اثر محافظتی تجویز مزمن خوراکی پودر ریشه ویتانیا سومنیفرا بر فاکتورهای التهابی و درد ناشی از تست فرمالین در موش صحرایی نر تغدیه شده با فروکتوز

The protective effect of chronic oral administration of withania somnifera root powder on inflammatory factors and Formalin-Induced Pain in fructose-fed male rats.


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: محمدرضا شهرکی

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 6101
عنوان فارسی طرح اثر محافظتی تجویز مزمن خوراکی پودر ریشه ویتانیا سومنیفرا بر فاکتورهای التهابی و درد ناشی از تست فرمالین در موش صحرایی نر تغدیه شده با فروکتوز
عنوان لاتین طرح The protective effect of chronic oral administration of withania somnifera root powder on inflammatory factors and Formalin-Induced Pain in fructose-fed male rats.
نوع طرح
محل اجرای طرح مدیریت توسعه فناوری سلامت
رسته مطالعاتی بنیادی- کاربردی
دانشکده/مرکز دانشکده پزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
زهرا صمدی نوشهر zsamadi67@yahoo.com
محمدرضا شهرکیمجریاستاد راهنمادکترای تخصصی mrshahrakim@gmail.com
علیرضا نخعیمشاورمشاور علمیدکترای تخصصی alireza_nakhaee@yahoo.com
مهناز شهرکی پورمشاورمشاور آمارکارشناسی ارشدmahnaz@gmail.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی اثر محافظتی تجویز مزمن خوراکی پودر ریشه ویتانیا سومنیفرا بر فاکتورهای التهابی و درد ناشی از تست فرمالین در موش صحرایی نر تغدیه شده با فروکتوز
خلاصه طرح به لاتینThe protective effect of chronic oral administration of withania somnifera root powder on inflammatory factors and Formalin-Induced Pain in fructose-fed male rats.
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشبیماری دیابت ملیتوس یکی ازشایعترین بیماریهای سیستم غدد درونریز بدن محسوب میشود(1).که کمبود یا کاهش نسبی میزان انسولین وکاهش حساسیت گیرنده های انسولینی در این بیماری، باعوارض متابولیکی حاد نظیر کتواسیدوز و اغمای هیپراسمولار و با یک اختلال متابولیک مزمن و عوارض نامطلوب در دراز مدت نظیر رتینوپاتی، نفروپاتی، نوروپاتی، ضایعات پوستی، اختلالات سیستم قلب وگردش خون همراه میباشد(2). شیوع آن درجمعیت بالغان جهان درسال 2010 میلادی 4.6 درصد بوده است و پیشبینی می‌شود تا سال 2030 به حدود7.7 درصد افزایش یابد. البته سهم کشورهای درحال توسعه از این افزایش، 5.3 برابرکشورهای توسعه یافته است(3). افراد دیابتی در دو دسته ‌طبقه ‌بندی می‌گردند (نوع یک و دو). در دیابت نوع یک بیماران از عدم ترشح انسولین رنج می‌برند. نوع دو رایج‌تر است و علت آن مقاومت به انسولین و یا عدم پاسخ به ترشح کافی انسولین و یا معمولا ًترکیبی از این دو عامل می‌باشد(4(. مقاومت به انسولین یافته ثابتی است که حتی سالها پیش از شروع دیابت وجود دارد و مطالعات آینده نگر نشان داده اند، مقاومت به انسولین میتواند شروع دیابت را پیشبینی کند(5). مقاومت به انسولین به همراه سندرم متابولیک یکی از عوامل بنیادی بروز دیابت نوع دو است(6). سندرم متابولیک مشتمل بر مجموعه ای از اختلالات متابولیکی همچون چاقی شکمی، افزایش تری گلیسیرید، کاهش HDL، اختلال در هموستاز قند خون و افزایش فشارخون می باشد (7).شیوع بسیار بالای سندرم متابولیک در کشورهای پیشرفته ودر حال توسعه توجه ویژه بسیاری از محققین را به خود جلب نموده است(8). به طوریکه34 درصد از بزرگسالان ایالت متحده امریکا، حدود 35 درصد از جمعیت بزرگسالان و10 درصد از نوجوانان ایران نیز مبتلا به این سندرم هستند (11-9). همچنین زنان ایرانی بالاترین شیوع سندرم متابولیک را در میان زنان جهان به خود اختصاص داده اند (12). اگر چه تعریف پذیرفته شده جهانی برای این سندرم وجود ندارد، اما مطالعات متعدد مقاومت انسولینی را از عوامل اصلی بروز این سندرم معرفی می نمایند(13). پروسه های التهابی نیز نقش ویژه ای در پاتوژنز و پیشرفت آترواسکلروز، پیشروی بیماری های قلبی عروقی و دیابت نوع دو ایفا می نماید(16-14). مشاهده شده است که در افراد مبتلا به سندرم متابولیک سطح فاکتورهای التهابی به طور معنی داری افزایش می یابد(19-17). بافت چربی نیز یکی از منابع مهم سیتوکین های پیش التهابی است و ارزیابی سطح آدیپوسیتوکین های مترشحه از این بافت، تعیین کننده وضعیت فرایندهای التهابی در بدن می باشد(20).
