بررسی پلی مورفیسم ژنی پری لیپین1 (Rs1052700،Rs4578621)،سوبسترای رسپتور انسولین -1(IRS-1 ) (rs2943641)،FTO(Rs3751812)در افراد مبتلا به دیابت نوع 2 (T2DM)و مقایسه با افراد سالم

Evaluation of genetic polymorphismperilipin1) Rs1052700،Rs4578621(IRS-1)rs2943641،(FTO)Rs3751812(in patients with Type2 Diabetes(T2DM) and compare with healthy subjects


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: رامین سراوانی

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 7179
عنوان فارسی طرح بررسی پلی مورفیسم ژنی پری لیپین1 (Rs1052700،Rs4578621)،سوبسترای رسپتور انسولین -1(IRS-1 ) (rs2943641)،FTO(Rs3751812)در افراد مبتلا به دیابت نوع 2 (T2DM)و مقایسه با افراد سالم
عنوان لاتین طرح Evaluation of genetic polymorphismperilipin1) Rs1052700،Rs4578621(IRS-1)rs2943641،(FTO)Rs3751812(in patients with Type2 Diabetes(T2DM) and compare with healthy subjects
نوع طرح
محل اجرای طرح مدیریت توسعه فناوری سلامت
رسته مطالعاتی بنیادی
دانشکده/مرکز دانشکده پزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز 366

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
رامین سراوانیمجری دکترای تخصصی saravaniramin@yahoo.com
نسرین رنجبرهمکارهمکاری در اجرای طرحکارشناسی ارشدranjbar2014@yahoo.com
حمیدرضا گلویهمکارهمکاری در اجرای طرحکارشناسی ارشدZaums@Zaums.Zaums

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی پلی مورفیسم ژنی پری لیپین1 (Rs1052700،Rs4578621)،سوبسترای رسپتور انسولین -1(IRS-1 ) (rs2943641)،FTO(Rs3751812)در افراد مبتلا به دیابت نوع 2 (T2DM)و مقایسه با افراد سالم
خلاصه طرح به لاتینEvaluation of genetic polymorphismperilipin1) Rs1052700،Rs4578621(IRS-1)rs2943641،(FTO)Rs3751812(in patients with Type2 Diabetes(T2DM) and compare with healthy subjects
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشدیابت اختلال متابولیکی چند فاکتوریال است که بوسیله سطح گلوکز بالای خون مشخص میگردد. شیوع دیابت در سرتاسر جهان به دلایل رشد جمعیت ، پیری ، شیوه زندگی و فعالیت فیزیکی رو به افزایش می باشد.این روند صعودی8 /2درصد معادل 171 میلیون در سال 2000 بوده وبه 4/4 درصد معادل 366 میلیون در سال 2030 می رسد(1). فاکتورهای خطر زیادی برای T2DM وجود دارد، شامل سن، ژنتیک، دیابت حاملگی قبلی، تاریخچه‌ی خانوادگی بیماری و غیره. T2DM با افزایش مقاومت به انسولین در بافت های محیطی (کبد، ماهیچه های اسکلتی و بافت چربی) و افزایش در ترشح انسولین به وسیله ی سلول هایβ پانکراس شناخته می‌شود.رایج ترین نوع دیابت؛ دیابت نوع 2است و بیشتر در افراد 35 سال و بالاتر مشاهده می‌شود.مشخص شده که چاقی دلیل عمده دیابت نوع2،در افرادی است که به لحاظ ژنتیکی مستعد ابتلا به این بیماری هستند. از دیگر دلایل آن می توان به عدم تحرک ،فشار خون بالا،داشتنHDLخون پایین و یا تری گلیسیرید بالا اشاره کرد (2) .

