بررسی ظهور پروتئین mmp10 (ماتریکس متالوپروتیناز10) در لیکن پلان دهانی

Evaluation of matrix metalloproteainase 10 expression in oral lichen planus


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
مجری و همکاران
مجری و همکاران
اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی
دانلود
دانلود
علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: مسعود میری مقدم

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 6918
عنوان فارسی طرح بررسی ظهور پروتئین mmp10 (ماتریکس متالوپروتیناز10) در لیکن پلان دهانی
عنوان لاتین طرح Evaluation of matrix metalloproteainase 10 expression in oral lichen planus
نوع طرح
محل اجرای طرح
رسته مطالعاتی توصیفی- تحلیلی
دانشکده/مرکز دانشکده دندانپزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
مسعود میری مقدممجری دکترای دندانپزشکی masoud.miri72@gmail.com
حمیده کدهاستاد راهنمای اول طرح دانشجویی دکترای تخصصی h_a_kade@yahoo.com
شیرین سراوانیمشاور دکترای تخصصی shirin.saravani@yahoo.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی ظهور پروتئین mmp10 (ماتریکس متالوپروتیناز10) در لیکن پلان دهانی
خلاصه طرح به لاتینEvaluation of matrix metalloproteainase 10 expression in oral lichen planus
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشلیکن پلان یک ختلال اتو ایمیون با واسطه لنفوسیتهای Tمی باشد که انتی ژنهای خودی روی کراتینوسیتها را به عنوان عامل بیگانه تلقی کرده و منجر به التهاب و مرگ سلولهای کراتینوسیت می شود. فرم دهانی لیکن پلان یک بیماری التهابی مزمن با اتیولوژی ناشناخته است که حدود 2% از جامعه را مبتلا می کند.1این بیماری معمولا در سن 50-70 سال مشاهده می شودو در بچه ها خیلی نادر است.خانم ها بیشتر مبتلا می شوند و ضایعات بیشتر در مخاط باکال(90%)،زبان(30%)و لثه(13%) ایجاد می شوند.2تا کنون 6 فرم بالینی لیکن پلان دهانی توصیف شده است ولی یک طبقه بندی بالینی ساده تر شامل 3فرم بالینی رتیکولار،اتروفیک و اروزیو می شود.1 در نمای هیستوپاتولوژیک لیکن پلان تخریب سلولهای لایه ی بازال به همراه اپوپتوز کراتینوسیتها، یک ارتشاح لنفوسیتیک نواری شکل متراکم در حد فاصل بین اپیتلیوم و همبند، نواحی موضعی از افزایش تولید کراتین در اپیتلیوم گاهگاهی نواحی اتروفیک در اپیتلیوم را نشان می دهد، همچنین اجسام ائوزینوفیلیک کلویید ( (civatte bodyنیز که نشان دهنده ی کراتینوسیتهای دژنره است اغلب در نیمه ی پایینی اپیتلیوم مشاهده می شود.1 پاتوژنز لیکن پلان شامل التهاب متقابل بین سلولهای التهابی،کموکاینها و سیتوکاینها می باشد که در نهایت منجر به اپوپتوز کراتینوسیتهای بازال می شود. تخریب غشا پایه که منجربه مهاجرت لنفوسیتها می شود، با دخالت انزیمهای پروتئولیتیک ]ماتریکس متالوپروتیناز هاmmps))[ انجام می شود.
ماتریکس متالوپروتئینار ها یک خانواده پروتئیناز وابسته به روی می باشد که در مهاجرت سلولی،انژیوژنز و فعالیت پروتئولیتیک فاکتورهای رشد نقش دارند.همچنین در ترمیم زخم و تهاجم تومورها نیز مورد نیاز هستند.3 گرچه نقش دقیق ماتریکس متالو پروتینازها در بیماری های مختلف هنوز شناخته نشده است.این پروتینازها به 3زیر گروه تقسیم می شوند: کلاژنازها(mmp1,8)،استروملیزینها (mmp3,10)و کلاژنهای تیپ4(mmp2,9). 1
مطالعات قبلی به وجود ماتریکس متالوپروتیناز2و3 در اپیتلیوم لیکن پلان دهانی اشاره کرده اند ولی ماتریکس متالوپروتیناز9 اساسا در نواحی ارتشاح التهابی ائوزینوفیلیک مشاهده شده است.3
هم چنین در مطالعه ای به نقش ماتریکس متالوپروتیناز2 و7 در تشکیل لیکن پلان دهانی نیز اشاره شده است.
Paulisovaو همکارانش در سال2012 مطالعه ای با هدف ظهور mmp9 در بیماران با لیکن پلان دهانی انجام دادند و نتیجه ی این مطالعه این بود که mmp9در همه ی موارد لیکن پلان اساسادر ارتشاح التهابی لنفوسیتی در لامیناپروپریا و لنفوسیتهای داخل لپیتلیوم مشاهده شد ولی در این مطالعه نتوانستند به ارتباط مستقیم بین mmp9و پاتوژنز لیکن پلان دست پیدا کنند.2
Rubaciوهمکارانش در سال2012 مطالعه ای با هدف تحقیق در مورد نقشmmp2,7,10 و TIMP-1در پاتوژنز لیکن پلان دهانی انجام دادند.نتیجه ی این مطالعه:MMP2,7,و TIMP-1 ممکن است در تشکیل ضایعات OLPدخیل باشند1.
Chen و همکارانش در سال2008مطالعه ای با هدف بررسی mmps, TGF-B1,TIMP-2 در سرطان زایی لیکن پلان دهانی انجام دادند، نتیجه ی این مطالعه:ماتریکس متالوپروتیناز2 و MT1-MMP وخصوصا ماتریکس متالوپروتیناز9ممکن است برای قضاوت در مورد پتانسیل بدخیمی لیکن پلان دهانی فاکتورهای مهمی باشند.4
Mazzarellaوهمکارانش در سال 2005 مطالعه ای با هدف بررسی ظهورماتریکس متالوپروتینازها در انواع رتیکولار و اروزیو لیکن پلان دهانی انجام دادند و به این نتیجه رسیدند که نماهای کلینیکی متفاوت لیکن پلان دهانی با میزان mmp mRNA ارتباط معناداری دارد.3
Xijing و همکارانش در سال 2001در مطالعه ای به بررسی نقش ماتریکس متالوپروتئینازها و مهارکننده های انها در لیکن پلان دهانی پرداختند و به این نتیجه رسیدند کهmmp9 ممکن است در پاتوژنز olp دخیل باشد5.
با توجه به اینکه در مورد نقش mmp10 تا کنون مطالعات محدودی انجام شده است هدف از انجام این مطالعه بررسی نقش mmp10در پاتوژنز لیکن پلان دهانی می باشد.
سوالات و / یا فرضیات پژوهش

