بررسی اثرات محفاظتی پرولیفراتیو و آنتی اکسیدانی عصاره هیدروالکلی ویتانیا کواگولانت بر مدل هیپرپلازی خوش خیم پروستات در رت

Study of the prolifrative-Protective and antioxidant effects of withania coagulant hydro alcoholic extract on benign prostatic hyperplasia model in rat


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: مریم سربیشگی درمیان

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 7149
عنوان فارسی طرح بررسی اثرات محفاظتی پرولیفراتیو و آنتی اکسیدانی عصاره هیدروالکلی ویتانیا کواگولانت بر مدل هیپرپلازی خوش خیم پروستات در رت
عنوان لاتین طرح Study of the prolifrative-Protective and antioxidant effects of withania coagulant hydro alcoholic extract on benign prostatic hyperplasia model in rat
نوع طرح
محل اجرای طرح
رسته مطالعاتی تجربی- آزمایشگاهی
دانشکده/مرکز دانشکده پزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز 92

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
محدثه خانیهمکاراجراء طرحکارشناسیmohadesekhani68@gmail.com
سعیده سلیمیمشاور دکترای تخصصی sasalimi@yahoo.com
مریم سربیشگی درمیانمجری دکترای تخصصی msarbishegi@yahoo.co.in

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی اثرات محفاظتی پرولیفراتیو و آنتی اکسیدانی عصاره هیدروالکلی ویتانیا کواگولانت بر مدل هیپرپلازی خوش خیم پروستات در رت
خلاصه طرح به لاتینStudy of the prolifrative-Protective and antioxidant effects of withania coagulant hydro alcoholic extract on benign prostatic hyperplasia model in rat
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشپروستات غده ای است که در طی دوره زندگی مردان تحت تغییرات زیادی قرار می گیرد . در هنگام تولد به اندازه یک نخود می باشد ولی پس از آن به آرامی شروع به رشد کرده و در زمان بلوغ و پس از آن به سرعت بزرگ می شود تا به سایز طبیعی آن در یک مرد بالغ برسد .


پرولیفراسیون سلولی بیش از اندازه میتواند باعث افزایش سایز و وزن آن گردد . هیپرپلازی خوش خیم پروستات (BPH ) یک اختلال ارولوژیکی است که به بزرگ شدن غیرسرطانی پروستات در مردان اطلاق می شود . با بزرگ شدن تدریجی پروستات پیشابراه تحت فشار قرار گرفته و باعث بروز علائمی از جمله : ضعیف شدن جریان ادرار ، عدم تخلیه کافی مثانه ، ناکچوری ، دیزوری ، و انسداد خروجی مثانه می گردد ، این علائم که مربوط به BPHمی باشد به عنوان علائم مجاری ادرای تحتانی (LUTS) نامیده می شود.( 1)


این غده یک ارگان وابسته به آندروژن می باشد . در بدن ، تستوسترون در استرومای غده پروستات تحت تاثیر 5- آلفا ردوکتاز به دی هیدروتستوسترون (DHT ) تبدیل می شود تمایل DHT برای باند شدن به رسپتور آندروژن 10 برابر تستوسترون است DHT با باند شدن به رسپتور آندروژن باعث تحریک رونویسی فاکتور رشدی میگردد که برای سلولهای اپیتلیال و استرومای پروستات میتوژنیک است ، بنابراین DHT یکی از عوامل مسئول در هیپرپلازی سلولهای استرومال و اپیتلیال پروستات می باشد . ( 2 )


استرس اکسیداتیو عدم تعادل آنتی اکسیدان به پراکسیدان به نفع پراکسیدان است و با بالا رفتن سن نیز افزایش می یابد و باعث تشدید آسیب بافتی می شود.استرس اکسیداتیو نقش مهمی را در ایجاد التهاب و بیماری های مرتبط با پیری ایفا می کند. ( 3 )


