بررسی اثر آنتی باکتریال عصاره هیدروالکلی دانه هندوانه ابوجهل بر روی پاتوژن های انسانی

The anti-bacterial effect of hydroalcholic extract seeds of Citrullus colocynthis L human pathogenic bacteria


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
مجری و همکاران
مجری و همکاران
اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی
دانلود
دانلود
علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: مهسا پورجنگی

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 6854
عنوان فارسی طرح بررسی اثر آنتی باکتریال عصاره هیدروالکلی دانه هندوانه ابوجهل بر روی پاتوژن های انسانی
عنوان لاتین طرح The anti-bacterial effect of hydroalcholic extract seeds of Citrullus colocynthis L human pathogenic bacteria
نوع طرح
محل اجرای طرح
رسته مطالعاتی توصیفی(مطالعه کمی)
دانشکده/مرکز دانشکده پزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
محمد بکائیاناستاد راهنمای اول طرح دانشجویی دکترای تخصصی bokaeian.m@gmail.com
غلامرضا کمیلیاستاد راهنمای دوم طرح دانشجویی متخصصrkomeili@gmail.com
مهسا پورجنگیمجری متخصصmahsapoorjangi@YAHOO.COM

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی اثر آنتی باکتریال عصاره هیدروالکلی دانه هندوانه ابوجهل بر روی پاتوژن های انسانی
خلاصه طرح به لاتینThe anti-bacterial effect of hydroalcholic extract seeds of Citrullus colocynthis L human pathogenic bacteria
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهششواهد به جای مانده از دوران باستان نشان دهنده استفاده انسان های اولیه از گیاهان به عنوان دارو در درمان بیماری ها است. با گسترش شاخه های مختلف علوم، استفاده از مواد شیمیایی در تولید دارو، توجه محققین را به خود معطوف کرد، اما دیری نپایید که عوارض و ناکارآمدی این داروها دانشمندان را مجدداً مجبور به استفاده از ترکیبات گیاهی در درمان بیماری ها نمود(1،2) یکی از مهم ترین چالش های درمانی، مقابله با بیماری های عفونی به دلیل شیوع و گسترش بالای آن ها است. پس از شناسایی پنی سیلین در دهه 40 میلادی، و گسترش استفاده از آن در درمان، هر روزه آنتی بیوتیک های جدیدی برای درمان عفونت ها ارائه گردید. نتیجه این امر گسترش استفاده بالینی آنتی بیوتیک های طبیعی و سنتتیک در درمان عفونت های بالینی بود. استفاده بی رویه از این داروهای ضد میکروبی منجر به افزایش مقاومت های دارویی علیه آنتی بیوتیک های متفاوت در اکثر باکتری ها گردید(3). همین موضوع یکی از دلایل استفاده رو به رشد از گیاهان به عنوان مواد طبیعی کم خطر، در دسترس و ارزان قیمت، نسبت به آنتی بیوتیک های سنتتیک، در درمان عفونت های باکتریال بوده است. هم چنین این داروهای گیاهی نزد مردم دارای مقبولیت بیشتری در مصرف هستند(4،5). هندوانه ابوجهل و یا خربزه روباه که در کتب طب سنتی با نام های خنظل و مراره الحصاری و علقم نام برده شده است، یکی از گیاهان دارویی متعلق به خانواده cucurbitaceous می باشد. هندوانه ابوجهل از گیاهان بومی منطقه جنوب ایران است و در مناطق مختلف سیستان و بلوچستان به وفور یافت می شوند . میوه این گیاه دارای خاصیت مسهلی قوی با اثر قاطع است. در موارد ضعف اعمال روده، فلج امعاء و احشاء، آب آوردن انساج، انسداد و بیماری های کبدی و گاهی به عنوان قاعده آور به کار می رود. از خواص مهم دیگر این دارو، اثر ضد ویروس، میکروبی و سرطانی آن است(6، 7). در این گیاه ماده