محققان دریافته‌اند که تغذیه‌ی نامناسب و چاقی باعث ایجاد التهاب می‌شود و التهاب موجب مقاومت به انسولین و بروز دیابت نوع 2 می‌گردد(21). مقاومت به انسولین و التهاب دوعامل شناخته شده در گسترش دیابت نوع2 می باشد (24-22).
مطالعات نشان میدهد که مصرف فروکتوز درسطح جهان رو به افزایش است به طوری که مصرف آن از روزانه 16 تا 20 گرم به 85 تا 100 گرم رسیده است(26و25). بالا رفتن مصرف کربوهیدراتها به ویژه قندهای تصفیه شده ای که فروکتوز بالایی دارند، یکی از عوامل بسیار مهم دخیل در ایجاد سندرم مقاومت به انسولین می باشد(27). بعلاوه، مطالعه بر روی حیوانات نشان داده است که مصرف رژیمهای غذایی خاص با فروکتوز بالا در دراز مدت منجر به سندرم متابولیک میشود(28).بیماران مبتلا به سندرم متابولیک، و دیابتی نسبت به افراد سالم 4-2 برابر بیشتردر معرض خطر بیماری های قلبی-عروقی می باشند(29). لازم به ذکر است که در گذشته خطر ابتلا به بیماری های قلبی- عروقی به طور عمده به هیپر گلیسمی و ناهنجاری های لیپیدی و شرایط ترومبولیتیک نسبت داده می شد اما امروزه توجه عمده بر روی سطح عوامل التهابی می باشد(30). مشاهده شده است که در افراد مبتلا به سندرم متابولیک سطح بیومارکرهای التهابی از قبیل IL6 (اینترلوکین6) و CRP (پروتئین واکنشگر حاد) بالا می باشد(32و 31).CRP توسط هپاتوسیتهای کبدی تولید میگردد و یک شاخص معمول التهاب است. بافت چربی IL-6 ترشح میکند که این عامل تولید CRP را از هپاتوسیت های کبدی تنظیم می نماید و میتواند باعث ایجاد التهاب سیستمیک مزمن در افراد با چربی بدنی اضافه گردد(33). افزایش سیتوکینین های پیش التهابی از جمله فاکتور نکروزه کننده تومور آلفا(TNF-α) و IL-6 و CRP نقش مهمی در آبشار التهابی، مقاومت انسولینی سیستمیک، کاهش عملکرد سلول های بتا پانکراس و ترشح انسولین دارد(34).
افزایش فاکتورهای التهابی به صورت حاد، محرکی در جهت شروع و پیشروی فرایندهای التهابی می باشد. تداوم شرایط حاد التهابی در افراد می تواند زمینه را برای بروز التهاب مزمن فراهم کرده و در نتیجه خطر بیماری هایی نظیر دیابت، بیماری های قلبی عروقی و سندرم متابولیک را افزایش دهد(35).
با توجه به ماهیت مزمن و پیشرونده بیماری های فوق، کنترل فرآیندهای التهابی در طولانی مدت حائز اهمیت است(36). لذا با کنترل فاکتورهای التهابی و ایمونولوژیکی میتوان از بروز سندرم مقاومت به انسولین و عوارض آن جلوگیری کرد.(38و 37).
برخی مطالعات نشان داده اند که افزایش قند خون به صورت مزمن، باعث تغییراتی مثل افزایش حساسیت نورون های نخاعی-تالاموسی و اختلال در سلول های عصبی مسئول درد به شکل ایجاد ایمپالس های خود به خودی در نورون های آوران اولیه درد میشود(40 و39). همچنین تغییرات بیوشیمیایی در سلول های عروق گلیال و نورون های محیطی و اختلال در مسیر اسید های چرب می تواند در تغییر آستانه درد و ایجاد نوروپاتی نقش داشته باشد (14).
