند تا یک سوم موارد ارگانهای دیگر هم درگیرند، شایعترین محل هایی که در سل خارج ریوی درگیر می شوند به ترتیب شیوع عبارتند از: غدد لنفاوی، پلور، دستگاه گوارش، استخوانها و مفاصل، مغز و پریتوئن. در اثر گسترش هماتوژن در بیماران مبتلا به HIV سل خارج ریوی امروز بیش از گذشته ایجاد می شود2 به طوری که سل خارج ریوی در 60-40 % مبتلایان به AIDS اثبات شده است.1 تقریبا 10 درصد افراد مبتلا به عفونت مایکوباکتریوم توبرکلوزیس به سمت بیماری ریوی یا خارج ریوی سل پیشرفت می کنند و از جمله عوامل موثر در پیشرفت عفونت به بیماری فعال سل عوامل دفاعی بدن میزبان می باشد.6که در این بین فاکتورهای ژنتیک میزبان از جمله مهمترین موارد تعیین کننده استعداد میزبان برای ابتلا به بیماری فعال و موارد شدید و مقاوم بیماری می باشد.7 در کنترل عفونت سل ایمنی ذاتی نقش مهمی به عهده دارد. متعاقب ورود باسیل سل از راه تنفس به بدن، ماکروفاژهای آلوئولی از طریق پذ یرنده های غشایی خود از جمله پذیرنده های شبه Toll (Tool Like Receptors-TLRs)، باکتری را شناسایی کرده و علاوه بر بلع آن با ایجاد یک پاسخ التهابی، خط مقدم دفاع علیه مایکوباکتریوم را ایجاد می کنند. سایتوکاین های تولید شده توسط ماکروفاژها سبب فراخوانی سایر سلول های ایمنی ذاتی شامل سلول های کشنده طبیعی (Natural Killer-NK) و لنفوسیت هایT به موضع گردیده که به نوبه خود با ترشح سایتوکاین ها ی فعال کننده ماکروفاژ، ظرفیت نابودسازی مایکوباکتریوم توسط این سلولها راافزایش می دهند. شواهد اپیدمیولوژیک موید این مطلب است که در 70 درصد موارد، این پاسخ التهابی مبتنی بر ایمنی ذاتی به تنهایی کافی بوده و می تواند سبب نابودی سل گردد، در بسیاری از افرادی که با مسلولین تماس مستقیم داشته اند، آزمایش PPD مثبت نمی شود که این خود بر حذف باسیل سل بدون مشارکت سلول های T و ایجاد خاطره ایمونولوژیک دلالت دارد.8 در سایر موارد، پاسخ ایمنی ذاتی به تنهایی کافی نبوده و پس از عرضه آنتی ژن های باکتری توسط سلول های دندریتی به لنفوسیت های T در گره های لنفاوی موضعی پاسخ ایمنی اکتسابی فعال می گردد؛ در نتیجه پس از تکثیر لنفوسیت های T و مهاجرت آن ها به ریه، تشکیل گرانولوما که یک پاسخ TH1 می باشد، موجب محدود شدن عفونت خواهد شد. 9 پروتئین (TLR Domain-containing Adaptor Protein) TIRAP یکی از 4 پروتئینی است که در انتقال پیام TLR نقش اساسی دارند و تعیین مسیر فعال شدن آبشاری وابسته به این است که کدام یک از پروتئین های تطبیق دهنده توسط TLR استفاده شود10 TLR ها خانواده ای از پروتئین های عرض غشایی سلول های پستانداران هستند که واسطه پاسخ ایمنی علیه عوامل عفونی می باشند20 ، که به یک کلاس از مولکول های شناخته شده به عنوان رسپتور های الگو شناسی تعلق دارند.21 TLR ها مشخصات مولکولی گروه ارگا نیسمی را مثل لیپوپلی ساکارید گرم منفی ها، پپتید و گلیکان ارگانیسم های گرم مثبت و D-sRNA ویروس ها و لیپوتیکوئیک اسید قارچ ها را ارائه می کنند، TLR 2 و TLR4 برای شناسایی محصولات تولیدی مایکو باکتریوم توبرکلوزیس مهم هستند.22 از طریق TIRAP سیگنال TLR4 منتقل می شود که در نهایت منجر به ترشح سایتوکین و پاسخ التهابی می گردد.23 TIRAP بیشترین تعداد پلی مورفیسم را در بین پروتئین های تطبیق دهنده دارد وبه تنهایی شامل 8 پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی است. در میان این پلی مورفیسم ها، پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی