بررسی پلی مورفیسم های rs 8050136 و rs 9939609 ژن FTO در بیماران مبتلا به سل ریوی در مقایسه با افراد سالم در شهر زاهدان

Evaluation of gene FTO rs 8050136 and rs 9939609 polymorphisms in pulmonary tuberculosis and healthy in Zahedan


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان:

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 7273
عنوان فارسی طرح بررسی پلی مورفیسم های rs 8050136 و rs 9939609 ژن FTO در بیماران مبتلا به سل ریوی در مقایسه با افراد سالم در شهر زاهدان
عنوان لاتین طرح Evaluation of gene FTO rs 8050136 and rs 9939609 polymorphisms in pulmonary tuberculosis and healthy in Zahedan
نوع طرح کاربردی
محل اجرای طرح مرکز تحقیقات بیماریهای عفونی و گرمسیری
رسته مطالعاتی مورد شاهدی
دانشکده/مرکز دانشگاه علوم پزشکی
زمان اجرا -روز 365

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
ناهید دژکامهمکاردانشجودستیاری پزشکیdr.ndejkam@gmail.com
محمد نادریمجری اولاستاد راهنمادکترای تخصصی naderi597@gmail.com
محسن طاهریمجری دوماستاد راهنمادکترای تخصصی taheri@zaums.ac.ir
محمد هاشمیمشاورمشاور طرحدکترا - PHDmhd.hashemi@gmail.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی پلی مورفیسم های rs 8050136 و rs 9939609 ژن FTO در بیماران مبتلا به سل ریوی در مقایسه با افراد سالم در شهر زاهدان
خلاصه طرح به لاتینEvaluation of gene FTO rs 8050136 and rs 9939609 polymorphisms in pulmonary tuberculosis and healthy in Zahedan
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشبیماری سل (TB) بیماری مزمنی است که بوسیله مایکوباکتریوم تو برکلوزیس ایجاد می شود و یک مسئله بهداشتی را، در سراسر دنیا بویژه در کشورهای پیشرفته مطرح می کند.[1]
بیماری سل شایعترین علت مرگ ناشی از بیماری های عفونی تک عاملی در دنیا است و از نظر بار جهانی، بیماری در رتبه دهم قرار دارد. پیش بینی می شود این بیماری تا سال 2020 همچنان در این جایگاه بماند و یا تا رتبه هفتم بالا رود. به هر حال با توجه به اولویت برنامه های کنترلی سل، سازمان جهانی بهداشت (WHO) اهدافی را برای کنترل بیماری سل مشخص کرده است که مهمترین آن ها عبارتست از این که شیوع سل تا سال 2015 در جهان به 50 درصد میزان آن در سال 1990برسد وتا سال 2050 میزان مرگ ناشی از سل فعال، به یک نفر در یک میلیون نفر کاهش یابد. [2[ بر طبق برآورد سازمان جهانی بهداشت یک سوم جمعیت دنیا آلوده به سل هستند، یعنی از هر سه نفر جمعیت جهان یک نفر به باسیل سل آلوده می باشد و در هر ثانیه یک نفر به تعداد آن ها اضافه می شود. [3]
در مطالعه ای که بر روی اپیدمیولوژی سل در دهه اخیر و مروری بر وضعیت آن در جنوب شرق ایران انجام شده است.گزارش کرده اند که در ایران شایعترین نوع سل، سل ریوی می باشد، به طوری که سل ریوی اسمیر خلط مثبت 53 درصد کل موارد سل را تشکیل می دهد. سل خارج ریوی نیز 28 درصد کل موارد سل را شامل می شود. [4] در میان استان ها، گلستان و سیستان و بلوچستان بیشترین میزان بروز شیوع را در کشور دارا هستند. [2] سوء تغذیه (Tobacco smoking) درمان ایموتوساپرسیو- دیابت- آلودگی هوای درون خانه- ازدحام جمعیت- مهاجرت- افزایش سن- فقر همگی بعنوان ریسک فاکتورهای مسئول شناخته شده اند. [5-6[ در میان این فاکتورها مشکلات مربوط به وزن اخیرا بیشتر مورد توجه قرار گرفته. چندین مطالعه نشان داد که چاقی نه تنها به بد خیمی ها یی از قبیل: سرطان پستان و کانسر کولورکتال و بیماریهای کاردیووسکولار و دیابت تیپ 2 ارتباط داده می شود بلکه به بیماریهایی عفونی متعدد مربوط می شود. [ [7,8,9گرچه تاثیر چاقی روی ایجاد مشکلات متابولیک و کاردیوسکولار بخوبی مطالعه شده؛ ولی اطلاعات کمتری درباره اثرش بر روی بیماری های عفونی وجود دارد. [10 [چاقی مشابه حالات دیگر مانند سوء تغذیه، شناخته شده که عملکرد سیستم ایمنی را مختل می کند، تعداد گلبول های سفید را تغییر می دهد و پاسخ های ایمنی سلولی را تحت تاثیر قرار می دهد. اختلال عملکرد سیستم ایمنی منجر به استعداد میزبان به عفونت مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می شود. [ 10[ با دسترسی به genome single nucleotide polymorphism(SNP) wide association studies(GWAS) پیشرفت های زیادی در کشف ارتباط پلی مورفیسم های ژنتیک با صفات و بیماری-های انسان ایجاد شده است. [ 11و12] اولین ارتباط بین MBI و پلی مورفیسم ها در سال 2007 شناخته شد که FTO اولین ژن شناخته شده در این زمینه بوده است و به طور شایع بر روی چاقی در جمعیت های مختلف موئر شناخته شده است. [13-14[ FTO یک ژن بزرگ با 9 exons و با اندازه بیش از 400 kb روی کروموزم 16q12.2 واقع شده در تنظیم جذب غذا نقش مهمی را ایفا می کند. [15[ FTO به طور برجسته ای در مغز بویژه هایپوتالاموس بیان شده و نقش کلیدی در کنترل هموستاز انرژی ایفا می کند. [16[ در انسانFTO به نظر می رسد که برای تکامل نرمال اغلب ارگانهای سیستمیک از قبیل CNS و سیستم کاردیووسکولار لازم و ضروری است. [15[ مطالعات اخیر اثرات ژن FTO را روی بیماری های مرتبط با افزایش BMI از قبیل دیابت و نقایص لوله عصبی و بیماری آلزایمر نشان داده است. [27-28[
