چاپ صفحه |  صفحه نخست سامانه |  مجری و همکاران |  اطلاعات تفضیلی |  دانلود | علوم پزشکی زاهدان |
| کد طرح | 7139 |
| عنوان فارسی طرح | مولکولار اپیدمیولوژی آمیب آزادزی-آکانتامبا در آب های مختلف زاهدان در سال 1393 |
| عنوان لاتین طرح | Molecular epidemiology of free- living amoeba - Acanthamoeba in different waters of Zahedan in 1393 |
| نوع طرح | |
| محل اجرای طرح | دانشگاه علوم پزشکی زاهدان |
| رسته مطالعاتی | مقطعی- توصیفی |
| دانشکده/مرکز | دانشکده پزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز | 270 |
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| عادل ابراهیم زاده | مجری | استاد راهنما | دکترا(p.h.d) | |
| مهناز شهرکی پور | مشاور | مشاور آمار | کارشناسی ارشد | mahnaz@gmail.com |
| مریم منصوری نیا | همکار | mansouri.m1989@gmail.com |
| عنوان | متن |
|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | مولکولار اپیدمیولوژی آمیب آزادزی-آکانتامبا در آب های مختلف زاهدان در سال 1393 |
| خلاصه طرح به لاتین | Molecular epidemiology of free- living amoeba - Acanthamoeba in different waters of Zahedan in 1393 |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | آمیب های آزادزی ، آمیب های فرصت طلبی هستند که معمولا به صورت آزاد در آب های شور و شیرین، آب دریاها ، خاک های مرطوب ،روی گیاهان در حال فساد و... زندگی میکنند.(8-1) این آمیب ها در آب های سطحی باز از قبیل منابع تامین آب به فراوانی یافت می شوند ، اما بیشترین تعداد آنها در محیط های سرشار از مواد مغذی همچون سیستم های تصفیه بیولوژیکی فاضلاب ، جایی که فعالیت های تغذیه ای باکتریایی وجود دارد، یافت می شوند. تک یاخته های آزادزی در محدوده ی گستر ده ای از شرایط محیطی در آب های آبی از آب های گرم زمین و آب های گرم آلوده تا لوله های شبکه آبرسانی حضور دارند.( 9،8)
این آمیب ها در ابتدا غیر بیماریزا محسوب می شدند تا اینکه Culbertson در سال 1985 بیماریزا بودن آنها را اثبات کرد. این تک یاخته ها قادرند علاوه بر زندگی آزاد، در صورت شرایط مناسب به میزبان خود حمله کرده و به عنوان یک عامل انگلی در بدن میزبان بیماریزا گردند.(10) این تک یاخته ها از عوامل مهم ایجاد عفونت در سیستم اعصاب مرکزی انسان وحیوانات هستند و در اکثر موارد منجر به مرگ بیمار می شوند. آمیب های آزادزی شامل خانواده های والکامفیده(Vahlkampfidae)، ونیلیده (Vannellidae)و آکانتوموبیده (Acanthamoebidea)هستند.(8) اعضا چهار جنس از این آمیب ها شامل آکانتامبا، نگلریا، بالاموثیا و ساپینیا تاکنون از عفونت های سیستم اعصاب مرکز ی، ریه، سینوس ها ، چشم و پوست در انسان جدا و شناسا یی شده اند.(8) در ایران موارد آلودگی انسان یا حیوان به بالاموثیا شناسایی نشده است اما این آمیب از منابع محیطی و نیز گرد و غبار جدا سازی شده است.(11) آکانتامبا و نگلریا از شناخته شده ترین آمیب های آزادزی بیماری زا هستند و از نظرپزشکی بسیار اهمیت دارند .(14-12) گونه های آکانتامبا را در سرتاسر جهان در خاک ، آب، روی پوست وسایر بافت ها در انسان و حیوانات می توان یافت.