بررسی مولکولار اپیدمیولوژی گونه های مختلف مالاریای انسانی در استان سیستان و بلوچستان

Molecular – Epidemiology of Different human Malaria Species in Sistan-Baluchistan Province


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
مجری و همکاران
مجری و همکاران
اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی
دانلود
دانلود
علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: عادل ابراهیم زاده

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 7141
عنوان فارسی طرح بررسی مولکولار اپیدمیولوژی گونه های مختلف مالاریای انسانی در استان سیستان و بلوچستان
عنوان لاتین طرح Molecular – Epidemiology of Different human Malaria Species in Sistan-Baluchistan Province
نوع طرح
محل اجرای طرح مدیریت توسعه فناوری سلامت
رسته مطالعاتی مقطعی- توصیفی
دانشکده/مرکز دانشکده پزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز 270

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
عادل ابراهیم زادهمجری دکترا(p.h.d)
صدیقه نوری دلیرهمکار نامعلومs.nouridalir@gmail.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی مولکولار اپیدمیولوژی گونه های مختلف مالاریای انسانی در استان سیستان و بلوچستان
خلاصه طرح به لاتینMolecular – Epidemiology of Different human Malaria Species in Sistan-Baluchistan Province
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشمالاریا یک عفونت حاد و مزمن است که با لرز ، تب و گاهی اوقات با عوارض شدید و کشنده مشخص میگردد . (1) و یکی از مهمترین بیماریهای عفونی مناطق گرمسیری و نیمه گرمسیری است که سالانه سیصد تا چهار صد میلیون نفر در سراسر جهان به آن مبتلا میشوند (2) این بیماری توسط تک یاخته ای از جنس پلاسمودیوم ایجاد می شود ابتلا به این بیماری توسط پنج گونه از جنس پلاسمودیوم موسوم به پلاسمودیوم ویواکس ، پلاسمودیوم فالسیپاروم ، پلاسمودیوم مالاریه ، پلاسمودیوم اووال و پلاسمودیوم ناولزی (P. Knowlesi ) صورت میگیرد (3و1). گونه پلاسمودیوم 14 کروموزوم دارد (4) و ابتلاء به مالاریا توسط گونه های پلاسمودیوم ویواکس و پلاسمودیوم فالسیپاروم از مشکلات بهداشتی مناطق جنوب ، جنوب شرقی و نیز شمال غرب کشور ایران می باشد که در این بین مالاریای ویواکس با حدود 90% موارد مالاریا (5) هم از لحاظ فراوانی و و هم از لحاظ الگوهای بیولوژیک از قبیل ایجاد عفونت نهفته ((latent/sub-patent و عود (relaps )از اهمیت بسزایی برخوردار است (6) پلاسمودیوم ویواکس به مدت طولانی به اشتباه بی اهمیت در نظر گرفته شد (7) ولی امروزه نشان داده شده است که بروز مالاریا شدید در افراد آلوده به پلاسمودیوم ویواکس قابل توجه بوده است و نشان داده شده است که پلاسمودیوم ویواکس یکی از علل عمده مالاریای شدید می باشد(9-8) و به کلروکین و دیگر داروها نیز مقاومت پیداکرده است (11-10) مالاریا حاصل از پلاسمودیوم فالسیپاروم بدخیم ترین نوع مالاریا است(12) و مسئول مالاریای شدید و مرگ و میر در انسان میباشد(13)پلاسمودیوم فالسیپاروم میتواند عوارض متعددی مربوط به سیستمهای مختلف بدن را ایجاد کند از جمله : مالاریا مغزی ، نارسایی حاد کلیه،تب پیشاب سیاه ،هیپوگلیسمی،انعقاد داخل عروقی منتشر (DIC) ، افت فشار خون و شوک(14)سیتوادهرنس و روزتینگ نقش مهمی در ایجاد بیماری شدید توسط پلاسمودیوم فالسیپاروم دارند(17-15). مقاومت پلاسمودیوم فالسیپاروم در ایران از نوع R3 میباشد(1۸) پلاسمودیوم مالاریه با بیماری های کلیوی و سندرم نفروتیک در ارتباط است و توزیع آن در مناطق آندمیک آفریقا منطبق با توزیع پلاسمودیوم فالسیپاروم است اما در عفونتهای مخلوط با پلاسمودیوم فالسیپاروم نادیده گرفته میشود مگر اینکه با PCRمشخص شود همچنین این گونه پلاسمودیوم در جنوب شرقی آسیا ،در حوزه آمازون جنوب آمریکا در اروپا و بخش های جنوبی ایالات متحده آمریکا شایع است(19).هم چنین در ایران نیز مشاهده شده است(20) پلاسمودیوم اوال از نظر ظاهری و بیماری زایی مشابه پلاسمودیوم ویواکس است و بیشتر در آفریقا دیده میشود اما مواردی از بقیه کشورها نیز گزارش شده است (22-21)در ایران این گونه پلاسمودیوم گزارش نشده است(20)