امروزه برای کاهش التهاب و درد از داروهای شیمیایی رایج مانند انواع کورتیکواستروئید و سالسیلات ها استفاده میشود اما به دلیل عوارض ناشی از آنها توجه متخصصان به استفاده از گیاهان دارویی معطوف شده است(42). گیاه ویتانیا سومنیفرا (بوزیدان) یکی از گیاهان با خواص دارویی مهم در طب سنتی است که جهت افزایش میل جنسی، بهبود عملکرد کلیه، ضد التهاب، و بهبودی برونشیت مورد استفاده قرار میگیرد (44و 43).
Hemalataو همکاران در سال 2004 اثرات هیپوگلیسیمیک میوه ویتانیا سومنیفرا را در مدل تجربی دیابت قندی نوع 1 در موش صحرایی نشان دادند(45).
M,Ahmad و همکاران در سال 2005 در یک بررسی در هند اثر عصاره الکلی(متانولی) ویتانیا سومنیفرا را بر روی موش های پارکینسونی آزمایش کرده و نشان دادند که این گیاه خاصیت آنتی اکسیدانی ،آنتی پراکسیدانی دارد(46).
در مطالعه دیگری که توسط همین گروه انجام شده است، نشان داده شد که گیاه ویتانیا سومنیفرا، موجب کاهش 2α- ماکروگلوبولین میشود که خود یک شاخص برای داروهای ضد التهاب است(47).
در مطالعه دیگری که توسطK, Anbalaga و همکارانش در هند انجام شد، نشان دادند که ریشه این گیاه میزان 2α-گلیکوپروتئین را در سرم موش صحرایی دچار التهاب شده، کاهش میدهد (48).
خلیلی و همکاران در سال 1386 در دانشگاه شاهد، اثر ضد دردی این گیاه را در موش های صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین(STZ) گزارش کردند(49).
از آنجایی که شواهد تجربی نشان نشان داده اند، غذاهای سرشار از فروکتوز از طریق اثر بر Randle cycle موجب مهار اکسیداسیون اسید های چرب بلند زنجیر، اختلالات لیپیدی و مقاومت به انسولین میگردند(50-54). همچنین یکی از علل ایجاد سندرم مقاومت به انسولین، عوامل تغذیه ای است و یکی از روش های ایجاد این سندرم در حیوانات آزمایشگاهی، استفاده از رژیم غذایی غنی از فروکتوز می باشد(56و55).
با توجه به مطالعات فوق و گزارش بررسی اثر تجویز مزمن خوراکی ریشه ویتانیا سومنیفرا بر شدت درد موش های دیابتی نوع 1 و اینکه در هیچکدام از مطالعات اثر این گیاه بر شدت درد و فاکتور های التهابی در موش های مقاوم به انسولین بررسی نشده است، هدف این مطالعه تاثیر تجویز مزمن خوراکی پودر ریشه ویتانیا سومنیفرا بر میزان فاکتورهای التهابی و درد در موش های مقاوم به انسولین therapy of Type 2 diabetes. Int JClinPract2001; 121: 8-12.
25- Heather B, Lisa F, Khosrow A. Fructose, insulin resistance, and metabolic dyslipidemia. NutrMetab 2005; 2:5.
26- Sleder J, Chen YD, Cully MD, Reaven GM. Hyperinsulinemia in fructose-induced hypertriglyceridemia in the rat. J Metab 1980; 29(4):303-5.
27- Basciano H, Federico L, Adeli KH. Fructose, insulin resistanc and metabolic dyslipidemia. Nutrition & Metabolism. 2005; 2(5):163-7.
28- Jalal R, bagheri SM, Moghimi A, Rasuli MB. Hypoglycemic effect of aqueous shallot and garlic extrats in rats with fructose-indused insulin resistance. J clin Biochem Nutr 2007;41(3):218-23.
29- Canadian diabetes association. Clinical practice guideline for prevention and management of diabetes in Canada. Canada; 2003.
30- Nabipour I, Vahdat K, Jafari SM, Beigi S, Assadi M, Azizi F, et al. elevated high sensivity C reactive protein in associated with type II diabetes mellitus: The Persian gulf healthy heart study. Endocr J 2008;55(4):717-22.
31- Koster A, Stenholm S, Alley DE, Kim LJ, Simonsick EM, Kanaya AM, et al. Body fat distribution and inflammation among obese older adults with and without metabolic syndrome. Obesity (Silver Spring) 2010; 18:2354-61.
