کاربرد دوتکنیک جدید میکرواستخراج مایع - مایع پخشی در سرنگ جهت استخراج ید ادرار واندازه گیری آن بروش اسپکتروفوتومتری و مقایسة این دو تکنیک با متد استاندارد ساندل-کلتهوف

Application of Two New Techniques Based on in-Syringe Dispersive Liquid-Liquid Microextraction for Spectrophotometric Urinary Iodide Determination and Comparison of Them to Standard Sandell–Kolthoff Method


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
مجری و همکاران
مجری و همکاران
اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی
دانلود
دانلود
علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان:

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 6162
عنوان فارسی طرح کاربرد دوتکنیک جدید میکرواستخراج مایع - مایع پخشی در سرنگ جهت استخراج ید ادرار واندازه گیری آن بروش اسپکتروفوتومتری و مقایسة این دو تکنیک با متد استاندارد ساندل-کلتهوف
عنوان لاتین طرح Application of Two New Techniques Based on in-Syringe Dispersive Liquid-Liquid Microextraction for Spectrophotometric Urinary Iodide Determination and Comparison of Them to Standard Sandell–Kolthoff Method
نوع طرح کاربردی
محل اجرای طرح دانشگاه علوم پزشکی زاهدان
رسته مطالعاتی مطالعه تجربی (Experimental)(مطالعه کمی)
دانشکده/مرکز دانشکده پزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز 270

