چاپ صفحه |  صفحه نخست سامانه |  مجری و همکاران |  اطلاعات تفضیلی |  دانلود | علوم پزشکی زاهدان |
| کد طرح | 6541 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثر عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا (Anacylus Pyrethrum) بر سطح سرمی تستوسترون ،FSH ، LHو تعداد اسپرم در موش های صحرایی نر بالغ دیابتی شده با استرپتوزوسین |
| عنوان لاتین طرح | Evaluation of the effect of alcoholic and aqueous extract of roots pellitory (Anacylus Pyrethrum) on serum testosterone, FSH, LH levels and sperm count in streptozotocin-induced diabetic adult male rats |
| نوع طرح | |
| محل اجرای طرح | مدیریت توسعه فناوری سلامت |
| رسته مطالعاتی | تجربی- آزمایشگاهی |
| دانشکده/مرکز | دانشکده پزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز |
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| جواد دهواری | همکار | کارشناس ارشد | javaddehvari@yahoo.com | |
| محمدرضا شهرکی | مجری | استاد راهنما | دکترای تخصصی | mrshahrakim@gmail.com |
| مهناز شهرکی پور | مشاور | کارشناسی ارشد | mahnaz@gmail.com |
| عنوان | متن |
|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | بررسی اثر عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا (Anacylus Pyrethrum) بر سطح سرمی تستوسترون ،FSH ، LHو تعداد اسپرم در موش های صحرایی نر بالغ دیابتی شده با استرپتوزوسین |
| خلاصه طرح به لاتین | Evaluation of the effect of alcoholic and aqueous extract of roots pellitory (Anacylus Pyrethrum) on serum testosterone, FSH, LH levels and sperm count in streptozotocin-induced diabetic adult male rats |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | بیماری دیابت یک اختلال متابولیکی است که با افزایش قند خون شناخته می شود و سلول های بتای پانکراس و محصول ترشحی ان،انسولین، نقش اصلی را در پاتوفیزیولوژی دیابت بر عهده دارند. دو نوع دیابت وجود دارد. دیابت تیپ یک و تیپ دو . دیابت تیپ یک ( وابسته به انسولین ) دلیل آن نبود انسولین در اثر تخریب سلولهای بتا می باشد و در دیابت تیپ دو یا غیر وابسته به انسولین ، گیرندهای انسولین در سلول های کبد، عضله وبافت چربی در برابر انسولین مقاوم می شوند،و چون تلاش جبرانی سلول های بتا برای ترشح انسولین بیشتر جهت حفظ قند خون در یک محدوده فیزیولوژیکی طبیعی کافی نیست، این وضع نهایتا منجر به خستگی عملکردی سلول های بتا می شود(1).
درحال حاضرتقریبا 246میلیون نفر در جهان مبتلا به دیابت می باشند و انتظار می رود که تا سال 2025این رقم به 380 میلیون افزایش پیدا کند ، احتمالا بیشترین افزایش شیوع در کشورهای در حال توسعه خواهد بود(2). ناباروری و مشکلات مربوط به آن به عنوان یکی از مسائل مهم در زندگی زوجین شناخته شده است(3). بر اساس آمارهای موجود 35 درصد موارد ناباروری زوجین مربوط به مردان و 25 درصد از موارد ناباروری مربوط به هر دو زوج می باشد. شایع ترین علت ناباروری مردان، عدم توانایی آنان در تولید تعداد کافی اسپرم های سالم و فعال است(4و5). شواهد تجربی نشان داده است که دیابت برفعالیت جنسی مردان و زنان اثرمی گذارد. همچنین در بیشتر بیماران دیابتی نقص فعالیت های جنسی به صورت کاهش میل جنسی و کاهش قدرت باروری دیده می شود(6). گزارشات تجربی نشان داده است که اثر دیابت بر روی دستگاه تولید مثلی جنس نر ، اختلال در رفتار جنسی ، کیفیت منی و انزال است. اختلال در روند اسپرماتوژنز و موارد الیگو اسپرمی نیز در افراد دیابتی گزارش شده است. از جمله اثرات دیگر دیابت کاهش تحرک اسپرم می باشد(7). در بیماران مبتلا به دیابت شیرین سطح سرمی تستوسترون ، و اسپرماتو ژنزکاهش می یابد، غدد ضمیمه جنسی تحلیل یافته وکاهش میل در رفتار جنسی گزارش شده است .