در مطالعاتی که بر روی موش انجام شدبیان ژن FTO در هسته های arcuate هایپوتالاموس در طی 48 ساعت ناشتایی کاهش یافته بودو بعد از 10 هفته تماس با رژیم پر چرب افزایش یافته بود. [17-18[
در جمعیتی از ویتنام و آسیای جنوبی و چین نشان داده شد، که علاوه بر چاقی پلی مورفیسم rs9939609ژن FTO
با دیابت تیپ 2 ارتباط دارد. [19[ مدارک زیادی، در مورد دیابت به عنوان ریسک فاکتور برای توبرکلوزیس وجود دارد و ممکن است بر روی تظاهرات و پاسخ درمانی شخص بیمار تاثیر داشته باشد. [20[ دیابت کنترل نشده به نظر می رسد که کاویته بیشتر و میزان اسمیر مثبت بیشتری داشته باشد، بعد از 2 ماه درمان با آنتی توبرکلوزیس منفی شدن کشت کمتر اتفاق می افتد. [21[ به نظر می رسد ابتلا به دیابت می تواند یکی از دلایلی باشد که چرا تلاش برای کاهش شیوع جهانی توبرکلوزیس علی رغم میزان بالای موارد تشخیص داده شده و میزان بالای درمان شده تاثیر کمتری داشته است. [22[ دیده شده که پلی مورفیسم های ژنی rs 9939609 و rs8050136 در ژن FTO به طور قابل توجهی با چاقی در جمعیت های متفاوت از جمله در جمعیت چین ارتباط دارد. [23-24[
در مطالعه ای نشان داده شد آلل A با جذب انرژی افزایش یافته مستقل از وزن بدن همراه بود. [35 [
یک مطالعه مورد-شاهدی بر روی بررسی ارتباط بین دو پلی مورفیسم شایع(rs 8050136 , rs9939609). FTO با سل ریوی در جمعیت چین انجام شد، ارتباط برجسته ای بین پلی مورفیسم ژنتیک rs 9939609 و ریسک توبرکلوز مشاهده شد. در مقایسه با ژنوتیپ شایع TT افرادیکه حامل AA بودند ریسک افزایش یافته قابل توجهی داشتند(RO= 3.77 ) در مقایسه با هاپلوتایپ شایع rs 9939609 T- rs 8050136C ، هاپلوتایپ rs 9939609A- rs 8050136C با ریسک افزایش یافته ای از توبرکلوز همراه بود (OR= 6.09) [۲۶ [
عملکرد تغییر یافته ایمنی انسان وابسته به این واریانت های ژنتیک است که می تواند توضیح بدهند که چرا تعدادی از افراد به طور موفقیت آمیزی نسبت به دیگران به عفونت سلی مقاومت نشان می دهند [۲۶ [
در مطالعه ای که در چین انجام شد نقش پلی مورفیسم rs 9939609 ژن FTo به عنوان عامل خطر توبرکلوزیس مطرح شد و از این فرضیه که پلی مورفیسم های ژن FTO روی استعداد میزبان به بیماری های عفونی تاثیر گذار است حمایت می کند. [۲۶ [
این یافته ها ممکن است به تشخیص افرادیکه در ریسک بالاتری برای توبرکلوزیس هستند کمک کنند و مداخلات موثر برای پیشگیری و کنترل بیماری به کار گیریم.
با توجه به اهمیت بیماری سل و شیوع قابل ملاحظه آن در منطقه و لزوم تشخیص و درمان به موقع به خصوص در افراد مبتلا به عفونت و به این دلیل که تاکنون فقط در یک مطالعه ارتباط بین پلی مورفیسم rs 9939609 ژن FTO در بیماران مبتلا به سل مورد بررسی قرار گرفته، هدف ما از این تحقیق بررسی پلی مورفیسم های ژن فوق در بیماران مبتلا به سل و گروه شاهد در شهرستان زاهدان می باشد تا بتوان با استفاده از نتایج این مطالعه بررسی های لازم برای اقدامات تشخیصی و درمانی مناسب خصوصا در افراد مستعد موارد شدید بیماری سل اجرا نمود.
سوالات و / یا فرضیات پژوهش۱- توزیع فراوانی پلی مورفیسم rs8050136 ژن FTO در بیماران مبتلا به سل ریوی و افراد سالم متفاوت است.
2- توزیع فراوانی پلی مورفیسم rs 9939609 ژن FTO در بیماران مبتلا به سل ریوی و افراد سالم متفاوت است.
هدف کلی طرحتوزیع فراوانی پلی مورفیسم های rs8050136 و rs 9939609 ژن FTO در بیماران مبتلا به سل ریوی در مقایسه با افراد سالم در شهر زاهدان
اهداف اختصاصی1- مقایسه فراوانی پلی مورفیسم rs8050136 ژن FTO دربیماران مبتلا به سل ریوی و در افراد سالم
2- مقایسه فراوانی پلی مورفیسم rs 9939609 ژن FTO در بیماران مبتلا به سل ریوی و در افراد سالم
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحالف- مراکز تحقیقات ژنتیک ب- مرکز تحقیقات سل ج- کلیه مراکز دانشگاهی
تعریف واژه های تخصصیSNP : پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی تغییر در توالی DNA که فقط در یک نوکلئوتید رخ می دهد و مشاهده شده است که این تغییرات می تواند در بعضی بیماری ها یک ریسک فاکتور باشد.
نوع مطالعهمورد- شاهدی (Case- control)
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)کلیه بیماران مبتلا به سل که در سال 94-1393جهت ارزیابی و درمان به بیمارستان بوعلی زاهدان مراجعه می-کنند.