C539T (S180L) وجود دارد که یک فاکتور محافظت کننده در برابر سل و سایر بیماری های التهابی در جمعیت های گوناگون به شمار می آید11و12 سایر پلی مورفیسم ها مثل C558T (G286A) یک نوع پیوند قوی با C539 T دارند. در گزارش Hawn و همکاران نیز ارتباط آن با افزایش استعداد ابتلا به سل در گروهی از جمعیت ویتنام آمده است13 در مطالعه ای در چین 6 پلی مورفیسم در ژن TIRAP یا فت شد که از بین اینها پلی مورفیسم G286A باعث استعداد ابتلا به سل می شود.14 این پلی مورفیسم منجر به تغییر در عملکرد ژن TIRAP و در نتیجه نقص در تولید سایتوکین های تولید شده توسط ماکروفاژ می گردد.15و16 اما پلی مورفیسم های C558T و C539 T در جوامع چینی باعث استعداد ابتلا به سل نمی شود14 در مطالعه ای در افریقای غربی وجوامع کلمبیایی نشان داده شد که پلی مورفیسم C539 T یک فاکتور حفاظتی در برابر سل است.12و11 در گزارش etal Nejentsev, امده است که در جوامع اندونزی پلی مورفیسم C539 T باعث استعداد ابتلا به سل نمیشود.17 در مطالعه ای در جنوب هند این نتیجه حا صل شد که پلی مورفیسم C539 T باعث استعد اد ا بتلا به سل میگردد.18بنابراین شواهد حاکی از اهمیت شناسایی پلی مورفیسم های تک نوکلئوتیدی TIRAP در ارتباط با بیماری سل دارد. با توجه به اهمیت بیماری سل و شیوع قابل ملاحظه آن در منطقه و لزوم تشخیص و درمان به موقع به خصوص در افراد مبتلا به عفونت، و به این دلیل که تاکنون در تعدادی کمی از مطالعات ارتباط مابین پلی مورفیسم در بیماران سل مورد بررسی قرار گرفته است، جهت بررسی وجود ارتباط بین بروز انواع شدید بیماری سل ریوی در افراد مبتلا به این عفونت با پلی مورفیسم ژن TIRAP/MAL، هدف از انجام این مطالعه مقایسه بررسی فراوانی پلی مورفیسم های ژن TIRAP/MAL در بیماران مبتلا به سل و گروه شاهد در شهرستان زاهدان می باشد، تا بتوان با استفاده از نتایج این مطالعه برنامه ریزی های لازم برای اقدامات تشخیصی و درمانی مناسب خصوصا در افراد مستعد موارد شدید بیماری سل اجرا Stenger, S, Takeuchi, O, et al. Induction of direct antimicrobial activity through mammalian toll-like receptors. Science 2001; 291:1544. 23-TIRAP to ll-interleukin 1 receptor (TIR) domain containing adaptor protein.By HUGO Gene Nomencalture Committee.available on http://www.ncbi.nlm.nih.gov/gene/114609. updated on 24-mar-2012. نمود. |
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 1. توزیع فراوانی ژنوتیپ Ser180Leu (rs8177374 C>T) and -137A/G (rs1893352 A/G) ژن TIRAP/MAL در بیماران مبتلا به سل ریوی و گروه شاهد متفاوت است. |
| هدف کلی طرح | تعین پلی مورفیسم های Ser180Leu (rs8177374 C>T) and -137A/G (rs1893352 A/G) ژن TIRAP/MAL در بیماران مبتلا به سل ریوی و افراد سالم |
| اهداف اختصاصی | 1- تعیین توزیع فراوانی ژنو تیپ A/G 137- AA/GA/GG)) مربوط به ژن TIRAP/MAL در افراد مبتلا به سل ریوی 2- تعیین توزیع فراوانی ژنو تیپ A/G 137- AA/GA/GG)) مربوط به ژن TIRAP/MAL در افراد سالم 3- مقایسه فراوانی ژنوتیپ A/G 137- AA/GA/GG)) مربوط به ژن TIRAP/MAL در افراد مبتلا به سل ریوی و افراد سالم 4- تعیین توزیع فراوانی ژنوتیپ Ser 180 Leu (Ser/Leu / Ser/Ser / Leu/Leu) مربوط به ژن TIRAP/MAL در افراد مبتلا به سل ریوی 5- تعیین توزیع فراوانی ژنوتیپ Ser 180 Leu (Ser/Leu / Ser/Ser / Leu/Leu) مربوط به ژن TIRAP/MAL در افرادسالم 6- مقایسه فراوانی ژنوتیپ Ser 180 Leu (Ser/Leu / Ser/Ser / Leu/Leu) مربوط به ژن TIRAP/MAL در افرادمبتلا به سل ریوی و افرادسالم |