بعلاوه در بیماران فوق کاهش حرکت اسپرم و افزایش اسپرم های ناهنجار نیزگزارش شده است (8و9). در مردان تولید اسپرم را بیضه بر عهده دارد که دارای سلول های مادر با قابلیت تکثیری بالا می باشد و سلول های اسپرم توسط سلول های مادر طی دو تقسیم میتوز و میوز بوجود می ایند (9). بررسی ها نشان می دهد که مردان دیابتی در معرض استرس اکسیداتیو بوده و استرس اکسیداتیو در بیضه ها می تواند بر ترشح تستوسترون از سلولهای لیدیگ و نقش حمایتی سلولهای سرتولی اسیب وارد کند (10). گذشته از آن شوهد تجربی نشان داده است که بیضه ها به آسیب سلولی ناشی از عوامل محیطی حساس هستند و اپوپتوز یس سلول های زایا در شرایط غیرفیزیولوژیکی (استرس) مانند دیابت ، ایسکمی ، هیپر ترمی و پرتوتراپی نیز ممکن است رخ دهد (11 و12) . مطالعات اخیر افزایش اپوپتوز را در لوله های منی ساز موش های صحرایی دیا بتیک شده با استرپتوزوسین (stz)را نشان داده اند (13 و14) . مکانیسم اپوپتوز یس وابسته به دبا بت نامشخص است . با این حال مطالعات نشان داده اند که استرس اکسیداتیو ناشی از دیابت ، اپوپتوز یس را القا می کند(15و16). در محور هیپوتالاموس-هیپوفیز –گناد (HPG) ؛ هیپوتالاموس هورمون GnRH را آزاد می کند که بر غده هیپوفیز اثر کرده و موجب تحریک ترشح هورمون محرک جسم زرد (LH) و هورمون محرک فولیکول (FSH) توسط این غده می شود.LH و FSH بر روی سلول های رده سرتولی و سلول های لیدیگ اثر کرده و موجب تحریک روند اسپرماتوژنز و ترشح تستوسترون می شوند. دیابت تیپ یک موجب ایجاد اختلال در محور HPG شده که این امر منجر به اختلال در روند اسپرماتوژنز می شود و در نهایت موجب ایجاد اختلال در باروری می شود(17) دیابت ناشی از stz در موش صحرایی نر به اتروفی اندام جنسی ، کاهش تعداد اسپرم همراه با سطوح پایین گنادوتروپین ها و تستوسترون پلاسما منجر می شود . رفتار جنسی (تناسلی) موش های دیابتی کاهش یافته و همچنین با کاهش باروری در حین جفت گیری طبیعی همراه بوده است(18) . گزارشات نشان داده است که تغییرات چشمگیر در قطر توبول سمینیفروس و مهار اسپرماتوژنز در مراحل اسپرماتوسیتی2 و 3 در توبول های کوچک حیوانات دیابتی مشاهده شده است. مراحل دیگر اسپرماتوژنز ، شامل مراحل 4 و 6 نیز در حیوانات دیابتی متاثر می شوند. همچنین ، 4 هفته بعد از ایجاد دیابت سلولهای زاینده دژنره شده در مراحل مختلف تکوین را می توان مشاهده کرد(19). گیاه عاقرقرحا : گیاه عاقرقرحا گیاهی چند ساله ، خوابیده بر روی زمین و از خانواده استراسه است ، که در سراسر هند یافت می شود و بعنوان یک مقوی برای سیستم عصبی در نظر گرفته می شود . ریشه ان حاوی canacyclin ، pellitorine ، hydrocarolin و inulin است. و نیز دارای خواصی از جمله ضدالتهابی ، ایمنی و انابولیک نیز می باشد(20). این گیاه به عنوان دارویی برای تحریک غدد بزاقی، بهبود زکام مزمن و به عنوان دوای درمان قرمزی پوست در بین مردم استفاده می شود. به صورت جویدنی این گیاه برای درد دندان، آپنه و از کار افتادگی ماهیچه های نای مفید است.استفاده از این گیاه نتایج مثبتی بر بهبود عملکرد جنسی و زمان انزال نیز داشته است.