بررسی اثر عصاره هیدروالکلی کارالوما توبرکولاتا بر شدت درد حاد و مزمن در موش های صحرایی نر

Effect of hydro- alcoholic extract of caralluma tuberculata on acute and chronic pain in male rat.


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
مجری و همکاران
مجری و همکاران
اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی
دانلود
دانلود
علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان:

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 6447
عنوان فارسی طرح بررسی اثر عصاره هیدروالکلی کارالوما توبرکولاتا بر شدت درد حاد و مزمن در موش های صحرایی نر
عنوان لاتین طرح Effect of hydro- alcoholic extract of caralluma tuberculata on acute and chronic pain in male rat.
نوع طرح
محل اجرای طرح مدیریت توسعه فناوری سلامت
رسته مطالعاتی بنیادی- کاربردی
دانشکده/مرکز دانشکده پزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
زهرا صمدی نوشهر zsamadi67@yahoo.com
غلامرضا کمیلیاستاد راهنمای اول طرح دانشجوییتدوین طرحمتخصصrkomeili@gmail.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی اثر عصاره هیدروالکلی کارالوما توبرکولاتا بر شدت درد حاد و مزمن در موش های صحرایی نر
خلاصه طرح به لاتینEffect of hydro- alcoholic extract of caralluma tuberculata on acute and chronic pain in male rat.
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشدرد از جمله تجاربی است که هر انسانی در طول زندگی خود با آن مواجه میشود. درد از یک طرف هشداری برای آگاهی از آسیب بافتی و از طرف دیگر احساس ناخوشایندی است که همواره روح و جسم را مورد حمله قرار میدهد(1). درد به دو صورت حاد و مزمن بروز می کند که در هر دو حالت می تواند به عنوان یک عامل محدود کننده یا ناتوان کننده مانع از انجام فعالیت های روزمره شود. درد حاد در اثر صدمه سریع و ناگهانی به یک عضو به وجود می آید که با از بین رفتن عامل ایجاد کننده آن، درد هم از بین میرود . درد مزمن طولانی مدت و ناشی از صدمه ایجاد شده طی زمان طولانی است و عوارض آن صدمه است که منجر به ایجاد درد مزمن می شود(2).
داروهای ضد درد به دو دسته مخدر و غیرمخدر تقسیم می شوند. داروهای مخدر عملکرد خود را از طریق اتصال به گیرنده های واقع در سیستم عصبی (μ ,κ ,δ) اوپیوئیدی مو، کاپا و دلتا مرکزی نشان می دهند، یعنی اثر ضد دردی خود را به صورت مرکزی نشان می دهند. از این دسته داروها می توان به مرفین، کدئین، هروئین اشاره کرد. استفاده طولانی مدت از داروهای مخدر منجر به تحمل و وابستگی فیزیکی و همچنین افزایش حساسیت نسبت به درد یا هیپرآلرژی می شود (3). داروهای غیرمخدر عملکرد خود را از طریق سیستم اوپیوئیدی نشان نمی دهند، یعنی فاقد عملکرد مرکزی بوده و اثرات ضد دردی خود را به صورت محیطی نشان می دهند. مثال عمده از این گروه داروهای ضد التهاب غیر استروئیدی هستند که اثر خود را از طریق جلوگیری از سنتز ایکوزانوئیدها توسط مهار آنزیم نشان (Cyclo-oxygenase- COX) سیکلواکسیژناژ می دهند . استفاده طولانی مدت از آن ها منجر به ایجاد تحمل یا ایجاد وابستگی نمی شود، اما با مهار 1 COX- باعث ناراحتی های معدی- روده ای میشوند(4). امروزه با استفاده از داروهای شیمیایی رایج مانند انواع کورتیکوستروئید اگرچه در کاهش میزان التهاب گام های موثری برداشته شده، اما عوارض شدید این داروها کاملا مشخص و اجتناب ناپذیر شده اند . از این رو تحقیقات جدید استفاده از طب مکمل به خصوص گیاه درمانی به عنوان درمان با هزینه کم و حداقل عوارض جانبی را معرفی می نماید (5).
در این خصوص یکی از گیاهان مهم در طب سنتیcaralluma tuberculata می باشد. این گونه گیاهی متعلق به خانواده استبرق (Asclepiadacea) و جنس کارالوما (Caralluma) می باشد. کارالوما گیاهی کوتاه، عمودی و دارای ساقه گوشتی می باشد. بطور کلی این گیاه فاقد برگ می باشد و گلهای کوچکی دارد که در برخی گونه ها رنگهای تیره دارند. تیغه های این گیاه نرم ولطیف می باشد(7و6). به صورت سنتی کارالوما برای کاهش اشتها و کاهش وزن، درمان دیابت، جذام، روماتیسم، فلج، دردمفاصل، میگرن، تب ،مالاریا و التهاب استفاده می شود(8).