تلخ به نام کولوسنتین و کولوسنتتین وجود دارد که مصرف آن برای بیماران دیابتی توصیه شده‌است. در مطالعه Doss و همکاران نتایج نشان داد که اسانس ابوجهل مهار کننده باکتری های استافیلوکوکوس اورئوس، باسیلوس سابتی لیس، اشرشیاکلی، پسودوموناس آئروژینوزا، کلبسیلا پنومونه ای و پروتئوس میرابیلیس می باشد در حالی که عصاره متانولی آن تنها مهار کننده استافیلوکوکوس اورئوس، اشرشیاکلی و پسودوموناس آئروژینوزا است(8). در مطالعه Marzouk و همکاران حداقل غلظت مهار کنندگی عصاره ابوجهل برای باکتری های اشرشیاکلی، پسودوموناس آئروژینوزا، استافیلوکوکوس اورئوس و انتروکوکوس فیکالیس به ترتیب 20/0، 63/1، 25/3 و 63/1 میلی گرم بر میلی لیتر بوده است(9). در مطالعه Gurudeeban قطر هاله مهاری عصاره آبی ابوجهل برای باکتری های باسیلوس سابیتی لیس، استافیلوکوکوس اورئوس، استرپتوکوکوس پایوژنز، کلبسیلا پنومونه ای و سالمونلا تیفی به ترتیب 56/0±5، 52/1±13، 35/0±2، 50/0±5 و 42/0±2 بوده است(10).
Shyamala gowri بیان کرد که عصاره استون ابوجهل مهار کننده قوی پسودوموناس آئروژینوزا با قطر هاله مهاری mm14 است (11).
John peter paul نشان داد که عصاره اتانولی ابوجهل قطر هاله مهاری 7، 5 و 4 میلی متر به ترتیب در برابر باکتری های اشرشیاکلی، پروتئوس ویولگری و استافیلوکوکوس اورئوس به ترتیب داشته است (12). دیگر مطالعات هم نشان داد که عصاره آبی ابوجهل مهار کننده Erwinia amylovora و Bacillus subtilis قطر هاله مهاری 14/0±33/8 میلی متر می باشد(13). در مطالعه L. Alkamel نتایج نشان داد عصاره آبی ابوجهل در غلظت 128 میلی گرم بر میلی لیتر قطر هاله های مهاری 5/0±12، 5/0±11، 5/0±11 و 5/0±12 میلی متر در برابر باکتری های استافیلوکوکوس، استرپتوکوکوس پایوژنز، پسودوموناس آئروژینوزا و اشرشیاکلی به ترتیب ایجاد کرده است (14). در مطالعات قبلی بیشتر بر روی میوه و همچنین عصاره های اتانولی و آبی بررسی شده است اما در این مطالعه ما بر آن امدیم که اثر آنتی باکتریال عصاره هیدروالکلی دانه هندوانه ابوجهل برروی پاتوژن های انسانی بررسی کنیم.
سوالات و / یا فرضیات پژوهشتاثیرعصاره گیاهی دانه هندوانه ابوجهل بر روی باکتری های مورد مطالعه چگونه است؟
هدف کلی طرحبررسی اثر آنتی باکتریال عصاره هیدروالکلی دانه هندوانه ابوجهل بر روی پاتوژن های انسانی
اهداف اختصاصی1-تعیین توزیع فراوانی حساسیت باکتری های استرپتوکوکوس پایوژنز، استرپتوکوکوس پنومونه ای، استافیلوکوکوس ساپروفتیکوس، هافنیا الوی، اسینتو باکتر بومانی، انتروکوکوس فیکالیس، پروتئوس میرابیلیس، سراشیا مارسنسیس و استافیلوکوکوس اورئوس به آنتی بیوتیکهای مرسوم
2-تعیین توزیع فراوانی حساسیت باکتری های استرپتوکوکوس پایوژنز، استرپتوکوکوس پنومونه ای، استافیلوکوکوس ساپروفتیکوس، هافنیا الوی، اسینتو باکتر بومانی، انتروکوکوس فیکالیس، پروتئوس میرابیلیس، سراشیا مارسنسیس و استافیلوکوکوس اورئوس به عصاره هیدروالکلی دانه هندوانه ابوجهل
3- مقایسه حساسیت باکتری های استرپتوکوکوس پایوژنز، استرپتوکوکوس پنومونه ای، استافیلوکوکوس ساپروفتیکوس، هافنیا الوی، اسینتو باکتر بومانی، انتروکوکوس فیکالیس، پروتئوس میرابیلیس، سراشیا مارسنسیس و استافیلوکوکوس اورئوس به آنتی بیوتیکهای مرسوم و عصاره هیدروالکلی دانه هندوانه ابوجهل
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح
تعریف واژه های تخصصیندارد.
نوع مطالعهتوصیفی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)سویه ها باکتری استاندارد می باشد.