همچنین ریشه این گیاه بدلیل داشتن خواص جوان سازی در طب سنتی هند بسیار معروف است(21). مروری بر متون : در مطالعه انجام گرفته توسط Vikas Sharma و هم کاران در سال 2008 نشان داده شده است که تجویز عصاره ابی گیاه عاقرقرحا موجب افزایش تعداد اسپرم و افزایش غلظت فروکتوز مایع منی می شود گذشته از آن در بهبود رفتارهای جنسی موش های صحرایی نر موثر است وپیشنهاد دادند که عصاره ابی این گیاه دارای اثر افزایشی و وابسته به دوز بر روی تعداد اسپرم بوده و غلظت فروکتوز مایع منی را نیز بطور قابل توجهی افزایش می دهد (21). در مطالعه ای که توسط Vikas Sharma و همکاران در سال 2010 انجام گرفت ، نشان دادند که تجویز خوراکی عصاره الکلی (petroleum ether extract) گیاه عاقرقرحا تاثیر مشخصی بر وزن بدن و اندام های جنسی دارد و نیز موش های تحت درمان تمایل بیشتری نسبت به جنس مخالف پیدا کردند و رفتارهای پیش از جفت گیری انها افزایش یافته بود. شاخص های دیگر رفتار جنسی از جمله نعوظ نیز در این حیوانات بطور قابل توجهی افزایش یافته بود (22). در مطالعه ای دیگر که توسط Vikas Sharma و همکاران در سال 2009انجام گرفت ، نشان داده شد که تجویز خوراکی عصاره الکلی گیاه عاقر قرحا Anacyclus pyrethrum در تمام دوزها (150mg/kg و 100 ،50) موجب افزایش قابل توجهی در وزن بدن ، تعداد اسپرم ، تحرک و زنده ماندن اسپرم ، همراه با افزایش غلظت تستوسترون سرم ، هورمون جسم زرد(LH) و هورمون محرک فولیکول (FSH) می شود. محتوای فروکتوز مایع منی نیز پس از 28 روز درمان بطور قابل توجهی افزایش یافته بود (23). جمع بندی و بیان علت اصلی اجرای طرح : باتوجه به مطالعات فوق و گزارش اثرات آنابولیک مثبت عصاره های آبی و الکلی ریشه گیاه عاقرقرحا بر ارگان های تولیدمثلی و اثر مثبت آن بر روند اسپرماتوژنز، وباتوجه به اینکه تاکنون اثر این عصاره بر اسپرماتوژنز و میزان تستوسترون در حیوانات آزمایشگاهی دیابتی شده بررسی نشده است، هدف از این مطالعه بررسی اثر تزریق درون صفاقی عصاره الکلی و ابی برگ گیاه عاقرقرحا(Anacylus Pyrethrum) بر سطح سرمی تستوسترون، FSH ،LH وتعداد اسپرم در گرم بافت مجرای اپیدیدیم و دفران در موش های صحرایی نر دیابتی شده با استرپتوزوسین می .Evaluation of the Anabolic, Aphrodisiac and Reproductive Activity of Anacyclus Pyrethrum DC in Male Rats. Sci Pharm. 2009; 77; 97–110. 22. Sharma V et al. Effects of petroleum ether extact of Anacyclus Pyrethrum DC.on sexual behavior in male rats.journal of Chinese integrative medicin ,August 2010,Vol.8.No.8 23. Sharma V et al . Androgenic and Spermatogenic Activity of Alkylamide-Rich Ethanol Solution Extract of Anacyclus pyrethrum DC. Sci Pharm. 2009; 77; 97–110 24- محمد حسن افتخاری و همکاران، اثر دایدزئین بر سطح گلوکز ، پروفایل لیپیدی و فعالیت آنزیم پاراکسوناز موش های صحرایی دیابتی، مجله علوم تغذیه و صنایع غذایی ایران، سال چهارم، شماره 2، تابستان 1388، صفحات 44-37. 25- ارضی اردشیر، شفیع مهران. اثر عصاره هیدروالکلی گیاه بادرنجبویه در پیشگیری از تشنج ناشی از نیکوتین در موش سفید . مجله دانشگاه علوم پزشکی بابل شماره ١ سال چهارم١٠٧،١٣٨٠ 26-محمودی م، حیدری م، ظهور ع:بررسی اثر عصاره گیاه بادرنجبویه بر تشنجات صرعی ناشی از تزریق پنتیلن تترازول در موش صحرایی.مجله دانشگاه علوم پزشکی کرمان:شماره٢،٩٤-٨٨،١٣٨٠ 27.Asgari jahromiM, Movahedin M ,Amanloo M . The Effects of Calligonum Extract on Sperm Parameters and the Rate of Apoptosis in Aged Male Mice Testis issue. Modares Journal of Medical Sciences: Pathobiology, 16(1), Spring 2013 28-عبدالله نژاد اکرم و همکاران . اثر سیر بر اسیب های بیضه ای ناشی از دیابت شیرین در موش های صحرایی نر . مجله غدد درون ریز و متابولیسم ایران ، دوره یازدهم ، شماره چهارم ، ابان 1388 29حمدی محمدرضا، رضازاده حسن.اثر مصرف اتانول بر بافت بیضه RAT در حال بلوغ و بالغین.