چاپ صفحه |  صفحه نخست سامانه |  مجری و همکاران |  اطلاعات تفضیلی |  دانلود | علوم پزشکی زاهدان |
| کد طرح | 6302 |
| عنوان فارسی طرح | ارزیابی هیستولوژی روند استخوان سازی القاء شده پس از کاشت ماده زمینه ای استخوان (BMG) واکتاکلسیم فسفات(ocp) درضایعات استخوان مندیبل موش صحرایی |
| عنوان لاتین طرح | Histologic evaluation of osteogenesis induced by implantation of bone matrix gelatin(BMG) and octa calcium phosphate(OCP) in the mandibular bone defects of rat |
| نوع طرح | |
| محل اجرای طرح | مدیریت توسعه فناوری سلامت |
| رسته مطالعاتی | بنیادی- کاربردی |
| دانشکده/مرکز | دانشکده دندانپزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز |
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| فریدون سرگلزائی اول | استاد راهنمای اول پایان نامه دانشجویی | استاد راهنما | دکترای تخصصی | fsargolzaei@yahoo.com |
| اسحق علی صابری | استاد راهنمای دوم پایان نامه دانشجویی | استاد راهنما | دکترای تخصصی | saberiendo@zaums.ac.ir |
| محمدرضا عرب | مشاور | استاد مشاور | دکترای تخصصی | mr_arabz@yahoo.com |
| نرجس سرگلزایی | مشاور | مشاور آمار | دکترای تخصصی | sargolzaeinarges@gmail.com |
| اسماعیل زارع | دانشجو | zare1358@gmail.com |
| عنوان | متن |
|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | ارزیابی هیستولوژی روند استخوان سازی القاء شده پس از کاشت ماده زمینه ای استخوان (BMG) واکتاکلسیم فسفات(ocp) درضایعات استخوان مندیبل موش صحرایی |
| خلاصه طرح به لاتین | Histologic evaluation of osteogenesis induced by implantation of bone matrix gelatin(BMG) and octa calcium phosphate(OCP) in the mandibular bone defects of rat |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | استخوان یکی از بافتهای عمده موجوددر بدن انسان است که همواره مورد عمل پیوند قرارمی گیرد وجراحان ارتوپدی وفک وصورت،اندودنتیست ها و پریودنتیست ها از گرفتهای استخوانی جهت ترمیم نقایص بزرگاستخوانی که به واسطه ضربه ها، عفونتها ویا نئوپلازی ها حادث می شود ویا اصلاح وبازسازی بدشکلیهای مادرزادی استفاده مینمایند1و2. با این وجود کاربرد بالینی چنین گرفت هایی که به صورت اتوژن ویا آلوژن می باشند، به دلیل مشکلات خاصی ازقبیل پس زدن، محدودیت دهنده استخوان، افزایش زمان عمل، عفونتها و در نهایت مرگ ومیر احتمالی، با محدودیت مواجه است3و4.