32- Oda E, Kawai R. Reproducibility of high-sensitivity C-reactive protein as an inflammatory component of metabolic syndrome in Japanese. Circ J 2010; 74:1488-93.
33- Deepa R, Velmurugan K, Arvind K, Sirvaram P, sientay C, Uday S, et al. Serum levels of interleukin 6, Creactive protein, vascular cell adhesion molecule 1, and monocyte chemotactic protein 1 in relation to insulin resistance and glucose intolerance--the Chennai Urban Rural Epidemiology Study (CURES). Metabolism. 2006;55(9):1232-8.
34- Goldberg RB. Cytokine and cytokine-like inflammation markers, endothelial dysfunction, and imbalanced coagulation in development of diabetes and its complications. J ClinEndocrinolMetab2009; 94(9):3171-82.
35- Deopurkar R, Ghanim H, Friedman J, Abuaysheh S, Sia CL, Mohanty P, et al. Differential effects of cream, glucose, and orange juice on inflammation, endotoxin, and the expression of Toll-like receptor-4 and suppressor of cytokine signaling-3. Diabetes Care 2010; 33:991-7.
36- Rutter MK, Meigs JB, Sullivan LM, D’Agostino RB, Sr., Wilson PWF. C-reactive protein, the metabolic syndrome, and prediction of cardiovascular events in the Framingham offspring study. Circulation 2004; 110:380-385.
37- King DE, Mainous AG, Buchanan TA, Pearson WS. C-reactive protein and glycemic control in adults with diabetes. Diabetes Care 2003; 26:1535-539.
38- Schaumberg DA, Glynn RJ, Jenkins AJ, LyonsTJ, Rifai N, Manson JE, et al. Effect of intensiveglycemic control on levels of markers ofinflammation in type 1 Diabetes mellitus in thediabetes control and complications trial.Circulation 2005;111: 2446-453.
39- Chen SR, Pan HL. Hypersensitivity of spinothalamic tract neurons associated with diabetic neuropathic pain rats. Neurophysiology 2002; 87: 2726-33
40- Khan GM, Chen SR, Pan HL. Role of primary afferent nerves in allodynia caused by diabetic neuropathy in rats. Neuroscience 2002; 114: 291-9
41- Dobretsov M, Hastings SL, Stimers JR. Mechanical hyperalgesia in rats with chronic perfusion of lumbar dorsal root ganglion with hyperglycemic solution. Journal of Neuroscience Methods 2001; 110: 9–15
42- Khorasani A. Makhzanoladvieh. Islamic Republic Educational Publisher. 1982; 324-325.
43- Mishra LC, Singh BB, Dagenais S. Scientific basis for the therapeutic use of Withaniasomnifera (ashwagandha): review. Altern Med Rev 2000; 5:334-46.
44- Czap K. Withaniasomnifera – monograph. Altern Med Rev 2004; 9:211-4
45- Hemalatha S, Wahi AK, Singh PN, Chansouria JP. Hypoglycemic activity of WithaniacoagulansDunal in streptozotocin induced diabetic rats. J Ethnopharmacol 2004; 93:261-264.
46- Ahmad, M.; Saleem, S.; Ahmad, A.S.; Ansari, M.A.; Yousuf, S.; Hoda, M.N.; Islam, F. Neuroprotective effects of Withaniasomniferaon 6-hydroxydopamine induced Parkinsonism in rats. Hum. Exp. Toxicol. 2005, 24, 137-147
47- Anbalagan, K.; Sadique, J. Role of prostaglandins in acute phase proteins in inflammation. Biochem. Med. 1984, 31, 236-245.
48- Anbalagan, K.; Sadique, J. Influence of an Indian medicine (Ashwagandha) on acutephase reactants in inflammation. Indian J. Exp. Biol. 1981, 19, 245-249.
49- Khalili, M. The Effect of Oral Administration of WithaniaSomnifera
50- Bezerra RW, Veno M, Silva MS, Tavers DQ, Carvalho CR, Saad MJ. A high-fructose diet induced insulin resistance but not blood pressure change in normotensive rats. Braz J Med Biol Res 2001; 85, 33-42.
51- Jacobson MF, High-fructose corn syrup and obesity epidemic. Am J ClinNutr 2004 80; 1081- 1082.
52- Avramoglu RK, Basciano H, AdeliK.Lipid and lipoprotein dysregulation in insulin resistancestates. Clin Chime Acta 2006; 368, 1-19.