مجله علمی پزشکی ارومیه .1374،سال ششم ،شماره سوم و چهارم:78-90 30.Linder RE,klinfeler GR ,Strander LF ,Saurez JD . Acute spermatogenic effects of bromaocetic acids.Fund and Appl Toxicol.1994;22:422-423 31.Hibi H ,Yamamoto K. Effects of alpha-blocker on sperm concentration,motility intraluminal pressure and fluid movment in the rat cauda epididyms. The gurnal of urology.1995;154:606-610. 32.Sood S,Reghunandandn V, Marya RK, Singh PI. Efeect of vitamin D repletion on testicular function vitamin D-deficient rats.Nutr Metab.1995;39;95-98 33.Pant NM,Stivastava SC, Prasad AK, Shankar R,Sriraastava Sp.Effects of carbary1 on the rats male reproductive system.Vet Human Toxicol.1995;37(5):421-425 34.Sinha N, Naratan R, Saxea DK, Endusulfan-induced biochemical changes in the testis of ایجاد می شود. اجزای دستگاه تناسلی (بیضه ، مجاری اپی دیدیم و دفران راست و چپ ) مشخص و در دسترس قرار گرفته و به ترتیب اندام ها جدا ، توزین و سپس به محیط مورد نظر جهت انجام مراحل بعدی انتقال می یابد. ابتدا مجاری دفران راست و چپ از محفظه شکم حیوان خارج می شود. دو اندام اول پس از وزن کردن هر کدام در یک پتری حاوی یک میلی لیتر سرم فیزیولوژی که از قبل تهیه می شود قرار می گیرد (29و30). شمارش اسپرماتوزوئید در مجرای دفران: هر مجرای دفران خارج شده را در سرم فیزیولوژی با استفاده از تیغ بیستوری به طور کامل ریز نموده و سوسپانسیون هموژنیزه تهیه می شود . پس از ان مقدار معین سرم فیزیولوژی به سوسپانسیون اضافه می شود تا رقت مناسب را پیدا و اسپرماتوزوئید در زیر میکروسکوپ قابل شمارش شود. یک قطره از این سوسپانسیون روی لام هموسیتومتر قرار داده می شود و پس از گذاشتن لامل ، شمارش اسپرم مانند شمارش گلبول سفید انجام می شود(31و32). شمارش اسپرماتوزوئید در مجرای اپیدیدیم: مجرای اپی دیدیم راست و چپ پس از خروج از محفظه شکم حیوان وزن و به داخل یک میلی لیتر سرم فیزیولوژی (جهت جلوگیری از خشک شدن) منتقل می شود. پس از ان هر مجرای اپی دیدیم به دو قسمت تقسیم و هر بخش به داخل یک پتری با حجم معین سرم فیزیولوژی منتقل می شود. پس از ان عمل ریز کردن هر قسمت به دقت و مشابه مجرای دفران انجام می شود تا سوسپانسیون حاصل رقت مناسب را کسب کند(33و34). یک قطره از این محلول روی لام هموسیتومتر بین لام و لامل قرار می گیرد و عمل شمارش اسپرماتوزوئید (مشابه گلبول های سفید ) انجام می شود. میانگین اعداد حاصل در ضرایب مربوطه (ضرایب تصحیح حجم ، سطح و رقت ) ضرب می شود و حاصل ان به عنوان تعداد اسپرماتوزوئید در هر اپیدیدیم حیوان در نظر گرفته میشود. چون در هنگام خرد شدن تعدادی از اسپرم ها اسیب می بیند ، معیار اندازه گیری ، اسپرماتوزوئید های سالم است. محاسبه تعداد اسپرماتوزوئید در گرم بافت مجاری دفران و اپیدیدیم : برای کاهش اثر تفاوت اندازه های مجاری دفران و اپی دیدیم ، ابتدا تعداد اسپرماتوزوئیدها در مجاری دفران و اپی دیدیم راست و چپ حیوان شمارش می شود و سپس با داشتن وزن مجاری و تعداد اسپرم در اندام هر طرف ، تعداد اسپرم در یک گرم بافت حیوان محاسبه می گردد. پس از پایان دوره تزریق حیوانات مجددا توزین شده و پس از بیهوشی با اترو عدم پاسخ گویی به رفلکس های درد ،خونگیری از ورید گردنی انجام می شود. سرم جدا شده در فریزر در دمای٧٠- درجه سانتی گراد نگهداری می شود. پس از خونگیری اندام های مورد نظر (بیضه ، مجاری اپیدیدیم و دفران) جدا شده و مورد بررسی قرار خواهند گرفت هورمون تستوسترون با روش متداول آزمایشگاهی اندازه گیری می شود و جهت اندازه گیری ، FSH وLH از کیت اختصاصی رت به روش الیزا استفاده خواهد شد. rats.1995;37(6):547-549 باشد. |
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 1-عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا باعث تفاوت معنی دار میانگین سطح سرمی هورمون تستوسترون در گروه های مورد بررسی می شود