رادیکال های آزاد ایجاد شده باعث پراکسیداسیون لیپیدهای غشاء، اکسیداسیون پروتئین ها و نتیجتاًً آسیب های شدید سلولی می گردند . کاهش سطح آنتی اکسیدان های پلاسما ، افزایش سطح MDA و ایجاد التهاب ،نقش استرس اکسیداتیو را در بیماری BPH نشان می دهد. ( 3 )


نتیجه تحقیقات نشان می دهد که التهاب پروستات با پاتوژنز BPH و LUTS در ارتباط است بطوریکه التهاب می تواند باعث بیان بیش از حد سایتوکین های پیش التهابی مانند اینترلوکین -6 (IL-6) ، اینترلوکین -8 (IL-8 ) و فاکتور نکروز توموری آلف (TNF-α) گردد .( 4،5 )


از طرفی ماکروفاژها و لنفوسیت ها باعث القاء بیان COX-2 در اپیتلیوم پروستات وبدنبال آن بیان بیش از حد ژن آنتی آپوپتوتیک BCL-2 و افزایش پرولیفراسیون سلولی در پروستات می شوند .(6،7)





یکی دیگر از عوامل ایجاد هیپرپلازی پروستات عدم تعادل بین پرولیفراسیون سلولی و آپوپتوز می باشد( 8،9 )بطوریکه تحقیقات نشان میدهد بیان PCNA(Prolifrative Cell Nuclear Antigen) در BPH بطور قابل توجهی افزایش مییابد . (10 )


دو درمان اصلی که برای هیپرپلازی خوش خیم پروستات استفاده می شود عبارتند از : 1- استفاده از آنتاگونیستهای رسپتور α1-adrenergic 2- استفاده از مهارکننده های 5α-reductase


آنتاگونیستهای رسپتور آلفا – 1 آدرنرژیک شامل doxazosin ، terazosin و tamsulosin می باشند که با ریلکس کردن عضله صاف در پروستات و گردن مثانه باعث برطرف شدن علائم LUTS می گردند .


از طرفی دیگر مهارکننده های 5-آلفا ردوکتاز مانند فیناستراید با کاهش تولید دی هیدروتستوسترون (DHT) باعث مهار هیپرپلازی پروستات می گردد . ( 11،12 )


به هر حال استفاده از این داروها بدلیل عوارض جانبی شان مانند کاهش لیبیدو ، اختلال در ارکشن و اژاکولیشن ، ژنیکوماستی و احتقان بینی محدود می باشد . ( 13 )


امروزه استفاده از داروهای گیاهی و استفاده از عوامل فیتوتراپیک به عنوان درمانهای آلترناتیو مکمل مورد توجه محققین قرار گرفته شده است .


گیاه پنیرباد ) ویتانیا کواگولانت ( متعلق به خانواده ی سولاناسه گیاهی است بومی محدود به منطقه ی بلوچستان در استان سیستان و بلوچستان است و عمدتاً در رویشگاه های طبیعی شهرستانهای سراوان، خاش و ارتفاعات بم پشت رشد میکند دامداران محلی در استان سیستان و بلوچستان از میوه های گیاه دارویی ویتانیا کواگولانس با استفاده از شیر گاو و گوسفند یک نوع پنیر سفید نرم تولید میکنند که کاملا به صورت تجربی تهیه میشود . ( 14)


قسمت های مختلف این گیاه در طب سنتی برا ی درمان ، اسهال، استفراغ و فشارخون تجویز می شود یافته های جدید حاکی از تأثیرات ضد سرطانی ، ضد دیابتی ،ضد التهابی وآنتی اکسیدانی آن می باشد . (15،16)


youn 2013) (نشان داد که ویتافرین A موجود در عصاره گیاه ویتانیا دارای اثرات ضدالتهابی است و میتواند باعث مهار TNFα و cox-2 گردد . ( 17)


Nithya و همکارانش طی مطالعه ای عنوان کردند که ویتانیا کواگولانس با مهار بیان cox-2 دارای اثر بیشتری بر مهار التهاب نسبت به ضد التهابهای غیر استروئیدی دارد . ( 18)


