
| کد طرح | 6844 |
| عنوان فارسی طرح | اثر ضدباکتریایی عصاره هیدروالکلی ریشه درخت گردو(Juglandaceae ) بر استرپتوکوکوس موتانس |
| عنوان لاتین طرح | اثر ضدباکتریایی عصاره هیدروالکلی ریشه درخت گردو(Juglandaceae ) بر استرپتوکوکوس موتانس |
| نوع طرح | بنیادی-کاربردی |
| محل اجرای طرح | دانشگاه علوم پزشکی زاهدان |
| رسته مطالعاتی | بنیادی- کاربردی |
| دانشکده/مرکز | دانشکده دندانپزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز | 365 |

| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| سمیه حسینی طباطبایی | استاد راهنمای اول پایان نامه دانشجویی | دکترای تخصصی | so_tabatabaei@yahoo.com | |
| محمد بکائیان | استاد راهنمای دوم پایان نامه دانشجویی | دکترای تخصصی | bokaeian.m@gmail.com | |
| مهدی فرخی استاد | دانشجو | mahdifarokhi@gmail.com |

| عنوان | متن |
|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | اثر ضدباکتریایی عصاره هیدروالکلی ریشه درخت گردو(Juglandaceae ) بر استرپتوکوکوس موتانس |
| خلاصه طرح به لاتین | اثر ضدباکتریایی عصاره هیدروالکلی ریشه درخت گردو(Juglandaceae ) بر استرپتوکوکوس موتانس |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | دهان به لحاظ فلور میکروبی از تنوع زیادی برخوردار است به طوری که حدود پانصد گونه میکروارگانیزم در حفره دهان وجود دارد1. علیرغم اینکه پوسیدگی دندان احتمالاً شایع ترین بیماری مزمن در جهان است تا به حال هیچگاه برنامه ای برای ریشه کنی این بیماری میکروبی انجام نشده است. عامل اتیولوژیک اصلی شناخته شده برای پوسیدگی دندان استرپتوکوک های موتانس و لاکتوباسیل ها هستند2. استرپتوکوکوس موتانس از باکتری های گرم مثبتی است که در دهان به سر می برد و از طریق متابولیزه کردن کربوهیدرات های مختلف محیط اسیدی ایجاد می کند. قابلیت استرپتوکوکوس موتانس برای سنتز گلوکان خارج سلولی عامل بیماری زایی اصلی این باکتری ها بوده و عامل ایجاد کننده ی پوسیدگی های دندانی در حیوانات و انسان است3.درمان و پیشگیری از پوسیدگی با آنتی بیوتیک ها و استروئیدها پتانسیل اکسیداسیون-احیا بزاق را تغییر داده، فعالیت لیزوزیم را ضعیف و شرایط ایجاد واکنش های آلرژیک را تسهیل می کنند و باعث کاهش مقاومت بدن نسبت به عوامل پاتوژنیک می گردند4. از طرفی استقبال گسترده ای از طب سنتی و داروهای گیاهی در زمینه های مختلف علوم پزشکی صورت گرفته است، که علت آن کاربرد گیاهان به عنوان دارو از قرن های پیش می باشد5. از آنجا که استفاده از آنتی بیوتیک ها و استروئیدها باعث تسهیل واکنش های آلرژیک و کاهش مقاومت بدن نسبت به فاکتورهای پاتوژنیک می شود ، لذا یکی از استراتژی های مقبول در دنیا ، استفاده از گیاهان دارویی است که از جمله این گیاهان می توان ، عصاره مریم گلی (Salvia officinalis ) ، انیسون (Pimpinella anisum )، پونه ، بومادران واستویا را نام برد6.