2-عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقر قرحا باعث تفاوت معنی دار میانگین سطح سرمی هورمون FSH در گروه های مورد بررسی می شود 3-عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقر قرحا باعث تفاوت معنی دار میانگین سطح سرمی هورمون LH در گروه های مورد بررسی می شود 4- عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا باعث تفاوت معنی دارمیانگین وزن مجرای دفران در گروه های مورد بررسی می شود 5- عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا باعث تفاوت معنی دار وزن مجرای اپی دیدیم در گروه های مورد بررسی می شود 6- عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا باعث تفاوت معنی دار میانگین تعداد اسپرم در گرم بافت در مجرای اپیدیدیم در گروه های مورد بررسی می شود 7- عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا باعث تفاوت معنی دار میانگین تعداد اسپرم در گرم بافت مجرای دفران درگروه های مورد بررسی می شود 8-عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا باعث تفاوت معنی دار میانگین وزن بیضه در گروه های مورد بررسی می شود 9- عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا باعث تفاوت معنی دار میانگین وزن بدن در گروه های مورد بررسی می شود |
| هدف کلی طرح | تعیین اثر عصاره الکلی و ابی ریشه گیاه عاقرقرحا (Anacylus Pyrethrum) بر سطح سرمی تستوسترون ،FSH ، LHو تعداد اسپرم در موش های صحرایی نر بالغ دیابتی شده با استرپتوزوسین |
| اهداف اختصاصی | 1- مقایسه میانگین سطح سرمی تستوسترون در گروههای مختلف مورد بررسی
2-مقایسه میانگین سطح سرمی FSH در گروههای مختلف مورد بررسی 3- مقایسه میانگین سطح سرمی LH در گروههای مختلف مورد بررسی 4- مقایسه میانگین تعداد اسپرم درگرم بافت در مجرای اپیدیدیم درگروههای مختلف مورد بررسی 5- مقایسه میانگین تعداد اسپرم درگرم بافت در مجرای دفران در گروههای مختلف مورد بررسی 6- مقایسه میانگین وزن مجرای دفران در گروههای مختلف مورد بررسی 7- مقایسه میانگین وزن اپی دیدیم در گروههای مختلف مورد بررسی 8- مقایسه میانگین وزن بیضه در گروههای مختلف مورد بررسی 9- مقایسه میانگین وزن بدن حیوانات در گروههای مختلف مورد بررسی |
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | دانشگاه علوم پزشکی زاهدان و سایر مراکز تحقیقاتی |
| تعریف واژه های تخصصی | دیابت : در مطالعه حاضر افزایش قند خون در حالت طبیعی و غیرناشتا به میزان بیش از 250 میلی گرم بر دسی لیتر نشان دهنده دیابتی شدن حیوان خواهد بود(24). |
| نوع مطالعه | کاربردی |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | جمعیت مورد مطالعه90 سر موش صحرایی نر سالم و بالغ از نژاد Wistar Albino می باشند که در اتاق حیوانات دانشگاه علوم پزشکی زاهدان نگهداری می شود |
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | تعداد حیوانات مورد مطالعه90 سرموش صحرایی نر و بالغ از نژاد Wistar Albino می باشند که پس از توزین در قفس نگهداری میشوند و سپس به صورت تصادفی به نه گروه (n=10) تقسیم می شوند(21). |
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | حیوانات مورد مطالعه با استفاده از معیارهای ورود و خروج ذکر شده در بالا انتخاب می شوند ، بدین ترتیب 90 سر موش را وارد مطالعه میکنیم و سپس انها را بطور تصادفی به نه گروه ده تایی تقسیم می کنیم. |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | اطلاعات حاصل از این بررسی که بوسیله روش های آزمایشگاهی، دستی و مشاهده فردی بدست آمده، در فرم های اطلاعاتی خاص ثبت می گردد و در نهایت تمام آنها مورد آنالیز قرار می گیرد. |