perilipin
پری لیپین پروتئینی است که برای تشکیل قطرات لیپیدی در بافت چربی لازم می باشد ، عملکرد پری لیپین جلوگیری از لیپولیز در شرایط پایه است با این حال به دنبال تحریک هورمونی لیپولیز را القا می کند بنابراین پری لیپین ذخیره و شکست تری آسیل گلیسرول را بر اساس نیازهای متابولیک بدن تنظیم می کند. آنالیزهای اولیه مشخص کرده اند که چندین تنوع و تغییر توالی در ژن پری لیپین مرتبط با فاکتورهای خطر دیابت شامل : چاقی ، سطح گلوکز ناشتا ، حساسیت به انسولین و افزایش فشار خون بویژه در زنان می باشد.مطالعات بالینی در دهه های گذشته ارتباط بین نقص عملکرد بافت چربی با ریسک ابتلا به دیابت نوع 2 را بیان می کنند(3).
Rs1052700: این جایگاه ژنی روی کروموزوم 15 در ناحیه 3`UTR قرار گرفته است در مطالعه ای که در سال 2006 در جمعیت زنان سنگاپوری ،مالزیای و هندی انجام شدمشاهده گردید که پلی مورفیسم rs1052700 با نسبت چربی اشباع به کربوهیدرات برای مقاومت به انسولین مرتبط است(4). در مطالعه ای دیگر در سال 2012 در جمعیت زنان آمریکایی مشخص گردید که آلل مینوراین SNP با کاهش سطح انسولین پلاسما وHOMO-IRمرتبط است(5).
Rs4578621: این جایگاه ژنی روی کروموزوم 15 در ناحیه 5`UTR قرار گرفته در مطالعه ای در سال 2006 در جمعیت زنان ومردان فرانسوی انجام شده مشخص گردید که پلی مورفیسم rs4578621 به نظر نمی رسد که تعیین کننده ژنتیکی از چاقی و دیابت نوع2 باشد(6).

سوبسترای رسپتور انسولین -1(IRS-1)
نقش مهمی در انتقال سیگنال انسولین داردو پروتئین IRS-1با فسفوریلاسیون ریشه تیروزین آن سبب آغاز اثرات انسولین شامل: فعال سازی PI3K و جابجایی ترانسپورتر GLUT4میشود(7).
مطالعه در موش ها نشان داده که IRS-1برای عملکرد انسولین در سلولهای بتا پانکراس ماهیچه اسکلتی و بافت چربی ضروری است. موشهایی که فقدان IRS-1 را دارند اختلال در رشد ، مقاومت به انسولین و نقص در ترشح انسولین را نشان دادند(7). بنابراین تصور می شود که IRS-1 بعنوان یک ژن کاندید برای دیابت نوع 2 باشد.
rs2943641: اینSNPروی کروموزوم 2 قرار گرفته و مشخص شده این پلی مورفیسم با دیابت نوع 2 در جمعیت سوئد مرتبط است(8).
Almind و همکاران در سال 2014 گزارش کرده اند که موتاسیون در کدون 972 ازIRS-1در القاء سیگنال انسولین از طریق مسیر PI3K وممکن است در مقاومت به انسولین در بیماران دیابتی نقش داشته باشد(1).
Clausenو همکاران گزارش کرده اند که واریانت کدون 972 با کاهش حساسیت به انسولین مرتبط است و پیشنهاد می کنند که این واریانت از ژن IRS-1در آسیب شناسی مقاومت به انسولین نقش داشته باشد. دیگرمطالعات ارتباط بین پلی مورفیسم IRS-1 و دیابت نوع 2 را نقض کرده اند(1).
FTO :
این پروتئین در سوخت و ساز انرژی نقش مهمی دارد. نوع تغییر یافته ی این ژن قویترین عامل ارثی خطر ساز برای چاقی به شمار می رود. این پروتئین به مقدار زیاد در هیپوتالاموس و بطور عمده در هسته کانیکه تنظیم تعادل انرژی را به عهده دارد، بیان می شود. ژن تغییر یافته ی این پروتئین نمی تواند هورمون محرک اشتها را به نحو مناسب در هیپوتالاموس مهار کند (9) این امر باعث کاهش حس سیری و افزایش دریافت کالری می شود(10) . موشهایی که حامل کپی های اضافی از FTOهستند افزیش در وزن بدن بدلیل افزایش جرم توده چربی را دارند(11).بنابراین پیشنهاد می شود که FTO یک نقش کنترلی در وزن بدن را دارد.
Rs3751812 :اینSNPروی کروموزوم 16 قرار گرفته و مطالعات انجام شده در جوامع اروپایی نشان از یک ارتباط قوی بین این پلی پلی مورفیسم و چاقی را نشان می دهد. تاثیر ژن FTOبر دیابت از طریق اثر بر چاقی مخصوصا BMI می باشد(12).
Frayling و همکاران گزارش کردند که این پلی مورفیسم ارتباط شاخصی با چاقی در بچه ها و بزرگسالان اروپایی تبار دارد.همچنین در بین بچه های اسپانیایی بین FTO و BMI ارتباط وجود دارداما بعضی نتایج منفی در اقیانوسیه ، آفریقاو آسیا دیده شده است(11).


