بررسی میزان PH و آلفا آمیلاز بزاق در بیماران مبتلا به آفت راجعه دهانی

Evaluation of salivary PH and alpha-amylase in patients with recurrent aphthous stomatitis


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: ماریه هنرمند

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 6270
عنوان فارسی طرح بررسی میزان PH و آلفا آمیلاز بزاق در بیماران مبتلا به آفت راجعه دهانی
عنوان لاتین طرح Evaluation of salivary PH and alpha-amylase in patients with recurrent aphthous stomatitis
نوع طرح
محل اجرای طرح دانشکده دندانپزشکی
رسته مطالعاتی کاربردی
دانشکده/مرکز دانشکده دندانپزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
وحید اکاتی دانشجو v_okati@yahoo.com
ماریه هنرمندمجریاستاد راهنمادکترای تخصصی honarmand56@yahoo.com
علیرضا نخعیمشاور دکترای تخصصی alireza_nakhaee@yahoo.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی میزان PH و آلفا آمیلاز بزاق در بیماران مبتلا به آفت راجعه دهانی
خلاصه طرح به لاتینEvaluation of salivary PH and alpha-amylase in patients with recurrent aphthous stomatitis
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشآفت دهانی شایع ترین زخم دهانی است که به صورت یک یافته بسیار معمول در میان 20% جمعیت مشاهده می شود که به صورت زخم های دردناک و راجعه روی مخاط داخلی گونه ها و لب ها، سطح شکمی زبان، کام نرم و حلق ظاهر می شود. این زخم ها می توانند آزار زیادی برای بیمار ایجاد کنند و با فعالیت های روزمره بیمار تداخل کنند1.
اغلب بیماران مبتلا به آفت های دهانی در طول یک سال دوره های متعددی از این بیماری را دارند. مکانیسم دقیق ایجاد آفت هنوز به درستی روشن نیست اما فاکتورهایی را در بروز آن دخیل دانسته اند. شامل تروما، استرس های روحی، کمبودهای تغذیه ای مانند کمبود ویتامین ها، به خصوص B12، روی، اسید فولیک، آهن، مسائل ارثی و ژنتیکی2.
بزاق به عنوان یک عنصر مهم و حیاتی برای حفظ سلامت مخاط دهان در نظر گرفته شده است3. جریان بزاق و ترکیبات آن تأثیر عمده ای در تشکیل جرم، بیماری پریودنتال و پوسیدگی ها ایفا می کند. نقش مهم بزاق در دهان کنترل PH دهان است4. PH بزاق توسط سیستم اسید کربنیک/بیکربنات، سیستم فسفات و سیستم پروتئین تنظیم می شود5. تعداد زیادی از ترکیبات بزاقی ممکن است توانایی کنترل PH را داشته باشند، اما مهمترین آنها بی کربنات است6. غلظت بی کربنات در بزاق با افزایش جریان بزاق و تغییرات PH افزایش می یابد7. مطالعات بسیاری روی PH بزاق، محدوده بین 5/5 تا 9/7 را برآورد کرده اند که با افزایش PH ، میزان جریان بزاق (SFR) نیز افزایش می یابد8.
α-آمیلاز بزاقی (SAA) یکی از فراوان ترین مواد بزاق است و حدود 10-20% از کل محتوای پروتئین بزاق را تشکیل می دهد9 . SAA از سلولهای آسینار اپیتلیالی بسیار تمایز یافته غدد بزاقی و عمدتا از غدد پاروتید تولید می شوند 10. SAA کمک به هضم مواد غذایی از طریق هیدرولیز نشاسته به گلوکز و مالتوز می کند11. مشاهدات اخیر نشان می دهد ارتباطی بین ترشح SAA و شرایط پراسترس وجود دارد و در هر دوشرایط استرس فیزیکی و روانی افزایش غلظت آنزیم دیده می شود12.