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | تهیه گیاه :
گیاه مورد نظر از یک فروشگاه محلی در شهر زاهدان خریداری می شود.سپس جهت تعیین گونه آن به هرباریوم گروه زیست شناسی دانشگاه سیستان و بلوچستان ارسال و پس از تایید وارد چرخه کار خواهد شد . روش تهیه عصاره ابی گیاه: ابتدا ریشه خشک شده گیاه را در ظرفی ریخته ، به آن آب مقطر اضافه می کنیم و محلول حاوی مواد را در دستگاه سوکسله قرار می دهیم و به مدت ٢٤ ساعت عمل عصاره گیری تداوم می یابد و پس از این مدت عصاره گیاهی به دست آمده توسط کاغذ صافی و قیف بوخنر جدا می شود و در دمای ٣٧ درجه سانتی گراد خشک خواهد شد (درون ظروف شیشه ای) و پس از خشک شدن آن جدا سازی شده و در زمان انجام آزمایش، عصاره خشک شده با دوز مورد نظر در سرم فیزیولوژی حل و مورد استفاده قرار می گیرد(25). روش تهیه محلول عصاره : جهت تولید محلول عصاره از سرم فیزیولوژی استریل استفاده می شود. سپس محلول عصاره حاصل با دوزهای 50 ؛100 و150میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن استفاده خواهد شد(23و26). روش تهیه عصاره الکلی گیاه : ریشه خشک شده گیاه را با استفاده از اسیاب برقی بصورت پودر دراورده و سپس به ان اتانول 95درصد اضافه می کنیم و محلول حاصل را در دستگاه سوکسله قرار می دهیم و به مدت 24ساعت عمل عصاره گیری تداوم می یابد و پس از این مدت عصاره به دست آمده توسط کاغذ صافی و قیف بوخنر جدا می شود و در دمای ٣٧ درجه سانتی گراد خشک شده در دستگاه انکوباتور و پس از خشک شدن آن جدا سازی می شود(23). روش تهیه محلول عصاره : جهت تولید محلول عصاره از حلال دی متیل سولفوکسید(DMSO) استفاده می شود(27). سپس محلول عصاره حاصل با دوزهای 50 ، 100 و150میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن استفاده خواهد شد (23). این مطالعه بر روی 90 سر موش صحرایی نژاد Wistar-Albino در محدوده وزنی 230-270 انجام خواهد شد. پس از توزین ، حیوانات به نه گروه ده تایی تقسیم می شوند. و در قفس نگهداری می شوند.حیوانات مورد بررسی دسترسی کامل به آب و غذا دارند و در شرایط١٢ ساعت روشنایی و١٢ ساعت تاریکی و در دمای ٣٠-٢٥درجه سانتی گراد که به طور مصنوعی تهیه می شود قرار می گیرند. گروه های مورد مطالعه شامل : 1-گروه کنترل که عصاره ای دریافت نمی کند. 2-گروه دوم که دیابتی شده و عصاره دریافت نمی کنند . 3-گروه سوم که دیابتی شده و حلال دی متیل سولفوکسید را دریافت می کنند. 4-گروه چهارم که دیابتی شده و عصاره الکلی گیاه را با دوز50 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن به مدت چهار هفته دریافت می (23). 5-گروه پنجم که دیابتی شده و عصاره الکلی گیاه را با دوز100 میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن به مدت چهار هفته دریافت می کنند(23). 6- گروه ششم که دیابتی شده و عصاره الکلی گیاه را با دوز150 میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن به مدت چهار هفته دریافت می کنند(23). 7-گروه هفتم که دیابتی شده و عصاره ابی گیاه را با دوز50 میلی گرم بر کیلوگرم وزن بدن به مدت چهار هفته دریافت می کنند(23). 8- گروه هشتم که دیابتی شده و عصاره ابی گیاه را با دوز100 میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن به مدت چهار هفته دریافت می کنند(23). 