ترکیبات موجود در گیاه ویتانیا، نظیر ویتافرین A بطور گسترده ای به عنوان ترکیبات فعال آنتی اکسیدانی بر روی فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدان نظیر سوپراکسید دیسموتاز، کاتالاز و گلوتاتیون پروکسیداز تاثیر مثبت داشته و باعث کاهش رادیکال های آزاد می شود .( 19)


همچنین در درمان بیماریهای مرتبط با Aging مانند آترواسکلروز ، دیابت ، پارکینسون و آلزایمر که با تجمع ROS همراه است بعنوان یک ماده خنثی کننده رادیکال های آزاد مورد استفاده قرار گرفته شده است . ( 20)


نتیجه تحقیقات Subramanian و همکارانش نشان داد که عصاره ویتانیا کواگولانس دارای خواص آنتی پرولیفراتیو در مقابل اسکواموس کارسینومای سرو گردن می باشد .( 21)


خواص آنتی آپوپتوتیک ، آنتی پرولیفراتیو ، آنتی متاستاتیک و پروآپوپتوتیک ویتانولوئیدها با مهار NFκβ و پروتئین های آنتی آپوپتوتیک Bcl2 و Bcl-xl در انواع مختلف سرطان ها توسط سایر محققین نیز نشان داده شده است . ( 22،23،24 )





Mahdi و همکاران نیز عنوان کردند که ویتانیا قادر به درمان الیگو اسپرمی و بهبود کیفیت اسپرم در مردان نابارور می باشد .از طرفی در رت های ماده میتواند با عث افزایش فولیکولوژنز و گنادوتروپین شود . ( 25)


همچنین ویتانولوئیدها بعنوان هورمونهای گیاهی شناخته شده اند و قادرند با اشغال کردن رسپتورهای سطح سلول مانع باند شدن هورمونها به جایگاه فعالشان گردیده و در نتیجه مانع فعالیت آنها شوند . ( 26 )


با توجه به اینکه این گیاه بومی منطقه سیستان و بلوچستان بوده و تاکنون تاثیر آن بر هیپرپلازی پروستات بررسی نشده است بنابراین هدف از این مطالعه بررسی اثرات محافظتی پرولیفراتیو و آنتی اکسیدانی عصاره هیدروالکلی این گیاه بر مدل هیپرپلازی خوش خیم پروستات در رت می باشد .


سوالات و / یا فرضیات پژوهش• عصاره هیدروالکلی ویتانیا کواگولانت باعث کاهش وزن پروستات در رتهای مدل BPH نسبت به گروه کنترل می شود .
• عصاره هیدروالکلی ویتانیا کواگولانت باعث کاهش بیان PCNA در بافت پروستات رت های مدل نسبت به گروه کنترل می گردد .
• عصاره هیدروالکلی ویتانیا کواگولانت باعث افزایش میزان ظرفیت آنتی اکسیدانی تام (TAC) در بافت پروستات رت های مدل نسبت به گروه کنترل می گردد .
عصاره هیدروالکلی ویتانیا کواگولانت باعث کاهش میزان مالون دی آلدئید(MDA) در بافت پروستات رت های مدل نسبت به گروه کنترل می گردد .
هدف کلی طرحتعیین اثرات محافظتی پرولیفراتیو و آنتی اکسیدانی عصاره هیدروالکلی ویتانیا کواگولانت بر مدل هیپرپلازی خوش خیم پروستات در رت
اهداف اختصاصی• مقایسه اثر عصاره ویتانیا کواگولانت بر میزان وزن پروستات بین گروههای تیمار شده با عصاره و گروههای تیمار نشده

• مقایسه اثر عصاره ویتانیا کواگولانت بر میزان پرولیفراسیون سلولی در بافت پروستات بین گروههای تیمار شده با عصاره و گروههای تیمار نشده

• مقایسه اثر عصاره ویتانیا کواگولانت بر میزان ظرفیت آنتی اکسیدانی تام (TAC) در پروستات بین گروههای تیمار شده با عصاره و گروههای تیمار نشده