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | دانشکده علوم پزشکی زاهدان |
| تعریف واژه های تخصصی | SNP:Single Nucleotide Polymorphism TIRAP: یکی از چهار پروتئینی است که در انتقال پیام TLR که از پذیرنده های غشایی بر روی سطح ماکروفاژ های آلوئولی می باشد، باکتری را شناسایی کرده و با ایجاد یک پاسخ التهابی دفاع علیه باکتری را فراهم می کند.9و8 |
| نوع مطالعه | مورد- شاهدی (case-control) |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | 2- جامعه مورد مطالعه: کلیه بیماران مبتلا به سل که در سال 1390 جهت ارزیابی و درمان به بیمارستان بوعلی زاهدان مراجعه می کنند. معیار ورود به مطالعه : 1- سن بالای 16 سال 2- عدم وجود هر گونه عفونت سیستمیک یا موضعی (با یا بدون درگیری ریوی) 3- عدم وجود هر گونه بیماری غیر عفونی سیستمیک حاد یا مزمن (با یا بدون درگیری ریوی) 4- عدم وجود هر گونه نئوپلاسم تشخیص داده شده (با یا بدون درگیری ریوی) معیار ورود به گروه شاهد: معیار ورود در گروه شاهد نیز سن بالای 16سال و عدم وجود هر گونه عفونت سیستمیک یا موضعی (با یا بدون درگیری ریوی)، عدم وجود هر گونه بیماری غیر عفونی سیستمیک حاد یا مزمن(با یا بدون درگیری ریوی) و عدم وجود هر گونه نئو پلاسم تشخیص داده شده(با یا بدون درگیری ریوی) خواهد بود. معیار خروج از مطالعه : عدم همکاری بیمار از ادامه طرح |
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | حجم نمونه حداقل 160 نفر شامل کلیه بیماران مسلول ریوی تشخیص داده شده تحت درمان یا درمان شده شهرستان زاهدان در سال 1390 می باشد.به همین تعداد نیز از افراد سالم جامعه که به بیماری سل مبتلا نشده اند و سابقه هیچ گونه بیماری سیستمیک ندارند انتخاب میشوند. |
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | تصادفی ساده |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | در این مطالعه جهت جمع آوری اطلاعات از تکنیک مشاهده ای (observational) استفاده می شود، و اطلاعات کلی و مشخصات دموگرافیک فرد شامل: جنس، سن، سابقه خانوادگی ابتلا به بیماری سل و نتایج آزمایشگاهی با استفاده از معاینه، شرح حال و اطلاعات پرونده در فرم های اطلاعاتی ثبت می شود. |
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | هدف از انجام این مطالعه مورد- شاهدی، مقایسه فراوانی پلی مورفیسم های ژن TIRAP/MAL در بیماران مبتلا به سل و گروه شاهد می باشد. در این مطالعه تعداد 160نفر از بیماران مبتلا به سل ریوی بالای 16 سال که در سال 1390 به بیمارستان بوعلی شهر زاهدان جهت ارزیابی و درمان مراجعه می کنند و 160 نفر از افراد سالم بالای 16 سال به عنوان گروه شاهد مورد مطالعه قرار خواهند گرفت. در گروه بیماران سل ریوی در ابتدا از کلیه بیماران مشکوک به سل ریوی (دارای علایم: سرفه همراه با خلط و کاهش وزن، هموپتزی، درد قفسه سینه، بی اشتهایی، خستگی و تعریق شبانه) اسمیر مستقیم خلط و کشت باسیل مایکوباکتریوم توبرکلوزیس (به عنوان روش استاندارد تشخیصی) انجام خواهد شد و با توجه به زمان بر بودن آماده شدن نتایج کشت، در بیمارانی که حداقل دو نمونه اسمیر خلط مثبت داشته باشند نمونه گیری خون انجام شده و بررسی پلی مورفیسم تنها در بیمارانی