گونه های آکانتامبا به دو شکل تروفوزوئیت و کیست مشاهده میشوند. کیست در شرایط نامساعد محیطی تشکیل و سبب بقا و تداوم حیات این تک یاخته در طبیعت می شود. کیست در مقابل گندزدا های مورد استفاده برای ضد عفونی کردن انواع وسایل و تجهیزات پزشکی و همچنین کلرینه کردن آب و ضدعفونی کردن سیستم های آب بیمارستان ها مقاوم است .(14،13) محققین این آمیب را بر اساس سکانس ژن rRNA به 17ژنوتایپ(T1-T17)طبقه بندی کرده اند. در این میان ژنوتایپ های T3-T4 از بیماری زایی بیشتری برخوردارند. همچنین توانسته اند این آمیب را از نازوفارنکس وپوست جداکنند.(18-15،4) آکانتامبا موجب دو بیماری مهم می شود که از آن جمله آنسفالیت گرانولوماتوز آمیبی است که منحصراً در افراد دچار نقص سیستم ایمنی از جمله کودکان، افراد مبتلا به ایدز، لوکمی ها و افراد دریافت کننده پیوند دیده می شود.(20،19) پیش آگاهی ضعیف است و بیماری در اکثر موارد، پس از مرگ بیمار تشخیص داده می شود(22،21) از دیگر بیماری مهم ایجاد شده به وسیله این انگل می توان به کراتیت آکانتامبایی دردناک اشاره کرد، که منجر به کوری می شود. کراتیت آکانتامبایی معمولاً افراد با ایمنی کار آمد را گرفتار می کند(11،7) همچنین استفاده از لنز زیبایی خطر ابتلا به کراتیت آمیبی را افزایش می دهد که این بیشتر در جنس مونث شیوع دارد . در ایران نیز با توجه به شیوع کراتیت های آکانتامبایی، توجه به آمیب های آزادزی حائز اهمیت است.(20) مطالعات نشان داده است که کیست ها ی آکانتامبا معلق در هوا، خاک و آب از منابع خطربرای این بیماری محسوب می شود(12) ترفوزوئیتهای این تک یاخته در طبیعت به عنوان مخزنی برای انواع باکتریهای پاتوژن نظیر گونه های لژیونلا ، هلیکوباکتر پیلوری ، ویبریو کلرا، مایکوباکتریوم اویوم و لستریا مونوسیتوژنز شناخته شده اند و سبب حفظ، تکثیر و انتقال این عوامل باکتریایی میشوند) 24،23،8) زیستگاه معمول این آمیب ها و این باکتریها آب است . اولین باردرسال 1913 مرحله کیست گونه ای ازآکانتامبا توسط Puschkarew از گردو غبارجدا و شناسایی شد.اولین مورد عفونت انسانی ناشی از آکانتامبا در سال 1972 توسط Jager و Stamm گزارش گردیده است.(20) Khan و همکاران در سال 2001 در مطالعه ای توانستند آکانتامبا را به دو جنس پاتوژن و غیر پاتوژن تقسیم کنند. آنها با استفاده از تکنیک PCR ، 9 استرین را از ایزوله ها جدا کردند.همچنین با بررسی و کشت درپلیت های آگار حاوی مانیتول دریافتند فرم پاتوژن آکانتاموبا توانایی رشد در محیط با اسمولاریته بالا را دارند و این در حالی است که فرم غیر پاتوژن فاقد این توانایی است. آنها این روش را روشی سریع و حساس برای انواع فرم پاتوژن ذکر کردند(25) در ایران حضور آکانتامبا در آب ،خاک ،گرد وخاک ، مدفوع گاو واستخر شنا گزارش شده است.(26) همچنین با بررسی نمونه های آب و خاک رودخانه ها و دریاچه پریشان در منطقه کازرون (27) آب های سطحی و میادین شهر تهران(28)ونمونه های آب شیرین بیمارستان ها (29)چشمه آب گرم سرعین در اردبیل(30) آلودگی به آکانتامبا گزارش شده است. همچنین آلودگی به آکانتامبا از منابع آب ، مخازن ، تانکرها و بخش های مختلف بیمارستانی در کشور پرتغال(31) از آب چاه و آب شیردرنیکارگوآ(32)از نمونه های آب خانگی در فلوریدا(33)ازاستخرهای شنا درقاهره و مصر(34)از آب آشامیدنی دراوزکای ژاپن(35) و ازتصفیه خانه