به منظور رفع این محدودیتهادر طی چندین دهه گذشته تحقیقات دامنه داری درجهت یافتن ماده ای که بتواند جایگزین مناسبی برای گرفتهای استخوانی باشد، انجام گرفته است وموادی به عنوان جایگزین گرفتهای استخوانی معرفی ومورد استفاده واقع شده اند1و3و5.ازجمله این مواد که شاید بتواند جایگزین شایسته ای برای گرفتهای استخوانی در ترمیم نقایص استخوانی باشد، مشتقات کلسیم فسفات هستند6.یکی از مشتقات کلیسم فسفات، اکتا کلسیم فسفات است که به عنوان پیش ساز مستقیم مرحله آپاتیت مطرح می باشد ودر مقایسه با سایر مشتقات، ازقدرت بیشتری در تحریک وهدایت استخوان سازی برخوردار است وبا مرور زمان جذب وبوسیله بافت استخوانی جدید ساخته شده جایگزین میشود.طبق ادعای Suzuki، اکتاکلسیم فسفات تنها جزءترکیب غیرآلی است که باعث تحریک مستقیم استخوان سازی در استخوانهای پهن میشود7. از طرف دیگر محققین متعددی بر ترمیم موفقیت آمیز نقایص استخوانی پس از استفاده از ماده زمینه ایی بدون مواد معدنی استخوان 2و4 ویاژلاتین ماده زمینه ای استخوان 3و8 که حاوی مقادیر فراوانی از فاکتورهای القاءکننده استخوانسازی نظیر پروتیین هدایت کننده استخوان می باشند تاکید کردهاند ومعتقدهستند که خصوصیات DBM و BMG، آنها را به عنوان گروه دیگری از موادی که می توانند جایگزین مناسبی برای گرفتهای استخوانی باشند مطرح نموده است.واکنش متقابل این مواد با اکثر مشتقات کلسیم فسفات به هنگام استفاده به صورت ترکیب، نتایج امیدوارکننده ایی را در ترمیم نقایص استخوانی نشان داده است9. Kawai و همکاران، اثر رژنراسیون استخوان به وسیله ترکیب اکتاکلسیم فسفات و کلاژن را در ضایعات استخوانی بررسی کردند.آنها ترکیب OCP وکلاژن را به درون ضایعه کیست رادیکولار دو بیمار قرار دادند. معاینات رادیوگرافی، ترمیم کافی استخوان را در ضایعه استخوانی پس از سه تا شش ماه نشان داد10. در مطالعه Masuda و همکاران،که خصوصیات مکانیکی و آنالیز میکرو سی تی جهت بررسی کیفیت استخوان ساخته شده به وسیله ایمپلانت ترکیب اکتاکلسیم فسفات و کلاژن انجام شد، مشاهده گردید که کیفیت استخوان ساخته شده از نظر خواص مکانیکی با گروه کنترل قابل مقایسه می باشد11. Fuji و همکاران ، در مطالعه ایی به بررسی مقایسه اثر اکتا کلسیم فسفات به همراه آلژینات در برابر آلژینات به تنهایی جهت تحریک سلولهای استئو بلاست پرداختند. آنها نشان دادند که ترکیب اکتا کلسیم فسفات به همراه آلژینات بستر مناسبی جهت تکثیر سلولهای استئوبلاست وتحریک استخوان سازی نسبت به آلژینات فراهم می کند12. در تحقیق Wang وهمکاران نشان داده شد، هنگامی که پالپ دندانی در تماس مستقیم با OCP قرار می گیرد، شکل گیری سریع عاج ترمیمی القاء شده وبیان سیالو پروتیین عاج ساختگی در مجاورت عاج ترمیمی سنتز شده در پالپ دندانی دیده میشود13 . قرار گیریOCP در نقایص استخوانی به صورت محسوسی سبب افزایش استخوان سازی شده وتبدیل OCP به هیدروکسی آپاتیت در قابلیت تحریکیOCP نهفته است14 . در تحقیق دیگری که توسط سرگلزایی و همکاران صورت گرفت، اثر کاشت اکتاکلسیم فسفات جهت ترمیم ضایعات استخوان های دراز در موش صحرایی مورد بررسی قرار گرفت ونشان داده شد که ocp در صورت کاشت در محل ضایعات استخوانی ایجادشده در استخوان های دراز، دارای قدرت القاء استخوان سازی و ترمیم محل ضایعه بوده ودر نهایت جذب می گردد15. باتوجه به اینکه تاکنون گزارشی مبنی براستفاده ازاکتاکلسیم فسفات (OCP) به عنوان یک ماده غیرآلی همراه باپروتیین های هدایت کننده استخوانسازی که ازBMG آزاد میشوند، به منظور تحریک استخوان سازی ویا ترمیم نقایص استخوانی درمقالات مطرح نشده، اثرترمیمی استفاده همزمان این دو ماده BMG و OCP به عنوان جایگزین گرفتهای استخوانی بررسی شودتا شاید افق جدیدی در ترمیم نقایص استخوانی به روی کلینسین ها گشوده شود. |
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 1-تاثیر استفاده از ocp در محل ضایعات ایجاد شده درمندیبل در بهبود روند القاء استخوان سازی با گروه کنترل متفاوت است.