در ایران نیز مالاریا یکی از مشکلات کشوراست هر چند پس از سال 1972این بیماری در بسیاری از نقاط کشور تحت کنترل در آمده و انتقال به برخی از مناطق آندمیک محدود میشود. که بیش از 91% موارد مالاریای کشور از سه استان سیستان و بلوچستان،کرمان و هرمزگان گزارش میشود و استان سیستان و بلوچستان جایگاه نخست را داراست.(23)در ایران عمدتا دو پلاسمودیوم ویواکس و فالسیپاروم مشاهده شده است (25-24) در حال حاضر تعداد مبتلایان به مالاریا در کشور سالانه کمتر از 15000نفر میباشد (26) حدود 764815 نفر در سال 2012 در ایران در مناطق مالاریاخیز زندگی میکنند که حدود 1600نفر مشکوک به مالاریا گزارش شده است و از این تعداد 1418 نفر مبتلا به پلاسمودیوم ویواکس تشخیص داده شده اند در سال 2012 شیوع پلاسمودیوم ویواکس در ایران 90% و پلاسمودیوم فالسیپاروم 10 % گزارش شده است(27) در استان سیستان و بلوچستان نیز مالاریای غالب مالاریای ویواکس است به طوری که تعداد بیماران مبتلا به مالاریای ویواکس تقریبا برابر است با افراد مبتلا به بیماری مالاریا. و ماکزیمم پلاسمودیوم ویواکس در شهر نیکشهر این استان و ماکزیمم پلاسمودیوم فالسیپاروم از سرباز گزارش شده است (28)
در مطالعه دکتر ابراهیم زاده و همکاران اپیدمیولوژی گونه های مختلف مالاریا را در استان سیستان و بلوچستان به روش مولکولی nested PCR مورد بررسی قرار دادند که نتایج حاکی از روش میکروسکوپی حدود 7/60 % پلاسمودیوم ویواکس،7/20% پلاسمودیوم فالسیپاروم 9/2 % عفونت میکس و0% مالاریه و 7/15 % منفی گزارش شد و نتایج حاکی از PCR، 51.4% پلاسمودیوم ویواکس ،13.6%پلاسمودیوم فالسیپاروم، 29.3% عفونت میکس و1.4% مالاریه و 4.3 % منفی گزارش شد و پلاسمودیوم فالسیپاروم عامل مالاریای بدخیم گزارش شده است و پلاسمودیوم اوال گزارش نشد(20)
در مطالعه دکتر رئیسی و همکاران روند بیماری مالاریا در ایران طی سالهای 86-81 مورد بررسی قرارگرفت این مطالعه ، مطالعه ایی گذشته نگر بود که وضعیت اپیدمیولوژیک مالاریا را طی 6 سال مورد بررسی قرار داده است و نتایج این مطالعه این بود که اکثر موارد مالاریا به سه استان جنوب و جنوب شرقی معطوف است و استان سیستان و بلوچستان جایگاه نخست را دارد(23) در مطالعه یوسفی و همکاران که در سال 2010-2009 انجام شد شیوع مالاریا در سرباز مورد بررسی قرار گرفت که نتایج حاکی از آن بود که 90%پلاسمودیوم ویواکس ،8/7 % پلاسمودیوم فالسیپاروم و 2/2 % پلاسمودیوم مالاریه و میکس گزارش شد(29) در مطالعه دکتر عشاقی و همکاران در سال 1381 با عنوان تشخیص گونه های انگل مالاریا به روش nested PCR در پشه های ناقل و خون های آلوده منطقه چابهار و ایرانشهر انجام شده است که نتایج این مطالعه نشان می دهد که گونه غالب انگل مالاریا ،گونه پلاسمودیوم ویواکس است(30) در مطالعه ی دکتر ذاکری و همکاران در سال 2010 گونه های میکس پلاسمودیوم ویواکس و فالسیپاروم در ایران افغانستان و پاکستان به روش مولکولی و میکوسکوپی مورد بررسی قرار گرفت(31) در مطالعه ایی که به وسیله فکری و همکاران انجام شدکه وضعیت مالاریا در منطقه آندمیک جاسک را به روش گذشته نگر مورد بررسی قرار داده است(32) طی مطالعه ایی دیگر که توسط آسمار و همکاران در سال 1998 گونه های پلاسمودیوم در مناطق مالاریا خیز به روش nested PCR انجام شد(33) طی مطالعات ذکر شده بالا تنها در مطالعه ابراهیم زاده و همکاران 4 گونه پلاسمودیوم مورد بررسی مولکولی قرار گرفته است اما از آن زمان تاکنون و با توجه به اقدامات انجام شده برای حذف مالاریا در کشور ، نیاز به اطلاعات دقیقی از اپیدمیولوژی گونه های مالاریا احساس میشود بنابراین ما در این مطالعه اپیدمیولوژی 4 گونه پلاسمودیوم انسانی را در استان سیستان و بلوچستان به روش مولکولی PCR مورد بررسی قرار می دهیم
در هزاره سوم با وجود موفقیت قابل توجه در کنترل، مالاریای انسان ، هنوز هم یکی از مهمترین موضوعات سلامتی عمومی است بنابراین کاهش و کنترل کامل یکی از اهداف توسعه بهداشت جهانی میباشد و این امر محقق نمیگردد مگر اینکه اطلاعات کافی در رابطه با اپیدمیولوژی گونه های پلاسمودیوم یک منطقه را داشته باشیم. استان سیستان و بلوچستان واقع در جنوب شرقی ایران ، یکی از مناطق آلوده بومی مالاریا در جهان می باشد. و گزارشات فراوانی مبنی بر مقاومت به حشره کش ها و مقاومت دارویی ، هم چنین همسایگی با کشورهای افغانستان و پاکستان آلوده به مالاریا ،وجود منطقه آزاد اقتصادی چابهار به عنوان مرکز تجارتی و توریستی و از همه مهمتر در جهت تحقق اهداف برنامه حذف مالاریا در افق 1404 ،استفاده از روشی دقیق با حساسیت و ویژگی بالا در تشخیص گونه های مختلف و تعیین گونه های عامل مالاریای انسانی در منطقه با اهمیت است
ما برآنیم تا با اجرای این طرح شیوع 4 گونه پلاسمودیوم انسانی مهم را در استان سیستان و بلوچستان به روش مولکولی مورد بررسی قرار دهیم و نمایی واقعی از گونه های پلاسمودیوم در استان ترسیم نماییم که منجر به راه حل های کاربردی برای پیشگیری و مبارزه با مالاریا در منطقه گردد و گامی در جهت حذف مالاریا در کشور برداریم
سوالات و / یا فرضیات پژوهش1. آیا گونه غالب پلاسمودیوم در منطقه سیستان و بلوچستان p.f یا p.v و یا انواع دیگر گونه های مالاریای انسانی است؟