• مقایسه اثر عصاره ویتانیا کواگولانت بر میزان مالون دی آلدئید ( MDA ) در پروستات بین گروههای تیمار شده با عصاره و گروههای تیمار نشده

• مقایسه اثر عصاره ویتانیا کواگولانت در دوز های 250-500 و 1000 میلی گرم بر پرولیفراسیون سلولی– میزان ظرفیت آنتی اکسیدانی کل – میزان مالون دی آلدئید و وزن پروستات

سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح
تعریف واژه های تخصصیهیپرپلازی خوش خیم پروستات = افزایش تعداد سلولهای اپیتلیال غده پروستات
نوع مطالعهدراین مطالعه پژوهش انجام شده از نوع تجربی می باشد .
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)موش های صحرایی نر نژاد ویستار
حجم نمونه و روش محاسبه آندر این مطالعه 60 سر (6 گروه ده تایی) موش صحرایی نر نژاد ویستار استفاده می گردد
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)بصورت تصادفی ساده
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)سطح آنتی اکسیدانی کل و میزان مالون دی آلدئید با استفاده از کیت های مخصوص ، تعیین تغییرات بافتی با استفاده از میکروسکوپ نوری (رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین) و پرولیفراسیون سلولی با استفاده از آنتی بادی مخصوص و اندازه گیری وزن پروستات توسط ترازوی دقیق انجام می گردد
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)عصاره گیری از گیاه ویتانیا کواگولانس:

جمع آوری نمونه های ریشه گیاه پنیرباد از گلخانه مرکز پژوهشی گیاهان دارویی و زینتی دانشگاه سیستان و بلوچستان انجام می شود. نمونه ها بعد از جمع آوری با آب بدون یون شسته و در دمای25° در محیط آزمایشگاه خشک شده و عصاره هیدروالکلی به میزان مورد نیاز تهیه می گردد .



تعیین خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره :

تعیین خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره ویتانیا کواگولانس با استفاده از فعالیت مهار رادیکالها توسط روش Moon و Terato (28 )با کمی تغییرات بر پایه قدرت مهار رادیکال ثابت 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) اندازه گیری می شود . از بوتیلات هیدروکسی تولوئن(BHT) به عنوان کنترل مثبت استفاده می شود .

گروه بندی حیوانات :

در این تحقیق از تعداد60 سر رت نر نژاد ویستار در محدوده وزنی 250-200 گرم و سن 3 الی 4 ماه استفاده می شود . حیوانات در شرایط استاندارد و با دوره روشنایی و تاریکی 12ساعته و دمای 3±21 نگهداری می شوند و دسترسی آزاد به آب و غذا خواهند داشت .

حیوانات بطور تصادفی انتخاب شده و در 6 گروه 10تایی زیر قرار می گیرند :

گروه 1 : گروهی که هیچ مداخله ای صورت نمی گیرد .

گروه 2 : به مدت 4 هفته روزانه آب مقطر از طریق گاواژ دهانی دریافت کرده و همزمان روغن ذرت به مدت 3 هفته بصورت زیرجلدی تزریق می گردد

گروه 3: به مدت 4 هفته روزانه آب مقطر از طریق گاواژ دهانی دریافت کرده و همزمان mg/kg 3 تستوسترون پروپیونات به مدت 3 هفته بصورت زیرجلدی تزریق می گردد .

گروه 4 : به مدت 4 هفته روزانه عصاره گیاه ویتانیا کواگولانس را به میزان mg/kg250 از طریق گاواژ دهانی دریافت کرده و همزمان mg/kg 3 تستوسترون پروپیونات به مدت 3 هفته بصورت زیرجلدی تزریق می گردد .

گروه 5 : : به مدت 4 هفته روزانه عصاره گیاه ویتانیا کواگولانس را به میزان mg/kg500 از طریق گاواژ دهانی دریافت کرده و همزمان mg/kg 3 تستوسترون پروپیونات به مدت 3 هفته بصورت زیرجلدی تزریق می گردد .