در مطالعاتی همچون مطالعه Pokupec و همکاران در سال 2013 در کرواسی تاثیر آفت های راجعه مورد بررسی قرار گرفت و محققان به این نتیجه رسیدند که بین آفت و کاهش PH بزاق ارتباط وجود دارد13 . در مطالعه ای که توسط Al-Taee در سال 2010 انجام شد تعداد 30 بیمار مبتلا به آفت راجعه و 30 فرد سالم از نظر PH بزاق مورد بررسی قرار گرفتند که در این مطالعه بین PH بزاق دو گروه تفاوت معنی داری دیده شد و گروه مورد PH بزاق پایین تری نسبت به گروه کنترل داشت.14
در پژوهش Boras در سال 2012 میزان آلفا آمیلاز بزاق در زمان آفت فعال در دهان و زمان بهبودی بررسی شد که میزان آلفا آمیلاز در زمان بهبودی بیشتر از زمان حضور آفت بود.15
در مطالعه Rashkova و همکاران در سال 2012 ارتباط بین میزان آلفا آمیلاز بزاق با استرس های مرتبط با اضطراب را در 30 بیمار بررسی شد. میزان آلفا آمیلاز بزاق در شرایط استرس شدید کمتر از شرایط نرمال بود که این تفاوت از نظر آماری معنی دار بود16.
در پژوهش Furlan و همکاران در سال 2012 تعداد 31 کودک را از نظر میزان کورتیزول بزاقی، آلفا آمیلاز بررسی کردند. در این مطالعه کورتیزول و سطح آمیلاز قبل از فیشورسیلانت تراپی نسبت به بعد از آن بالاتر مشاهده شد. 17
با توجه به اینکه بروز آفت در شرایط پر استرس بیشتر دیده می شود و در برخی مطالعات به تغییرات میزان آلفا آمیلاز در شرایط پر استرس اشاره شده، و همچنین در مطالعات اندکی به تغییرات PH بزاق در زمان بروز آفت پرداخته شده است، این مطالعه با هدف مقایسه میزان PH و آلفا آمیلاز بزاق در افراد مبتلا به آفت راجعه و افراد سالم طراحی گردید.
سوالات و / یا فرضیات پژوهش1- میزان PH بزاق در بین افراد مبتلا به آفت و افراد سالم متفاوت است.
2- میزان PH بزاق در افراد مبتلا به آفت در دوره عود و بهبودی متفاوت است.
3- میزان آلفا آمیلاز بزاق در بین افراد مبتلا به آفت و افراد سالم متفاوت است.
4- میزان آلفا آمیلاز بزاق در بین افراد مبتلا به آفت در دوره عود و بهبودی متفاوت است.
هدف کلی طرحتعیین میزان PH و آلفا آمیلاز بزاق در بیماران مبتلا به آفت راجعه دهانی
اهداف اختصاصی1- مقایسه میزان PH بزاق در بین افراد مبتلا به آفت و افراد سالم
2- مقایسه میزان PH بزاق در بین افراد مبتلا به آفت در دوره عود و بهبودی
3- مقایسه میزان آلفا آمیلاز بزاق در بین افراد مبتلا به آفت و افراد سالم
4- مقایسه میزان آلفا آمیلاز بزاق در بین افراد مبتلا به آفت در دوره عود و بهبودی
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحدانشگاه علوم پزشکی زاهدان
تعریف واژه های تخصصی
نوع مطالعهمورد - شاهدی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)جامعه مورد بررسی شامل بیماران مراجعه کننده به دانشکده دندانپزشکی که دارای آفت راجعه دهانی هستند و گروه کنترل افرادی فاقد هرگونه زخم دهانی و بیماری سیستمیک می باشند.