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
محمودعلی کیخوائیمجری اول فوق تخصصmazyar44@gmail.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی کاربرد دوتکنیک جدید میکرواستخراج مایع - مایع پخشی در سرنگ جهت استخراج ید ادرار واندازه گیری آن بروش اسپکتروفوتومتری و مقایسة این دو تکنیک با متد استاندارد ساندل-کلتهوف
خلاصه طرح به لاتینApplication of Two New Techniques Based on in-Syringe Dispersive Liquid-Liquid Microextraction for Spectrophotometric Urinary Iodide Determination and Comparison of Them to Standard Sandell–Kolthoff Method
محل اول بکارگیری نتایج تحقیق
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشید جزءاصلی هورمون تیروئیداست که نقش مهمی در رشد و متابولیسم انسان بعهده دارد. کمبود ید یکی از چالشهای مهم حوزه ی سلامت در کشورهای جهان سوم است. آمارها حاکی از آن است که2/2 میلیارد نفر از کمبود ید رنج می برند. تعیین مقدار ید در ادرار (UI) مهمترین تست برای پی بردن به سطح ید در انسان می باشد که علی الخصوص در تشخیص کمبود ید بسیار مهم است. روشهای تجزیه ای معمول UI در آزمایشگاههای تشخیص طبی، وقت گیر و پر هزینه می باشد و روشهای دقیق تر مانند پلاسمای القائی کوپل شده با اسپکترومتر جرمی بسیار پیچیده و گرانبها هستند لذا نیازمند روشی نوین برای این اندازه گیری هستیم که ضمن آنکه در همه ی آزمایشگاهها قابل انجام باشد، سرعت زیادی داشته و ارزان قیمت باشد و با ابزار ساده بتواند ید را در محیط بسیار پیچیده ی ادرار بطور صحیح و دقیق سنجش نماید.
روش متداول ساندل-کلتهوف که در آن یک اسپکتروفوتومتر معمولی ماوراء بنفش-مرئی (UV-Vis) استفاده می شود که ضمن ارزان قیمت بودن، روش کار ساده ای دارد، باینصورت که ید واکنش اکسیداسیون- احیاء سریم (IV) و آرسنیک (III) را کاتالیز می نماید. سرعت بی رنگ شدن رنگ زرد سریم، تخمینی از مقدار ید در ادرار را به دست میدهد [1].
از معایب این تکنیک، حد تشخیص بالای آن و حساسیت زیاد آن به دما است ( واکنش کاتالیزوری می باشد) اما عیب اصلی آن، زمان بر بودن آن است به طوری که روش ساندل-کلتهوف برای تجزیه یک نمونه ادرار، به سه روز زمان نیاز دارد [2].
در این تحقیق دو روش بسیار مدرن برای استخراج سریع ید از ادرار پیشنهاد می شود که ید را از محیط پیچیده خارج ساخته، تغلیظ می نمایند و سپس به سادگی توسط اسپکتروفوتومتر خوانده می شود. کل تجزیه کمتر از یک ربع ساعت زمان می برد. روش آماده سازی نمونه مورد استفاده، میکرو استخراج مایع- مایع در سرنگ (S-DLLME) نام دارد. دو روش برای S-DLLME ید در ادرار مورد تحقیق قرار خواهند گرفت: استفاده از آهن (III)- فنانترولین برای ایجاد کمپلکس با ید ودیگری استخراج ید به صورت ICL2- زوج یون شده با رودامین ب. برای اولین بار روش SDLLME در مورد یک آنیون به کار گرفته خواهد شد.
مشکل جاری که سیاست گزار با آن مواجه است کدام است؟
روش های موجود کدامها هستند؟
پیشنهاد اول نحوه کاربرد
محل دوم بکارگیری نتایج تحقیق
سوالات و / یا فرضیات پژوهش-آیا روشS-DLLME می تواند برای استخراج ید به کار رود؟
-آیا مزاحمتهای ترکیبات دیگر در ادرار مخصوصأ آنیونهایی مانند کلرید، تأثیری بر سنجش دارد؟
هدف کلی طرحبررسی کاربرد دوتکنیک جدید میکرواستخراج مایع - مایع پخشی در سرنگ برای استخراج ید واندازه گیری آن در نمونه های ادرار بروش اسپکتروفوتومتری
منافع و مضرات روشهای موجود کدامند؟
چرا پیام تحقیق شما حلال مشکل جاری است؟
اهداف اختصاصی1.استاندارد سازی روش میکرو استخراج مایع- مایع در سرنگ به روش استفاده از آهن (III)- فنانترولین برای ایجاد کمپلکس با ید در اندازه گیری ید ادرار
2. مقایسه روش میکرو استخراج مایع- مایع در سرنگ به روش استفاده از آهن (III)- فنانترولین برای ایجاد کمپلکس با ید با روش استاندارد در اندازه گیری ید ادرار
3. استاندارد سازی روش میکرو استخراج مایع- مایع در سرنگ به روش استخراج ید به صورت ICL2- زوج یون شده با رودامین ب در اندازه گیری ید ادرار
4. مقایسه روش میکرو استخراج مایع- مایع در سرنگ به روش استخراج ید به صورت ICL2- زوج یون شده با رودامین ب با روش استاندارد در اندازه گیری ید ادرار
پیشنهاد دوم نحوه کاربرد
محل سوم بکارگیری نتایج تحقیق
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح-آزمایشگاههای تشخیص طبی
پیام تحقیق شما چه منافعی از نظر هزینه، کارایی و بهره وری برای مدیر دارد؟
برای اجرای راه حل پیشنهادی شما چه موانع و حمایتهایی وجود دارند؟
تعریف واژه های تخصصیمیکرواستخراج مایع- مایع در سرنگ = روش میکرواستخراج مبتنی بر حالت مینیاتوری شده ی استخراج مایع- مایع که در آن از سه حلال استفاده شده و در سرنگ معمولی انجام می شود.
اسپکتروفوتومتر = دستگاهی که شدت جذب نور در هر طول موج را برای مایعات تعیین می کند.
پیشنهاد سوم نحوه کاربرد
محل چهارم بکارگیری نتایج تحقیق
نوع مطالعهازمایشگاهی In vitro
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)پس از توسعة روش توسط نمونه استاندارد، مزاحمتها در همان نمونه بررسی می شوند. در صورت موفقیت آمیز بودن (عدم تأثیر عوامل مزاحمی که غالبأ در ادرار انسان با غلظت بالا وجود دارند) نمونه ادرار، مورد آنالیز قرار گرفته و سپس توسط آلوده سازی (spiking) با مقادیر مختلفی از یدید، ریکاوری روش تست می گردد. در صورت ریکاوری 95-103%، از نظر تجزیه ای، برای آنالیز UI مناسب می باشد. از آنجائی که ساخت متد (و نه کاربرد آن) مد نظر پژوهشگران این طرح است، تعدّد نمونه احتیاج نمی باشد و صحّت روش با چند نمونه ادرار که UI آنها با روش استاندارد، معلوم است، کنترل خواهد شد.
پیشنهاد چهارم نحوه کاربرد
حجم نمونه و روش محاسبه آناز آنجائیکه توسعه و ارائه متد مد نظر است، تنها به آنالیز نمونه های استاندارد، و یکی دو نمونه حقیقی بسنده شده و نتایج حاصله با نتایج حاصل از روش استاندارد مقایسه حواهند شد.
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)ندارد
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)بازگشت به روش اجرای طرح
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)1. توسعه روش S-DLLME: استفاده از حلالهای مختلف، شرایط یونی گوناگون، احجام مختلف و سایر پارامترهای مؤثر بر استخراج بر مبنای کمپلکس آهن- فنانترولین و نیز رودامین ب- زوج یون ICL2-
2. بررسی مزاحمتها
3. آنالیز نمونه حقیقی با روش پیشنهادی
4. آنالیز همان نمونه با روش استاندارد کلتهوف- ساندل
در این تحقیق اندازه گیری مقادیر بسیار ناچیز ید توسط روش میکرو استخراج مایع- مایع پخشی در سرنگ مورد بررسی قرار خواهد گرفت. به این منظور دو روش متفاوت استخراج آن با استفاده از تشکیل زوج یون به همراه اسپکتروفوتومتری ماوراء بنفش- مرئی به کار گرفته خواهد شد. هر دو روش ساده (استخراج و پیش تغلیظ در یک مرحله)، سریع و قابل انجام با ابزار ساده و در دسترس میباشند و نخستین گزارش برای کاربرد میکرو استخراج مایع- مایع پخشی در سرنگ برای یک آنیون محسوب می گردند.