Streptococcus pyogenes ATCC® 19615™, Streptococcus pneumoniae ATCC 49619,S. saprophyticus ATCC®15305,Hafnia alvei ATCC 51873,Acinetobacter. baumannii ATCC 19606,Enterococcus faecalis ATCC 29212,Proteus mirabilis ATCC 35659,Serratia marcescens ATCC 274, Staphylococcus aureus ATCC® 25923. T
حجم نمونه و روش محاسبه آن- با استفاده از جدول آنتی بیوگرام و اندازه گیری قطر هاله عدم رشد، مقاوم حساس یا نیمه حساس بودن باکتری به آنتی بیوتیک های مرسوم مشخص می گردد.
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)استفاده از باکتری های استاندارد
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)بر اساس اطلاعات ثبت شده در چک لیست
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)- تهیه ی عصاره ی هیدروالکلی دانه هندوانه ابوجهل
تهیه ی عصاره ی دانه هندوانه ابوجهل با همکاری دانشگاه سیستان و بلوچستان در گروه زیست شناسی فراهم می شود.
جهت تهیه عصاره مقدار 40 گرم از دانه خشک شده گیاه را به صورت پودر در 100 میلی لیتر حلال متشکل از اتانول 86 درجه مخلوط کرده و بعد از 20 ساعت آن را بوسیله ی کاغذ واتمن شماره ی یک صاف نموده و سپس اتانول توسط دستگاه روتاری از عصاره خارج شد به طوریکه محلول نهایی باقیمانده برابر 10 میلی لیتر حاصل گردید این محلول به عنوان غلظت 100 درصد عصاره در نظر گرفته شد و برای استریل کردن آن از فیلتر استریل 4/0 میکرو متر استفاده گردید(15).
عصاره دانه هندوانه ابوجهل که به این ترتیب به دست می آید تا هنگام استفاده آن فریز می شود.
2-تهیه باکتری ها:باکتری ها به صورت آماده از شرکت آرین مهر تهیه می گردد.
باکتری ها شامل Streptococcus pyogenes ATCC® 19615™,Streptococcus pneumoniae ATCC 49619,S. saprophyticus ATCC®15305,Hafnia alvei ATCC 51873, Acinetobacter. baumannii ATCC 19606,Enterococcus faecalis ATCC 29212,Proteus mirabilis ATCC 35659,Serratia marcescens ATCC 274, Staphylococcus aureus ATCC® 25923
می باشند.
3- تعیین حساسیت باکتری به آنتی بیوتیک های مرسوم
باکتری های فریز شده را ساب کالچر می دهیم و بعد از انکوباسیون از باکتری سوسپانسیونی با کدورت یکسان با 5/0 واحد مک فارلند تهیه می کنیم، سپس سوسپانسیون حاصل را یک به 10 رقیق می کنیم.
از رقت حاصل 1/0 میلی لیتر برداشته و بر روی محیط کشت مناسب بر اساس نوع باکتری به صورت سفره ای کشت می دهیم. سپس دیسک های حاوی آنتی بیوتیک را روی محیط های کشت قرار می دهیم.
بعد از انکوباسیون با استفاده از جدول آنتی بیوگرام و اندازه گیری قطر هاله عدم رشد، مقاوم حساس یا نیمه حساس بودن باکتری به آنتی بیوتیک های مرسوم که شامل ( اریترومایسین، سفکسیم، سفتازیدیم، تتراسیکلین، آمپی سیلین و آمیکاسین) مشخص می گردد.
تعیین MIC و MBC عصاره:
حساسیت جدایه های باکتری نسبت به عصاره های گیاهی با استفاده از روش رقت سازی در چاهک بررسی شد. . به هفت چاهک از پلیت های میکروتیتر میزان 100 میکرولیتر از محیط مایع مغذی مولر هینتون (MHB) اضافه شد. به چاهک اول 100 میلی لیتر از محلول رقیق شده عصاره اضافه شده و پس از مخلوط کردن 100 میکرولیتر از چاهک اول برداشته به چاهک دوم اضافه کرده و بدین ترتیب تا آخرین چاهک این کار انجام داده شد از چاهک آخر 100 میکرولیتر محیط کشت خارج کرده مقدار 100 میکرولیتر از سوسپانسیون میکروبی حاوی 107 واحد در میلی لیتر معادل 5/0 مک فارلند اضافه شده و در انکوباتور در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت قرار گرفت. اولین لوله ای که از رشد باکتری پس از قرار دادن در انکوباتور جلوگیری کرده است به عنوان (MIC) در نظر گرفته شده و برای اطمینان از چاهک های شفاف 10 میکرولیتر برداشته به محیط مولر هینتون آگار منتقل کرده و پس از 24 ساعت اولین رقتی که توانسته 9/99 درصد باکتری را از بین ببرد به عنوان حداقل غلظت کشنده نشان داده می شود(16).
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)در پایان مطالعه اطلاعات حاصل از بررسی های آزمایشگاهی، داده ها توسط روش های آماری یعنی میانگین، فراوانی، انحراف معیار با استفاده از جداول و نمودار ها توسط نرم افزار آماری SPSS ver. 17 توصیف می گردد.
ملاحظات اخلاقی چون حیطه پژوهش میکروبی است. ملاحظات اخلاقی ندارد
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهاندارد.
کلمات کلیدیهندوانه ابوجهل، آنتی باکتریال، پاتوژن های انسانی
anti-bacterial, Citrullus colocynthis L , human pathogen
فهرست منابع و مراجع1- Marjorie MC. Plant Products as Antimicrobial Agents. Clin Microb Rev 1999; 12: 564-582.
2- Thomson WAR. Medicines from the Earth. Maidenhead, United Kingdom: McGraw-Hill Book Co.; 1978.
3- Weinstine RA. Controlling antimicrobial resistance in hospitals: Infection control and use of antibiotics. Emerg Infect Dis 2001; 7: 188-192.
4- Mosaddegh M. and Naghibi FI. Traditional Medicine: Past & Present. Traditional Medicine & Materia medica. Vol. 1. Tehran, Iran; Published TMRC; 2002: p:2-20.(Persian).
5- The promotion & development of traditional medicine- Report of a WHO meeting” WHO Report series, No.622, Switzerland. 1978; 8-13: 36-9.