Caralluma دارای فعالیت ضد التهابی بوده و مشخص شده که دارای فعالیت های آنتی تومور و ضد سرطانی نیز می باشد (7). نام فارسی این گیاه شاخ گوزنی و نام محلی آن در منطقه حفاظت شده گنو، مغ مار یا مارانگوش است و کاربرد محلی آن در این منطقه خاصیت ضد انگلی آن است(9). در زبان محلی بلوچستان به آن مارموت یا مارموتک می گویند(10). C.tuberculata توسط مردم بلوچستان خشک شده تا آب آن گرفته شود سپس بصورت پودر درآورده و از آن برای درمان یرقان، اسهال خونی، درد معده، یبوست و هپاتیت B وC استفاده می کنند. با جویدن گیاه تازه از آن برای از بین بردن کک ومک وجوش ها و برای تصفیه خون استفاده می شود. همچنین ازاین گیاه برای درمان دیابت وفشار خون بالا استفاده می کنند(10).
در تحقیقی که توسط Abdel-Sattar و همکارانش به منظور بررسی اثر anti hyperglycaemic و hypolipidaemic عصاره متانولی گیاه C.tuberculata در رتهای دیابتی شده بااسترپتوزوتوسین STZ))انجام شد، نتایج حاصله نشان داد، درمان با گیاه به صورت مشهودی باعث کاهش قند خون، کاهش سطوح کلسترول توتال، تری گلیسرید، LDL و افزایش HDL در رتها شد(11).
در تحقیق دیگری که توسط M.M.Ahmad و همکارانش به منظور بررسی خاصیت ضد التهابی (anti inflammatory) عصاره الکلی گیاه C.tuberculata در رتها انجام شد، اثر ضد التهابی آن رتها مشهود بود همچنین اثر ضد درد (analgesic) آن مشاهده شد ولی اثر ضد تب (antipyretic) آن مشاهده نشد(12). علیرغم اثر ضد التهابی گزارش شده برای این گیاه، با توجه با اینکه مطالعات کمی در زمینه اثرات ضد دردی آن گزارش شده لذا در این مطالعه سعی خواهد شد اثر ضد دردی آن بر روی مدل درد القا شده با فرمالین مورد بررسی قرار گیرد.
سوالات و / یا فرضیات پژوهشعصاره هیدروالکلی کارالوما توبرکولاتا(caralluma tuberculata) درد حاد را در گروه های دریافت کننده آن کاهش میدهد.
عصاره هیدروالکلی کارالوما توبرکولاتا(caralluma tuberculata) درد مزمن را در گروه های دریافت کننده آن کاهش میدهد.
هدف کلی طرحبررسی اثر عصاره هیدروالکلی caralluma tuberculata بر شدت درد حاد و مزمن در موش های صحرایی نر
اهداف اختصاصی- تعیین نمره درد حاد ناشی از تزریق فرمالین در گروه کنترل
- تعیین نمره درد حاد ناشی از تزریق فرمالین در گروه های دریافت کننده عصاره
- تعیین نمره درد حاد ناشی از تزرق فرمالین در گروه دریافت کننده مورفین
- تعیین نمره درد حاد ناشی از تزریق فرمالین در گروه دریافت کننده دیکلوفناک
- تعیین نمره درد حاد ناشی از تزریق فرمالین در گروه دریافت کننده عصاره + نالوکسان
- مقایسه نمره درد حاد در گروههای مختلف فوق الذکر
- تعیین نمره درد مزمن ناشی از تزریق فرمالین در گروه کنترل
- تعیین نمره درد مزمن ناشی از تزریق فرمالین در گروههای دیافت کننده عصاره
- تعیین نمره درد مزمن ناشی از تزریق فرمالین در گروه دریافت کننده مورفین
- تعیین نمره درد مزمن ناشی از تزریق فرمالین در گروه دریافت کننده دیکلوفناک
- تعیین نمره درد مزمن ناشی از تزریق فرمالین در گروه دریافت کننده عصاره و نالوکسان
- مقایسه نمره درد مزمن در گروههای مختلف مورد مطالعه
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحدر صورتی که گیاه کارلوما توبرکولاتا اثر ضد دردی قابل ملاحظه ای داشته باشد می توان با انجام تحقیقات بیشتر در شرایط invivo و نتایج حاصل از آن، از این گیاه جهت ساخت دارو برای کاهش درد در مراکز داروسازی استفاده نمود.
تعریف واژه های تخصصیدرد حاد : واکنش حیوان در پاسخ به تزریق فرمالین در پنج دقیقه اول پس از تزریق می باشد.
درد التهابی : واکنش حیوان در پاسخ به تزریق فرمالین در دقایق 60-16 پس از تزریق می باشد.