معیار ورود به مطالعه:

1. بیماران دارای آفت دهانی مینور

2. گروه کنترل نیز نباید سابقه ای از هرگونه زخم دهانی ویا بیماری سیستمیکی را ذکر کنند.

3. داشتن سن 20-40 سال

معیار خروج از مطالعه:

1. مصرف دخانیات ( سیگار، قلیان و ...)

2. وجود هر نوع ضایعه دهانی و دندانی بجز آفت

3. وجود بیماریهای سیستمیک، مصرف دارو و ابتلا به بیماری بهجت

حجم نمونه و روش محاسبه آنبر اساس فرمول حجم نمونه و مقاله رفرنس 14 محاسبه شده 3/28 نفر می باشد که حجم نمونه در هر گروه 30 نفر تعیین شد.

( )2=12.56
X1=6.6 , X2=7.2 , S1=0.75 , S2=0. 5
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)آسان در دسترس. کلیه افرادی که شرایط ورود به مطالعه را داشته باشند تا رسیدن به حجم نمونه به مطالعه وارد خواهند شد .
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)با استفاده از فرم اطلاعاتی میزان PH و آلفا آمیلاز هر فرد در هر گروه ثبت می شود.(فرم ضمیمه 1)
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)در این مطالعه مورد – شاهدی از افراد مراجعه کننده به کلینیک دانشکده دندانپزشکی زاهدان در سال 1392 ، بیمارانی که دارای آفت دهانی مینور و فعال باشند و معیارهای ورود به مطالعه را داشته باشند ، پس کسب رضایت آگاهانه از بیمار(فرم ضمیمه 2) نمونه بزاق غیر تحریکی در زمان ابتلا به آفت و در زمانی که زخم آفتی کاملا بهبود یافته باشد،گرفته می شود. گروه کنترل نیز از نظر سن و جنس با گروه مورد هماهنگ خواهند شد. افراد بایستی 90 دقیقه قبل از نمونه گیری از خوردن و آشامیدن و مسواک زدن اجتناب کنند. تمام نمونه ها 11-9 صبح جمع آوری می شود.بزاق غیر تحریکی از تمام افراد گروه مورد و شاهد به روش Spitting جمع آوری می شود. بعد از جمع آوری بزاق در لوله آزمایش، درب آن با پارافیلم بسته و کدگذاری می شود و به آزمایشگاه بیوشیمی دانشگاه علوم پزشکی زاهدان منتقل می شود. اندازه گیری PH نمونه ها با استفاده از دستگاه PH متر انجام می شود. سپس برای تعیین غلظت آلفا آمیلاز، نمونه ها در شرایط 20 - درجه سانتی گراد تا زمان اجرای آزمایش نگهداری می شوند.
برای اندازه گیری میزان فعالیت آنزیم آلفا آمیلاز بزاق، ابتدا نمونه های فریز شده به مدت حدود نیم ساعت در دمای آزمایشگاه قرار میگیرند ، سپس عمل سانتریفوژ با دورrpm 3500 به مدت 20 دقیقه بر روی آنها انجام و مایع رویی و شفاف حاصل به وسیله سمپلرهای حجمی مناسب به میکروتیوب های اپندروف منتقل می شوند. مشخصات هر نمونه بر روی میکروتیوب درج می گردد. بعد از این مرحله، اندازه گیری فعالیت آنزیم آلفا آمیلاز بزاقی با استفاده از کیت شرکت پارس آزمون و دستگاه اسپکتروفتومتر انجام می شود. تعیین فعالیت آنزیم آلفا آمیلاز بزاق براساس روش مدیفیه شده Caraway starch-iodine method انجام می شود. اصول آزمایش بدین صورت است که آنزیم آمیلاز با هیدرولیز نمودن سوبسترای نشاسته، آن را به مالتوز و مقدار کمی ساکارید تبدیل می کند.
در این روش از مشتق نشاسته آمیلوز به عنوان سوبسترا استفاده می شود. مشتق نشاسته آمیلاز در مدت زمان معین تحت تاثیر آمیلاز موجود در نمونه قرار می گیرد. پس از افزایش ید و توقف واکنش، کاهش جذب حاصل که متناسب با فعالیت آنزیم می باشد در طول موج 660 نانومتر اندازه گیری می شود.
برای تعیین فعالیت آلفا آمیلاز بزاقی مقدار 1 میلی لیتر سوبسترای نشاسته به مدت 5 دقیقه در بن ماری 37 درجه سانتیگراد قرار داده می شود. سپس 20 میکرولیتر از نمونه بزاق سانتریفوژ شده ، به آن اضافه می گردد. بعد از مخلوط کردن نمونه به وسیله دستگاه میکسر ، با استفاده از کرونومتر دقیقا به مدت 5/7 دقیقه، نمونه در بن ماری 37 درجه سانتیگراد قرار داده می شود. بعد از این مدت ، بلافاصله واکنش با افزودنml 1 محلول کارید و 3 میلی لیتر آب مقطر متوقف می گردد. در لوله بلانک هیچ نمونه بزاقی اضافه نمی شود ولی سایر مراحل آزمایش مشابه لوله آزمایش انجام می گیرد. در این مرحله بعد از مخلوط کردن مجدد، جذب نمونه ها و بلانک در طول موج 660 نانومتر در مقابل آب مقطر خوانده خواهد شد. در این روش مدت ثبات رنگ ایجاد شده 60 دقیقه می باشد. میزان فعالیت آنزیم آمیلاز در نمونه های بزاق به وسیله فرمول زیر محاسبه می شود.
= فعالیت آمیلاز بزاق (واحد بین المللی در لیتر) (بلانک جذب –آزمایش جذب )/(بلانک جذب)×1470
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)- مقایسه PH بزاق در افراد مبتلا به آفت با افراد سالم
PH
گروه میانگین انحراف معیار P-value
مورد
شاهد