53- Shapiro A, Mu W, Roncal C, Cheng Ky Johnson RJ and Scarpace PJ. Fructose-induced leptine resistance exacerbates weight gain in response to subsequent high-fat feding. Am j physiology regular integer comp physiology 2008; 295(5):1370-5.
54- Singh AK, Amial H, Haas PJmDringenbeg U,Fussel S, BaroneS,Engelhart r, Zuo J, Seicler Uand Soleimani M. Fructose-induced hypertension:essential rol of chloride and Fructose absorbingtransporter Pat1 and Glut5. Kidney int 2008; 74(4):438-47.
55- Swanson J.E., Lain D.C., Thomas W., Bantle JP. Metabolic effects of dietary fructose in healthy subjects. Am J ClinNutr 1992; 55, 851- 56.
56- Haidari M, Leung N, MahbubF.Fastingand posprandial overproduction of intestinally derived lipoproteins in an animal model of insulin resistance. Evidence that chronic fructose feeding in hamster is accompanied by enhanced de novo lipogenesis and apo.
57- Swanson J.E., Lain D.C., Thomas W., Bantle JP. Metabolic effects of dietary fructose in healthy subjects. Am J Clin Nutr 1992; 55, 851- 56.
58- Swanston-Flatt SK, Day C, Bailey CJ, Flatt PR. Evaluation of traditional plant treatments for diabetes: studies in streptozotocin diabetic mice. ActaDiabetolLat 1989; 26(1):51-5.
59- Arzi A, Sarkaki A, Aghel N , Nazari Z , Saeidnejad S. Study of Analgesic Effect of Hydroalcoholic Extract of Cinammom. Sci Med J 2011; 10(3):271-279
60- Wheeler-Aceto H, Cowan A. Standardization of the ratpaw formalin test for the evaluation of analgesics.Psychopharmacology 1991; 104: 35-44.
61- Dubuisson D, Dennis SG: The formalin test: a quantitative study of the analgesic effects of morphine, meperidine, and brain stem stimulation in rats and cats. Pain 1977; 4: 161-74.
62- Tara M, Jonathan C, David R. Use and Abuse ofHOMA modeling 2004; 27(6): 1487- 1495.
63- Guide lines for proper Conduct of Animal Experiments Science Council of japan میباشد.
2006.
سوالات و / یا فرضیات پژوهش1. تجویز خوراکی پودر ریشه گیاه سومنیفرا موجب کاهش میزان IL-6 میشود.
2. تجویز خوراکی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا موجب کاهش میزان CRP میشود.
3. تجویز خوراکی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا موجب کاهش میزان TNF-α میشود.
4. تجویز خوراکی پودر ریشه ویتانیا سومنیفرا مقاومت به انسولین را کاهش میدهد.
5. تجویز خوراکی پودر ریشه ویتانیا سومنیفرا قند خون(FBS) را در موش های مقاوم به انسولین ،کاهش میدهد.
6. تجویز خوراکی ریشه ویتانیا سومنیفرا موجب افزایش مقاومت به درد حاد میشود.
7. تجویز خوراکی ریشه ویتانیا سومنیفرا موجب افزایش مقاومت به درد مزمن میشود.
هدف کلی طرحاثر محافظتی تجویز مزمن خوراکی پودر ریشه ویتانیا سومنیفرا بر فاکتورهای التهابی و درد ناشی از تست فرماین در موش صحرایی نر تغذیه شده با فروکتوز
اهداف اختصاصی1) تعیین اثر تجویز خوراکی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا بر سطح سرمی IL-6 در موش های صحرایی نر تغذیه شده با فروکتوز و مقایسه آن با مقدار این کمیت در گروههای دیگر
2) تعیین اثر تجویز خوراکی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا بر سطح سرمی CRP در موش های صحرایی نر تغذیه شده با فروکتوز ومقایسه آن با مقدار این کمیت در گروههای دیگر
3) تعیین اثر تجویز خوراکی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا بر سطح سرمی TNF-α در موش های صحرایی نر تغذیه شده با فروکتوز مقایسه آن با مقدار این کمیت در گروههای دیگر
4) تعیین اثر تجویز خوراکی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا بر سطح سرمی انسولین در موش های صحرایی نر تغذیه شده با فروکتوز و مقایسه آن با مقدار این کمیت در گروههای دیگر