نوع مطالعهتجربی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)48 سر موش صحرایی نر سالم نژاد ویستار(Wistar- Albino) با محدوده وزنی 200-250 gمی باشد که در مرکز تحقیقات حیوانات آزمایشگاهی دانشگاه علوم پزشکی زاهدان نگهداری میشوند.
حجم نمونه و روش محاسبه آنبراساس مطالعات انجام شده قبلی، حیوانات مورد مطالعه 48 سر موش صحرایی نر نژاد ویستار(wistar-albino)می باشند(13).
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)نمونه گیری بر اساس معیارهای ورود به مطالعه انجام میشود و قرار گیری در گروه ها به صورت تصادفی انجام میشود.
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)جمعیت مورد بررسی در این مطالعه48 سر موش صحرایی نر از نژاد wistare_Albino در محدوده وزنی 200-250 g میباشد که در شرایط 12 ساعت روشنایی و 12 ساعت تاریکی مصنوعی قرار میگیرند. حیوانات مورد بررسی دسترسی کامل به آب و غذا دارند و در جه حرارت اتاق حیوانات مورد بررسی بین 2±24 درجه سانتی گراد خواهد بود. حیوانات پس از توزین با ترازو (وزن اولیه) به طور تصادفی به 8گروه (n=6) تقسیم میشوند. و حدود 1 ساعت قبل آزمون در شرایط آزمایشگاه قرار میگیرند.
1- گروه کنترل منفی: دریافت کننده سرم فیزیولوژی (5ml/kg) (13).
2- گروه کنترل مثبت1 : دریافت کننده مورفین 2.5mg/kg)) (13).
3- گروه کنترل مثبت 2: دریافت کننده دیکلوفناک(5mg/kg)(15).
4- گروه تست 1: دریافت کننده عصاره هیدروالکلی75mg/kg
5- گروه تست 2: دریافت کننده عصاره هیدروالکلی 125mg/kg
6- گروه تست 3: دریافت کننده عصاره هیدروالکلی 250mg/kg
7- گروه تست 4: دریافت کننده عصاره هیدروالکلی 500mg/kg (16).
8- گروه تست5 : دریافت کننده عصاره هیدروالکلی250mg/kg + نالوکسان(1mg/kg) (17).
نحوه تهیه عصاره هیدروالکلی:
پس از تهیه گیاه از منطقه ایرندگان خاش، ساقه آن در سایه خشک ، سپس توسط آسیاب پودر خواهد شد. و عصاره هیدروالکلی 70% از آن به روش سوکسله تهیه خواهد شد.
تمام داروها و عصاره ها به صورت درون صفاقی و حدودا 30 دقیقه قبل از آزمون درد تزریق میشوند.
آزمون فرمالین:
برای این آزمون از روش متداول استفاده میگردد. بدین ترتیب که حیوان در یک محفطه از جنس پلاکسی گلاس (40×40×40)تحت شرایط آرام قرار گرفته و در قسمت زیر محفظه آینه ای با زاویه 45 درجه قرار دارد تا وضعیت کف پای حیوان کاملا مشخص باشد. پس از گذشت یک ساعت، 50 میکرولیتر فرمالین 5/2% به صورت زیرجلدی به کف پای عقبی هر موش تزریق میگردد و شدت درد حیوان بر اساس تقسیم بندی زیر به چهار درجه تفکیک میشود: (0)- حیوان بدون احساس درد روی پای تزریق شده راه میرود و می ایستد. (1)- پای حیوان با محفطه تماس داشته ولی حیوان بدن خود را روی پای سالم خود می اندازد. (2)- حیوان پنجه دردناک را کاملا از محفطه بلند میکند. (3)- حیوان پنجه تزریق شده را از شدت درد میلیسد، گاز میگیرد یا یا به شدت تکان میدهد. ثبت پاسخ های رفتاری بالافاصله بعد از تزریق فرمالین آغاز و تا 60 دقیقه ادامه می یابد. در این ارتباط پاسخ در هر 15 ثانیه ثبت و به عنوان شاخصی از میزان درد در آزمون فرمالین در نظر گرفته میشود. با استفاده از این روش، اعداد 0 تا 3 برای زمان های مختلف بدست می آید.
میانگین درد در ده دقیقه اول بعد از تزریق فرمالین، به عنوان مرحله اول یا حاد و در دقایق 16 الی 60 به عنوان مرحله دوم یا مزمن در نظر گرفته می شود. محاسبه متد درد بر اساس Dubuisson انجام میشود(14).
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)
برای تحلیل نتایج از SPSS Ver.18 استفاده خواهد شد. یافته ها بر اساس Mean±SEM بیان خواهند شد. از تست های One way- ANOVA و Tukey برای ارزیابی اختلاف و میزان معنی دار بودن آن استفاده میشود . در ضمن (P<0.05) به عنوان حد نصاب برای معنی دار بودن تفاوت های بین گروه ها در نظر گرفته خواهد شد.