2-تاثیر استفاده از BMG در محل ضایعات ایجاد شده درمندیبل در بهبود روند القاء استخوان سازی با گروه کنترل متفاوت است. 3- تاثیر استفاده از ترکیب OCP وBMG در محل ضایعات ایجاد شده درمندیبل در بهبود روند القاء استخوان سازی با گروه کنترل وبا گروههای آزمایشی OCP وBMG متفاوت است. 4-تاثیر استفاده از BMG در محل ضایعات ایجاد شده درمندیبل در حجم استخوان ساخته شده با گروه کنترل متفاوت است. 5-تاثیر استفاده از OCPدر محل ضایعات ایجاد شده درمندیبل در حجم استخوان ساخته شده با گروه کنترل متفاوت است. 6-تاثیر استفاده ازترکیب BMG وOCPدر محل ضایعات ایجاد شده درمندیبل درحجم استخوان ساخته شده با گروه کنترل وبا گروههای آزمایشی OCP وBMG متفاوت است. 7- تاثیر زمان در میزان حجم استخوان ساخته شده و گروه های مختلف آزمایشی، متفاوت است. |
| هدف کلی طرح | تعیین هیستولوژیک وهیستومورفیک روند استخوان سازی القاء شده پس از کاشت ماده زمینه ای استخوان (BMG) واکتاکلسیم فسفات(OCP) درضایعات استخوان مندیبل موش صحرایی می باشد. |
| اهداف اختصاصی | 1-مقایسه روند ترمیم ضایعات استخوانی مندیبل پس از کاشت OCPبا گروه کنترل
2-مقایسه روند ترمیم ضایعات استخوانی مندیبل پس از کاشت BMGبا گروه کنترل 3- مقایسه روند ترمیم ضایعات استخوانی مندیبل پس از کاشت ترکیب BMG وOCP با گروه کنترلودو گروه OCP و BMG 4-مقایسه میزان حجم استخوان جدید ساخته شده درمحل ضایعه پس از کاشت BMGباگروه کنترل 5- مقایسه میزان حجم استخوان جدیدساخته شده درمحل ضایعه پس ازکاشتOCPباگروه کنترل 6-مقایسه میزان حجم استخوان جدیدساخته شده درمحل ضایعه پس از کاشت ترکیب BMGوOCPباگروه کنترل وبا گروههای آزمایشی OCP و BMG 7- مقایسه میزان حجم استخوان جدید ساخته شده در زمان های مختلف و گروهای آزمایشی متفاوت |
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | دانشجویان ودستیاران پزشکی و دندانپزشکی |
| تعریف واژه های تخصصی | |
| نوع مطالعه | مطالعه به صورت تجربی و مداخله ایی انجام میگیرد. |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | جمعیت مورد مطالعه در این پژوهش عبارت از 48 سر موش صحرایی نر جوان وبالغ(8-6 هفته ایی) با وزن متوسط 150-120 گرم واز نژاد Sprague Dawley میباشد که به طور کاملا تصادفی به گروههای آزمایشی وکنترل تقسیم وعملیات پژوهشی برروی آنها انجام میگیرد.از آنجایی که Rat از سازگاری و سطح ایمنی بالایی برخوردار است ودر هنگام عمل، استریلیتی حتی المقدور رعایت می شود، در تغذیه آن خللی ایجادنشده، درعین حال در صورت عدم رشد کافی وهمسان نبودن وزن ویا در صورت عفونی شدن، از مطالعه خارج می شوند.از آنجا که از نمونه های همسان وهموژن استفاده می شود، سعی گردیده است که متغیرهای مخدوش کننده کنترل گردند. |
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | : با توجه به رفرنس19 ونظر مشاور آمار تعیین گردیده است.تعداد 48 عدد سرموش صحرایی انتخاب خواهد گردید. |
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | تصادفی ساده |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | اطلاعات براساس مطالعات هیستومورفولوژی وهیستومورفومتری وبااستفاده از میکروسکوپ نوری وعدسی شئی مدرج مناسب در زمانهای طراحی شده در پژوهش استخراج وگزارش می شوند. .(بر اساس جدول ضمیمه شماره 1) |