در مطالعه ای که Noumi وهمکاران در سال 2010 انجام دادند، به این نتیجه رسیدند که میزان حداقل غلظت بازدارندگی(MIC: minimum inhibitory concentration) عصاره چوب درخت گردو علیه رده ی کاندیدا از 0.006 تا 0.195 mg/ml متغیر بود7. در بررسی های Isanga وهمکاران در سال 2007 و همچنین در مطالعه ی میرعلی اکبری و شهیدی در سال 2008، اثرات ضدقارچی، ضد باکتریایی و آنتی اکسیدانی این گیاه شرح داده شده است8و9. از طرفی تحقیقات گذشته، نشان می دهد که چوب گردو حاوی اجزای دیگری مثل پروتئین های گیاهی، فیبرهای مربوط به رژیم غذایی، ملاتونین10 ، استروئیدهای گیاهی 11 ، فولات، تانین و پلی فنول ها12است که همگی اثرات سودمندی برای سلامتی انسان دارند. در مطالعه عظیمی لیسار و همکاران در سال 1391، نتایج نشان داد که روغن سیاه دانه با غلظت 330 میلی گرم بر میلی لیتر بر علیه استرپتوکوکوس موتانس دارای هاله عدم رشد 22 میلی متر می باشد13. در مطالعه کرمانشاه در سال 1389، اثر ضدمیکروبی عصاره هیدروالکلی مریم گلی و پونه مورد بررسی قرار گرفت، میزان حداقل غلظت بازدارندگی(MIC) عصاره مریم گلی و پونه برای استرپتوکوکوس موتانس به ترتیب 25/6 و 5/12 میکروگرم بر میلی لیتر به دست آمد14. در مطالعه شعاع حسنی و همکاران در سال 1387، نتایج نشان داد که غلظت 6 میلی گرم در میلی لیتر عصاره اتیل استاتی موم زنبور عسل توقف رشد باکتری ها را به دنبال داشت و غلظت 30 میلی گرم در میلی لیتر آن برای استرپتوکوکوس موتانس باکتریسید بود15. از طرفی گونه های گردو از منابع مهم چوب در مناطق معتدل در سراسر جهان است. در چین، گردو (Juglandaceae) فقط به عنوان کالای کشاورزی به حساب نمی آید بلکه، برگ، ساقه، ریشه، میوه ها، گل ها و غشای ligneous آن، برای کاربردهای مختلف دارویی مورد استفاده قرار می گیرد16. از این رو هدف این مطالعه بررسی اثر ضدباکتریایی عصاره هیدروالکی ریشه درخت گردو(Juglandaceae ) بر استرپتوکوکوس موتانس خواهد بود. |
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 1) اثر عصاره هیدروالکی ریشه ی درخت گردو بر باکتری استرپتوکوکوس موتانس چقدر است؟
2) میزان غلظت موثر عصاره هیدروالکلی ریشه درخت گردو بر باکتری استرپتوکوکوس موتانس چقدر است؟ |
| هدف کلی طرح | اثر ضدباکتریایی عصاره هیدروالکلی ریشه درخت گردو(Juglandaceae ) بر استرپتوکوکوس موتانس |
| اهداف اختصاصی | 11) تعیین چگونگی اثر عصاره هیدروالکلی ریشه درخت گردو بر باکتری استرپتوکوکوس موتانس
2) تعیین میزان غلظت موثر عصاره هیدروالکلی ریشه درخت گردو بر باکتری استرپتوکوکوس موتانس |
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | وزارت بهداشت و علوم پزشکی
وزارت جهاد کشاورزی |
| تعریف واژه های تخصصی | |
| نوع مطالعه | توصیفی |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | کیت های باکتریایی تهیه شده از بانک میکروب انیستتو پاستور تهران ، حاوی باکتری استرپتوکوک موتانس در محیط کشت. |
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | مطالعه نیاز به تعیین حجم نمونه نداشت. |
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | انجام آزمایشات آزمایشگاهی و ثبت نتایج حاصل از آنها در فرم اطلاعاتی(ضمیمه شماره 1). |
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | 1- تهیه ی عصاره از ریشه درخت گردو