- مقایسه میزان آلفا آمیلاز بزاق در افراد مبتلا به آفت با افراد سالم
آلفا آمیلاز
گروه میانگین انحراف معیار P-valuue
مورد
شاهد
تمامی اطلاعات بدست آمده با استفاده از نرم افزار SPSS19 و آزمون آماری t-test و یا معادل ناپارامتری آن تجزیه و تحلیل می گردد.
ملاحظات اخلاقی بر اساس کد 1 از کدهای مصوب کمیته کشوری اخلاق در پژوهشهای علوم پزشکی، رضایت شرکت کنندگان مبنی بر شرکت در مطالعه کسب خواهد شد.
بر اساس کد 3 از کدهای مصوب کمیته کشوری اخلاق در پژوهشهای علوم پزشکی،کسب رضایت آگاهانه فارغ ازهرگونه اجبار ، تهدید ، تطمیع و اغوا انجام خواهد شد.
بر اساس کد 5 از کدهای مصوب کمیته کشوری اخلاق در پژوهشهای علوم پزشکی، هدف از انجام تحقیق، فواید ماهیت پژوهش به شرکت کنندگان توضیح داده خواهد شد.
بر اساس کد 17 از کدهای مصوب کمیته کشوری اخلاق در پژوهشهای علوم پزشکی، اطلاعات مربوط به هریک از شرکت کنندگان بصورت محرمانه نگهداری خواهد شد و پرسشنامه ها بدون ذکر نام و نام خانوادگی دانشجویان تکمیل خواهد شد.
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهاعدم همکاری بیماران که بایستی تا رسیدن به حجم مورد نظر بیمار جدید پذیرش شود.
کلمات کلیدیPH ، آلفا آمیلاز، آفت راجعه دهانی، بزاق
PH, alpha-amylase, recurrent aphthous stomatitis, saliva
فهرست منابع و مراجع1- Greenberg MS, Glick M. Burkets Oral medicine diagnosis and treatment.11th ed. Philadelphia: WB Saunders; 2008.63-65.
2- Chattopadhay A Shetty KV. Recurrent aphthous stomatitis. Otolaryngol clin North Am 2011; 44(1):79-88.
3- Todorovic T, Dozic I Pavlica D Markov-ic D Brajovic G and Ivanovic M. Use of saliva as a diagnostic fluid in dentistry. Srp Arh Celok Lek 2005; 133(7): 372-378.
4- Samaranayake L. Saliva as a diagnostic fluid. Int Dent J 2007; 57(5):295-9.
5- Hand AR. Ten Cate's Oral histology: Development, Structure and Function. 6th ed., Mosby, Reed Elsevier India: New Delhi 2003; P: 299-328.
6- Bradley RM. Essentials of Oral Physiolo-gy.1st ed. St Louis, Mosby 2008; P: 161-186.
7- Kaufman E and Lamster IB. The diagnos-tic applications of saliva- a review. Crit Rev Oral Bio Med 2002; 13: 197- 212.
8- Choo RE and Huestis MA. Oral fluid as diagnostic tool. Clin Chem Lab Med 2004; 42: 1273-1287.
9- Baum BJ. Principles of saliva secretion. Ann N Y Acad Sci 1993; 694: 17-23.
10- Arhakis A, Karagiannis V, Kalfas S.Salivary alpha-amylase activity and salivary flow rate in young adults. Open Dent J 2013; 7:7-15.
11- Behringer V, Deschner T, Möstl E, Selzer D, Hohmann G. Stress affects salivary alpha-Amylase activity in bonobos. Physiol Behav 2012; 105(2):476-82.
12- Arhakis A, Karagiannis V, Kalfas S. Salivary Alpha-Amylase Activity and Salivary Flow Rate in Young Adults. The Open Dentistry Journal 2013; 7: 7- 15 .
13- Pokupec JS, Lukenda DB. Comorbidity of recurrent aphthous stomatitis and polyps ventriculi. Coll Antropol 2013;37(1):297-9
14- Al-Taee AF, khudhur AS. Determination of Salivary pH in Patients With Recurrent Aphthous Ulcera-tion (RAU). Al–Rafidain Dent J 2010; 10(2):390-393.
15- Boras VV. Is Salivary Alpha Amylase Useful as a Biomarker of Stress in Oral Diseases? J Autacoids 2012; 1:2.
16- Rashkova MR, Ribagin LS, Toneva NG.Correlation between salivary alpha-amylase and stress-related anxiety.Folia Med (Plovdiv) 2012;54(2):46-51.
17- Furlan NF, Gavião MB, Barbosa TS, Nicolau J Castelo PM. Salivary cortisol, alpha-amylase and heart rate variation in response to dental treatment in children. J Clin Pediatr Dent 2012; 37(1):83-7.

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
6270 barresi dar pajoohesh.docx1392/10/24130946دانلود
6270 eemale eslahate pajoohesh.docx1392/10/24128276دانلود
6270 eemale eslahate davari.docx1392/10/24145462دانلود
6270 komite akhlaq.docx1392/10/24130097دانلود
formate emza 6270.jpg1392/10/24171205دانلود
6270 komite akhlaq.docx1392/11/21143185دانلود