چاپ صفحه |  صفحه نخست سامانه |  مجری و همکاران |  اطلاعات تفضیلی |  دانلود | علوم پزشکی زاهدان |
| کد طرح | 6913 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی میزان آلفا آمیلاز بزاق در افراد مبتلا به هرپس دهانی راجعه |
| عنوان لاتین طرح | Evaluation of salivary alpha-amylase levels in patients with recurrent oral herpes |
| نوع طرح | کاربردی |
| محل اجرای طرح | دانشکده دندانپزشکی |
| رسته مطالعاتی | کاربردی |
| دانشکده/مرکز | دانشکده دندانپزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز | 365 |
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| ماریه هنرمند | مجری | استاد راهنما | دکترای تخصصی | honarmand56@yahoo.com |
| علیرضا نخعی | مشاور | استاد مشاور | دکترای تخصصی | alireza_nakhaee@yahoo.com |
| شیرین شایسته فلک | دانشجو | shayesteh_shirin@yahoo.com |
| عنوان | متن |
|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | بررسی میزان آلفا آمیلاز بزاق در افراد مبتلا به هرپس دهانی راجعه |
| خلاصه طرح به لاتین | Evaluation of salivary alpha-amylase levels in patients with recurrent oral herpes |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | هرپس دهانی راجعه یکی از زخمهای رایج دهان است که بصورت یک یافته معمول در میان 20-40٪ بالغین مشاهده میشود که بصورت زخمهای دردناک بیشتر روی مخاط لبها ظاهر میشوند این زخمها میتوانند آزار زیادی برای بیمار ایجادکنند و با فعالیتهای روز مره بیمار تداخل کنند1.
مکانیسم ایجاد هرپس دهانی راجعه به این نحو است که ویروس هرپس سیمپلکس 1 (1HSV) پس از اولین تماس و تلقیح پوستی و مخاطی وارد اکسونهای اعصاب حسی میشود و ایجاد عفونت خفته و مزمن در گانگلیونهای حسی مینماید و سپس با عوامل مستعد کننده مانند استرس و تضعیف سیستم ایمنی بروز مینماید1. از طرفی بزاق به عنوان یک عنصر مهم و حیاتی برای حفظ سلامت مخاط دهان در نظر گرفته شده است2. جریان بزاق و ترکیبات آن تأثیر عمدهای در تشکیل جرم، بیماری پریودنتال و پوسیدگیها ایفا میکند. بزاق نقش مهمی در کنترل pH دهان دارد3. α- آمیلاز بزاقی (SAA) یکی از فراوانترین مواد بزاق است و حدود 10-20٪ از کل محتوای پروتئین بزاق را تشکیل میدهد4. SAA از سلولهای آسیناراپیتلیالی بسیار تمایز یافته غدد بزاقی و عمدتاً از غدد پاروتید تولید میشوند5. SAA کمک به هضم مواد غذایی از طریق هیدرولیز نشاسته به گلوکز و مالتوز میکند6. مشاهدات اخیر نشان میدهد ارتباطی بین ترشح SAA و شرایط پراسترس وجود دارد و در هر دو شرایط استرس فیزیکی و روانی افزایش غلظت این آنزیم دیده میشود5. در مطالعهای که توسط Shirtcliff و همکاران در سال 2009 در دانشگاه نیواورلئان انجام شد ارتباطی معناداری بین استرس دوران کودکی با سطح بالای آنتی بادی به ویروس هرپس سیمپلکس نوع 1 وجود داشت7. در مطالعهای که در سال 2011 