2. آلودگی مخلوط در این منطقه بیشتر شامل چه گونه هایی از مالاریای انسانی است؟و با چه درصدی؟

3. آیا آلودگی به انواع مالاریای انسانی مالاریه ، اواله در استان وجود دارد یا نه؟

4. توزیع فراوانی گونه های پلاسمودیوم بر حسب جنسیت در جمعیت تحت بررسی چقدر است؟

5. توزیع فراوانی گونه های پلاسمودیوم بر حسب سن افراد در جمعیت تحت بررسی چقدر است؟

6. توزیع فراوانی گونه های پلاسمودیوم بر حسب تابعیت افراد در جمعیت تحت بررسی چقدراست؟

هدف کلی طرحتعیین توزیع فراوانی گونه های مختلف عامل مالاریای انسانی در استان سیستان و بلوچستان
اهداف اختصاصی1. تعیین گونه غالب و فراوانی آن در جمعیت تحت بررسی

2. تعیین وجود و درصد آلودگی های مخلوط گونه های پلاسمودیوم در جمعیت تحت بررسی

3. تعیین فراوانی دیگر گونه های مولد مالاریای انسانی در جمعیت تحت بررسی

4.تعیین فراوانی گونه های پلاسمودیوم در جمعیت تحت بررسی به تفکیک جنس.