سوالات و / یا فرضیات پژوهشتوزیع فراوانی پلی مورفیسمrs1052700ژنPLIN1 درافراد مبتلا به دیابت نوع 2 و افراد سالم متفاوت است.
توزیع فراوانی پلی مورفیسم rs4578621ژنPLIN1 درافراد مبتلا به دیابت نوع 2 و افراد سالم متفاوت است.
توزیع فراوانی پلی مورفیسم rs2943641 ژن IRS-1درافراد مبتلا به دیابت نوع 2 و افراد سالم متفاوت است.
توزیع فراوانی پلی مورفیسم rs3751812 ژن FTO درافراد مبتلا به دیابت نوع 2 و افراد سالم متفاوت است.
هدف کلی طرح: تعیین پلی مورفیسم ژنی پری لیپین1 ،سوبسترای رسپتور انسولین -1(IRS-1 ) ،FTO در افراد مبتلا به دیابت نوع 2 (T2DM)درمقایسه با افراد سالم
اهداف اختصاصیتعیین فراوانی پلی مورفیسمrs1052700 ژن پری لیپین1درافراد مبتلا به دیابت نوع 2 و افراد سالم
تعیین فراوانی پلی مورفیسم rs4578621ژن پری لیپین1در افراد مبتلا به دیابت نوع 2 و افراد سالم
تعیین فراوانی پلی مورفیسم rs2943641 ژن IRS-1درافراد مبتلا به دیابت نوع 2 و افراد سالم
تعیین فراوانی پلی مورفیسم rs3751812ژن FTO درافراد مبتلا به دیابت نوع 2 و افراد سالم
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحندارد
تعریف واژه های تخصصی:پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی تغییر در توالی DNAاست که فقط در یک نوکلئوتید رخ می دهد و مشاهده شده است که این تغییرات می تواند در بعضی بیماری ها یک ریسک فاکتور باشد(10, 11).
دیابت: بیماری شناخته شده ی اختلال متابولیکی کربو هیدرات ها است که با اندازه گیری قند خون ناشتای بالای 126 میلی گرم بر دسی لیتر تشخیص داده می شود.
پری لیپین: پروتئینی است که برای تشکیل قطرات لیپیدی در بافت چربی لازم می باشد.

سوبسترای رسپتور انسولین -1: نقش مهمی در انتقال سیگنال انسولین دارد.
FTO:پروتئینی که یک نقش کنترلی در وزن بدن را دارد.