توسط Roizman انجام شد ارتباطی بین استرس فیزیکی و تاثیر آن بروی فعال شدن ژن ویروس سیمپلکس 1 (بهصورت دورهای) یافت شد8. در مطالعهی Rashkova و همکاران در سال 2012 ارتباط بین میزان آلفاآمیلاز بزاق با استرسهای مرتبط با اضطراب را در 30 بیمار بررسی کردند. میزان آلفاآمیلاز بزاق در شرایط استرس شدید کمتر از شرایط نرمال بود که این تفاوت از نظر آماری معنی دار بود9. در پژوهش Furlan و همکاران در سال 2012 تعداد 31 کودک را از نظر میزان کورتیزول بزاقی، آلفاآمیلاز بررسی کردند. در این مطالعه کورتیزول و سطح آمیلاز قبل از پروفیلاکسی فیشور سیلانت نسبت به بعد از آن بالاتر مشاهده شد10. در مطالعهای که توسط Unno در سال 2013 در دانشگاه شیزوکا ژاپن انجام شد اثر همبستگی مثبتی بین فعالیت آلفاآمیلاز بزاق و استرس ذهنی دانش آموزان یافت شد11. با توجه به اینکه بروز هرپس در شرایط پر استرس بیشتر دیده میشود و در برخی مطالعات به تغییرات میزان آلفاآمیلاز در شرایط پر استرس اشاره شده است، این مطالعه با هدف مقایسه میزان آلفاآمیلاز بزاق در افراد مبتلا به هرپس دهانی راجعه و افراد سالم طراحی گردید. |
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 1- میزان آلفاآمیلاز بزاق در بین افراد مبتلا به هرپس دهانی راجعه و افراد سالم متفاوت است.
2- میزان آلفاآمیلاز بزاق در بین افراد مبتلا به هرپس در دوره عود و بهبودی متفاوت است. |
| هدف کلی طرح | تعیین میزان آلفاآمیلاز بزاق در بیماران مبتلا به هرپس راجعه دهانی |
| اهداف اختصاصی | 1- مقایسه میزان آلفاآمیلاز بزاق در بین افراد مبتلا به هرپس و افراد سالم
2- مقایسه میزان آلفاآمیلاز بزاق در بین افراد مبتلا به هرپس در دوره عود و بهبودی |
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | دانشگاه علوم پزشکی زاهدان |
| تعریف واژه های تخصصی | آلفا آمیلاز بزاق:یکی از مهمترین آنزیم های بزاق است که حدود 10-20% از کل محتوای پروتئینبزاق را تشکیل می دهدو کمک به هضم مواد غذایی از طریق هیدرولیز نشاسته به گلوکز و مالتوز می کند7.
|
| نوع مطالعه | مورد - شاهدی |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | جامعه مورد بررسی شامل بیماران مراجعه کننده به دانشکده دندانپزشکی که دارای هرپس راجعه دهانی هستند و گروه کنترل افرادی فاقد هرگونه زخم دهانی و بیماری سیستمیک میباشند.
معیار ورود به مطالعه: 1. بیماران دارای هرپس دهانی راجعه 2. گروه کنترل نیز نباید سابقهای از هرگونه زخم دهانی و یا بیماری سیستمیکی را ذکر کنند. 3. داشتن سن 40-20 سال معیار خروج از مطالعه: 1. مصرف دخانیات (سیگار، قلیان و ...) 2. وجود هر نوع ضایعه دهانی و دندانی بجز هرپس دهانی 3. وجود بیماریهای سیستمیک و یا مصرف دارو |
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | بر اساس فرمول حجم نمونه و مقاله رفرنس 12 محاسبه شده 24 نفر می باشد که حجم نمونه در هر گروه 30 نفر تعیین شد.