ملاحظات اخلاقی در این تحقیق تمامی اصول پروتوکل ژاپن در خصوص تحقیقات بر روی حیوانات رعایت خواهد شد(18). و به تایید کمیته اخلاق دانشگاه نیز خواهد رسید.
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها
کلمات کلیدیآزمون فرمالین ، caralluma tuberculata،درد حاد و مزمن
فهرست منابع و مراجع
1. Goldman L. Bennett JC. Cecil textbook of medicine. Voll, 21th ed. WB sundersCo. 2000, pp: 103.
2. Wall PD. Melozok R. text book of pain. 2th ed. Churchill livengstone. 1991, PP: 52.
3. Mangione MP, Crowley-Matoka M. Improving pain management communication: how patients understand the terms "opioid" and "narcotic". J Gen Intern Med. 2008;23(9):1336-8.
4. Rostom A, Dubé C, Lewin G, Tsertsvadze A, Barrowman N, Code C, et al. Nonsteroidal anti-inflammatory drugs and cyclooxygenase-2 inhibitors for primary prevention of colorectal cancer: a systematic review prepared for the U.S. Preventive Services Task Force. Ann Intern Med. 2007; 146(5): 376-89.
5. Khorasani A. Makhzanoladvieh. Islamic Republic Educational Publisher. 1982; 324-325.
6. Rajendran R, Rajendran K. Caralluma extract products and processes for making the same. US Patent 7,060,308. 13 June, 2006:1-22.
7. Mahmood T, Muhammad S, Shinwari ZK. Molecular and morphological characterization of Caralluma Species. Pakistan Journal of Botany. 2010;42(2):1163-71 (Journal).
8. Dutt HC, Singh S, Avula B, Khan IA, Bedi YS. Pharmacological review of Caralluma R.Br. with special reference to appetite suppression and anti-obesity. Journal of medicinal food. [Review]. 2012 Feb;15(2):108-19.
9. سلطانی پور.م.ا .گیاهان داروئی منطقه حفاظت شده گنو.پژوهش وسازندگی.1384؛(68).
10. Rasool Bakhsh T, Tahira B, Miajab K, Mushtaq A, muhamad Z, Ma AG. INDIGENOUS KNOWLEDGE OF FOLK MEDICINE BY THE WOMEN OF KALAT AND KHUZDAR REGIONSOF BALOCHISTAN, PAKISTAN. Pak J Bot. 2010;42(3):1465-85.
11. Abdel-Sattar E, Harraz FM, Ghareib SA, Elberry AA, Gabr S, Suliaman MI. Antihyperglycaemic and hypolipidaemic effects of the methanolic extract of Caralluma tuberculata in streptozotocin-induced diabetic rats. Natural product research. [Research Support, Non-U.S. Gov't]. 2011 Jul;25(12):1171-9.
12. Ahmed MM, Qureshi S, Al-Bekairi AM, Shah AH, Rao RM, Qazi NS. Anti-inflammatory activity Caralluma tuberculata alcoholic extract. Fitoterapia. 1993;64(4):357-60.
13. ارضی اردشیر ، سرکاکی علیرضا ، عاقل نسرین ، نظری زهرا ، سعیدنژاد زهرا. مطالعه اثر ضد دردی عصاره هیدروالکلی دارچین در موش صحرایی به روش آزمون فرمالین. مجله علمی پزشکی، دوره 10، شماره 3، 1390، صفحات: 279-271.
14. Dubuisson D, Dennis SG: The formalin test: a quantitative study of the analgesic effects of morphine, meperidine, and brain stem stimulation in rats and cats. Pain 1977; 4: 161-74.
15. Vetrichelvan, T., and M. Jegadeesan. "Effect of alcohol extract of Achyranthes aspera Linn. on acute and subacute inflammation." Phytotherapy research 17.1 (2003): 77-79.
16. Al-Bekairi, A. M., et al. "Effect of Caralluma tuberculata on the cytological and biochemical changes induced by cyclophosphamide in mice." Food and chemical toxicology 30.8 (1992): 719-722.
17. Raufi, Safoura, and Hojjatollah Alaii. "The effects of locus coeruleus electrical stimulation on brain waves of morphine dependent rats." Physiology and Pharmacology 10.4 (2007): 283-289.
18. Guide lines for proper Conduct of Animal Experiments Science Council of japan 2006.


پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
signature.jpg1392/09/268413دانلود
Image858.jpg1392/09/26487156دانلود
Image859.jpg1392/09/26529262دانلود
caralluma.T.jpg1392/12/12899280دانلود
Samadi-proposal 2 tarh.docx1392/12/12104252دانلود