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | :OCP وBMG الف-روش تهیه
OCPمورد استفاده جهت کاشت در محل ضایعه طبق روشZ.Legeros16 و BMGمورد استفاده بصورت تلفیقی از روش Urist وهمکاران 17و Yanوهمکاران3 آماده می گردند. ب-روش عمل جراحی وکاشت مواد: موشهای صحرایی در طی روزهای متوالی وبرنامه ریزی شده بااستفاده از تزریق درون صفاقی کتامین هیدروکلراید(mg/kg60) بیهوش می شوند. پس از بیهوشی کامل، پوست ناحیه مورد نظر واقع برروی استخوان مندیبل تراشیده شده به وسیله بتادین 10% شرکت تولیدارو ضدعفونی میگردد. بااستفاده از یک برش پوستی، پوست همراه با بافتهای زیرین به صورت دو فلپ کنار زده شده وهر دونیمه استخوان در معرض دید قرارمی گیرد. سپس پریوست ناحیه مورد نظر خراشیده وبرداشته می شود. بااستفاده از فرز دندانپزشکی ضایعه ایی به قطر 3 وبه عمق 2میلیمتر بر روی هر دو نیمه استخوان فک و در نزدیکی ستیغ آلوئولار(درحد فاصل اولین دندان مولار ودندان ثنایا) ایجاد می گردد.پس از آماده شدن محل کاشت، در گروه های آزمایشیاکتا کلسیم فسفات به تنهایی، ژلاتین ماده زمینه ایی استخوان به تنهایی(هرکدام شش میلی گرم)، ترکیب اکتاکلسیم فسفات وژلاتین ماده زمینه ایی استخوان(شش میلی گرم به نسبت 4/1 ) در محل قرار داده می شود و بوسیله surgicel(جهت جلوگیری ازپخش ذرات کاشت شده) پوشیده می شود.درگروه کنترل هیچگونه ماده ایی در محل ضایعه،کاشت نشده وفقط پس از شستشوبا سرم نمکی سرد، بوسیله surgicelپوشیده میشود.پس از اتمام عمل جراحی، مکان جراحی بوسیله نخ بخیه قابل جذب04 دوخته وضدعفونی می شود.حیوان ها پس از به هوش آمدن به قفس های تعیین شده منتقل وتا زمان کشتار ونمونه برداری تحت مراقبت روزانه وتغذیه مناسب قرار می گیرند15. ج-روش برداشت نمونه ها: براساس طراحی انجام شده دراین طرح، در همه گروه های آزمایشی وکنترل، نمونه برداری در طی روزهای هفتم،چهاردهم، بیست ویکم وپنجاه وششم پس از عمل وکاشت مواد انجام خواهد شد. نمونه های برداشت شده پس از طی مراحل روتین آماده سازی(ثبوت، کلسیم گیری و...)بوسیله پارافین قالب گیری می شوند.از قالبهای پارافینی آماده شده روزهای هفتم، چهاردهم، بیست ویکم جهت مطالعه هیستومورفولوژی وروز پنجاه وششم جهت انجام هیستومورفومتری، مقاطع 5 میکرونی تهیه وپس ازرنگ آمیزی بوسیله H&Eو آلشین بلوعملیات طراحی شده پژوهشی برروی آنها انجام خواهد گرفت. هیستومورفومتری:جهت انجام مورفومتری وتعیین حجم استخوان جدید ساخته شده در هر کدام از گروههای آزمایشی وکنترل، نمونه برداری در روز پنجاه وششم پس از عمل (در هر گروه شش سر) انجام می گیرد. از بلوکهای بدست آمده، مقاطع پنج میکرونی به صورت سریال تهیه می شود. از هر کدام از نمونه ها به صورت تصادفی شش مقطع (دو مقطع از قسمت سطحی، دومقطع از قسمت میانی ودومقطع از قسمت عمقی ضایعه ایجاد شده) انتخاب وبرروی سه اسلاید قرار می گیرد(هر نمونه سه اسلاید وشش مقطع).از این رو در هر گروه هیجده اسلاید وسی وشش مقطع جهت انجام مورفومتری انتخاب می گردد. مقاطع انتخاب شده بوسیله H&Eرنگ آمیزی شده وبا استفاده از میکروسکوپ نوری که دارای عدسی چشمی مدرج میباشد تحت بزرگنمایی 40Xعمل اندازه گیری انجام می گیرد.