|
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | آسان در دسترس کلیه افرادی که شرایط ورود به مطالعه را داشته باشند تا رسیدن به حجم نمونه به مطالعه وارد خواهند شد. |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | با استفاده از فرم اطلاعاتی میزان آلفاآمیلاز هر فرد در هر گروه ثبت میشود (فرم ضمیمهی 1). |
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | در این مطالعه موردی – شاهدی از افراد مراجعه کننده به کلینیک دانشکده دندانپزشکی زاهدان در سال 1393، بیمارانی که دارای هرپس دهانی باشند و معیارهای ورود به مطالعه را داشته باشند، پس از کسب رضایت آگاهانه از بیمار (فرم ضمیمهی 2) نمونه بزاق غیرتحریکی در زمان ابتلا به هرپس و در زمانی که زخم آن کاملاً بهبود یافته باشد، گرفته میشود. گروه کنترل نیز از نظر سن و جنس با گروه مورد هماهنگ خواهند شد. افراد بایستی 90 دقیقه قبل از نمونهگیری از خوردن و آشامیدن و مسواک زدن اجتناب کنند. تمام نمونهها 11-9 صبح توسط دانشجو جمعآوری میشود. بزاق غیر تحریکی از تمام افراد گروه مورد و شاهد به روش Spitting جمعآوری میشود. بعد از جمعآوری بزاق در لوله آزمایش، درب آن با پارافیلم بسته و کدگذاری میشود و به آزمایشگاه بیوشیمی دانشگاه علوم پزشکی زاهدان منتقل میشود. و برای تعیین غلظت آلفاآمیلاز، نمونهها در شرایط 20- درجه سانتیگراد تا زمان اجرای آزمایش نگهداری میشوند.
برای اندازه گیری میزان فعالیت آنزیم آلفا آمیلاز بزاق، ابتدا نمونه های فریز شده به مدت حدود نیم ساعت در دمای آزمایشگاه قرار میگیرند ، سپس عمل سانتریفوژ با دورrpm 3500 به مدت 20 دقیقه بر روی آنها انجام و مایع رویی و شفاف حاصل به وسیله سمپلرهای حجمی مناسب به میکروتیوب های اپندروف منتقل می شوند. مشخصات هر نمونه بر روی میکروتیوب درج می گردد. بعد از این مرحله، اندازه گیری فعالیت آنزیم آلفا آمیلاز بزاقی با استفاده از کیت شرکت پارس آزمون و دستگاه اسپکتروفتومتر انجام می شود. تعیین فعالیت آنزیم آلفا آمیلاز بزاق براساس روش مدیفیه شده Caraway starch-iodine method انجام می شود. اصول آزمایش بدین صورت است که آنزیم آمیلاز با هیدرولیز نمودن سوبسترای نشاسته، آن را به مالتوز و مقدار کمی ساکارید تبدیل می کند. در این روش از مشتق نشاسته آمیلوز به عنوان سوبسترا استفاده می شود. مشتق نشاسته آمیلاز در مدت زمان معین تحت تاثیر آمیلاز موجود در نمونه قرار می گیرد. پس از افزایش ید و توقف واکنش، کاهش جذب حاصل که متناسب با فعالیت آنزیم می باشد در طول موج 660 نانومتر اندازه گیری می شود. برای تعیین فعالیت آلفا آمیلاز بزاقی مقدار 1 میلی لیتر سوبسترای نشاسته به مدت 5 دقیقه در بن ماری 37 درجه سانتیگراد قرار داده می شود. سپس 20 میکرولیتر از نمونه بزاق سانتریفوژ شده ، به آن اضافه می گردد. بعد از مخلوط کردن نمونه به وسیله دستگاه میکسر ، با استفاده از کرونومتر دقیقا به مدت 5/7 دقیقه، نمونه در بن ماری 37 درجه سانتیگراد قرار داده می شود. بعد از این مدت ، بلافاصله واکنش با افزودنml 1 محلول کارید و 3 میلی لیتر آب مقطر متوقف می گردد. در لوله بلانک هیچ نمونه بزاقی اضافه نمی شود ولی سایر مراحل آزمایش مشابه لوله آزمایش انجام می گیرد. در این مرحله بعد از مخلوط کردن مجدد، جذب نمونه ها و بلانک در طول موج 660 نانومتر در مقابل آب مقطر خوانده خواهد شد. در این روش مدت ثبات رنگ ایجاد شده 60 دقیقه می باشد. میزان فعالیت آنزیم آمیلاز در نمونه های بزاق به وسیله فرمول زیر محاسبه می شود. = فعالیت آمیلاز بزاق (واحد بین المللی در لیتر) |