5.تعیین فراوانی گونه های پلاسمودیوم در جمعیت تحت بررسی به تفکیک سن.

6. تعیین فراوانی گونه های پلاسمودیوم در جمعیت تحت بررسی به تفکیک تابعیت

سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحمراکز خدمات بهداشتی- درمانی
تعریف واژه های تخصصیمالاریا مغزی: مهمترین عارضه عفونت فالسیپاروم است و در اغلب موارد عامل مرگ و میر مالاریا است از علایم آن سر درد شدید است که متعاقب آن خواب آلودگی، پریشانی ، اغما ظاهر میشود تب پیشاب سیاه: همولیز دسته جمعی و ناگهانی گلبول قرمز اعم از گلبولهای انگل دار و سالم در داخل رگ ها هیپوگلیسمی: افزایش انسولین خون در افراد بالغ بر اثر درمان مالاریای فالسیپاروم با کینین یا کینیدین روزتینگ(Rosetting): یک فرآیند اتصال گلبول های قرمز سالم به گلبول های قرمز آلوده به انگل بالغ غیر جنسی است. حدود 12-10 گلبول در فرم روزت به هم می چسبند سیتو ادهرنس: فرایند اتصال گلبول قرمز آلوده به عروق اندوتلیال و رگهای خونی کوچک
relaps: عود هم گفته میشود در پلاسمودیوم ویواکس وپلاسمودیوم اووال تعدادی از انگلها به‌صورت نهفته در کبد باقی می‌مانند که هیپنوزوئیت نامیده می‌شوند و در مراحل بعدی (3 سال به شرط ترک مناطق اندمیک)رشد کرده ومروزوئیت های را تولید می‌کنندکه به گلبولهای قرمز حمله کرده و باعث ایجاد عود بیماری می شوند
نوع مطالعهمطالعه حاضر یک مطالعه توصیفی - مقطعی میباشد.
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)جامعه آماری شامل افرادی است که در پیک اول مالاریا ، علایم بیماری مالاریا را داشته و به مراکز بهداشـتی درمـانی شهرستان های فوق (چابهار ، نیکشهر ، ایرانشهر و سرباز) مراجعه کرده باشند. معیار ورود: همه کسانی که با علایم مشکوک به بیماری مالاریا به مراکز بهداشتی مراجعه می نمایند.
معیار خروج : افرادی که رضایت به همکاری نداشته باشند.
حجم نمونه و روش محاسبه آنحجم نمونه شامل 100نفر از مراجعه کنندگان به مراکز بهداشتی در شهرستانهای چابهار ،ایرانشهر، نیکشهر ، سرباز میباشد و زمان نمونه گیری از فروردین تا مرداد سال1394 میباشد
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)با مراجعه به مراکز بهداشتی و درمانی شهرستانهای فوق ، به صورت احتمالی و سرشماری بیمارانی را که مبتلا به مالاریا تشخیص داده شده اند و هم چنین مشکوک به مالاریا هستند را انتخاب میکنیم و با رضایت کتبی از آنها خون گرفته میشود و در لوله حاوی EDTA منتقل میشود و با رعایت زنجیره سرد به آزمایشگاه گروه انگل شناسی منتقل میگردد
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)1.پرسشنامه


2.فرم اطلاعاتی


3.روش مولکولی Nested PCR


4.استفاده از نرم افزار SPSS برای گردآوری اطلاعات




پرسشنامه طرح بررسی مولکولار اپیدمیولوژی گونه های مختلف مالاریا در استان سیستان و بلوچستان





مشخصات فردی: کد بیمار:

1. نام و نام خانوادگی:.........

2. جنسیت:

مرد زن

3. سن بر حسب ماه؟.........

4. آیا مایلید از شما خون گرفته شود؟

بلی خیر

5.تابعیت:

ایرانی افغانی پاکستانی سایر (نام ببرید....)

6. در صورت تابعیت غیر ایرانی چند سال است که به ایران آمده اید؟ به چه دلیل؟

6.آیا اولین بار است که به مرکز بهداشت مراجعه میکنید؟

بلی خیر (در صورت جواب خیر) چرا....