1. استخراج ید توسط تکنیک میکرو استخراج مایع- مایع پخشی با استفاده از لیگاند رودامین ب

در این روش استخراج، رودامین ب (شکل 1) توسط میکرو پیپت به داخل سرنگ پلاستیکی 10 میلی لیتری که در آن نمونة ادرار حضور دارد، افزوده می شود. سپس محلول توسط اسید هیدروکلریدریک غلیظ اسیدی شده و محلول دوتایی شامل یک حلال پخشی و یک حلال استخراجی سریعأ توسط یک سرنگ انسولین از نوک سرنگ پلاستیکی به داخل محلول نمونه تزریق می گردد. استخراج در دمای محیط انجام میگیرد. فاز استخراجی حاوی ید در بالای سرنگ ظاهر می گردد که چند میکرولیتر از آن توسط میکرو سرنگ شیشه ای برداشته شده و به داخل میکروسل اسپکتروفوتومتروارد می شود و سپس جذب آن توسط دستگاه اندازه گیری میشود.



واکنشی که در سرنگ قبل از استخراج صورت می گیرد، طبق معادله زیر می باشد [3]:

I- + HNO2 + 2H+ + Cl- → ICl + 2NO + 2H2O

سپس کلرید ید با اضافی کلرید تولید -ICl2 می کند که آنیون تولیدی به صورت زوج یون با رودامین ب به داخل تولوئن استخراج می شود. در اینجا از تکنیک میکرو استخراج مایع- مایع پخشی برای اندازه گیری ید استفاده می شود که تاکنون استخراج و اندازه گیری آنیونها با این روش و با استفاده از سرنگ گزارش نشده است. به علت استفاده از سرنگ، نیازی به مرحله سانتریفوژ نمی باشد که باعث کوتاهتر شدن فرآیند استخرا ج به دلیل حذف این مرحله شده است [4].

2. استخراج ید با تکنیک میکرو استخراج مایع- مایع پخشی توسط کمپلکس تریس 1و10 فنانترولین- آهن II

در این روش نیز استخراج ید از نمونة ادرار، مانند روش(1) داخل سرنگ پلاستیکی 10 میلی لیتری انجام خواهد شد. کمپلکس تریس 1و10 فنانترولین- آهن (II) (شکل 2) به نمونة ادرار حاوی ید افزوده شده و توسط بافر به حجم میرسد. سپس مخلوط دو تایی حلالها شامل نیتروبنزن و متانول توسط سرنگ انسولین با شدت به داخل محلول نمونه تزریق میگردد تا ید به داخل نیتروبنزن استخراج شود [5].

پس از انتقال مقداری از فاز استخراجی به داخل میکروسل، جذب آن توسط اسپکتروفوتومتر جذبی ماوراء بنفش- مرئی اندازه گیری می گردد. محلول شاهد نیز طبق روش بالا اما بدون حضور آنالیت تهیه و فرآیند استخراج روی آن اعمال می شود [6].

روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)توسط تست F، دقت دو روش پیشنهادی با هم و با روش استانداردساندل-کلتهوف مقایسه خواهند شد. سپس با استفاده از تست student’s-t، صحت اندازه گیری ید در ادرار، بین دو روش میکرواستخراج مایع-مایع پخشی در سرنگ با یکدیگر و نیز با روش SK ، بررسی خواهد گردید. برای هر دو روش پیشنهادی، ارقام با ارزش تجزیه ای شامل، صحت، دقت، حساسیت، حد تشخیص، تکرارپذیری و بازیابی نسبی(ریکاوری) گزارش خواهد شد.
ملاحظات اخلاقی ندارد
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهااپتیمم سازی پارامترهای مؤثر بر استخراج یدید از ادرار، چالش واقعی و اصلی می باشد که بایستی دهها پارامتر تغییر داده و بهینه سازی شوند. به این منظور از روش شناخته شده Univalent (یاone-parameter-at-a-time) استفاده می شود. به اینصورت که کلیه شرایط آزمایش را ثابت نگه داشته و تنها یک متغیر،تغییر داده می شود (مثلأ دمای واکنش) تا اثر آن بر میزان استخراج (اندازه گیری) ید بررسی شود. پس از یافتن مقدار بهینه آن پارامتر خاص، آنرا به همراه سایر فاکتورهای مؤثر بر آزمایش، ثابت نگه داشته، فاکتور دوم را در یک گستره ی بخصوص تغییر می دهیم (مثلأ pH نمونه) تا آن نیز بهینه سازی شود. این عمل بر روی تمامی عوامل تأثیر گذار بر آزمایش انجام شده و بهینه سازی صورت خواهد پذیرفت.
کلمات کلیدیUrinary Iodide Determination، in-Syringe Dispersive Liquid-Liquid,Microextraction
میکرواستخراج مایع - مایع پخشی در سرنگ؛ اندازه گیری یدادرار
فهرست منابع و مراجع1. World Health Organization/International Council for the Control of the Iodine Deficiency Disorders/ United Nations Children's Fund. (2007) Assessment of the Iodine Deficiency Disorders and
Monitoring Their Elimination, 3rd ed. World Health Organization: Geneva.

2. Pieter L. Jooste, P.L., Strydom, E., Methods for determination of iodine in urine and salt, Best Pract. Res. Clin. Endocrin. Metabol., Vol. 24, pp 77-88, 2010.

3. AL-Hajjaji, M.A., Spectrophotometric and spectrofluorimetric determination of iodide by extraction of ICl2- with rhodamine b, Anal. Chim. Acta, Vol. 197, pp. 281-284, 1987.

4. Cruz-Vera, M., Lucena, R., Cárdenas, S., Valcárcel, M., One-step in-syringe ionic liquid-based dispersive liquid–liquid microextraction, J. Chromatogr. A, Vol. 1216, pp. 6459-6465, 2009.

5. Yamamoto, Y., Tarumoto, T., Tsuboughi, M., Spectrophotometric determination of anions by solvent extraction with metal chelate cations. XIV Determination of iodide ions with tris (1،10- phenanthroline) iron(II), Bull. Chem. soc. Japan, Vol. 44, No. 3, pp. 2124- 2126, 1971.