5) تعیین اثر تجویز خوراکی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا بر سطح گلوکز خون (FBS) در موش های صحرایی نر تغذیه شده با فروکتوز و مقایسه آن با مقدار این کمیت در گروههای دیگر
6) تعیین اثر تجویز خوراکی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا بر مقاومت به انسولین در موش های صحرایی نر تغذیه شده با فروکتوز و مقایسه آن با مقدار این کمیت در گروههای دیگر
7) تعیین اثر ضد دردی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا در موش های صحرایی نر تغذیه شده با فروکتوز در مرحله حاد و مقایسه آن با مقدار این کمیت در گروههای دیگر
8) تعیین اثر ضد دردی پودر ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا در موش های صحرایی نر تغذیه شده با فروکتوز در مرحله مزمن و مقایسه آن با مقدار این کمیت در گروههای دیگر
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحدانشگاه علوم پزشکی زاهدان
تعریف واژه های تخصصیسندرم متابولیک: تشخیص سندرم متابولیک بر اساس افزایش تری گلیسرید ، کاهش HDL، افزایش گلوکز، ایجاد مقاومت انسولین
فاکتورهای التهابی: پروتئین واکنشی فاز حاد(CRP) )، IL-6 (اینترلوکین 6)، TNF-α (فاکتور نکروز کننده تومور α)
درد: اندازه گیری شدت درد با استفاده از آزمون Dubuisson
نوع مطالعهتجربی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)48 سر موش صحرایی نر سالم نژاد ویستار(Wistar- Albino) با محدوده وزنی 200±20g می باشد که در مرکز تحقیقات حیوانات آزمایشگاهی دانشگاه علوم پزشکی زاهدان نگهداری میشوند.
حجم نمونه و روش محاسبه آنجمعیت مورد مطالعه شامل 48 سر موش نر سالم نژاد ویستار در 4گروه 12 تایی (n=12) که هر کدام در 2 زیر گروه 6 تایی تقسیم بندی میشوند.
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)نمونه گیری بر اساس معیارهای ورود به مطالعه انجام میشود و قرار گیر ی در گروه ها به صورت تصادفی انجام میشود.
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)اندازه گیری پارامترهای خونی توسط کیت و به صورت دستی انجام میشود.
اندازه گیری شدت درد بر اساس محاسبه نمره متد Dubuisson انجام میشود.
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)جمعیت مورد بررسی در این مطالعه48 سر موش صحرایی نر از نژاد wistare_Albino در محدوده وزنی g20± 200 میباشد که در شرایط 12 ساعت روشنایی و 12 ساعت تاریکی مصنوعی قرار میگیرند. حیوانات مورد بررسی دسترسی کامل به آب و غذا دارند و در جه حرارت اتاق حیوانات مورد بررسی بین 2±24 درجه سانتی گراد خواهد بود. حیوانات پس از توزین با ترازو (وزن اولیه) به طور تصادفی به 4گروه (n=12) تقسیم میشوند.
1) گروه کنترل که در خوردن و آشامیدن آزاد هستند A:(n=12).
2) گروه کنترل تیمار با ریشه گیاه :B (n=12) این موش ها به مدت 8 هفته از غذای حاوی ریشه گیاه استفاده میکنند.
3) گروه های دریافت کننده آب سرشار از فروکتوز:C ((n=12 : این حیوانات به مدت 8 هفته از آب آشامیدنی غنی از فروکتوز به نسبت(10% وزنی- حجمی ) استفاده میکنند(57).
4) گروه های دریافت کننده آب سرشار از فروکتوز +غذای حاوی ریشه گیاه ویتانیا سومنیفرا: (n=12) D این حیوانات به مدت 8 هفته از آب غنی از فروکتوز) 10% وزنی-حجمی)به همراه غذای حاوی پودر ریشه ویتانیا سومنیفرا ( 62.5 میلیگرم به ازای هر گرم غذا) استفاده میکنند(58).
تهیه غذای محتوی ریشه گیاه:
گیاه ویتانیا سومنیفرا از شهرستان داراب ، جاده روستای حسن آباد تهیه و پس از تعیین گونه آن توسط هرباریوم گروه زیست شناسی دانشگاه سیستان و بلوچستان، ریزوم آن خشک، و کاملا آسیاب شده و به صورت پودر در می آید . سپس به صورت 25/6 در صد (62.5mg/g) در غذای اولیه موش ها مخلوط و سپس آبگیری شده و خمیر بدست آمده مجددا به صورت پلیت در آمده و پس از خشک شدن به میزان لازم در اختیار حیوان قرار میگیرد.
بعد از اتمام 8 هفته، قبل آزمون درد : زیرگروه A2 و C2 هر کدام از موش ها 2.5mg/kg به صورت درون صفاقی مورفین ، و زیرگروه های B2 و D2 هر کدام از موش ها 1mg/kg به صورت درون صفاقی نالوکسان دریافت میکنند.روی موش های زیر گروه های دیگر آزمون درد بدون مداخله انجام میشود(59).