7.آیا داروهای ضد مالاریا استفاده می کنید؟

بلی خیر

در صورت بلی لیست داروی مصرفی؟

8. آیا تاکنون سفر به کشورهای همسایه داشته اید؟

بلی خیر

در صورت بلی به کدام کشورها سفر داشته اید و چند بار؟....

فرم اطلاعاتی طرح بررسی مولکولار اپیدمیولوژی گونه های مختلف مالاریا در استان سیستان و بلوچستان

کد بیمار جنسیت تابعیت سن مشکوک به کدام پلاسمودیوم نتیجه PCR گونه پلاسمودیوم

روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)جامعه آماری در این طرح شامل افرادی است که در پیک اول مالاریا ، علایم بیماری مالاریا را داشته و مشکوک به بیماری مالاریا باشند و به مراکز بهداشـتی درمـانی شهرستان های فوق (چابهار ، نیکشهر ، ایرانشهر و سرباز) مراجعه کرده باشند.معیار ورود: همه کسانی که با علایم مشکوک به بیماری مالاریا به مراکز بهداشتی مراجعه می نمایند.معیار خروج : افرادی که رضایت به همکاری نداشته باشند.انتخاب نمونه در این طرح به صورت سرشماری از مراجعه کنندگان به مراکز بهداشتی مرکز شهرستانهای فوق انجام میگیرد.
در این طرح پس از هماهنگی های لازم با معاونت پژوهشی ابتدا به مراکز بهداشت شهرستانهای فوق رفته و هماهنگی برای انجام این مطالعه در پیک اول مالاریا انجام میشود و در هر شهر یک کارشناس خبره را انتخاب میکنیم و به او آموزش می دهیم تا در پیک مالاریا از کسانی که به مراکز بهداشت مراجعه می کنند و مشکوک به مالاریا هستند ابتدا سوالات پرسشنامه را بپرسد و سپس از بیمار 2 میلی لیتر خون وریدی با رضایت جمع آوری شود و به لوله حاوی EDTA (به عنوان یک ماده ضد انعقاد در نمونه ها) منتقل کرده و در COLD BOX قرار دهد تا انتقال زنجیره سرد رعایت گردد و جهت انجام سایر آزمایشات به آزمایشگاه گروه انگل شناسی زاهدان انتقال می دهیم.همچنین لازم به ذکر است که تا قبل از نمونه گیری تمام وسایل مورد نیاز برای آزمایشات را تهیه کرده و تحت شرایط استاندارد در آزمایشگاه تحقیقاتی مولکولار پارازیتولوژی گروه انگل شناسی و قارچ شناسی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی زاهدان نگه داری می کنیم
در آزمایشگاه گروه انگل شناسی زاهدان آزمایشات زیر را انجام می دهیم:
DNA در این مرحله ، با استفاده از روش کیت استخراج DNA ,DNAجهت انجام PCR استخراج می گردد. و در مرحله PCRاز 5 جفت پرایمر اولیگو نوکلئوتیدی برای تشخیص و پیدا نمودن گونه های مختلف پلاسمودیوم انسانی استفاده میشود ژن مورد هدف در واکنش زنجیره ایی پلیمراز ، ژنی است که برای بخش تحتانی کوچک RNA ریبوزومی کد شده است.( ssr-RNA ) این ژنها بخشی از ژنوم اصلی هستند که دارای ردیف های نوکلئوتیدی ثابت در میان گونه های مختلف مالاریا می باشد و به علاوه دارای بخش های اختصاصی برای هر کدام از گونه های چهارگانه پلاسمودیوم انسانی در بخش اصلی ژنوم برای تشخیص و شناسایی گونه وجود دارد.(35-5،20،34).در عملیات PCR،DNA خالص شده از انگل مالاریا را به عنوان نمونه مورد استفاده قرار می گیرد و پرایمر استفاده شده در واکنش اولیه ژن اختصاصی گونه های rplu5 و rplu6 است زیرا این دو پرایمر بخشی از ژنوم اختصاصی 4 گونه انسانی را می سازد سپس برای مرحله دوم و جداسازی 4گونه مختلف پلاسمودیوم انسانی از 4 جفت متفاوت پرایمر اختصاصی استفاده میگردد به عبارتی برای هر نمونه 5 واکنش الزامی برای تعیین گونه انجام میگردد
مراحل چرخه ایی در واکنش 1 عبارت است از:
1. جداسازی مولکول DNA: حرارت 95 درجه به مدت 5 دقیقه
2.شروع ساخت مولکولهای جدید DNA در 58 درجه به مدت 2 دقیقه
3.ادامه گسترش کپی سازی در 72 درجه به مدت 2 دقیقه
4. حرارت 94 درجه به مدت 1 دقیقه برای جداسازی مولکول 2 رشته DNA