- ظهور mmp10 در لیکن پلان دهانی و گروه کنترل متفاوت است.
هدف کلی طرحتعیین ظهورپروتئین mmp10در لیکن پلان دهانی
اهداف اختصاصی

- مقایسه ظهور mmp10در لیکن پلان دهانی و گروه کنترل
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحدانشگاههای علوم پزشکی
تعریف واژه های تخصصی
نوع مطالعهتوصیفی - تحلیلی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)بلوکهای پارافینی و پرونده های با تشخیص لیکن پلان دهانی موجود در آرشیو دانشکده دندانپزشکی زاهدان

معیارهای ورود:

1.تمامی نمونه هایی که مشخصات پرونده بیمار مربوط به آن، از نظر متغیرهای مورد مطالعه کامل باشد.

2.تمامی بلوکهایی که دارای میزان کافی از ضایعه به منظور رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی باشند.

3.نمونه ها فیکساسیون مطلوب داشته باشند.

4.نمونه ها فاقد نکروز در لام مورد نظر باشند.

5.نمونه هایی که از لحاظ تشخیص میکروسکوپی مورد اتفاق پاتولوژیست های طرح باشد



حجم نمونه و روش محاسبه آنبا توجه به بررسی به عمل امده بر اساس موارد موجود در ارشیو دانشکده دندانپزشکی تعداد 30 نمونه لیکن پلان وارد مطالعه می شود.
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)روش نمونه گیری برای نمونه های لیکن پلان دهانی بصورت سرشمار می باشد
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)برطبق مشاهده و گزارش توسط پاتولوژیست و همچنین اطلاعات ثبت شده در پرونده بیماران(فرم اطلاعاتی ضمیمه شماره1)
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)در این مطالعه گذشته نگر تحلیلی که به صورت مقطعی اجرا می گردد30 نمونه از بلوکهای با تشخیص لیکن پلان موجود در آرشیو دانشکده دندانپزشکی استخراج می شود همچنین تعداد 10 نمونه با تشخیص فیبروما نیز به عنوان نمونه های کنترل استفاده می شود،(تا حد امکان همسان سازی از نظر سن و جنس و مکان انجام خواهد شد) بعد از بررسی لامهای مورد نظر توسط دو پاتولوژیست و تایید آنها طبق معیارهای ورود و خروج، از بلوکهای پارافینی برشهای 5 میکرونی تهیه شده، برشها را روی لام مخصوص قرار داده و به مدت یک شبانه روز در داخل فور در دمای 37 درجه قرار داده تا دپارافینه شود و در مرحله بعد جهت آبگیری و شفاف سازی لامها را در گزیلل و درجات مختلف الکل سفید قرار داده تا آنتی ژنهای سطحی ظاهر گردد. سپس لامها را در داخل بافر سیترات (PH=6) قرار داده و داخل میکروویو به مدت 5 دقیقه در حالت جوش کامل میگذاریم سپس آنها را داخل بافر سیترات در آورده و داخل PBS(phosphate-buffered saline) با PH برابر 2/7 قرار می دهیم و بطور سلسله وار مراحل رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی را انجام می دهیم . از مارکر (آنتی بادی مونوکلونال) mmp-10 ساخت شرکت Novocastra استفاده می شود و از محلول Diluent جهت رقیق نمودن آنتی بادیها استفاده می شود. جهت اطمینان از صحت رنگ آمیزی برای همه نمونه ها از شاهد مثبت و منفی نیز استفاده می شود.در نهایت لامها توسط پاتولوژیست از لحاظ رنگ آمیزی مارکر فوق بر اساس تعداد سلولهای رنگ گرفته بررسی می شوند.زمانیکه هیچ سلولی رنگ نگرفته باشد(0)،25_125 سلول رنگ گرفته باشد(1)،125_225 سلول رنگ گرفته باشد(2)،بیشتر از225 سلول رنگ گرفته باشد(3) و در نهایت میانگینscore هاگزارش می شود.
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)داده ها توسط نرم افزار اماری SPSS(19) و آزمون تی مستقل و معادل ناپارامتریک ان در صورت غیرنرمال بودن داده ها خواهد شد.





گروه لیکن پلان

میانگین کنترل

میانگین P-value

Mmp10(اپی تلیوم)

Mmp10(همبند)