آزمون فرمالین:
برای این آزمون از روش متداول استفاده میگردد. بدین ترتیب که حیوان در یک محفطه از جنس پلاکسی گلاس (40×40×40)تحت شرایط آرام قرار گرفته و در قسمت زیر محفظه آینه ای با زاویه 45 درجه قرار دارد تا وضعیت کف پای حیوان کاملا مشخص باشد. پس از گذشت یک ساعت، 50 میکرولیتر فرمالین 5/2% به صورت زیرجلدی به کف پای عقبی هر موش تزریق میگردد و شدت درد حیوان بر اساس تقسیم بندی زیر به چهار درجه تفکیک میشود: (0)- حیوان بدون احساس درد روی پای تزریق شده راه میرود و می ایستد. (1)- پای حیوان با محفطه تماس داشته ولی حیوان بدن خود را روی پای سالم خود می اندازد. (2)- حیوان پنجه دردناک را کاملا از محفطه بلند میکند. (3)- حیوان پنجه تزریق شده را از شدت درد میلیسد، گاز میگیرد یا یا به شدت تکان میدهد. ثبت پاسخ های رفتاری بالافاصله بعد از تزریق فرمالین آغاز و تا 60 دقیقه ادامه می یابد. در این ارتباط پاسخ در هر 15 ثانیه ثبت و به عنوان شاخصی از میزان درد در آزمون فرمالین در نظر گرفته میشود. با استفاده از این روش، اعداد 0 تا 3 برای زمان های مختلف بدست می آید.
میانگین درد در ده دقیقه اول بعد از تزریق فرمالین، به عنوان مرحله اول یا حاد و در دقایق 16 الی 60 به عنوان مرحله دوم یا مزمن در نظر گرفته می شود. محاسبه متد درد بر اساس Dubuisson انجام میشود(61و 60).
در پایان دوره تمام حیوانات مورد بررسی با اتر(مرک آلمان) عمیقا بیهوش و خونگیری از ورید گردن انجام، سپس تمام نمونه های خون با دور 3500 طی 20 دقیقه سانتریفوژ خواهند شد. در انتها سرم جداسازی شده جهت اندازه گیری گلوکز، انسولین، IL-6 ، CRP، TNF-α به آزمایشگاه فرستاده خواهند شد. مقاومت به انسولین به روش HOMA محاسبه میگردد(62).
Insulin resistance=fasting insulin×fastingglucose/22.5
گلوکز پلاسما با استفاده از روش زوج آنزیمی گلوکز – پراکسیداز با استفاده از کیت اندازه گیری گلوکز، شرکت زیست شیمی تهران- ایران اندازه گیری خواهد شد. انسولین رت با استفاده کیت و از روش ELISA اندازه گیری خواهد شد. وسطوح سرمی IL-6 ، CRP، TNF-α نیز توسط کیت های مخصوص خود به روش ELISA اندازه گیری خواهند شد. اطلاعات بدست آمده با نرم افزار SPSS ویرایش 15 و تست های آماری آنالیز و نتایج به صورت mean±SD در جداول آماری گزارش و اختلاف آماری با (P<0.05) معنی دار تلقی میگردد.
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)داده ها با استفاده از روش های آمار توصیفی(تنظیم جدول توزیع فراوانی، تعیین شاخص های مرکزی و پراکندگی، رسم نمودار) و آمار استنباطی( آزمون کروسکال والیس، من ویتنی، کای دو) تجزیه و تحلیل خواهند شد.
ملاحظات اخلاقی
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهامشکل تهیه کیت و امکان طولانی شدن زمان دریافت آنها
کلمات کلیدیویتانیا سومنیفرا، درد، فاکتورهای التهابی، سندرم متابولیک
metabolic syndrome, inflammatory factors, pain, withania somnifera
فهرست منابع و مراجع1- American Diabetes Association. Clinical practice recommendation, screening for diabetes. Diabetes Care 1997;20:22-24.
2- Gleckman R, Morr J. Diabetes-related foot infection. Contemp InternMed1994;6:57-64
3- Shaw JE,et al. global estimates of the prevalence of diabetes for 2010 and 2030. Diabetes Res CliPract. 2010 jan;87(1):4-14.
4- Frode, T.S. and Y.S. Medeiros, Animal models to test drugs with potential antidiabetic activity. Journal of ethnopharmacology, 2008. 115(2): p. 173-83.