نوع مطالعهموردی – شاهدی (case –control
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)کلیه بیماران مبتلا به دیابت نوع 2 که هم اکنون تحت درمان بوده و موارد جدیدی که تشخیص داده شده و مراجعه می کنندو اندیس بدنی
با لای 25 داشته باشند .
حجم نمونه و روش محاسبه آنبرای بررسی پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی٬ازافراد مبتلا به دیابت نوع 2 در زاهدان که هم اکنون تحت درمان می باشند واندیس بدنی با لای 25 داشته به تعداد 300 نفر خون گرفته می شود. گروه شاهد از نمونه های خون افراد سالم که مبتلا به بیماری دیابت نبوده و بیماری سیستمیک شناخته شده ای ندار ند(حداقل 300نفر) انتخاب می شوند.
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)آسان و در دسترس
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)مشاهده و بررسی‌های آزمایشگاهی
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)برای بررسی پلی مورفیسم و حذف ژنی نمونه خون در 20- درجه سانتیگراد نگهداری می‌شود. DNA نمونه خون افراد گروه شاهد و مورد به روش salting out تخلیص می‌شود. پرایمرهای اختصاصیجهت تعیین پلی مورفیسم ژنی به روش ARMS PCRطراحی می شود.در مرحله بعد شرایط PCR برای تعیین این پلی مورفیسم ها بهینه می شود می‌شود سپس نمونه ها در ژل اگارز قرار داده شده و اسکن می شوند و بررسی پلی‌مورفیسم ژنی با این روش مورد ارزیابی قرار می‌گیرد
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)



P value

Control n(%)
Case n(%)
Genotypes



AA
AT
TT Rs1052700
A/T
CC
CG
GG Rs4578621
C/G
CC
CT
TT rs2943641
C/T

GG
GT
TT Rs3751812
G/T


پس از گردآوری اطلاعات لازم، یافته هادر نرم افزار آماری SPSS وارد گشته و داده ها بااستفاده از آزمون آماری Chi square ، independent sample T test و رگرسیون داده‌هامورد تجزیه و تحلیل قرار خواهند گرفت.


ملاحظات اخلاقی با رضایت کامل از بیماران نمونه گیری می شود و تعهد می شود نام ومشخصات بیماران در هیچ گزارشی قید نشود. انجام آزمایشات هیچ گونه هزینه ای برای بیمار نخواهد داشت(باتوجه به کد های اخلاقی شماره های 1، 2،20،17)
{کدهای 1(هدف اصلی پژوهش ارتقای سلامت انسانها توأم با رعایت کرامت و حقوق ایشان است)
2(در پژوهش بر آزمودنی انسانی، سلامت و ایمنی فرد فرد آزمودنی‎ها درطولوبعدازاجرایپژوهش، برتمامیمصالح دیگر اولویتدارد )
14و15و16و13(کسب رضایت آگاهانه و آزادانه و موارد مربوط به آن)
25( حفظ رازداری)از دفترچه آزمودنی انسانی در طرح رعایت می شود.}
9- محدودیت های اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آن ها :
عدم همکاری بیمار و مشکل تهیه مواد وامکان طولانی شدن زمان دریافت آنها

محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهاعدم همکاری بیمار و مشکل تهیه مواد وامکان طولانی شدن زمان دریافت آنها
کلمات کلیدیدیابت نوع2،پلی مورفیسم؛پری لیپین؛IRS؛FTO
فهرست منابع و مراجع1. Awad NS, El-Tarras AE, Almalki TA, Alghamdi A, Sabry AM, Nemenqani D. Prevalence of A6224G Insulin Receptor Substrate-1 and Mitochondrial DNA tRNA) Leu (UUR) 3243 Polymorphisms in Diabetes Mellitus Patients in Saudi Arabia. World Journal of Medical Sciences. 2014;10(3):279-84. PubMed PMID:
\.
2. MaraschinJde F. Classification of diabetes. Advances in experimental medicine and biology. 2012;771:12-9. PubMed PMID: 23393666.
3. Qi L, Zhang C, Greenberg A, Hu FB. Common variations in perilipin gene, central obesity, and risk of type 2 diabetes in US women. Obesity. 2008 May;16(5):1061-5. PubMed PMID: 18356850. Pubmed Central PMCID: 3925667.
4. Corella D, Qi L, Tai ES, Deurenberg-Yap M, Tan CE, Chew SK, et al. Perilipin gene variation determines higher susceptibility to insulin resistance in Asian women when consuming a high-saturated fat, low-carbohydrate diet. Diabetes care. 2006 Jun;29(6):1313-9. PubMed PMID: 16732014.
5. Smith CE, Ordovas JM. Update on perilipin polymorphisms and obesity. Nutrition reviews. 2012 Oct;70(10):611-21. PubMed PMID: 23035807. Epub 2012/10/06. eng.
6. Meirhaeghe A, Thomas S, Ancot F, Cottel D, Arveiler D, Ferrieres J, et al. Study of the impact of perilipin polymorphisms in a French population. Journal of negative results in biomedicine. 2006;5:10. PubMed PMID: 16836753. Pubmed Central PMCID: PMC1538627. Epub 2006/07/14. eng.
7. Tang Y, Han X, Sun X, Lv C, Zhang X, Guo W, et al. Association study of a common variant near IRS1 with type 2 diabetes mellitus in Chinese Han population. Endocrine. 2013 Feb;43(1):84-91. PubMed PMID: 22576021. Epub 2012/05/12. eng.
8. Alharbi KK, Khan IA, Munshi A, Alharbi FK, Al-Sheikh Y, Alnbaheen MS. Association of the genetic variants of insulin receptor substrate 1 (IRS-1) with type 2 diabetes mellitus in a Saudi population. Endocrine. 2014 Nov;47(2):472-7. PubMed PMID: 24493031. Epub 2014/02/05. eng.
9. Loos RJ. Recent progress in the genetics of common obesity. British journal of clinical pharmacology. 2009 Dec;68(6):811-29. PubMed PMID: 20002076. Pubmed Central PMCID: 2810793.
10. Hainer V, Zamrazilova H, Spalova J, Hainerova I, Kunesova M, Aldhoon B, et al. Role of hereditary factors in weight loss and its maintenance. Physiological research / Academia ScientiarumBohemoslovaca. 2008;57 Suppl 1:S1-15. PubMed PMID: 18271696.
11. Wu J, Xu J, Zhang Z, Ren J, Li Y, Wang J, et al. Association of FTO polymorphisms with obesity and metabolic parameters in Han Chinese adolescents. PloS one. 2014;9(6):e98984. PubMed PMID: 24911064. Pubmed Central PMCID: PMC4049598. Epub 2014/06/10. eng.
12. Zabena C, Gonzalez-Sanchez JL, Martinez-Larrad MT, Torres-Garcia A, Alvarez-Fernandez-Represa J, Corbaton-Anchuelo A, et al. The FTO obesity gene. Genotyping and gene expression analysis in morbidly obese patients. Obesity surgery. 2009 Jan;19(1):87-95. PubMed PMID: 18855084. Epub 2008/10/16. eng.
13. Tomas C, Stangegaard M, Borsting C, Hansen AJ, Morling N. Typing of 48 autosomal SNPs and amelogenin with GenPlex SNP genotyping system in forensic genetics. Forensic science international Genetics. 2008 Dec;3(1):1-6. PubMed PMID: 19083859. Epub 2008/12/17. eng.
14. Sobrino B, Brion M, Carracedo A. SNPs in forensic genetics: a review on SNP typing methodologies. Forensic science international. 2005 Nov 25;154(2-3):181-94. PubMed PMID: 16182964. Epub 2005/09/27. eng.

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
proposal7179.doc1393/10/24330240دانلود
proposal eslah.doc1394/01/04365056دانلود
responce2.docx1394/01/0427889دانلود
proposal eslah2.doc1394/02/05399360دانلود
Res2.docx1394/02/0514168دانلود
proposal eslah shodeh kometeh akhlagh.doc1394/02/26401920دانلود
proposal eslah shodeh kometeh akhlagh.2.doc1394/02/29401920دانلود
proposal eslah shodeh kometeh akhlagh.22.doc1394/03/05402432دانلود