6. میرحیدر، حسین. معارف گیاهی: کاربرد گیاهان در پیشگیری و درمان بیماری ها.
. ، چاپ دوم، جلد سوم، تهران: دفتر نشر فرهنگ اسلامی، 1375، 176-182
7- Konoshima TA, Takaski MB, Kozuka MO. Inhibitory effects of Cucurbitane triterpenoids on epstein-barr virus activation and two-stage carcinogenesis of skin tumor. Biol Pharm Bull 1995; 18: 284-7.
8. Doss A , Vijayasanthi M, Anand SP, Parivuguna V, Venkataswamy R.Screening of Antimicrobial activity of essential oil and methanol extracts
of Citrullus colocynthis (L.) Schrad. South As. J. Biol. Sci. 2011; 1(1): 7- 15
9. Marzouka B, Marzoukb Z, Décorc R, Edziri a H, Halouid E, Feninad N, Aouni M. Antibacterial and anticandidal screening of Tunisian Citrullus colocynthis Schrad. from Medenine. Journal of Ethnopharmacology, 2009; 125: 344–349
10. Gurudeeban S, Rajamanickam E, Ramanathan T and Satyavani. Kantimicrobial activity of Citrullus colocynthis in gulf of mannar. International Journal of Current Research, 2011; 2: 078-081
11. Shyamala growri S, Priyavardhini S, Vasantha K, Umadevi M. Antibacterial activity on Citrullus colocynthis leaf extracts. Ancient Science of Life 2009; 29(1): 12-13.
12- John Peter Paul J. Studies on Antimicrobial Efficiency of Citrullus colocynthis (L.) Schrad: A Medicinal Plant. Ethnobotanical Leaflets 12: 944-47. 2008.

13- Mehni AM, Ketabchi S, Shahidi Bonjar GH.

Antibacterial activity and polyphenolic content of Citrullus colocynthesis

International Journal of Biosciences 2014; 4(3):190-196.