5. تکرار مراحل4-2 ، 24 مرتبه
6. اتمام واکنش و کاهش دما به 20 درجه
در مرحله دوم تمام مراحل فوق تکرار میگردد به جز تعداد تکرار مراحل فوق الذکر به 30 مرتبه میرسد . سپس برای بررسی نتیجه واکنش و اطمینان از تکثیر قطعه مورد نظر ، از الکتروفورز برروی ژل آگارز استفاده میگردد.
و در آخر اطلاعات بیمار را وارد فرم اطلاعات کرده و سپس اطلاعات ثبت شده را وارد کامپیوتر میکنیم و برای آنالیز داده ها از نرم افزار SPSSاستفاده میکنیم و سپس با استناد به روش های آماری توصیفی : جداول توزیع فراوانی ،رسم نمودار و تعیین شاخصهای آماری داده ها تجزیه و تحلیل خواهند شد
ضمنأ پرایمرهای مورد استفاده به شرح زیر است:
طول محصول توالی نام پرایمر
1200bp 5'-CTTGTTGTTGCCTTAAACTT-3'
5'-TTAAAATTGCAGTTAAAACG-3' rplu5
rplu6
205bp 5'-TTAAACTGGTTTGGGAAAACCAAATATATT-3'
5'-ACACAATGAACTCAATCATGACTACCCGTC-3' rFAL.1
rFAL.2
120bp 5'-CGCTTCTAGCTTAATCCACATAACTGATAC-3'
5'-ACTTCCAAGCCGAAGCAAAGAAAGTCCTTA-3' rVIV.1
rVIV.2
144bp 5'-ATAACATAGTTGTACGTTAAGAATAACCGC-3'
5'-AAAATTCCCATGCATAAAAAATTATACAAA-3' rMAL.1
rMAL.2
800bp 5'-ATCTCTTTTGCTATTTTTTAGTATTGGAGA-3'
5'-GGAAAAGGACACATTAATTGTATCCTAGTG-3' rOVAL.1
rOVAI2
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)اطلاعات بیمار را وارد فرم اطلاعات کرده و سپس اطلاعات ثبت شده را وارد کامپیوتر میکنیم و برای آنالیز داده ها از نرم افزار SPSSاستفاده میکنیم و سپس با استناد به روش های آماری توصیفی : جداول توزیع فراوانی ،رسم نمودار و تعیین شاخصهای آماری داده ها تجزیه و تحلیل خواهند شد
ملاحظات اخلاقی در این پژوهش کدهای اخلاقی زیر از دفترچه راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش های علوم پزشکی دارای آزمودنی انسانی با کد های ( 1، 2، 3، 4، 5، 7، 10، 11، 12، 13، 14، 15، 16، 17، 18، 19، 20، 21، 22، 23، 25، 26، 27، 28، 29، 30 و 31)
و همچنین در این پژوهش کدهای اخلاقی زیر از دفتر چه راهنمای اخلاقی پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی در جمهوری اسلامی ایران راهنمای عمومی با کد های (1، 2، 3، 4، 5، 6، 7، 8، 9، 10 و 11) رعایت شده است.
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها- دشوار بودن مسیرها
راه حل : در اختیار قرار گذاشتن ماشین در اختیار محقق توسط مرکز بهداشت شهرستانهای فوق با همکاری و هماهنگی معاونت دانشگاه علوم پزشکی زاهدان
- اسکان محقق
راه حل : در اختیار قرار دادن خوابگاه توسط مرکز بهداشت شهرستانهای فوق با همکاری و هماهنگی معاونت دانشگاه علوم پزشکی زاهدان
- عدم همکاری بیمار
راه حل : توضیح دادن در مورد منافع این طرح و این که هیچ ضرری متوجه آنان نخواهد شد و اطلاعات آنها به طور محرمانه باقی خواهد ماند و نامشان به هیچ عنوان فاش نخواهد شد.
کلمات کلیدیMalaria ,species Plasmodiums. nested PCR
مالاریا ، گونه های پلاسمودیوم،واکنش زنجیره ایی پلیمراز تو در تو(آشیانه ایی)
فهرست منابع و مراجع.صائبی، اسماعیل. 1390، "بیمارهای انگلی در ایران (تک یاختگان) "، انتشارات آییژ تهران
2. Aregawi M . World Malaria Report . 2008, World Health Organization. Geneva, Switzerland: 15-9
3. Oddoux O, Debourgogne A, Kantele A, Kocken CH, Jokiranta TS, Vedy S, et all. Identification of the five human Plasmodium species including P. knowlesi by realtime polymerase chain reaction. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2011 Apr ; 30(4) :597-601