انجام خواهد شد که کشت مثبت هم داشته باشند. در ابتدا پس از کسب رضایت کامل از بیماران، اطلاعات دموگرافیک بیماران شامل: جنس، سن، سابقه خانوادگی ابتلا به بیماری سل ثبت می شود. سپس جهت نمونه گیری، (در افراد دارای معیارهای ورود به مطالعه) 3 میلی لیتر خون وریدی در لوله های حاوی EDTAجمع آوری می گرددنمونه خون در 20-درجه سانتی گراد نگهداری می شود. DNA سلول های خون محیطی به روشsalting out تخلیص می شود،پرایمرهای اختصاصی ARMS طراحی شده و پس از بهینه سازی شرایط PCR ژنوتیپ گروه شاهد و مورد با این روش مورد ارزیابی قرار می گیرد. محصول PCR روی ژل آگارز دو درصد با اتیدیوم بروماید رنگ امیزی گردیده و محصولات PCR مورد ارزیابی قرار گرفته و ژنوتیپ فرد تعیین می گردد. |
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | پس از گرداوری اطلاعات لازم،یافته ها در نر افزار آماری SPSS وارد گشته و با استفاده از آزمون آماری T-Test و Chi-Squareداده ها مورد تجزیه و تحلیل قرار خواهند گرفت متغیر آلل/ژنوتیپ بیماران فراوانی (%) شاهد فراوانی (%) سطح معنی داری پلی مورفیسم 137A/G TIRAP- آلل ژنوتیپ پلی مورفیسمSer180Leu TIRAP آلل ژنوتیپ |
| ملاحظات اخلاقی | با توجه به کد شماره 1، 7 و 17 از کدهای مصوب کمیته کشوری اخلاق در پژوهش های علوم پزشکی اطلاعات بیماران در تمام طول مدت طرح و پس از آن بصورت محرمانه حفظ خواهد شد. (7) با رضایت کامل از بیماران نمونهگیری میشود و تعهد میشود نام و مشخصات بیماران در هیچ گزارشی قید نشود (1) و انجام آزمایشات هیچگونه هزینهای برای بیمار نخواهد داشت. ( 17) نتایج آزمایشات به اطلاع بیمار رسانده خواهد شد. (5) |
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | محدودیت های طرح شامل عدم همکاری بیماران می باشد. |
| کلمات کلیدی | بیماری سل ، TIRAP ، پلی مورفیسم |
| فهرست منابع و مراجع | 1- Kasper DL. Harrison's principles of internal medicine. 17th ed. New York: McGraw-Hill: 2008;p.1006-10020 2- Hass DW. Mycobacterial Disease. In: Mandell GL, Bennett JE, Dolin R, editors. Principles and Practice of Infectious Diseases. 7th ed. New York: Churchill Livingstone: 2010; p. 3129-63. 3- Alavi – Naini,Hashemi M,Mohaghegh-Montazeri M , etal.Glutaraldehyde test for rapid diagnosis off pulmonarytuberculosis intg tubere lung dis 2009,13(5):601-605 4- میر حقانی لیلا و همکاران. راهنمای کشوری مبارزه با سل. مجموعه انتشارات مر کز تحقیقات سل و بیماری های ریوی.. مر کز مدیریت بیماریها. معاونت سلامت. وزارت بهداشت و درمان وآموزش پزشکی1388 5- 5- ملیحه متانت و دیگران.اپیدمیولوژی سل در دهه اخیر و مروری بر وضعیت آن در جنوب شرق ایران.مجله تحقیقا ت علوم پزشکی زاهدان،سال 90،دوره13،شماره 9 6- Velez DR, Wejse C, Stryjewski ME, Abbate E, Hulme WF, Myers JL, et al. Variants in toll-like receptors 2 and 9 influence susceptibility to pulmonary tuberculosis in Caucasians, African-Americans, and West Africans. Hum Genet 2010 Jan; 127(1): 65-73. 7- Velez DR, Hulme WF, Myers JL, Stryjewski ME, Abbate E, Estevan R. Association of SLC11A1 with tuberculosis and interactions with NOS2A and TLR2 in African-Americans and Caucasians. Int J Tubercul Lung Dis 2009 Sep; 13(9): 1068-76. 