ملاحظات اخلاقی بر اساس کدهای شماره ی 6و8 از راهنمای اخلاقی پژوهشی بر روی عضو و بافت انسانی:
_پژوهشگر موظف است از بافتهایی که در اختیار وی قرار می گیرداستفاده بهینه کرده و از هدر رفتن انها جلوگیری می کند.
_تمامی اطلاعاتی که از صاحبان بافت مورد پژوهش جمع اوری و ثبت می شود راز حرفه ای تلقی شده،از این رو تمامی اصول و ملاحظات مربوط به رازداری و حریم شخصی رعایت می شود.
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهابا توجه به اینکه ممکن است نمونه های مورد نیاز طرح در آرشیو دانشکده موجود نباشند احتمال دارد برای دستیابی به نمونه های باقی مانده نیاز به مراجعه به سایر مراکز باشد.
کلمات کلیدیOral lichen planus,mmp10,pathology
فهرست منابع و مراجع-Asli HA,Hakki OG,Vakur OL,Gulsum AK.The roles of mmp2,7,10, and TIMP1 in the pathogenesis of OLP.J oral pathol med(2012);41:689-696
2-Paulusova V, Laco J, Slezak R. Expression of mmp9 in patients with OLP. ACTA MEDICA2012; 55:23-26
3-N Mazzarella,F Femiano,F Gombos,A De Rosa,M Giualo. MMP gene expression in oral lichen planus:erosive vs. reticular forms
2 -Abdullah SE,Recep DU,Niyazi DU,Mustafa CI,Sema SE.mmp1,9 and TIMP-1 levels in OLP patients with gingivitis or periodontitis.archives of oral biology2013;58;843-852
4- Chen Y, zhung w, Geng N,Tian K.mmps,TIMP-2,And TGF-B1 in the cancerization of oral lichen planus.Head 8 Neck 2008.
5- Xijing J, Philip B, Neil W, Laurence J. MMPs and their inhibitors in oral lichen pelanus. J Culan Pathol 2001;28:72-82
معرفی پژوهش/ اهداف پژوهش
(عین عبارت هدف پروپوزال را کپی نکنید. بلکه با جملاتی که برای مردم قابل فهم باشد (برای سواد حدود پنجم ابتدایی )هدف را برای شرکت کنندگان توضیح دهید.) در تمام این متن در صورتیکه شرکت کننده کودک یا فرد فاقد ظرفیت تصمیم گیری است باید مواردیکه منظور از "من"، فرد شرکت کننده بوده است به "کودک" یا "فرد تحت سرپرستی من" اصلاح شود و مواردیکه منظور از "من"، رضایت دهنده است به من به عنوان "ولی" یا "قیم قانونی" اصلاح شود.
خون گیری
(آیا طرح شما نیاز به خونگیری دارد یا خیر)
نحوه همکاری/ مزایا ی طرح
(در این بخش برای شرکت کنندگان به زبان ساده توضیح دهید که: چه مداخله ای بر روی آنها صورت میگیرد. چه اقدامات پاراکلینیکی بر روی آنها انجام میشود. چه نمونه ای و با چه حجمی از آنها میگیرید در این مدت چند نوبت مراجعه باید داشته باشند و به چه فواصلی چه اقداماتی را در پیگیری آنها انجام میدهید. (حتی میتوانید سود بالقوه ای که شرکت کنندگان میتوانند از شرکت در این پژوهش ببرند بنویسید. این سود میتواند شرح احتمال درمان یا تشخیص بهتر بیماریشان، دریافت خدمات سلامت رایگان و یا پرداخت مشوق مالی در ازای جبران همکاریشان باشد)
