بررسی پلی مورفیسم A1298C ژن MTHFR))Methylenetetrahydrofolate reductase ) در کارسینومای سلول سنگفرشی دهان

Evaluation of A1298C polymorphism of Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene in oral squamous cell carcinoma


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: شیرین سراوانی

کلمات کلیدی: -

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 6710
عنوان فارسی طرح بررسی پلی مورفیسم A1298C ژن MTHFR))Methylenetetrahydrofolate reductase ) در کارسینومای سلول سنگفرشی دهان
عنوان لاتین طرح Evaluation of A1298C polymorphism of Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene in oral squamous cell carcinoma
نوع طرح کاربردی
محل اجرای طرح دانشکده دندانپزشکی
رسته مطالعاتی کاربردی
دانشکده/مرکز دانشکده دندانپزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز 365

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
شیرین سراوانیاستاد راهنمای اول پایان نامه دانشجوییاستاد راهنمادکترای تخصصی shirin.saravani@yahoo.com
ابراهیم میری مقدم(پژوهشگر/استاد راهنما)استاد راهنمای دوم پایان نامه دانشجوییاستاد راهنمادکترای تخصصی moghaddam4@yahoo.com
آرزو خسرویهمکاردانشجو akhosravi214@gmail.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی پلی مورفیسم A1298C ژن MTHFR))Methylenetetrahydrofolate reductase ) در کارسینومای سلول سنگفرشی دهان
خلاصه طرح به لاتینEvaluation of A1298C polymorphism of Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene in oral squamous cell carcinoma
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشبه طور گسترده سرطان دهان 2-4 % کل موارد سرطان را شامل می شود. سرطان دهان شامل گروهی از نئوپلاسم ها می باشد که قادر است هر ناحیه ای از حفره ی دهان، فارنژیال و غدد بزاقی را تحت تاثیر قرار دهد. با این وجود لغت سرطان دهان به کارسینومای سلول های سنگفرشی دهان که در حال حاضر شایع ترین نئوپلاسم دهان می باشد، اطلاق می گردد1. کارسینوژنزیس دهانی یک پروسه ی چند مرحله ای متاثر از فاکتور های درونی و محیطی می باشد. در میان فاکتورهای محیطی ، مصرف منظم تنباکو و الکل نقش اساسی ایفا می کنند . عفونت پایدار ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) نیز در این پروسه موثر می باشد2.
در انسان فولات نقش اساسی در فراهم کردن گروه های متیل جهت سنتز دئوکسی نوکلئوزید و واکنش های متیلاسیون داخل سلولی ایفا می کند و کاهش آن طبق موارد گزارش شده منجر به عدم اتصال یوراسیل طی سنتز DNA، شکستگی رشته ی DNA ، عدم ترمیم DNA و کاهش متیلاسیونDNA می شود3. نقص فولات به عنوان عاملی است که در ریسک ابتلا به سرطان نقش داشته و احتمالا از طریق تنوعات ژنی در ژن (MTHFR) Methylenetetrahydrofolate reductase تنظیم می شود4. متیلاسیون DNA نقش بحرانی در کنترل فعالیت ژن ایفا می کند5. یکی از پلی مورفیسم های ژن MTHFR، A1298C می باشد که در اگزون 7 ، کدون 429 قرار دارد و عامل تغییر گلوتامیک اسید به الانین می باشد4. مطالعات مختلف، پلی مورفیسم A1298C ژن MTHFR را در سرطان کلورکتال6، سرطان سینه7، لوسمی حاد دوران کودکی8 و سرطان تخمدان9 بررسی نموده اند.
در مطالعه ای که در سال 2012 در برزیل توسط Galbiatti و همکارانش انجام گرفت، طی یافته های کلینیکی و هیستوپاتولوژیکی مشاهده نمودند که پلی مورفیسم A1298C در بیماران با سرطان حفره ی دهان به عنوان جایگاه اولیه، شیوع بیشتری داشته و پلی مورفیسم A1298C از نوع AA یاAC در ژن MTHFR، سن 49 سال یا بالاتر، جنس مذکر و مصرف عادتی تنباکو و الکل از عوامل مستعد کننده به سرطان سر و گردن می باشند10.
در سال 2011 در کشور هند، Sailasreeوهمکارانش طی بررسی های انجام شده با هدف بررسی نقش پلی مورفیسم های MTHFR در استعداد ابتلا به سرطان دهان دریافتند که ژنوتیپ 1298 CC در مقایسه با ژنوتیپ AA+AC با ریسک کاهش یافته ی سرطان دهان همراه بوده است. هم چنبن 1298CCو AC+CC نسبت به AA دارای ریسک افزایش یافته ای در شکست درمان و بقای ضعیف بیمار می باشند11.