جهت تهیه عصاره مقدار 40 گرم از برگ خشک شده گیاه را به صورت پودر در 300 میلی لیتر حلال متشکل از 50 درصد آب و 50 درصد اتانول 96 درجه مخلوط کرده و بعد از 20 ساعت آن را بوسیله ی کاغذ واتمن شماره ی یک صاف نموده و سپس اتانول توسط دستگاه روتاری از عصاره خارج می شود، به طوریکه محلول نهایی باقیمانده برابر 100 میلی لیتر حاصل شود. این محلول به عنوان غلظت 100 درصد عصاره در نظر گرفته می شود و برای استریل کردن آن از فیلتر استریل 4/0 میکرو متر استفاده می-گردد17.عصاره ی ریشه درخت گردو که به این ترتیب به دست می آید تا هنگام استفاده آن فریز می شود. 2- تعیین وزن خشک عصاره: ابتدا وزن یک لوله آزمایش تعیین و پس از آن ml1 از عصاره در آن ریخته می شود، سپس محتوی لوله در دمای اتاق خشک می گردد. بعد از خشک شدن عصاره، وزن لوله آزمایش مجددا تعیین می شود. اختلاف وزن لوله معادل با وزن خشک عصاره محاسبه می شود. 3- تهیه باکتری: میکرواورگانیسم مورد استفاده سویه های بالینی و استاندارد خواهند بود. 4- آزمون ضد میکروبی عصاره: حساسیت جدایه های باکتری نسبت به عصاره های گیاهی با استفاده از روش رقت سازی در چاهک بررسی می شود. به هفت چاهک از پلیت های میکروتیتر میزان 100 میکرولیتر از محیط مایع مغذی مولر هینتون (MHB) اضافه می شود. به چاهک اول 100 میلی لیتر از محلول رقیق شده عصاره اضافه خواهد شد و پس از مخلوط کردن، 100 میکرولیتر از چاهک اول برداشته به چاهک دوم اضافه خواهد شد و بدین ترتیب تا آخرین چاهک این کار انجام می شود. از چاهک آخر 100 میکرولیتر محیط کشت خارج می شود و مقدار 100 میکرولیتر از سوسپانسیون میکروبی حاوی 107 واحد در میلی لیتر معادل 5/0 مک فارلند اضافه می-شود و در انکوباتور در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت قرار خواهد گرفت. اولین لوله ای که از رشد باکتری پس از قرار دادن در انکوباتور جلوگیری کند، به عنوان حداقل غلظت بازدارندگی(MIC:minimum inhibitory concentration) در نظر گرفته می شود و برای اطمینان از چاهک های شفاف، 10 میکرولیتر برخواهیم داشت و به محیط مولر هینتون آگار منتقل خواهیم کرد و پس از 24 ساعت، اولین رقتی که توانسته باشد 9/99 درصد باکتری را از بین ببرد به عنوان حداقل غلظت کشنده (MBC:mimimum Bactericidal concentration) نشان داده خواهد شد18. کنترل ها نیز به شرح زیر خواهند بود: -محیط کشت و عصاره بدون باکتری عدم رشد -محیط کشت و آب مقطر با باکتری رشد -محیط کشت و کلرهگزیدین(شاهد مثبت) با باکتری عدم رشد |
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | در پایان مطالعه اطلاعات حاصل از بررسی های آزمایشگاهی، داده ها توسط روش های آماری یعنی میانگین، فراوانی، انحراف معیار و با استفاده از جداول و نمودار ها توسط نرم افزار آماری SPSS نسخه ی 20 توصیف می گردد. در نهایت داده ها به صورت زیر توصیف می گردند:
جدول شماره - تعیین حداقل غلظت عصاره ریشه درخت گردو بر بازدارندگی و کشندگی باکتری استرپتوکوک موتانس غلظت عصاره نوع فعالیت MIC MBC |
| ملاحظات اخلاقی | ندارد |
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | ندارد |
| کلمات کلیدی | استرپتوکوکوس موتانس، عصاره هیدروالکلی، ریشه درخت گردو
streptococcus mutans, hydro alcoholic extract, Juglandaceae |
| فهرست منابع و مراجع | 1. Schuster GS, Topazian RG, Goldberg HG, Hupp JR. Oral & Maxillofacial infections. 4th ed. Philadelphia: WB Saunders Co; 2002.P 30-31.