9- گروه نهم که دیابتی شده و عصاره ابی گیاه را با دوز150 میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن به مدت چهار هفته دریافت می کنند(23). نحوه تیمار حیوان: عصاره الکلی و آبی ریشه گیاه عاقرقرحا پس ازتائید دیابتی شدن حیوانات به صورت داخل صفاقی روزانه و در ساعت معینی از روز تیمار خواهند شد حجم ماده تیمار شده در تمامی حیوانات مورد بررسی براساس کیلوگرم بر وزن بدن و مدت زمان تیمار 4 هفته خواهد بود. نحوه دیابتی کردن حیوان : جهت القای دیابت، موش های صحرایی استرپتوزوتوسین را با دوز 60 میلی گرم بر کیلو گرم وزن بدن ( به صورت حل شده در محلول بافر سیترات) به صورت تزریق داخل صفاقی دریافت خواهند نمود(28)علایم دیابت شامل پرنوشی و پر ادراری پس از 7 - 5 روز آشکار خواهند گردید. جهت اطمینان بیشتر، میزان قند خون حیوانات با استفاده از دستگاه گلوکومتر دیجیتالی اندازه گیری خواهد شد که افزایش قند خون در حالت طبیعی و غیرناشتا به میزان بیش از 250 میلی گرم بر دسی لیتر نشان دهنده دیابتی شدن خواهد بود(24). روش برداشتن اندام های تناسلی : پس از اتمام خونگیری ، شکاف مناسبی در ناحیه اینگوینال دو طرف حیوان |
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | اطلاعات بدست آمده با نرم افزارSPSS و تست های آماری کروسکال والیسو تست تعقیبی توکی آنالیز می گردد، نتایج بدست آمده به صورتMean±SD بیان و اختلافات آماری با ٠٥/٠ P-value< معنی دار تلقی می گردد.
بنابراین داده ها با استفاده از روش های آمار توصیفی ( محاسبه شاخص های مرکزی و پراکندگی، رسم نمودار ، تنظیم جدول توزیع فراوانی ) و آمار استنباطی ( ازمون کروسکال والیس و تست تعقیبی توکی ) تجزیه و تحلیل خواهد شد. |
| ملاحظات اخلاقی | به تایید کمیته اخلاق دانشگاه خواهد رسید . همچنین فرم "چک لیست کار با حیوانات ازمایشگاهی بر اساس کد های راهنمای کار با حیوانات ابلاغی وزارت بهداشت" تکمیل و ضمیمه خواهد شد . |
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | خرید کیت |
| کلمات کلیدی | Anacyclus Pyrethrum , Diabetes , Streptozotocin , Spermatogenesis , Testosteron
گیاه عاقرقرحا ، دیابت ، استرپتوزوسین ، اسپرماتوژنز ، تستوسترون |
| فهرست منابع و مراجع | 1. Kloppel G, Mattias L, Habich K, et al. Islet pathology and the pathogenesis of type 1 and type 2 diabetes mellitus revisited. Surv Synth Pathol Res 1985; 4: 110–125
2.Ziaei-Rad M, Vahdaninia M, Montazeri A. Sexual dysfunctions in patients with diabetes: a study from Iran. Reproductive biology and endocrinology : RB&E. 2010;8:50 3.Jiang GY. Practical Diabetes. 1st Edition. Beijing: People's Health Publishing House: 1996, 295 4. Khaki A, Fathiazad F, Nouri M Khaki AA, Chelar c,ozanci, Ghafari-Novin M, Hamadeh M. The Effects of Ginger on Spermatogenesis and Sperm parameters of Rat. Iranian J. of Reproductive Medicine 2009; Vol. 7. No. 1: 7 - 12 5.Davis SN. Insulin, Oral Hypoglycemic Agents and the Pharmacology of the Endocrine Pancreas. In: Goodman and Gilmans the Pharmacological Basis of Therapeutics. Brunton, L.L. (Ed.). McGraw-Hill, New York. 2006, 1613 – 45 6.Baynes JW, Thorpe SR. Role of oxidative stress in diabetic complications: a new perspective on an old paradigm. Diabetes 1999; 48: 1 - 9. 7. García-Díez LC, Corrales Hernandez JJ, Hernandez-Diaz J, Pedraz MJ, Miralles JM. Semen characteristics and diabetes mellitus: significance of insulin in male infertility. Arch Androl 1991;26:119-28 8. Padron RS, Dambay A, Suarez R, Mas J. Semen analyses in adolescent diabetic patients. Acta Diabetol Lat 1984; 21(2): 115-121. 9. Vignon F, Le Faou A, Montagnon D, Pradignac A, Cranz C, Winiszewsky P, et al. Comparative study of semen in diabetic and healthy men. Diabete Metab 1991; 17(3): 350-354. 