های آب آشامیدنی در سوئیس(36) گزارش شده است. در واقع، امروزه به آکانتامبا نسبت سایر آمیب های آزادزی توجه بیشتری می شود و این بدلیل شیوع آکانتامبا در محیط اطراف و همچنین افزایش روز افزون بیماریهایی که، منجر به نقص سیستم ایمنی می شوند، میباشد. با توجه به این که آبهای راکد یک منبع احتمالی انواع عفونتهای انسانی هستند، مطالعه آنها از نظر آلودگی به این انگل به لحاظ بهداشت، حفظ و تأمین سلامت افراد جامعه بسیار ارزشمند است و از طرفی با توجه به خطر و نقش این تک یاخته در گسترش میکروارگانیسم های بیماری زا در منابع آب و فراوانی آکانتامبا در محیط و ارتباط مستقیم آن با آب ، می توان با شناسایی منابع آلوده اقدام موثر برای حذف یا کنترول این تک یاخته انجام داد و بدین ترتیب از بیماری های احتمالی ناشی از آکانتامبا و یا باکتری های حمل شده توسط آن پیشگیری کرد. بنابراین با توجه به اهمیت پزشکی آنها شناسایی گونه های مختلف این آمیب ها در منابع آب، با روشهای سریعی همچون PCR ضروری بنظر می رسد. از آنجاییکه هیچ اطلاعاتی از شیوع آکانتامبا از استان سیستان و بلوچستان در دسترس نیست به همین جهت هدف از این مطالعه بررسی و تعیین فراوانی این تک یاخته وتعیین ژنوتایپ های آن با استفاده از تعیین توالی ناحیه تشخیصی ژن 18SrDNA از منابع آبی شهرستان زاهدان واقع در استان سیستان و بلوچستان به کمک تکنیک PCR می باشد. |
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 5- سئوالات و/ یا فرضیات پژوهش 1. چند درصد آمیب آزادزی – آکانتامبا در آب های راکد شهرستان زاهدان در سال 1393 وجود دارد؟ 2. چند درصد آمیب آزادزی -آکانتامبا در آب های لوله کشی شهرستان زاهدان در سال 1393 وجود دارد؟ 3. چند درصد آمیب آزادزی – آکانتامبا در آب استخرهای شنا شهرستان زاهدان در سال 1393 وجود دارد؟ 4. چند درصد آمیب آزادزی – آکانتامبا در آب های کانال کشاورزی شهرستان زاهدان در سال 1393 وجود دارد؟ 5. چند درصد آمیب آزادزی – آکانتامبا در آب نماهای پارک های شهرستان زاهدان در سال 1393 وجود دارد؟ 6. ژنوتایپهای آکانتامبا در آب های مختلف شهر زاهدان از چه نوع هستند؟ |
| هدف کلی طرح | تعیین مولکولار اپیدمیولوژی آمیب آزادزی- آکانتامبا در آب های مختلف زاهدان سال 1393 |
| اهداف اختصاصی | 7- اهداف اختصاصی
1. تعیین فراوانی آمیب آزادزی - آکانتامبا در آب های راکد شهرستان زاهدان به روش PCR در سال 1393 2. تعیین فراوانی آمیب آزادزی – آکانتامبا در آب های لوله کشی شهرستان زاهدان به روش PCR در سال 1393 3. تعیین فراوانی آمیب آزادزی- آکانتامبا در آب استخرهای شنای شهرستان زاهدان به روش PCR در سال 1393 4. .تعیین فراوانی آمیب آزادزی - آکانتامبا درآب کانال های کشاورزی شهرستان زاهدان به روش PCR درسال 1393 5.تعیین فراوانی آمیب آزادزی- آکانتامبا در آب نماهای پارک های شهرستان زاهدان به روش PCR در سال 1393 6. تعیین نوع ژنوتیپ آکانتامبا در آب های مختلف شهرستان زاهدان در سال 1393 |
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | مراکز خدمات بهداشتی – درمانی |
| تعریف واژه های تخصصی | - تعریف واژه های تخصصی:
کراتیت آمیبی :گرفتاری یکطرفه ودرد شدید چشم وتجمع چرک در اتاقک قدامی چشم که توسط گونه های آکانتامبا ایجاد می شود. PCR: یک روش آزمایشگاهی است که به منظور تولید انبوه قطعه خاص و انتخابی از DNA به کار می رود. |