عوارض جانبی
(منظور عوارض و میزان احتمال بروز آنها در این مطالعه است)
جبران عوارض احتمالی
(برای آنکه شرکت کننده بتواند ارزیابی مناسبی از سود و زیان شرکت در پژوهش شما داشته باشد لازم است بتواند سود و زیان مداخلات معمول و مداخلات این پژوهش را مقایسه کند. به عنوان مثال میزان موفقیت و میزان عوارض هریک را مقایسه کند.) - او باید بداند كه اگر در حين و بعد از انجام پژوهش هم هر مشكلي اعم از جسمي و روحي به علت شرکت در اين پژوهش برایش پيش آمد درمان عوارض، و هزينه‌هاي آن و غرامت مربوطه بر عهده مجري خواهد بود.
هزینه های مربوط به انجام طرح تحقیقاتی
(تمام مداخلات پژوهشی باید برای بیمار رایگان باشد و بیمار بداند شامل چه مواردی هستند. )
روش های جایگزین
در صورت عدم تمایل به شرکت در مطالعه چه روش های درمانی برای بیمار ارائه خواهد شد
محرمانه بودن
بیمار باید بداندکه دست اندر كاران اين پژوهش، كليه اطلاعات مربوط به او را نزد خود به صورت محرمانه نگه‌داشته و فقط اجازه دارند نتايج كلي و گروهي اين پژوهش را بدون ذکر نام و مشخصات بیمار منتشر كنند. و كميته اخلاق در پژوهش با هدف نظارت بر رعایت حقوق وی مي‌تواند به اطلاعات ایشان دسترسي داشته باشد.
پاسخگویی به پرسش ها
در این بخش نام و اطلاعات دسترسی فردی از عوامل پژوهش را که بتواند اطلاعات صحیح و کافی در اختیار شرکت کنندگان قرار دهند و در مورد عوارض و نگرانیها راهنمایی لازم را ارائه دهند ذکر شود
حق نپذیرفتن یا انصراف
بیمار باید بداند که شرکت اودر اين پژوهش کاملاً داوطلبانه است و مجبور به شرکت در اين پژوهش نيست و در صورت عدم شرکت از مراقبت‌هاي معمول تشخيصي و درماني محروم نخواهد شد او باید بداند كه حتي پس از موافقت با شركت در پژوهش مي‌تواند هر وقت كه بخواهد، پس از اطلاع به مجري، از پژوهش خارج شود و خروج اواز پژوهش باعث محرومیت از دریافت خدمات درمانی معمول برای اونخواهد شد.
رضایت
او باید بداند که اگر اشکال يا اعتراضي نسبت به دست اندركاران يا روند پژوهش دارد مي تواند با كميته اخلاق در پژوهش دانشگاه تماس گرفته و مشکل خود را به صورت شفاهي يا كتبي مطرح نمايد. در انتهای فرم قید گردد : اينجانب موارد فوق‌الذکر را خواندم و فهميدم و بر اساس آن رضايت آگاهانه خود را براي شركت در اين پژوهش اعلام مي‌کنم. اينجانب ……………… خود را ملزم به اجراي تعهدات مربوط به مجري در مفاد فوق دانسته و متعهد مي‌گردم در تأمين حقوق و ايمني شركت كننده در اين پژوهش تلاش نمايم
پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
daneshjooee.doc1393/03/12273920دانلود
proposal eslah pajouhesh.doc1393/03/25275456دانلود
kade.jpg1394/12/09525527دانلود