بدین صورت که هر کدام از مقاطع بافتی تهیه شده که به شکل تقریبا مدورمی باشند در جهت عقربه های ساعت به چهار ربع تقسیم واز شماره یک تا چهار شماره گذاری می گردند. سپس با استفاده از جدول اعداد تصادفی که دارای رقمهای یک تا چهار به صورت تصادفی و پراکنده می باشد، در هر کدام از مقاطع یک ربع آن جهت اندازه گیری انتخاب وبرروی آنها چهار میدان میکروسکوپی از حاشیه ضایعه به سمت مرکز آن تحت بزرگنمایی 40Xوبا استفاده ازتکنیک شمارش نقطه ایی مورد اندازه گیری وسنجش قرار می گیرد.به طور کلی در هر نمونه حیوانی سه اسلاید(شش مقطع) واز هر مقطع چهار میدان میکروسکوپی ودر مجموع بیست وچهار میدان میکروسکوپی در هر نمونه ویکصد و چهل و چهار میدان میکروسکوپی در هر گروه مورد سنجش و اندازه گیری واقع می گردند.میانگین مقادیر بدست آمده برای تمامی گروهها به صورت درصد حجمی بیان می شود. |
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | مقایسه بین میانگین اندازه های بدست آمده در گروههای آزمایشی با یکدیگر وبا گروه کنترل(تمامی شرایط گروه کنترل، همسان با گروههای آزمایشی است به جزء اینکه در محل ضایعه ایجاد شده، ماده ای کاشت نگردیده است.) با استفاده از آزمون آنالیز واریانس(آزمونDuncan)استفاده خواهد شد و سطح معنی داری آزمون 5% در نظر گرفته خواهد شد.(بر اساس ضمیمه شماره 1 اقدام می گردد.)
رابطه بین نوع ماده استفاده شده و میزان استخوان ساخته شده گروه مورد مطالعه انحراف میانگین استخوان سازی خطای استاندارد Pvalue OCP BMG BMGو OCP کنترل BMG BMG BMGو OCP کنترل BMGوOCP OCP BMG کنترل کنترل OCP BMGوOCP BMG |
| ملاحظات اخلاقی | دستورالعمل کار با حیوانات آزمایشگاهی پر شده و ضمیمه شماره 2 می باشد. |
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | محدودیتی ندارد |
| کلمات کلیدی | Octacalcium phosphate, bone matrix gelatin, osteogenesis
اکتاکلسیم فسفات، ماتریکس ژلاتینی استخوان، استئوژنزیس |
| فهرست منابع و مراجع | 1- ReddiAH. Initiation of fracture repair by Bone morphogenic protein. Clin Orthop.1998;355:66-72
2-Rabie AB, Deng YM, Samman N, Hagg U. The effect of demineralized bone matrix on the healing of intramembranous bone grafts in rabbit skull defects. J dent.Res 1996;75(4):1045-1051 3-Yan WQ, Oka M, Nakamura T. Bone bonding in bioactive glass ceramics with bone matrix gelatin. J Biomed mater Res 1998;42:258-265 4-Hosny M, Sharawy M. Osteoinduction in rhesus monkeys using demineralized bone powder allografts. J Oral Maxillofac Surg. 1985;43:837-844 5-AshbyER, Rudkin GH, Ishida K, Miller TA. Evaluation of a novel osteogenic factor, Bone Cell Stimulating Substance, in a rabbit cranial defect model. Plast Reconstr Surg 1996;98:420-426 6-Jarcho M. Biomaterial aspects of calcium phosphate. Properties and applications. Dental Clin North Am.1986;30(1):25-47 7-Suzuki O, Nakamura M, Miyasaka Y, Kagayama M, Sakurai M. Maclura pomifera agglutinin-Binding glycoconjugates on converted apatite from synthetic octacalcium phosphate implanted into subperiosteal region of mouse calvaria. Bone Mineral 1993;20(2):151-166 8-Yamashita K, Takagi