8- Hanekom W, Abel B, Scriba T. Immunological protection against tuberculosis. SAMJ 2007; 97: 973-977. 9- Bikle DD. Vitamin D and the immune system: role in protection against bacterial infection. Curr Opin Nephrol Hypertens 2008; 17: 348-52. 10- Uematsu S, Akira S, Toll-like receptors (TLRs) and their ligands. Handb Exp pharmacol.2008 ;183:1-20 11- Khor CC, Chapman SJ, Vannberg FO, Dunne A, et al. A functional variant in TIRAP also known as mal, and protection against invasive pneumococcal disease,bacteremia,malaria and tubercolusis.Nat. Genet. 2007.39:523-528 12- Castiblanco J, Varela DC, Castano-Rodriguez N, Rojas-Villarraga A, et al. (2008). TIRAP (MAL) S180L polymorphism is a common protective factor against developing tuberculosis and systemic lupus erythematosus. Infect. Genet. Evol.2008. 8: 541-544. 13- Hawn TR, Dunstan SJ, Thwaites GE, Simmons CP, et al. (2006). A polymorphism in Toll-interleukin 1 receptor domain containing adaptor protein is associated with susceptibility to meningeal tuberculosis. J. Infect. Dis.2006; 194: 1127-1134. 14-Zhang YX, Xue Y, Liu JY, Zhao MY, et al. Association of TIRAP (Mal)gene polymorphisms with susceptibility to tuberculosis in a Chinese population 15-Nagpal K , Plantinga TS, Wong J, Monks BG, et al. (2009). A TIR domain variant of My D88 adapter-like (Mal)/TIRAP results in loss of My D88 binding and reduced TLR2/TLR4 signaling.J.Biol.Chem.284:25742-25748 16- George J , Kubarenko AV, Rautanen A, Mills TC,et al.(2010)MyD88 Adaptor-like D96N is a naturally occurring loss of-function variant of TIRAP J.mmun ol.184:3025-3032 17- Nejentsev S, Thye T, Szeszko JS, Stevens H, et al.(2008).Analysis of Association of the TIRAP (Mal) S180L polymorphisms variant and Tuberculosis in three Population.Nat.Genet.40:261-262 18-Selvaraj P,Harishankar M, Singh B, Jawahar MS, et al.(2010)Toll-like Receptor and TIRAP gene polymorphisms in pulmonary tuberculosis patient of South India.Tuberculosis(Edinb).90:306-10 19-تامسون و تامسون، ژنتیک درپزشکی؛ ترجمه ی دکترفرهاد همت خواه،تهران:شهر آب،1373.ص 158. 20-Medzhitov, R, Preston-Hurlburt, P, Janeway, CA Jr. A human homologue of the Drosophila Toll protein signals activation of adaptive immunity. Nature 1997; 388:394. 21-Gazzinelli, RT, Denkers, EY. Protozoan encounters with Toll-like receptor signalling pathways: implications for host parasitism. Nat Rev Immunol 2006; 6:895. 22-Thoma-Uszynski, S, |
| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|---|---|---|
| scan0001.jpg | 1391/02/27 | 633246 | دانلود |
| scan1.pdf | 1391/02/31 | 6953297 | دانلود |
| scan2.pdf | 1391/02/31 | 7768341 | دانلود |
| 120 004.jpg | 1391/04/03 | 174845 | دانلود |
| 120 005.jpg | 1391/04/03 | 91308 | دانلود |
| 120 006.jpg | 1391/04/03 | 207072 | دانلود |
| 120 007.jpg | 1391/04/03 | 156429 | دانلود |
| r.doc | 1391/05/04 | 1092608 | دانلود |
| 91.4.19.doc | 1391/05/11 | 76800 | دانلود |
| نهایی.doc | 1391/05/11 | 314368 | دانلود |