مطالعه Tsai و همکارانش در سال 2011 درتایوان به منظور ارزیابی ارتباط پلی مورفیسم های MTHFR و سرطان دهان بر روی 620 نمونه ی مبتلا به سرطان دهان و620 مورد کنترل صورت گرفت. نتایج حاصله نشان داد که توزیع پلی مورفیسم های A1298C در بین گروه کنترل و مبتلا، تفاوت معناداری ندارد3.
نتیجه ی حاصل در بررسی انجام شده روی 237 نمونه SCC سر و گردن و 711 مورد کنترل، توسط Suzuki و همکارانش در کشور ژاپن در سال 2007 بیانگراین واقعیت بوده است که پلی مورفیسم های مختلف MTHFR به تنهایی اثر مشخصی بر ریسک ابتلا به سرطان دهان ندارد. هم چنین ارزیابی هم زمان دو پلی مورفیسم A1298C و C677T ژن MTHFR ارتباط معناداری را باریسک HNSCC نشان نداد12.
Neumann و همکارانش در سال 2005 با بررسی 537 نمونهHNSCC و 545 مورد کنترل در شهر تگزاس ایالت متحده امریکا دریافتند که ژنوتیپ های ACوCC پلی مورفیسم A1298C ژن MTHFR در مقایسه با ژنوتیپ AA با کاهش 35 درصدی ریسک ابتلا بهHNSCC درارتباط هستند4.
همانطور که مطرح شد نتایج حاصل از مطالعات در کشورهای مختلف، در ارتباط با میزان اثر گذاری پلی مورفیسم A1298C ژن MTHFR در بروز OSCC متفاوت می باشد. نظر به این که تا کنون مطالعه ای بدین منظور در ایران انجام نشده، بر آن شدیم تا به بررسی این مهم بپردازیم.
سوالات و / یا فرضیات پژوهشتوزیع فراوانی پلی مورفیسم A1298Cژن MTHFR در دو گروه کنترل و کارسینومای سلول سنگفرشی دهان باهم متفاوت است.
هدف کلی طرحتعیین پلی مورفیسم A1298Cژن MTHFR در کارسینومای سلول سنگفرشی دهان
اهداف اختصاصیمقایسه ی پلی مورفیسم A1298C ژن MTHFR در دو گروه کنترل و کارسینومای سلول سنگفرشی دهان
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحمرکز تحقیقات دندانپزشکی، مرکز تحقیقات ژنتیکی کانسرها
تعریف واژه های تخصصی (MTHFR) Mthylenetetrahydrofolate reductase : آنزیمی است که به صورت برگشت ناپذیر واکنش تبدیل 5 و10 متیلن تتراهیدروفولات ردوکتاز به 5 متیل تتراهیدروفولات، که شکل رایج اولیه ی فولات می باشد را کاتالیز می کند. بنابراین این آنزیم نقش مرکزی در تعادل سنتز DNA و متیلاسیون آن ایفا می کند13.
نوع مطالعهموردی شاهدی-تحلیلی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)تمام نمونه های بیوپسی سرطان اولیه سلول سنگفرشی حفره دهان بر اساس بررسی های پاتولوژیک در بخش پاتولوژی دانشکده دندانپزشکی زاهدان که مقدار بافت باقیمانده آنها در بلوک پارافینی جهت بررسی کافی باشد.
حجم نمونه و روش محاسبه آنتمام نمونه های بیوپسی مورد بررسی شامل تمامی موارد SCC دهانی بخش پاتولوژی دانشکده دندانپزشکی زاهدان است که طی سالهای ۱۳۸۳ تا ۱۳۹2 جمع آوری شده اند و شامل ۵۰ نمونه می باشند و گروه کنترل 50 نمونه از نمونه های بافتی که فاقد تشخیص OSCC باشند.
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)سرشماری
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)فرم ثبت اطلاعات (ضمیمه شماره۱)
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)این مطالعه به صورت گذشته نگر طراحی شده است و از نمونه های بیوپسی بیماران مبتلا به سرطان سلول سنگفرشی دهانی موجود در آزمایشگاه پاتولوژی دانشکده دندانپزشکی زاهدان استفاده خواهد شد. گروه کنترل از DNA نمونه های بافتی که که در بخش پاتولوژی باشند و فاقد اختلال سرطانی SCC باشند و از لحاظ سن وجنس با نمونه های ابتلا به OSCC همسان سازی شده است. از بلوک پارافینی مربوط به هر نمونه سه برش جداگانه تهیه خواهد شد و در میکروتیوب های ۵/۱ میلی لیتری جهت استخراج DNA به آزمایشگاه فرستاده خواهد شد. DNA نمونه ها توسط کیتهای اختصاصی در طی ۴ مرحله Deparafinization،Protease Digestion ، Nucleic Acid Isolation،Nuclease Digestion and final purification استخراج شده و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی پلی مورفیسم A1298C ژن MTHFR با روش ARMS-PCR (Amplification Refractory Mutation System- Polymerase Chain Reaction) مورد ارزیابی کیفی قرار خواهند گرفت.
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)تمامی اطلاعات استخراج شده با استفاده از نرم افزار SPSS 21 و آزمون Chi square مورد تحلیل قرار خواهد گرفت.