T. Ultrastructural observation of calcification proceding new bone formation induced by demineralized bone matrix gelatin. Acta Anat 1992;143:261-267 9-Doll BA, Towel HJ, Hollinger JO, Reddi AH, Mellonig JT. The osteogenic potential of two composite graft systems using osteogenin. J periodontal 1990;61(12):745-50 10-Kawai T, Echigo S, Matsui K, Takahasha T, Suzuki O, etal..First clinical application of octacalcium phosphate collagen composite in human bone defect. J Tissue Eng Part A.2013 Dec 2. 11-Quality of regenerated bone enhanced by implantation of octacalcium phosphate –collagen composite. J Tissue Eng Part C Methods 2010 ;16(3):471-8 12-Fuji T,Anada T,Honda Y, Koike H, Kamakura S, etal. Octacalcium phosphate-precipitated alginate scaffold for bone regeneration. J Tissue Eng Part A.2009 ;15(11):3525_35 13-Wang X, Suzawa T, Miyauchi T, Zhao B, Yasuhara R, Anada T, Nakamura M, etal. Synthetic octacalcium phosphate-enhanced reparative dentine formation via induction of odontoblast differentiation. J Tissue Eng Regen Med. 2013 Doi:10.1002 14-Suzuki O, Kamakura S, Katagiri T, Nakamura M, Zhao B, Honda Y, etal. Bone formation enhanced by implanted octacalcium phosphate involving conversion into Ca-deficient hydroxyapatite. Biomaterials.2006; vol 27:2671-2681 15-سرگلزایی فریدون ،عرب محمد رضا، سارانی شیر احمد، هدایت پور عظیم. استفاده از کاشت اکتا کلسیم فسفات جهت ترمیم ضایعات استخوان های دراز در موش صحرایی. مجله دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تهران،دوره 64، شماره 6، شهریور 1385 16-Legeros RZ. Preparation of octacalcium phosphate (OCP): A direct fast method. Calcif.Tissue Int. 1985;37:194-197 17-Urist MR,Iwata H, etal. Bone morphogenesis in implants of insoluble bone gelatin. Proc Natl Amad Sci USA. 1973;70:3511-3515 18-Recker RR. Bone histomorphometry:Techniques and Interpretation.First edition Boca Raton,Florida:CRC press Chapter 8. Bone Histomorphometry :correction of the labeling “Escape Error” 19-Kamakura S, Sasano Y, Homma H, Suzuki O, Kagayama M, Motegi K. Implantation of Octacalcium phosphate (OCP) in Rat skull defects enhances bone repair. J Dent Res. 1999;78(11):1682-1687 |
| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|---|---|---|
| 6302 baresi dar pajoohesh.doc | 1392/12/18 | 318464 | دانلود |
| 6302 emale eslahate pajoohesh 1.docx | 1392/12/18 | 139183 | دانلود |
| 6302 emale eslahate pajoohesh 2.doc | 1392/12/18 | 333312 | دانلود |
| 6302 eslahate davari 1.doc | 1392/12/18 | 351232 | دانلود |
| 6302 eslahate davari 2.docx | 1392/12/18 | 140677 | دانلود |
| 6302 eslahate shora.doc | 1392/12/18 | 333312 | دانلود |
| 6302 komite akhlaq.docx | 1392/12/18 | 131190 | دانلود |
| formate emza 6302.jpg | 1392/12/18 | 207162 | دانلود |
| hazfe histomorphometry.docx | 1393/04/08 | 131356 | دانلود |