گروه 6 : به مدت 4 هفته روزانه عصاره گیاه ویتانیا کواگولانس را به میزان mg/kg1000از طریق گاواژ دهانی دریافت کرده و همزمان mg/kg 3 تستوسترون پروپیونات به مدت 3 هفته بصورت زیرجلدی تزریق می گردد .

یکروز پس از آخرین دوز تزریق و گاواژ ، طی بیهوشی عمیق حیوانات به روش نخاعی کشته شده و پروستات خارج و وزن می گردد همچنین نسبت وزن پروستات به وزن بدن ( پروستات ایندکس ) نیز محاسبه می شود .

آماده سازی هموژن پروستات :

بافت پروستات با محلول لیزکننده بافت (Tissue lysis) به نسبت (1/10 , W/V) هموژن می گردد و پس از آن هموژنات به مدت 25 دقیقه در دمای 4 درجه سانتی گراد با دور 12000 سانتریفیوژ می شود . غلظت پروتئین در مایع رویی اندازه گیری شده و همچنین میزان فعالیت ظرفیت آنتی اکسیدانی کل و میزان مالون دی آلدئید تعیین می گردد .







اندازه گیری میزان مالون دی آلدئید (MDA) به روش اسپکتروفتومتری

برای اندازه گیری میزان مالون دی آلدئید از روش TBRAS (29)استفاده میشود . واکنش مالون دی آلدئید با اسیدتیو باربیتوریک در دمای جوش، منجر به تولید رنگ صورتی می شودکه بوسیله n بوتانول استخراج میگردد و جذب آن در طول موج 530 نانومتر قرائت می گردد .



اندازه گیری ظرفیت آنتی اکسیدانی تام (Total antioxidant capacity)

برای اندازه گیری قدرت آنتی اکسیدانی تام پلاسما از روش FRAP( Ferric reducing ability of plasma) که توسط Stratil, Klejdus, and Kuban (30) ارایه شده استفاده می گردد . به طور خلاصه در این روش توانایی سوپرناتانت پروستات در احیای یون های فریک (Fe3+) اندازه گیری می شود . با احیای یون های فریک و تبدیل آن به یون های فرو (Fe2+) در PH اسیدی و با حضور معرف اختصاصی TPTZ ، کمپلکس آبی رنگی ایجاد می شود که در طول موج 593 نانومتر و بصورت اسپکتروفتومتریک قابل اندازه گیری است .

آزمایشات هیستوپاتولوژیکی:

پروستات پس از خروج از بدن در فرمالین 10% قرار داده شده و جهت فیکس کردن ، نمونه ها در دستگاه پروسسور قرار داده خواهند شد . نهایتاً قالب گیری با پارافین و برش گیری کرونال با ضخامت 7 میکرون انجام سپس با رنگ هماتوکسیلین وائوزین رنگ آمیزی می شوند .

آزمایشات ایمونوهیستولوژیکی :

اندازه گیری بیان PCNA (Prolifrating Cell Nuclear Antigen)

به منظور بیان آنتی ژن پرولیفراسیون سلولی (PCNA) برشهای 7 میکرونی از بلوکهای پارافینی (3 برش از هر گروه) گرفته می شود . برشها توسط زایلن دپارافینه شده و سپس هیدراتاسیون توسط الکلهای نزولی انجام خواهد شد .جهت احیای آنتی ژن های ماسکه شده برشها به مدت 5 دقیقه در سیترات بافر PH:6 تحت حرارت قرار می گیرند .

پس از آن نمونه ها به ترتیب با BSA (آلبومین سرم گاوی)5 درصد به مدت 2 ساعت و با آنتی بادی اولیه PCNA در دمای 4 درجه به مدت یک شبانه روز انکوبه می شوند . پس از شستشو با تریس بافر به ترتیب با آنتی بادی ثانویه و دی آمینو بنزیدین (DAB) به مدت ده دقیقه انکوبه می شوند . جهت رنگ زمینه از رنگ هماتوکسیلین استفاده می شود و پس از مونت کردن توسط میکروسکوپ نوری بررسی می شوند .

روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)داده های حاصل از این مطالعه با استفاده از نرم افزار SPSS جمع آوری می گردد. جهت تجزیه و تحلیل داده ها از آنالیز واریانس یکطرفه (ANOVA) استفاده می شود جهت مقایسه متغیرهای کمی از آزمون Student –t- test یا Man witney u و جهت مقایسه متغیر های کیفی از آزمون های Chi- square استفاده خواهد شد .
ملاحظات اخلاقی در این تحقیق همه آزمایشات مطابق آئین نامه کمیته اخلاق پژوهشی دانشگاه برای مطالعات حیوانی صورت خواهد گرفت. کشتن حیوانات تحت شرایط بیهوشی عمیق انجام خواهد شد تا حیوان کمترین درد و رنج را تحمل نماید.
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهاتاخیر در تامین مواد و مرگ و میر حیوانات
کلمات کلیدیهیپرپلازی خوش خیم پروستات – تستوسترون – آنتی اکسیدان - ویتانیا کواگولانت - پرولیفراسیون سلولی
فهرست منابع و مراجع
1) Roehrborn, C.G., Male lower urinary tract symptoms (LUTS) and benign prostatic hyperplasia (BPH). Medical Clinics of North America, 2011. 95(1): p. 87-100
2) Mizokami, A., et al., Prostate cancer stromal cells and LNCaP cells coordinately activate the androgen receptor through synthesis of testosterone and dihydrotestosterone from dehydroepiandrosterone. Endocrine-related cancer, 2009. 16(4): p. 1139-1155.
3) Merendino RA, Salvo F, Saija A, Di Pasquale G, Tomaino A, Minciullo PL, et al. Malondialdehyde in benign prostate hypertrophy: a useful marker? Mediators nflamm 2003;12:127–8.
4) Kramer G, Mitteregger D, Marberger M. Is benign prostatic hyperplasia (BPH) an inflammatory disease? Eur Urol. 2007;51(5):1202–1216.
5) Scott KA, Arnott CH, Robinson SC, et al. TNF-α regulates epithelial expression of MMP-9 and integrin αvβ6 during tumour promotion. A role for TNF-α in keratinocyte migration? Oncogene. 2004;23(41): 6954–6966.
6) Wang, W., A. Bergh, and J.E. Damber, Chronic inflammation in benign prostate hyperplasia is associated with focal upregulation of cyclooxygenase‐2, Bcl‐2, and cell proliferation in the glandular epithelium. The Prostate, 2004. 61(1): p. 60-72
7) Kramer G, Marberger M. Could inflammation be a key component in the progression of benign prostatic hyperplasia? Curr Opin Urol. 2006;16(1):25–29.
8) F.Deng, F. Gu, and T. Xia, “Proliferation and apoptosis status in benign prostatic hyperplasia,” ZhonghuaWai Ke Za Zhi, vol. 34, no. 10, pp. 620–622, 1996
9) Pawlicki, B., H. Zieliński, and M. Dabrowski, [Role of apoptosis and chronic prostatitis in the pathogenesis of benign prostatic hyperplasia]. Polski merkuriusz lekarski: organ Polskiego Towarzystwa Lekarskiego, 2004. 17(100): p. 307-310.
10) Vikram A, Kushwaha S, Jena GB: Relative influence of testosterone and insulin in the regulation of prostatic cell proliferation and growth.Steroids 2011, 76:416–423.
11) Black L, Naslund MJ, Gilbert TD Jr, Davis EA, Ollendorf DA: An examination of treatment patterns and costs of care among patients with benign prostatic hyperplasia. Am J Managed Care 2006, 12:99–110.
12) Roehrborn CG, Rosen RC: Medical therapy options for aging men with benign prostatic hyperplasia: focus on alfusozin 10 mg once daily. Clin Interv Aging 2008, 3:511–524.
13) Traish AM, Hassani J, Guay AT, Zitzmann M, Hansen ML: Adverse side effects of 5α-reductase inhibitors therapy: persistent diminished libido and erectile dysfunction and depression in a subset of patients. J Sex Med 2011, 8:872–884.