5- Salami M.S, HoseiniPanah F, Azizi F.Assessment of relation between insulinresistance and impaired glucose tolerance inadults of Tehran : Tehran Lipid and GlucoseStudy. Iranian Journal of Endocrinology andMetabolism. 2006, 3: 259-268.
6- BorzoueiSh, HoseiniPanah F, Azizi F. Concordance of ATPΙΙΙ and IDF definition of metabolic syndrome with insulin resistance in Tehran Lipid and Glucose Study. Iranian Journal of Endocrinology and Metabolism. 2008,5: 435-443.
7- Volek JS, Fernandez ML, Feinman RD, Phinney SD. Dietary carbohydrate restriction induces a unique metabolic state positively affecting atherogenic dyslipidemia, fatty acid partitioning, and metabolic syndrome. Prog Lipid Res 2008; 47:307-18.
8- Kolovou GD, Anagnostopoulou KK, Salpea KD, Mikhailidis DP. The prevalence of metabolic syndrome in various populations. Am J Med Sci 2007; 333:362-71.
9- Esposito K, Giugliano D. Mediterranean diet and the metabolic syndrome: the end of beginning. MetabSyndrRelatDisord 2010; 8:197-200.
10- Delavari A, Forouzanfar MH, Alikhani S, Sharifian A, Kelishadi R. First nationwide study of the prevalence of the metabolic syndrome and optimal cutoff points of waist circumference in the Middle East: the national survey of risk factors for noncommunicable diseases of Iran. Diabetes Care 2009; 32:1092-7.
11- Esmaillzadeh A, Mirmiran P, Azadbakht L, Etemadi A, Azizi F. High prevalence of the metabolic syndrome in Iranian adolescents. Obesity (Silver Spring) 2006; 14:377-82.
12- Cameron AJ, Shaw JE, Zimmet PZ. The metabolic syndrome: prevalence in worldwide populations. EndocrinolMetabClin North Am 2004; 33:351-75.
13- Lawlor DA, Smith GD, Ebrahim S. Does the new International Diabetes Federation definition of the metabolic syndrome predict CHD any more strongly than older definitions? Finding from the British Women's Heart and Health Study. Diabetologia 2006; 49:41-8.
14- Dandona P, Aljada A, Chaudhuri A, Mohanty P, Grag R. Metabolic syndrome: a comprehensive perspective based on interactions between obesity, diabetes and inflammation. Circulation 2005; 111:1448-54.
15- Ramos EJ, Xu Y, Romanova I, Middleton F, Chen C, Quinn R, et al. Is obesity an inflammatory disease? Surgery 2003; 134:329-35.
16- Williams KJ, Tabas I. Atherosclerosis and inflammation. Science 2002; 297:521-2.
17- Koster A, Stenholm S, Alley DE, Kim LJ, Simonsick EM, Kanaya AM, et al. Body fat distribution and inflammation among obese older adults with and without metabolic syndrome. Obesity (Silver Spring) 2010; 18:2354-61.
18- Oda E, Kawai R. Reproducibility of high-sensitivity C-reactive protein as an inflammatory component of metabolic syndrome in Japanese. Circ J 2010; 74:1488-93.
19- Hauner H. Secretory factors from human adipose tissue and their functional role. ProcNutrSoc 2005; 64:163-9.
20- Wood IS. Trayhurn P. Adipokines and the signaling role of adipose tissue in inflammation and obesity. Future Lipidol 2006; 1:81-89.
21- Calle MS, Fernandez ML. inflammation and diabetes. Diabetes Metab. 2012 jan15.
22- Henriksen EJ, Diamond-Stanic MK, Marchionne EM. Oxidative stress and the etiology of insulin resistance and type 2 diabetes. Free RadicBiolMed2011; 51(5):993-9.
23- King GL. The role of inflammatory cytokines in diabetes and its complications. J Periodontol 2008; 79(8 Suppl):1527-34.
24- Laakso M. Insulin resistance and its impact on the approach to

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
صمدی.doc1392/03/08301056دانلود
اثر ضد دردی دارچین.pdf1392/03/08364084دانلود
بوزیدان روی درد.pdf1392/03/08201286دانلود
رفرنس 31.pdf1392/03/08410222دانلود
2.jpg1392/03/08191417دانلود
Untitled.png1392/03/08641001دانلود
نهایی.doc1392/06/26293888دانلود
137_334_check-list (1)[1].doc1392/06/2681920دانلود
scan.jpg1392/08/29241066دانلود