| نوع مطالعه | مطالعه حاضر یک مطالعه توصیفی – مقطعی است. |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | جامعه هدف شامل منابع آب (آب های لوله کشی ،راکد سطحی ،کانال های کشاورزی ،آب استخرهای شناو آب نماهای پارک ها) شهرستان زاهدان
شرط های ورود نمونه ها به مطالعه، منابع آبی می باشد که برای آشامیدن ، شستشو ، شنا کردن و زیبا سازی معابر شهری به کار می رود و شرط های خروج نمونه ها آب های دارای گل ولای فراوان ، آلوده به فاضلاب ، آلوده به مواد صنعتی و فاضلاب های بیمارستانی و همچنین آب های با کدورت زیاد(تشخیص چشمی) می باشد. |
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | در کل 50 نمونه آب بر اساس حجم نمونه های تحقیقات قبلی(37،28) ، از نقاط مختلف شهرستان زاهدان به اندازه 1000 میلی لیترجمع آوری می گردد.نمونه های آب از کانال کشاورزی،آب لوله کشی ،آب نماهای پارک ها ،استخر های شنا و آب راکد جمع آوری می شود . |
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | غیر احتمالی ( نمونه گیری در دسترس) |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | 1-نمونه گیری از آب های مختلف شهرستان زاهدان 2-کشت نمونه ها در محیط آگار غیر مغذی 3-روش میکروسکوپی 4- خالص کردن آکانتامبا از سایر آمیب های آزادزی 5- استخراج DNA 6-روش ملکولی PCR جهت تایید وجود آکانتامبا 7- تعیین توالی ژن ها جهت شناسایی نوع ژنوتیپ آمیب 8- فرم اطلاعاتی |
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | - روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)
در این مطالعه توصیفی ، نمونه برداری طی سال 1393 از آب های لوله کشی ،آب های راکد میدانها ، آب نماهای پارک ها ، آب استخرهای شنا وکانال های کشاورزی موجود در شهرستان زاهدان انجام می شود و تعداد 50 نمونه 1000 میلی لیتری آب از مکانهای مختلف در داخل ظرف های استریل و عاری از آلودگی جمع آوری می گردد. نمونه ها از جاهایی تهیه می گردد که فعالیت مردم درآن مناطق کاملاً مشهود باشد. نمونه ها بلافاصله به آزمایشگاه انگل شناسی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی زاهدان منتقل می شوند. برای جداسازی آمیب های آزادزی از آبها از روش فیلتراسیون به کمک پمپ خلاء استفاده می شود. نمونه های آب به طور جداگانه از فیلتر نیتروسلولز (منافذ 45/0 میکرون )عبور داده می شوند ، با این روش آمیب ها از فیلتر عبور نمیکنند و بر سطح آن باقی میمانند. کشت آکانتامبا در محیط آگار غیرمغذی 1.5 درصد (Non Nutrient Agar) حاوی باکتری اشرشیاکلی انجام میگردد. مواد لازم جهت تهیه محیط آگار غیرمغذی (Non Nutrient Agar ): بافر Page پودر باکتو آگار آب مقطر محیط کشت آگار غیر مغذی 1.5% این محیط با استفاده از پودر باکتو آگار به صورت 1.5 % در پلیت ها در شرایط استریل تهیه می شود. لازم به ذکر است که قبل از بسته شدن محیط باید آن را به مدت 15 دقیقه در حرارت 121 درجه سانتیگراد اتوکلاوکرد و سپس دور پلیت ها را با استفاده از پارافیلم بسته ودر یخچال 4 درجه تا زمان استفاده نگهداری کرد. طرز تهیه محیط کشت Page's salin (10x) 100 ml Difco Agar 15 g