14) Ghahreman A, Attar F. Biodiversity of plant species in Iran: Central Herbarium of Tehran University,Faculty of Science; 1999.p.379. [in persian].
15) Hemalatha S, Wahi A, Singh P, Chansouria J.Hypolipidemic activity of aqueous extract of
Withania coagulans Dunal in albino rats.Phytotherapy Res 2006;20(7):614-7.
16) Jaiswal D, Rai PK, Watal G. Antidiabetic effect of Withania coagulans in experimental rats. Indian J ofClinical Bioch 2009;24(1):88-93
17) Youn, U.J., et al., Biologically active withanolides from Withania coagulans. Journal of natural products, 2013. 76(1): p. 22-28.
18) Nithya K, Vinithra I, Kalaiselvi K .Homology modeling of cyclooxygenase and insilico analysis of interaction between cyclooxygenase and withanolides. Paper presented at the 3rd Indo Korean Joint Seminar on Medicinal Plant Research (IKMPR-2010)
19) Prasad, S., et al., Wound healing activity of Withania coagulans in streptozotocin-induced diabetic rats. Pharmaceutical Biology, 2010. 48(12): p. 1397-1404
20) Maurya, R., Chemistry and pharmacology of Withania coagulans: an Ayurvedic remedy. Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2010. 62(2): p. 153-160.
21) Subramanian SS, Sethi PD .Withaferin-A from the roots of Withania coagulans. CURR SCI INDIA(1969) 38 (11): 267-268
22) Ichikawa H, Takada Y, Shishodia S, Jayaprakasam B, Nair MG, Agarwal BB .Withanolides potentiate apoptosis, inhibit invasion, and abolish osteoclastogenesis through suppression of nuclear factor-kappaB (NF-kappaB) activation and NF-kappaB-regulated gene expression. MOL CANCER THER.(2006), 6: 1434-1445
23) Choudhary MI, Hussain S, Yousuf S, Mudassar AD, Atta-ur- Rahman .Chlorinated and diepoxy withanolides from Withania somnifera and their cytotoxic effects against human lung cancer cell line. Phytochemistry,(2010) . 71: 2205–2209
24) Jayaprakasam B, Zhang Y, Seeram NP, Nair M G .Growth inhibition of human tumor cell lines by withanolides from Withania somnifera leaves. LIFE SCI, 2003 .74:125–132
25) Mahdi, A.A., et al., Withania somnifera improves semen quality in stress-related male fertility. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2011.
26) Al-Qarawi, A.A., Abdel-Rahman, H.A., El-Badry,A.A., Harraz, F., Razig, N.A., Abdel-Magied, E.M., The effect of extracts of Cynomorium coccineum and Withania somnifera on gonadotropins and ovarian follicles of immature Wistar rats. Phytother Res, 2000.14(4):288-90.
27) Belal, N.M., E.M. El-Metwally, and I.S. Salem, Effect of Dietary Intake Ashwagandha Roots Powder on the Levels of Sex Hormones in the Diabetic and Non-Diabetic Male Rats. World Journal of Dairy & Food Sciences, 2012. 7(2): p. 160-166.
28) Moon, J.H., Terao, J., Antioxidant activity of caffeic acid and dihydrocaffe- icacid in lard and human low-density lipoprotein. J. Agric. Food Chem, 1998, 46,5062–5065.
29) Satho, K. Serum lipid peroxide in cerebrovascular disorders determined by a new colorimetric method. Clin. Chim. Acta 1978, 90, 37–43
30) Stratil, P., Klejdus, B., & Kuban, V. Determination of total content of phenolic compounds and their antioxidant activity in vegetables – evaluation of spectrophotometric methods. Journal of Agriculture and Food Chemistry, 2006, 54,607–616.

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
Picture 017.jpg1393/10/031889032دانلود
Picture 018.jpg1393/10/031756184دانلود
nahaee.docx1393/10/21102215دانلود
BPH proposal.docx1393/11/13116278دانلود