جدول- توزیع فراوانی پلی مورفیسم A1298C ژن MTHFR در گروه های مورد مطالعه
P value گروه کنترل گروه OSCC گروه مورد مطالعه
پلی مورفیسم ژنی
AA
AC
CC
مجموع
ملاحظات اخلاقی در این مطالعه از نمونه های موجود در آرشیو استفاده خواهد شد و نیازی به کسب رضایت نامه آگاهانه نمی باشدو ملاحظه اخلاقی خاصی ندارد. (کد۱۷)
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهاندارد.
کلمات کلیدیMTHFR ، پلی مورفیسم ژنی، کارسینومای سلول سنگفرشی
Gene polymorphism, MTHFR, Squamous cell carcinoma
فهرست منابع و مراجع1. Markopoulos AK. Current aspects on oral squamous cell carcinoma. Open Dent J 2012; 6:126-130.
2. Fakhry C, Westra WH, Li S, Cmelak A, Ridge JA, Pinto H, et al. Improved survival of patients with human papillomavirus-positive head and neck squamous cell carcinoma in a prospective clinical trial. J Natl Cancer Inst 2008; 100(4): 261–269.
3. Tsai CW, Hsu CF, Tsai MH, Tsou YA, Hua CH, Chang WS, et al. Methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) genotype, smoking habit, metastasis and oral cancer in Taiwan. Anticancer Res 2011; 31(6): 2395- 9.
4. Neumann AS, Lyons HJ, Shen H, Liu Zh, Shi Q, Sturgis EM, et al. Methylenetetrahydrofolate reductase polymorphisms and risk of squamous cell carcinoma of the head and neck: a case-control analysis. Int J Cancer 2005; 115: 131–136.
5. Mascolo M, Siano M. Ilardi G, Russo D, Merolla F, Derosa G, et al. Epigenetic disregulation in oral cancer. Int J Mol Sci 2012; 13(2): 2331-53.
6. Yusef A, Shomaf M, Berger S, Ababneh N, Bobali Y, Ali D, et al. Allele and genotype frequencies of the polymorphic mrthylenetetrahydrofolate reductase and colorectal cancer among Jordanian population. Asian Pac J cancer Prev 2013; 14(8): 4559-65.
7. Liu Y, Zhou LS, Xu XM, Deng LQ, Xiao QK. Association of dietary intake of folate, vitamic B6 and B12 and MTHFR genotype with breast cancer risk. Asian Pac J cancer Prev 2013; 14(9): 5189-92.
8. Li X, Liao Q, Zhang S, Chen M. Association of methylenetetrahytrofolate reductase (MTHFR) C677T and A1298C polymorphisms with the susceptibility of childhood acute lymphoblastic leukaemia (ALL) in Chinese population. Eur J Med Res 2014; 19(1): 5.
9. Darehdori AS, Dastjerdi MN, Dahim H, Slahshoor M, Babazadeh Z, Taghavi MM, et al. Lack of significance of the BRCA2 promoter methylation status in different genotypes of the MTHFR a1298c polymorphism in ovarian cancer cases in Iran. Asian Pac J cancer Prev 2012; 13(5): 1833-36.
10. Galbiatti AL, Ruiz MT, Rodrigues JO, Raposo LS, Maniglia JV, Pavarino EC, et al. Polymorphisms and haplotypes in methylenetetrahydrofolate reductase gene and head and neck squamous cell carcinoma risk. Mol Biol Rep 2012; 39: 635-643.
11. Sailasree R, Nalinakumari KR, Sebastia P, Kanna S. Influence of methylenetetrahydrofolate reductase polymorphism in oral cancer patients. J Oral Pathol Med 2011; 40: 61-66.
12. Suzuki T, Matsuo K, Hasegawa Y, Hiraki A, Wakai K, Hirose K, et al. One-carbo metabolism-related gene polymorphisms and risk of head and neck squamous cell carcinoma: case control study. Japanes Cancer Association 2007; 98(9): 1439-1446.
13. Boccia S, Boffetta P, Brennan P, Ricciardi G, Gianfagna F, Matsuo K, et al. Meta- analyses of the methylenetetrahydrofolate reductase C677T and A1298C polymorphisms and risk of head and neck and lung cancer. Cancer Lett 2009; 237(1): 55-61.

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
Final Khosravi proposal.doc1392/12/12217600دانلود
modified final khosravi proposal.doc1393/02/14219648دانلود
Komite akhlagh.doc1393/02/22219648دانلود