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | - مقایسه میزان آلفاآمیلاز بزاق در افراد مبتلا به هرپس با افراد سالم
آلفا آمیلاز گروه میانگین انحراف معیار P-valuue مورد شاهد تمامی اطلاعات بدست آمده با استفاده از نرم افزار SPSS19 و آزمون آماری t-test تجزیه و تحلیل میگردد. |
| ملاحظات اخلاقی | راهنمای اخلاقی پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی ، کدهای 1-2-3-4-5-7-8-10-11-12و فصل 4 (کد 1-2-3-4-5) |
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | عدم همکاری بیماران که بایستی تا رسیدن به حجم مورد نظر بیمار جدید پذیرش شود. |
| کلمات کلیدی | آلفا آمیلاز، هرپس دهانی راجعه ، بزاق
alpha-amylase, recurrent oral herpes, saliva |
| فهرست منابع و مراجع | 1- Greenberg MS, Glick M. Burkets Oral medicine diagnosis and treatment.11th ed. Philadelphia: WB Saunders; 2008 .40-44
2- Todorovic T, Dozic I Pavlica D Markov-ic DBrajovic G and Ivanovic M. Use of saliva as a diagnostic fluid in dentistry. Srp Arh Celok Lek 2005; 133(7): 372-378. 3- Samaranayake L. Saliva as a diagnostic fluid. Int Dent J 2007; 57(5):295-9. 4- Baum BJ. Principles of saliva secretion. Ann N Y Acad Sci 1993; 694: 17-23. 5- Arhakis A, Karagiannis V, Kalfas S. Salivary alpha-amylase activity and salivary flow rate in young adults. Open Dent J 2013; 7:7-15. 6- Behringer V, Deschner T, Möstl E, Selzer D, Hohmann G. Stress affects salivary alpha-Amylase activity in bonobos. PhysiolBehav 2012; 105(2):476-82. 7- Shirtcliff EA, Coe CL, Pollak SD. Early childhood stress is associated with elevated antibody levels to herpes simplex virus type 1. Proc Natl Acad Sci U S A. 2009; 106(8):2963-7. 8- Roizman B. The checkpoints of viral gene expression in productive and latent infection: the role of the HDAC/CoREST/LSD1/REST repressor complex. J virol. 2011; 85(15):7474-82 . 9- Rashkova MR, Ribagin LS, TonevaNG. Correlation between salivary alpha-amylase and stress-related anxiety. Folia Med (Plovdiv) 2012; 54(2):46-51. 10- Furlan NF, Gavião MB, Barbosa TS, Nicolau JCastelo PM. Salivary cortisol, alpha-amylase and heart rate variation in response to dental treatment in children. J ClinPediatr Dent 2012; 37(1):83-7. 11- Unno K, Tanida N, Ishii N, Yamamoto H, Iguchi K, Hoshino M, et al. Anti-stress effect of theanine on students during pharmacy practice: positive correlation among salivary alpha- amylase activity, trait anxiety and subjective stress. Pharmacol Biochem Behav 2013;111:128-35. 12- Panchbhai AS, Degwekar SS, Bhowte RR. Estimation of salivary glucose, salivary amylase, salivary total protein and salivary flow rate in diabetics in India. Journal of oral science. 2010 Sep;52(3):359-68 . |
| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|---|---|---|
| PROPOZAL.doc | 1393/03/15 | 224256 | دانلود |
| PROPOZAL.doc | 1393/04/30 | 279040 | دانلود |
| eslahe shora drshayeste.doc | 1393/08/10 | 256000 | دانلود |
| komite akhlagh.doc | 1393/10/14 | 256000 | دانلود |
| propozal eslah shode komeite akhlagh.doc | 1393/11/13 | 255488 | دانلود |