4.M. Carlton J, H. Adams J, C. Silva J, L. Bidwell Sh,Lorenzi H, Caler E,etal. Comparative genomics of the neglected human malaria parasite Plasmodium vivax. Nature 2008 October 9; 455(7214): 757–763.
5. Zakeri S, Mamaghani S, Mehrizi A, Shahsavari Z, Raeisi A, Arshi S, et al. Molecular evidence of mixed Plasmodium vivax and P. falciparum infections in northern Iran. Eastern Mediterranean Health Journal 2004;10(3):336–342.
6. Haghdoost AA, Mazhari S, Bahaadini K. Estimating the relapse risk of Plasmodium vivax in Iran under national chemotherapy scheme using a novel method. J Vector Borne Dis. 2006;43(4):168-172
7. R Galinski M, W Barnwell J.REVIEW Plasmodium vivax: who cares?. Malaria Journal 2008 ; 7(1)
8. Naing C, A. Whittaker M , Nyunt Wai V , Wah Mak J. Is Plasmodium vivax Malaria a Severe Malaria?: ASystematic Review and Meta-Analysis. PLOS Neglected Tropical Diseases 2014; 8 (8):1-11
9. Tjitra E, Anstey NM, Sugiarto P, Warikar N, Kenangalem E .Multidrug-resistant Plasmodium vivax associated with severe and fatal malaria: a prospective study in Papua, Indonesia. PLoS Med 2008;5
10. Price RN, Douglas NM, Anstey NM .New developments in Plasmodium vivax malaria: severe disease and the rise of chloroquine resistance. Curr Opin Infect Dis 2009 ; 22: 430–435
11. Marfurt J, de Monbrison F, Brega S, Barbollat L, Mu¨ ller I, et al. Molecular markers of in vivo Plasmodium vivax resistance to amodiaquine plus sulfadoxine-pyrimethamine: mutations in pvdhfr and pvmdr1.JInfectDis2008;198:409–417. 12. E.Wellems Thomas , Hayton Karen , M. Fairhurst Rick . The impact of malaria parasitism from corpuscles to communities. Clinical Investigation September 2009 ; 119 (9):2496-2505
13. Miller L , Milon G. Malaria pathogenesis. Science 1994;264:1878–1883 14. N Patel D, Pradeep P, Surti MM , Agarwal SB. Clinical Manifestations of Complicated Malaria –An Overview. JIACM 2003; 4(4):323-31 15.Kirchgatter K, Hernando A, Portill D. Clinical and molecular aspects of severe malaria. An Acad Bras Cienc 2005;77(3):455-475 16. Chen Q, Schlichtherle M, Wahlgren M. Molecular Aspects of Severe Malaria Clinical Microbiology Reviews July 2000; 13( 3): 439–450 17.Rowe J. A, Claessens A, A. Corrigan R, Arman M. Adhesion of Plasmodiumfalciparum-infected erythrocytes to human cells: molecular mechanisms and therapeutic implications. Expert Rev. Mol. Med May 2009;11 18.WorldMalariaRiskChart2014.IAMAT 19. E. Collins W, M. Jeffery G.Plasmodium malariae: Parasite and Disease. Clinic Microbiology Reviews Oct 2007;20(4): 579–592
20.ابراهیم زاده،عادل."مولکولار اپیدمیولوژی گونه های مختلف مالاریای انسانی در استان سیستان و بلوچستان به روش واکنش زنجیره پلیمراز(PCR)"طرح تحقیقاتی،دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی زاهدان،81-80.
21.E. Collins W, M. Jeffery G.Plasmodium ovale: Parasite and Disease. Clinical Microbiology Reviews July 2005;18(3): 570–581
22.Gleason N. N., Fisher G. U, Blumhardt R, Roth A. E, Gaffney G. W. Plasmodium ovale Malaria Acquired in Viet-Nam. Bull. Org. mond. Santj 1970;42:399-403
23. رئیسی احمد،نیکپور فاطمه،رنجبرکهخا منصور و همکاران.روند بیماری مالاریا در جمهوری اسلامی ایران.