Double-distilled water 900 ml محلول فوق پس از اتوکلاو درون ظرف شیشه ای تا 6 ماه قابل استفاده است. جهت تهیه بافرPage (10X) از نمک های زیر همراه آب مقطر استفاده می شود: MgSO4, 7H2O (4 mg) Cacl2, 2H2O (4 mg) Na2HPO4 (142 mg) KH2PO4 (136 mg) Nacl (120 mg) Distilled Water (1000 ml) شناسایی آکانتامبا با استفاده از کشت monoxenic جهت تشخیص آکانتامبا فیلتر را به صورت وارونه بر روی محیط کشتی که با باکتری اشرشیاکولای پوشیده شده است ، قرار می دهیم ( باکتری به عنوان منبع غذایی برای انگل در سطح محیط کشت پخش می شود). سپس در دمای 25 تا 30 درجه سانتیگراد انکوبه می شوند. در مرحله بعد از روزهای چهارم تا هفتم هر روز به مشاهده میکروسکوپی محیط های کشت ، پرداخته می شود تا نمونه مثبت از نظر آکانتامبا شناسایی شود. به طور روزانه از محیط های کشت لام تهیه می شود و با استفاده از رنگ آمیزی گیمسا (نسبت 1 به 40 ) و به مدت 12 دقیقه رنگ آمیزی صورت میگیرد و هر لام به مدت 15 دقیقه بررسی و نتایج ثبت میگردد. کشت ها حداکثر یک ماه نگه داری و در صورت عدم مشاهده آکانتامبا پس از این مدت، منفی در نظر گرفته می شوند. معمولا پس از گذشت هفت روز در پلیت های مثبت ، تعداد فراوانی کیست و تروفوزوئیت مشاهده می شود. که برای بدست آوردن تروفوزوئیت جهت استخراج DNA قسمتی از محیط ژل را بریده و به محیط جدید جامد که سطح آن هم با باکتری اشرشیاکولای پوشیده شده است ، منتقل می شود و بعد از گذشت 48 تا 72 ساعت پلیت از نظر وجود تروفوزوئیت مورد بررسی قرار می گیرد . نحوه ی جمع آوری آمیب ها از سطح پلیت مواد و محلول های مورد استفاده PBS استریل سرم فیزیولوژی استریل با استفاده از پی پت پاستور استریل ، 4-5 میلی لیتر از PBS استریل بر روی محیط کشت ریخته و سپس با استفاده از cell scraper سطح پلیت کاملا با بافرPBS مخلوط می گردد تا تروفوزوئیت ها در بافر غوطه ور شوند . در مرحله بعد تروفوزوئیت و کیست ها همراه بافر با استفاده از پی پت پاستور به میکروتیوپ انتقال پیدا میکنند و با استفاده از سانتریفیوژ با دور 4000 هزار و زمان 5 دقیقه رسوب کافی از آمیب ها حاصل خواهد شد. جهت حذف آگار اضافی و شستشوی آمیب سه بار این عمل تکرار می شود تا حد امکان مواد اضافی از آمیب جدا شوند.در این مرحله همه نمونه ها جهت استخراج DNA و برخی از نمونه ها برای رنگ آمیزی انتخاب می شوند. برای استخراج DNA از کیت تجاری Dynabio (تکاپو زیست) استفاده و طبق دستور کار آن عمل می شود. برای تشخیص آکانتامبا از سایر آمیب های آزادزی از تکثیر قطعه ای از ژن زیر واحد کوچکRNA ریبوزومی ((SS rRNAاستفاده می شود و با بهره گیری از پرایمرهای استفاده شده توسط شرودر و همکاران(38) انجام می شود. نام پرایمر ترادف از 5به3 طول پرایمر جفت باز JDP1 5′-GGCCCAGAT CGTTTACCGTGAA-3′ 22 JDP2 5′- TCTCACAAGCTGCTAGGGGAGTCA-3′. 24 جهت انجام PCR از DNA استخراج شده(1.5 میکرولیتر) و Premix-PCR استفاده می گردد و شرایط PCR بهینه می شود. PCR در 32 دور انجام می شود،که عبارت است از : دناتوراسیون اولیه به مدت 5 دقیقه در 94 درجه سانتیگراد، دناتوراسیون به مدت 30 ثانیه در 94 درجه سانتی گراد ،اتصال اولیه به مدت 30 ثانیه د ر 60 درجه سانتی گراد ، طویل سازی به مدت 30 ثانیه در 72 درجه سانتی گراد و طویل سازی نهایی به مدت 5 دقیقه در 72 درجه سانتی گراد. محصول PCR بر روی ژل آگارز 5/1 درصد حاوی اتیدیوم بروماید الکتروفورز می شود. در این مرحله ، نمونه های مثبت جهت سکوئنسینگ ارسال میگردند. بعد از تعیین توالی ، با استفاده از سایت pubmed و بر اساس بالاترین همولوژی اقدام به تعیین نوع ژنوتیپهای آکانتامبا می شود. |
