مقایسه فراوانی پلی مورفیسم ژن TNFα G308A در کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک در مقایسه با کودکان سالم

Comparison of TNFα Gene G308A Polymorphism in children with Nephrotic Syndrome and Normal Children


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: سیمین صادقی بجد

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 6014
عنوان فارسی طرح مقایسه فراوانی پلی مورفیسم ژن TNFα G308A در کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک در مقایسه با کودکان سالم
عنوان لاتین طرح Comparison of TNFα Gene G308A Polymorphism in children with Nephrotic Syndrome and Normal Children
نوع طرح
محل اجرای طرح بیمارستان علی ابن ابیطالب
رسته مطالعاتی نامشخص
دانشکده/مرکز دانشکده پزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
ماهرخ فیروزی جهانتیغهمکار dr.mahrokhfiroozi@yahoo.com
سیمین صادقی بجدمجری فوق تخصصsisadegh@yahoo.com
محسن طاهریمجری دوم دکترای تخصصی taheri@zaums.ac.ir
محمد هاشمیمشاور دکترا - PHDmhd.hashemi@gmail.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی مقایسه فراوانی پلی مورفیسم ژن TNFα G308A در کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک در مقایسه با کودکان سالم
خلاصه طرح به لاتینComparison of TNFα Gene G308A Polymorphism in children with Nephrotic Syndrome and Normal Children
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشسندرم نفروتیک اختلالی است که بطور اولیه در کودکان ایجاد می شود (1) و یکی از بیمار های قابل توجه دوران کودکی می باشد(2) و نسبت به بالغین 15 برابر شایع تر است. شیوع آن در سال 2-3 مورد در 10000 بوده و اکثریت کودکان مبتلا به همراه با تغییرات اندک حساس به استروئید دارند. ویژگی های بارز سندرم نفروتیک شامل پروتئینوری بالا (5/3 گرم در 24 ساعت در بالغین یا 40/m2/h در کودکان) هیپو آلبینومی کم تر از 2.5 mg/dl ، ادم و هیپرلیپیدمی است. (1)
سندرم نفروتیک بر اساس پاسخ به درمان به دو گروه تقسیم شده است ، سندرم نفروتیک حساس به استروئید (SSNS) و سندرم نفروتیک مقاوم به استروئید (RSNS) (3-4). حدود 20% کودکان با سندرم نفروتیک به درمان استروئید پاسخ نمی دهند. (5)
ناهنجاری زمینه ای در سندرم نفروتیک ازدیاد نفوذپذیری دیواره مویرگ گلومرولی است که منجر به پروتئینوری سنگین و هیپوآلبومینمی می شود، علت این افزایش نفوذ پذیری به خوبی مشخص نشده است. در بیماری همراه با تغییرات اندک این احتمال وجود دارد که اختلال عملکرد سلول T منجر به تغییر وضعیت سیتوکین ها و در نتیجه از دست دادن گلیکوپروتین های با شارژ منفی داخل دیواره مویرگ گلومرول شود. (1)
شواهدی وجود دارد که عنوان می کند در سیستم ایمنی اولیه در پاتوژنز این بیماری دخیل است. همچنین پژوهش ها نشان داده است که سایتوکاین های متعادل کننده بالانس عملکرد TH1و TH2 در پاتوژنز سندرم نفروتیک ایدیوپاتیک تاثیر دارد. (10)
سندرم نفروتیک ایدیوپاتیک یک بیماری با واسطه سیستم ایمنی است اما هنوز ارتباط آن با سایتوکاین های TH1 و TH2 به طور کامل مشخص نیست. شواهد بسیاری نشان دهنده ارتباط این بیماری با سایتوکین های TH2 می باشد. (10)
سایتوکین ها نقش حساسی به عنوان مدیاتور های التهابی در بروز و پیشرفت سندرم نفروتیک ایدیوپاتیک دارند و تا کنون سایتو کین های مختلفی به عنوان عامل واسط در پیشرفت این بیماری شناخته شده است. مطالعات اخیر نشان می دهد که پلی موفیسم ژن های سایتوکین مختلف مانند اینترلوکین 1 بتا ، آنتا گونیست گیرنده اینترلوکین 1 بتا ، و TNFα با بیماری های مختلف التهابی مانند گلومرولونفریت، اسپوندیلیت آنکیلوزان و مالتیپل اسکلروزیس ارتباط دارد. (10)
در مطالعات قبلی مشخص شده است که میزان TNFα در افراد مبتلا به سندرم نفروتیک به طور واضحی افزایش می یابد. محققان اعلام نمودند که ژن TNFα ممکن است یکی از ریسک فاکتور های ژنتیکی برای ابتلا به سندرم نفروتیک باشد و البته احتمالا با پاسخ استروئیدی در ارتباط است. TNFαیک سایتوکین تعدیل کننده ایمنی بالقوه و پیش التهابی است. پلی مورفیسم در در پروموتور ژن TNFα باعث افزایش رونویسی ژن می شود و این افزایش رونویسی نیز در سندرم نفروتیک ایدیوپاتیک نیز وجود دارد.(6)
با توجه به اینکه نقش سایتوکین ها به طور کامل در کودکان با سندرم نفروتیک تا کنون شناخته نشده است و مطالعات اندکی در این زمینه انجام گرفته است. لذا با توجه به گفته های بالا ما در این طرح برآنیم که به مقایسه فراوانی پلی مورفیسم ژن TNFα در کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک در مقایسه با کودکان سالم بپردازیم.
سوالات و / یا فرضیات پژوهش- توزیع فراوانی ژنوتیپ TNFα-G308A (db SNP rs1800629) در کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک چگونه است؟
2- توزیع فراوانی ژنوتیپ TNFα-G308A (db SNP rs1800629) در کودکان سالم چگونه است؟
3- فراوانی ژنوتیپ TNFα-G308A (db SNP rs1800629) در کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک و کودکان سالم متفاوت است.
هدف کلی طرحمقایسه فراوانی پلی مورفیسم ژن TNFα در کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک در مقایسه با کودکان سالم
اهداف اختصاصی1- تعیین توزیع فراوانی ژنوتیپ TNFα-G308A (db SNP rs1800629) در کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک
2- تعیین توزیع فراوانی ژنوتیپ TNFα-G308A (db SNP rs1800629) در کودکان سالم
3- مقایسه فراوانی ژنوتیپ TNFα-G308A (db SNP rs1800629) در کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک و کودکان سالم
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحبیمارستانها
تعریف واژه های تخصصیTNFα, Polymorphism, Nephrotic Syndrome
نوع مطالعهمورد- شاهدی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)این مطالعه افراد مبتلا به سندرم نفروتیک که بیماریشان با تشخیص کلینیکی اثبات شده مورد بررسی قرار می دهد . نمونه ها از بین بیماران تحت درمان و یا موارد شناخته شده جدید مراجعه کننده به بیمارستان علی ابن ابیطالب و درمانگاه نفرولوژی کودکان که شرایط ذکر شده را داشته باشند ، انتخاب می شوند. موارد خروج از مطالعه شامل بیمارانی است که رضایت به انجام نمونه گیری نداشته باشند. افراد گروه شاهد از بین کودکان مراجعه کننده به کلینیک حضرت علی اصغر زاهدان بدون سابقه آلرژی، بیماری مزمن و سندرم نفروتیک در بیمار وخانواده آنها انتخاب می شوند.
حجم نمونه و روش محاسبه آنبا توجه به شیوع سندرم نفروتیک در زاهدان و حجم نمونه های مورد استفاده در مطالعات مشابه ، حداقل 100مورد بیمار و برابر آن کودکان سالم به عنوان گروه شاهد انتخاب خواهند شد.

روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)نمونه گیری به صورت آسان و در دسترس می باشد.
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)مشاهده و بررسی آزمایشگاهی
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)پس از تصویب پروپوزال از بیمارانی که بر اساس معیار های تشخیصی در آنها سندرم نفروتیک ایدیوپاتیک (پروتئینوری بالا (5/3 گرم در 24 ساعت در بالغین یا 40/m2/h در کودکان) هیپو آلبینومی کم تر از 2.5 mg/dl ، ادم و هیپرلیپیدمی و برای رد علل ثانویه نفروتیک با کمپلمان سرم نرمال) تشخیص داده می شودو یا سندرم نفروتیک داشته و تحت درمان می باشند ، خونگیری می شود. بیماران در دو گروه حساس به استروئید ومقاوم به استروئید تقسیم می شوند گروه اول : حساس به استروئید که 1- عود ندارد ودر فاز Remission هستندیعنی پروتئین ادرار کمتر از mg/m2/h 40یا پروتئین ادرار منفی در سه نوبت dipstic 2- عود مکرر دارند : 2 یا بیشتر از 2 عود در طی دوره شش ماهه یا 4 عود یا بیشتر در طی دوره 12 ماهه 3- وابسته به استروئید : 2 عود در طی دوره taper کردن استروئید . گروه دوم: مقاوم به استروئید . بعد از جمع آوری نمونه بیماران و مشخص شدن تعداد موارد مقاوم به استروئید و حساس به استروئید در صورتی که حداقل 20% درصد موارد مقاوم به استروئید باشند( جهت معنادارشدن آماری مطالعه) به بررسی فراوانی ژنوتیپ TNFâ در دو گروه حساس به استروئید ومقاوم استروئید ومقایسه با کودکان سالم می پردازیم . افراد گروه شاهد از بین کودکان مراجعه کننده به کلینیک حضرت علی اصغر زاهدان بدون سابقه آلرژی ، بیماری سیستمیک و سندرم نفروتیک در بیمار و خانواده انتخاب می شوند و پس از کسب رضایت از والدین و یا خود بیمار نمونه خون EDTA از بیمار گرفته می شود.
نمونه خون EDTA در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری می شود. DNA خون این افراد به روش Salting out تخلیص می شود، سپس با طراحی پرایمر های اختصاصی پلیمورفیسم ژنی G308A (db SNP rs1800629) به روش Amplification Refractory Mutation PCR تعیین می شود.

روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)پس از گردآوری اطلاعات لازم ، یافته ها در نرم افزار آماری SPSS وارد گشته و با استفاده از آزمون آماری کای دو و متغییر های کمی با آزمون T مستقل مورد تجزیه و تحلیل قرار می گیرند.
G308A (db SNP rs1800629) مورد شاهد P Value
GG
GA
AA

ملاحظات اخلاقی کد های اخلاقی 1و7و17 رعایت می شود.
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهاعدم همکاری بیماران
کلمات کلیدیسندرم نفروتیک -پلی مورفیسم
فهرست منابع و مراجع1. Beherman RE, Kliegman RM, Hal JB, Stanton BF. Nelson Textbook of Pediatrics, 18th ed. Philadelphia: WS100N 423 2011l:2190-2191.
2. اصفهانی سید طاهر، مدنی عباس ، مقتدری مستانه و همکاران. بررسی سر انجام ده ساله کودکان مبتلا به سندرم نفروتیک حساس به استروئید. مجله دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، اسفند 1386 دوره 65، شماره 12 ، صفحات 41-47
3. Hodsen EM, Habashy D, Craig JC. Intervention for Idiopatic steroidreisitance nephritic syndrome in children. Cochrane Data base syst Rev 2007; 19(2): 49-53.
4. Kim JS, Bellew CA, Silverstein DM, Aviles DH, Boineau FG, Vehadkari VM. High incidence of initial and late steroid resistance in childhood nephrotic syndrome. Kidney Int 2005; 68:1275-1281.
5. Mao J, Zhang Y, Du L, et al. NPHS1 and NPHS2 gene mutation in Chinese children with sporadic nephrotic syndrome. Pediatre Res 2007;61(1):117-22.
6.Jafar T, Agrawel S, Mahdi AA, Sharma RK, Awashti SH. Cytokine Gene Polymorphism in Idiopatic Nephrotic Syndrome Children. Ind J
Ciln Biochem 2011;26(3):296-302.
7. Mathieson PW. Cytokine polymorphisms and nephrotic syndrome. Clin Sci. 2002;102:513–514.

8. Fodor P, Saitua MT, Rodriguez E, Gonzalez B, Schlesinger L. T-cell dysfunction in minimal-change nephrotic syndrome of childhood. Am J Dis Child. 1982;136:713–717.
9. Wilson AG, di Giovine FS, Blakemore AI, Duff GW. Single base polymorphism in the human tumour necrosis factor alpha (TNF alpha) gene detectable by NcoI restriction of PCR product. Hum Mol Genet. 1992;1(5):353–6
10. Liu HM, Shen Q, Xu H, Yang Y. Significance of polymorphisms in variable number of tandem repeat region of interleukin-4 gene in recurrence of childhood steroid sensitive nephrotic syndrome. Zhonghua Er Ke Za Zhi. 2005;43:431–433

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
cytokine gene.pdf1392/02/04275228دانلود
tnf and nephrotic syndrome 2.pdf1392/02/04148658دانلود
TNF and nephrotic syndrome.pdf1392/02/04210561دانلود
tnf and nephrotic syndrome 6.pdf1392/02/04226052دانلود
New Image.JPG1392/02/15761965دانلود
New Image2.JPG1392/02/15637354دانلود
137_334_rezayatname akhlagh-1.doc1392/02/16222208دانلود
92.2.18.doc1392/03/1279360دانلود
3.jpg1392/03/12175465دانلود
نهایی.doc1392/03/12245248دانلود
download.action.doc1392/05/02245760دانلود
download.action.doc1392/05/29245760دانلود
6014.bmp1392/11/0712684726دانلود