6. Pena-Pereira, F., Lavilla, I., Bendicho, C., Headspace single-drop microextraction coupled to microvolume UV–VIS spectrophotometry for iodine determination, Anal. Chim. Acta, Vol. 631, pp. 223-228, 2009.
معرفی پژوهش/ اهداف پژوهش
(عین عبارت هدف پروپوزال را کپی نکنید. بلکه با جملاتی که برای مردم قابل فهم باشد (برای سواد حدود پنجم ابتدایی )هدف را برای شرکت کنندگان توضیح دهید.) در تمام این متن در صورتیکه شرکت کننده کودک یا فرد فاقد ظرفیت تصمیم گیری است باید مواردیکه منظور از "من"، فرد شرکت کننده بوده است به "کودک" یا "فرد تحت سرپرستی من" اصلاح شود و مواردیکه منظور از "من"، رضایت دهنده است به من به عنوان "ولی" یا "قیم قانونی" اصلاح شود.
خون گیری
(آیا طرح شما نیاز به خونگیری دارد یا خیر)
نحوه همکاری/ مزایا ی طرح
(در این بخش برای شرکت کنندگان به زبان ساده توضیح دهید که: چه مداخله ای بر روی آنها صورت میگیرد. چه اقدامات پاراکلینیکی بر روی آنها انجام میشود. چه نمونه ای و با چه حجمی از آنها میگیرید در این مدت چند نوبت مراجعه باید داشته باشند و به چه فواصلی چه اقداماتی را در پیگیری آنها انجام میدهید. (حتی میتوانید سود بالقوه ای که شرکت کنندگان میتوانند از شرکت در این پژوهش ببرند بنویسید. این سود میتواند شرح احتمال درمان یا تشخیص بهتر بیماریشان، دریافت خدمات سلامت رایگان و یا پرداخت مشوق مالی در ازای جبران همکاریشان باشد)
عوارض جانبی
(منظور عوارض و میزان احتمال بروز آنها در این مطالعه است)
جبران عوارض احتمالی
(برای آنکه شرکت کننده بتواند ارزیابی مناسبی از سود و زیان شرکت در پژوهش شما داشته باشد لازم است بتواند سود و زیان مداخلات معمول و مداخلات این پژوهش را مقایسه کند. به عنوان مثال میزان موفقیت و میزان عوارض هریک را مقایسه کند.) - او باید بداند كه اگر در حين و بعد از انجام پژوهش هم هر مشكلي اعم از جسمي و روحي به علت شرکت در اين پژوهش برایش پيش آمد درمان عوارض، و هزينه‌هاي آن و غرامت مربوطه بر عهده مجري خواهد بود.
هزینه های مربوط به انجام طرح تحقیقاتی
(تمام مداخلات پژوهشی باید برای بیمار رایگان باشد و بیمار بداند شامل چه مواردی هستند. )
روش های جایگزین
در صورت عدم تمایل به شرکت در مطالعه چه روش های درمانی برای بیمار ارائه خواهد شد
محرمانه بودن
بیمار باید بداندکه دست اندر كاران اين پژوهش، كليه اطلاعات مربوط به او را نزد خود به صورت محرمانه نگه‌داشته و فقط اجازه دارند نتايج كلي و گروهي اين پژوهش را بدون ذکر نام و مشخصات بیمار منتشر كنند. و كميته اخلاق در پژوهش با هدف نظارت بر رعایت حقوق وی مي‌تواند به اطلاعات ایشان دسترسي داشته باشد.
پاسخگویی به پرسش ها
در این بخش نام و اطلاعات دسترسی فردی از عوامل پژوهش را که بتواند اطلاعات صحیح و کافی در اختیار شرکت کنندگان قرار دهند و در مورد عوارض و نگرانیها راهنمایی لازم را ارائه دهند ذکر شود
حق نپذیرفتن یا انصراف
بیمار باید بداند که شرکت اودر اين پژوهش کاملاً داوطلبانه است و مجبور به شرکت در اين پژوهش نيست و در صورت عدم شرکت از مراقبت‌هاي معمول تشخيصي و درماني محروم نخواهد شد او باید بداند كه حتي پس از موافقت با شركت در پژوهش مي‌تواند هر وقت كه بخواهد، پس از اطلاع به مجري، از پژوهش خارج شود و خروج اواز پژوهش باعث محرومیت از دریافت خدمات درمانی معمول برای اونخواهد شد.
رضایت
او باید بداند که اگر اشکال يا اعتراضي نسبت به دست اندركاران يا روند پژوهش دارد مي تواند با كميته اخلاق در پژوهش دانشگاه تماس گرفته و مشکل خود را به صورت شفاهي يا كتبي مطرح نمايد. در انتهای فرم قید گردد : اينجانب موارد فوق‌الذکر را خواندم و فهميدم و بر اساس آن رضايت آگاهانه خود را براي شركت در اين پژوهش اعلام مي‌کنم. اينجانب ……………… خود را ملزم به اجراي تعهدات مربوط به مجري در مفاد فوق دانسته و متعهد مي‌گردم در تأمين حقوق و ايمني شركت كننده در اين پژوهش تلاش نمايم
پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
Proposal_Oloom_P_IODINE_V2(2).doc1392/04/06272384دانلود
Proposal_Oloom_P_IODINE_V3 (2).doc1392/06/18269312دانلود
Pasokh be soalat davaran.docx1392/06/1821179دانلود
Proposal_Oloom_P_IODINE_V3 (2).doc1392/11/06269312دانلود
Eslaaheyeh.docx1392/11/0615110دانلود