10 .Maneesh M., Jayalekshmi H., Sanjiba Dutta, Amit Chakrabarti and Vasudevan D.M. Experimental the rapeutical intervention with ascorbic acid in ethanol induced testicular injuries in rats. Indian Journal of Experimental Biology, (2005). 43:172- 176 11 .Collin, O., Damber, J.E., Bergh, A. Effects of endothelin-1 on the rat testicular vasculature. ., 1996. J. Androl. 17, 360-366. 12.Cai, L., Hales, B.F., Robaire, B. Induction of apoptosis in the germ cells of adult male rats after exposure to cyclophosphamide. ., 1997.Biol. Reprod. 56, 1490-1497. 13 .Sainio-Pollanen, S., Henriksen, K., Parvinen, M., Simell, O., Pollanen, P.,. Stage-specific degeneration of germ cells in the seminiferous tubules of non-obese diabetic mice. 1997. Int. J. Androl. 20, 243-253. 14 .Cai, L., Chen, S., Evans, T., Deng, D.X., Mukherjee, K., Chakrabarti, S.,. Apoptotic germ-cell death and testicular damage in experimental diabetes: prevention by endothelin antagonism. 2000. Urol. Res. 28, 342-347. 15. Allan, D.J., Harmon, B.V., Roberts, S.A.,. Spermatogonial apoptosis has three morphologically recognizable phases and shows no circa dian rhythm during normal spermatogenesis in the rat. 1992. Cell. Prolif. 25, 241-250. 16 . Reiter, R.J., Tan, D.X., Osuna, C., Gitto, E.,. Actions of melatonin in the reduction of oxidative stress: a review. 2000. J. Biomed. Sci. 7, 444-458. 17. Erica L. Schoeller & Samantha Schon & Kelle H. Moley. The effects of type 1 diabetes on the hypothalamic, pituitary and testes axis(REVIEW). Cell Tissue Res (2012) 349:839–847 18.Mallick Ch , Mandal S , Barik B . Protection of Testicular Dysfunctions by MTEC, a Formulated Herbal Drug, in Streptozotocin Induced Diabetic Rat . Biol. Pharm. Bull. 30(1) 84—90 (2007) 19.Ballester J, Munoz MC, Dominguez J, Rigau T, Guinovart JJ, Rodriguez-Gil JE. Insulin-dependent diabetes affects testicular function by FSH- and LHlinked mechanisms. J Androl 2004; 25: 706-19. 20.Sujith K , Suba V ,Ronald Darwin C .Neuropharmacological profil of ethanolic extract of Anacuclus Pyrethrum in albino wistar. IJPSR 2011; Vol. 2(8): 2109-2114 21. Sharma V et al |
| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|---|---|---|
| 1 001.jpg | 1392/11/08 | 419858 | دانلود |
| 2 001.jpg | 1392/11/08 | 274408 | دانلود |
| 3 001.jpg | 1392/11/08 | 699158 | دانلود |
| 4 001.jpg | 1392/11/08 | 450985 | دانلود |
| p(1).pdf | 1392/11/08 | 199689 | دانلود |
| p(2).pdf | 1392/11/08 | 267858 | دانلود |
| p(3).pdf | 1392/11/09 | 2250064 | دانلود |
| 137_334_check-list.doc | 1392/11/09 | 81408 | دانلود |
| dehvari proposal.docx | 1392/11/09 | 119171 | دانلود |
| Untitled-1.jpg | 1392/11/19 | 191625 | دانلود |
| p.docx | 1392/11/23 | 109047 | دانلود |
| p- davari.docx | 1392/12/11 | 124636 | دانلود |
| p1.docx | 1392/12/13 | 109287 | دانلود |
| nahaee.docx | 1392/12/17 | 126445 | دانلود |
| p1.docx | 1393/02/04 | 109661 | دانلود |
| 6541 (2).docx | 1393/03/03 | 14089 | دانلود |
| proposal eslah shode.docx | 1393/03/03 | 110618 | دانلود |
| javab davari.docx | 1393/03/03 | 14089 | دانلود |
| eslahiye2.docx | 1393/03/31 | 11792 | دانلود |
| proposal eslah shode2.docx | 1393/03/31 | 110888 | دانلود |