24. Nwaka S. Drug discovery and beyond:the role of public-private partnerships in improving access to new malaria medicines. Trans R Soc Trop Med Hyg 2005; 99: 20-29
25. Sadrizadeh B. Malaria in the world,in the eastern Mediterranean region and in Iran: Review article. WHO/EMRO Report: 2001; 1-13
26. Malaria in the scope of 1404, C.f.D.C. Malaria Control and Management office,Ministry of Health and Medical Education. Editor: Tehran
27. WHO. 2013. World malaria report. World Health Organization, Geneva,Switzerland.
28. Raeisi A,Gouya MM, Nadim A, Ranjbar M, Hasanzehi A, Fallahnezhad M ,et al. Determination of Malaria Epidemiological Status in Iran’s Malarious Areas as Baseline Information for Implementation of Malaria Elimination Program in Iran. Iranian J Publ Health Mar 2013; 42(3): 326-333
29. Youssefi M R, Rahimi M T.Prevalence of malaria infection in Sarbaz, Sistan and Bluchistan province. Asian Pac J Trop Biomed 2011; 1(6): 491-492
30.عشاقی محمدعلی،مرادی محمدتقی،تقی لو بهروز. تشخیص گونه های انگل مالاریا به روش nestedPCR در پشه های ناقل و خون های آلوده منطقه چابهار و ایرانشهر ایران.مجله پژوهشی حکیم،دوره7،شماره3(پاییز83):31-24
31.Zakeri S , Kakar Q, Ghasemi F, Raeisi A, Butt W, Safi N, etal.Detection of mixed Plasmodium falciparum & P. vivax infections by nested-PCR in Pakistan, Iran & Afghanistan. Indian J Med Res 132 July 2010:31-35
32. Fekri S, Vatandoost H, Daryanavard A, Shahi M, Safari R, Raeisi A,etal. Malaria Situation in an Endemic Area, Southeastern Iran. J Arthropod-BorneDisJune2014;8(1):82–90 33. Assmar M, Terhovanessian A, Jahani MR, Nahrevanian H, Amirkhani A, Piazak N,etal.Molecular Epidemiology Of Malaria In endemic Areas Of IRAN. Southeast Asian J Trop Med Public Health 2003;34(2):15-19 34.Snounou G, Viriyakosol S, Jarra W, Thaithong S, Brown KN. Identification of the four human malaria parasite species in field samples by the polymerase chain reaction and detection of a high prevalence of mixed infections. Mol Biochem Parasitol1993;58:283-92. 35.Snounou G, Viriyakosol S, Zhu XP, Jarra W, Pinheiro L, do Rosario VE, et al. High sensitivity of detection of human malaria parasites by the use of nested polymerase chain reaction. Mol Biochem Parasitol 1993; 61 :315-20.

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
1 (1).pdf1393/09/24405629دانلود
1 (2).pdf1393/09/244877282دانلود
2 (1).pdf1393/09/24467336دانلود
proposal.malaria.docx1393/09/24141072دانلود
proposal.malaria.pdf1393/09/241150582دانلود
eslahiye.form rezayate agahane.doc1393/10/0190112دانلود
proposal.eslah shode.malaria.docx1393/10/02141167دانلود
proposal.eslah shode.malaria.pdf1393/10/021198636دانلود
proposal.malaria.eslah shodeye shora pazhohesh.docx1393/10/26141560دانلود
proposal.malaria.eslah shodeye shora pazhohesh.pdf1393/10/261124436دانلود
nahaee.docx1393/11/04157424دانلود
nahaee deportment committee .docx1393/11/15142076دانلود
aslahate komite akhlagh.docx1393/11/20158535دانلود