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | داده های حاصل از آزمایش با کمک نرم افزار SPSS و با استناد به روش های آمار توصیفی (جدول توزیع فراوانی،رسم نمودار) تجزیه و تحلیل می شوند.
فراوانی و درصدوضعیت نمونه ها از نظر وجود آمیب آزادزی(آکانتامبا) آمیب نوع آب وجود آمیب (درصد) عدم وجود آمیب (درصد) جمع (درصد) لوله کشی استخرشنا راکد سطحی آب نماهای پارک ها کانال کشاورزی |
| ملاحظات اخلاقی | مشکل اخلاقی وجود ندارد |
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | - مشکل تهیه مواد وامکان طولانی شدن زمان دریافت آنها
راه حل: تصویب سریع تر طرح و دریافت بودجه آن |
| کلمات کلیدی | free- living amoeba ,Acanthamoeba,Water ,Genotyping |
| فهرست منابع و مراجع | 1. Mahmoudi M ,Taghipour N, Eftekhar M , Haghighi A .Isolation of Acanthamoeba species in surface waters of Gilan province-north of Iran. Parasitol Res 2012 July ;110: 473–477 2. Clarke B, Sinha A, Parmar D, Sykakis E . Advances in the Diagnosis and Treatment of Acanthamoeba Keratitis.Journal of Ophthalmology 2012 November; 484892:1-6 3. Siddiqui R , Khan N. Biology and pathogenesis of Acanthamoeba. Parasites & Vectors 2012;5(6):2-13 4. Schuster F ,Visvesvara GS. Free-living amoebae as opportunistic and non- opportunistic pathogens of humans and animals. Int J Parasitol 2004; 34: 1001-1027 5. Khan N . Acanthamoeba, biology and increasing importance in human health. FEMS Microbiol Rev. 2006; 30: 564-595 6. Marciano-Cabral F, Cabral G . Acanthamoeba spp. as agents of disease in humans. Clin Microbiol Rev. 2003; 16(2) : 273-307 7. Booton G, Kelly D, Chu Y, Seal D, Houang E, Lam D, et al . 18S ribosomal DNA typing and tracking of Acanthamoeba species isolates from corneal scrape specimens, contact lenses, lens cases, and home water supplies of Acanthamoeba keratitis patients in Hong Kong. J Clin Microbiol. 2002; 40: 1621–25 8. Visvesvara GS, Moura H, Schuster FL. Pathogenic and opportunistic free living amoebae: Acanthamoeba spp, Balam-uthia mandrillaris, Naegleria fowleri, and Sappinia diploidea. FEMS Immunol Med Microbiol 2007; 50(1): 1-26 9. Mosayebi M, Ghorbanzadeh B, Eslamirad Z, Ejtehadifar M, Rastad B. The Isolation and Detection of Acanthamoeba Keratitis in Rural Water Sources of Arak, Iran. mljgoums. 