2. Theondor MR, Harold OH, Ward J, Swift JR. Art and science of operative dentistry. 5th ed. St. Louis Missouri: The CV Mosby Co; 2006.P 67-70. 3. Saswati B, Indranil B. Role of HtrA in surface protein expression and biofilm formation by Streptococcus mutans. Infec Immun 2005; 73 (10): 6923-6934. 4. Walsh LJ. The current status of low level laser therapy in dentistry. Aust Dent J 1997; 42 (9): 302–306. 5. Fabrican DS, Farnsworth NR. The value of plants used in traditional medicine for drug discovery. Environ Health Perspect (EHP) 2001; 109 (1): 69–75. 6. Sanei As, Pour esmaeel HR, Ebadifar A, Madahi A. Antimicrobial effect of 7 plants extraction on a few of pathogen microoroganism of oral cavity. Pajuhande J 2009; 76 : 22-25. 7. Noumi E, Snoussi M, Hajlaoui H, Valentin E, Bakhrouf A. Antifungal properties of Salvadora persica and Juglans regia L. extracts against oral Candida strains. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2010; 29: 81-88. 8. Isanga J, Zhang GN. Biological active components and nutraceuticals in peanuts and related products. Food Rev. Intl 2007; 23: 123-140. 9. Miraliakbari H, Shahidi F. Oxidative stability of tree nut oils. J Agric Food Chem 2008; 56(12): 4751-9. 10. Reiter RJ, Manchester LC, Dun-Xian Tan MD. Melatonin in walnuts:influence on levels of melatonin and total antioxidant capacity of blood. Nutrition 2005; 21: 920-924. 11. Amaral JS, Alves M, Seabra R, Oliveira B. Vitamin E composition of walnuts (Juglans regia L.): a 3-year comparative study of different cultivars. J.Agric.Food. Chem 2005; 53: 5467-5472. 12. Li L, Tsao R, Yang R, Liu C, Zhu H, Young JC. Polyphenolic profiles and antioxidant activities of heartnut (Juglans ailanthifolia var. cordiformis) and Persian walnut (Juglans regia L.). J Agric Food Chem 2006; 54: 8033-8040. 13. عظیمی لیسار، حمیدرضا؛ نیاکان، محمد؛ محمدتقی، گلنوش؛ جعفریان، زهرا؛ نجفی، فرهود؛ مصطفوی زاده، سید مصطفی. «مقایسه تاثیر غلظت های مختلف سیاه دانه و نانوسیلور بر میزان رشد باکتری های دهانی استرپتوکوکوس موتانس و استرپتوکوکوس سنگوئیس». مجله تحقیق در علوم دندانپزشکی، زمستان 1391؛ دوره نهم، شماره 4: 186-179. 14. کرمانشاه، حمید؛ هاشمی، صدیقه السادات؛ آرامی، سکینه؛ میر صالحیان، اکبر؛ کمالی نژاد، محمد؛ کریمی، مهرداد و همکاران. «بررسی اثر ضد باکتریایی عصاره هیدروالکلی مریم گلی و پونه بر سه باکتری عامل پوسیدگی دندان در شرایط آزمایشگاهی». مجله دندانپزشکی دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، زمستان 1389؛ دوره 28، شماره 4: 237-232. 15. شعاع حسنی، علیرضا؛ حمدی، کسری؛ قائمی، امیر. «تاثیر عصاره اتیل استاتی موم زنبور عسل بر کلونیزاسیون استرپتوکوکوس موتانس». مجله علمی پژوهشی دانشگاه علوم پزشکی اراک، سال1387؛ دوره 11، شماره4: 95-87. 16. Emira Noumi, Mejdi Snoussi, Najla Trabelsi, Hafedh Hajlaoui, Riadh Ksouri, Eulogio Valentin, et al. Antibacterial, anticandidal and antioxidant activities of Salvadora persica and Juglans regia L. extracts. Medicinal Plants Research 2011; 5(17): 4138-4146. 17. اولیاء، پرویز؛ صادری، حوریه؛ نیازمند مطلوب، فاطمه؛ رضایی، محمدباقر. «بررسی اثر ضدمیکربی Zataria multifloraMatricaria و اگزاسیلین بر استافیلوکوکوس طلایی» . فصلنامة علمی - پژوهشی تحقیقات گیاهان دارویی و معطر ایران، 1385؛ دوره22، شماره 1: 26-22 . 18. سعیدی، سعیده؛ صباغ، سید کاظم؛ صبوری رباط، الهام. «بررسی فعالیت ضدمیکروبی عصاره و اسانس مورد(Myrtus Communis ( علیه سویه های استافیلوکوکوس آرئوس مقاوم به آنتی بیوتیک های انتخابی». مجله علوم پزشکی زابل، 1391، دوره 4، شماره 3: 32-21. |

| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|---|---|---|
| propozal nahaee.docx | 1393/02/21 | 114566 | دانلود |
| propozal eslahat davari.docx | 1393/03/24 | 119568 | دانلود |
| farrokhi- eslahat davari.docx | 1393/03/27 | 111904 | دانلود |
| propozal nahaee nahaee.docx | 1393/08/03 | 123326 | دانلود |
| komite akhlagh.doc | 1393/08/28 | 257536 | دانلود |