14- L. Alkamel M. Antimicrobial activity of aqueous extract of Citrullus colocynthis L.fruit. Tikrit Journql of Pharmaceutical Scinences 2005, 1(2):9- I 5
15- پرویز اولیاء ، حوریه صادری، فاطمه نیازمند مطلوب و محمدباقر رضائی . بررسی اثر ضدمیکربی Zataria multifloraMatricariaو اگزاسیلین بر استافیلوکوکوس طلایی . فصلنامة علمی - پژوهشی تحقیقات گیاهان دارویی و معطر ایران1385 . - جلد 22 شماره 1 ، صفحه 26-22 .
16. سعیدی س، صباغ س.ک، رباط کریم الف. بررسی فعالیت ضدمیکروبی عصاره و اسانس مورد(Myrtus Communis ( علیه سویه های استافیلوکوکوس آرئوس مقاوم به آنتی بیوتیک های انتخابی. مجله علوم پزشکی زابل، 1392، (3) 4، 32-21.
معرفی پژوهش/ اهداف پژوهش
(عین عبارت هدف پروپوزال را کپی نکنید. بلکه با جملاتی که برای مردم قابل فهم باشد (برای سواد حدود پنجم ابتدایی )هدف را برای شرکت کنندگان توضیح دهید.) در تمام این متن در صورتیکه شرکت کننده کودک یا فرد فاقد ظرفیت تصمیم گیری است باید مواردیکه منظور از "من"، فرد شرکت کننده بوده است به "کودک" یا "فرد تحت سرپرستی من" اصلاح شود و مواردیکه منظور از "من"، رضایت دهنده است به من به عنوان "ولی" یا "قیم قانونی" اصلاح شود.
خون گیری
(آیا طرح شما نیاز به خونگیری دارد یا خیر)
نحوه همکاری/ مزایا ی طرح
(در این بخش برای شرکت کنندگان به زبان ساده توضیح دهید که: چه مداخله ای بر روی آنها صورت میگیرد. چه اقدامات پاراکلینیکی بر روی آنها انجام میشود. چه نمونه ای و با چه حجمی از آنها میگیرید در این مدت چند نوبت مراجعه باید داشته باشند و به چه فواصلی چه اقداماتی را در پیگیری آنها انجام میدهید. (حتی میتوانید سود بالقوه ای که شرکت کنندگان میتوانند از شرکت در این پژوهش ببرند بنویسید. این سود میتواند شرح احتمال درمان یا تشخیص بهتر بیماریشان، دریافت خدمات سلامت رایگان و یا پرداخت مشوق مالی در ازای جبران همکاریشان باشد)
عوارض جانبی
(منظور عوارض و میزان احتمال بروز آنها در این مطالعه است)
جبران عوارض احتمالی
(برای آنکه شرکت کننده بتواند ارزیابی مناسبی از سود و زیان شرکت در پژوهش شما داشته باشد لازم است بتواند سود و زیان مداخلات معمول و مداخلات این پژوهش را مقایسه کند. به عنوان مثال میزان موفقیت و میزان عوارض هریک را مقایسه کند.) - او باید بداند كه اگر در حين و بعد از انجام پژوهش هم هر مشكلي اعم از جسمي و روحي به علت شرکت در اين پژوهش برایش پيش آمد درمان عوارض، و هزينه‌هاي آن و غرامت مربوطه بر عهده مجري خواهد بود.
هزینه های مربوط به انجام طرح تحقیقاتی
(تمام مداخلات پژوهشی باید برای بیمار رایگان باشد و بیمار بداند شامل چه مواردی هستند. )
روش های جایگزین
در صورت عدم تمایل به شرکت در مطالعه چه روش های درمانی برای بیمار ارائه خواهد شد
محرمانه بودن
بیمار باید بداندکه دست اندر كاران اين پژوهش، كليه اطلاعات مربوط به او را نزد خود به صورت محرمانه نگه‌داشته و فقط اجازه دارند نتايج كلي و گروهي اين پژوهش را بدون ذکر نام و مشخصات بیمار منتشر كنند. و كميته اخلاق در پژوهش با هدف نظارت بر رعایت حقوق وی مي‌تواند به اطلاعات ایشان دسترسي داشته باشد.
پاسخگویی به پرسش ها
در این بخش نام و اطلاعات دسترسی فردی از عوامل پژوهش را که بتواند اطلاعات صحیح و کافی در اختیار شرکت کنندگان قرار دهند و در مورد عوارض و نگرانیها راهنمایی لازم را ارائه دهند ذکر شود
حق نپذیرفتن یا انصراف
بیمار باید بداند که شرکت اودر اين پژوهش کاملاً داوطلبانه است و مجبور به شرکت در اين پژوهش نيست و در صورت عدم شرکت از مراقبت‌هاي معمول تشخيصي و درماني محروم نخواهد شد او باید بداند كه حتي پس از موافقت با شركت در پژوهش مي‌تواند هر وقت كه بخواهد، پس از اطلاع به مجري، از پژوهش خارج شود و خروج اواز پژوهش باعث محرومیت از دریافت خدمات درمانی معمول برای اونخواهد شد.
رضایت
او باید بداند که اگر اشکال يا اعتراضي نسبت به دست اندركاران يا روند پژوهش دارد مي تواند با كميته اخلاق در پژوهش دانشگاه تماس گرفته و مشکل خود را به صورت شفاهي يا كتبي مطرح نمايد. در انتهای فرم قید گردد : اينجانب موارد فوق‌الذکر را خواندم و فهميدم و بر اساس آن رضايت آگاهانه خود را براي شركت در اين پژوهش اعلام مي‌کنم. اينجانب ……………… خود را ملزم به اجراي تعهدات مربوط به مجري در مفاد فوق دانسته و متعهد مي‌گردم در تأمين حقوق و ايمني شركت كننده در اين پژوهش تلاش نمايم
پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
file-.jpg1393/03/07125410دانلود
file-2.jpg1393/03/07112248دانلود
file-3.jpg1393/03/07105620دانلود
p bo4.doc1393/04/22271872دانلود