2014; 7 (4) :66-71 10.Page FC. A New Key to Freshwater and Soil Gymnamoebae. Freshwater Biological Association Ambleside,1988; UK 11. Niyyati M, Lorenzo-Morales J, Rezaeian M, Martin-Navarro CM, Haghi AM, Maciver SK, et al. Isolation of Balamuthia mandrillaris from urban dust, free of known infectious involvement. Parasitol Res 2009; 106 (1): 279-81 12. Khan NA. Pathogenesis of Acanthamoeba infections. Microb Pathog 2003;34:277-85 13. MahgoubA. Acanthamoeba Keratitis. Parasitologists United Journal (PUJ)2010 3(1,2).9-18 14. Marcino-Cabal F, Jamerson M, Kaneshiro ES. Free-living amoebae, Legionella andMycobacterium in tap water supplied by amunicipal drinking water utility in the USA. J Water Heal 2010 Mar; 8 (1): 71-82 15. Lass A , Szostakowska B , Idzińska A ,Chomicz L. The first genotype determination of Acanthamoeba potential threat to human health, isolated from natural water reservoirs in Poland. Parasitol Res 2014; 113:2693–2699 16.Corsaro D, Venditti D . Phylogenetic evidence for a new genotype of Acanthamoeba(Amoebozoa. Acanthamoebida) . Parasitol Res. 2010; 107: 233–238 17.Liang SY, Ji DR, Hsia KT,Hung CC, Sheng WH, Hsu BM , et al. Isolation and identification of Acanthamoeba species related to amoebic encephalitis and nonpathogenic free-living amoeba species from the rice field. J Appl Microbiol 2010 Oct; 109 (4): 1422-9 18.Kao P. Diversity and Seasonal Impact of Acanthamoeba Species in a Subtropical Rivershed .BioMed Research International 2013; 405794 :1-8 19.Mirjalali H, Niyyati M, Abedkhojasteh H, Babaei Z, Sharifdini M, Rezaeian M. Pathogenic Assays of Acanthamoeba Belonging to the T4 Iranian J Parasitol2013 Oct-Dec ;8(4): 530-535 20. Rezaian M, Hooshyar H. Medical importance of free living Amoebas. J Med Council of Islamic Republic of Iran 2011; 29 (1): 69-83. 21. Torno MS Jr, Babapour R, Gurevitch A, Witt MD. Cutaneous acanthamoebiasis in AIDS. J Am Acad Dermatol 2000 Feb; 42 (2Pt 2): 351-4 22. Rocha-Azevedo B, Menezes GC, Silva- Filho FC. The interaction between Acanthamoeba polyphaga and human osteoblastic cells in vitro. Microb Pathol 2006 Jan; 40 (1):8-14 23. Goñi P, Teresa Fernández M, Rubio R Identifying endosymbiont bacteria associated with free-living amoebae. Environmental Microbiology2014;16(2): 339–349 24. Huang SW, Hsu BM. Isolation and identification of Acanthamoeba from Taiwan spring recreation areas using culture enrichment combined with PCR. Acta Tropica. 2010; 115(3): 282-287 25. Khan NA. Pathogenicity, morphology and differentiation of Acanthamoeba. Curr Microbiol 2001;43(6):391-5 26. Rezaeian M, Niyyati M, Farnia Sh, MotevalliHaghi A, Isolation of Acanthamoeba spp. from different environmental sources. Iranian J Parasitol. 2008; 3 (1) : 44–47 27. Rezaian M, Bagheri F, Farnia Sh,Babai Z . Isolation of pathogenic Amoeba (Naegleria and Acanthamoeba) from water sources and margin soils of rivers and lakes in Kazerun. J School Public Health Instit Public Health Res 2002; 1(3): 41-8 28. Eftekhar M, Nazemalhosseini Mojarad E, Haghighi A, Sharifi KH, Nochi Z, Athari A. Detection of Acanthamoeba from fresh water using polymerase chain reaction. J Shaheed Beheshti Univ Med Sci Health Serv 2009; 33(1): 43-6 29. Bagheri HR, Shafiei R, Shafiei F, Sajjadi S . Isolation of Acanthamoeba spp. from Drinking Waters in Several Hospitals of Iran. Iranian J Parasitol. 2010; 5 (2) : 19-25 30. BadirzadehM, NiyyatiM, BabaeiZ, AminiH, BadirzadehH, RezaeianM.Isolation of Free-Living Amoebae from Sarein Hot Springs in Ardebil Province, Iran. Iranian J Parasitol 2011;6:1-8 31. Carlesso A, Simonetti A, Artuso G, Brittes Rott E. Isolation and identification of potentially pathogenic free- living amoeba in samples from environments in a public hospital in the city of Porto Alegre, Rio Grand do Sul. Rev Soc Bras Med Trop 2007; 40(3): 316-20 32. Leiva B, Clasdotter E, Linder E, Winiecka-Krusnell G. Free-living Acanthamoeba and Negleria spp. Amebae in water sources of León, Nicaragua. Int J Trop Biol 2007; 56(2): 439-46 33. Shoff ME, Rogreson A, Kessler K, Schatz S, Seal DV. Prevalence of Acanthamoeba and other naked amoebae in south Florida domestic water. J water Health. 2008; 6(1): 99-104 34 . Al-herrawy A, Bahgat M, Mohammed A, Ashour A . Acanthamoeba species in Swimming Pools of Cairo, Egypt. Iranian J Parasitol: 2014 Apr –Jun ;9(2): 194-201 35. Edagawa A, Kimura A, Kawabuchi-Kurata T, Kusuhara Y, Karanis P. Isolation and genotyping of potentially pathogenic Acanthamoeba and Naegleria species from tap-water sources in Osaka, Japan. Parasitol Res 2009; 105(4): 1109-17 36. Thomas V, McDonnell G, Denyer SP, Maillard G. Free-living amoebae and their intracellular pathogenic microorganisms: risks for water quality. FEMS Microbiol Rev 2010; 34(3): 231-59 37. Rahdar M, Niyyati M, Salehi M,Feghhi M,Makvandi M,Pourmehdi M, et al. Isolation and Genotyping of Acanthamoeba Strains from Environmental Sources in Ahvaz City, Khuzestan Province, Southern Iran. Iranian J Parasitol. 2012; 7(4):22-26 38. Schroeder JM, Booton GC, Hay J, Niszl I, Seal D, Markus M, et al.Use of subgenic 18S ribosomal DNA PCR and sdequencing for genus and genotype identification of acanthamoebae from humans with keratitis and from sewage sludge. J Clin Microbiol 2001 May; 39 (5): 1903-11 |
| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|---|---|---|
| 4.pdf | 1393/09/23 | 2918056 | دانلود |
| primer.pdf | 1393/09/23 | 1678825 | دانلود |
| 1-s2.0-S0190962200901105-main.pdf | 1393/09/23 | 14596842 | دانلود |
| Acanthamoeba.docx | 1393/10/01 | 161757 | دانلود |
| Acanthamoeba.pdf | 1393/10/01 | 316856 | دانلود |
| eslah shode.docx | 1393/10/30 | 163216 | دانلود |
| eslah shode.pdf | 1393/10/30 | 320023 | دانلود |
| nahaee.docx | 1393/11/04 | 144414 | دانلود |