معیار ورود به مطالعه:

الف: سن بالای 16 سال

ب: عدم وجود هر گونه عفونت سیستمیک یا موضعی(با یا بدون درگیری ریوی)

ج: عدم وجود هر گونه بیماری غیر عفونی سیستمیک حاد یا مزمن (با یا بدون درگیری ریوی)

د: عدم وجود هر گونه نئوپلاسم تشخیص داده شده(با یا بدون درگیری ریوی)

معیارهای ورود به گروه شاهد:

الف: سن بالای 16 سال

ب: عدم وجود هر گونه عفونت سیستمیک یا موضعی(با یا بدون درگیری ریوی)

ج: عدم وجود هر گونه بیماری غیر عفونی سیستمیک حاد یا مزمن (با یا بدون درگیری ریوی)

د: عدم وجود هر گونه نئوپلاسم تشخیص داده شده(با یا بدون درگیری ریوی)

معیارهای خروج از مطالعه:

عدم همکاری بیماری از ادامه طرح

حجم نمونه و روش محاسبه آنحجم نمونه حداقل 150 نفر شامل کلیه بیماران TB ریوی اسمیر مثبت تشخیص داده شده تحت درمان یا درمان شده شهرستان زاهدان در سال 94-1393 می باشد. به همین تعداد نیز از افراد سالم جامعه که به بیماری سل مبتلا نشده اند و سابقه هیچ گونه بیماری سیستمیک ندارند، انتخاب می شوند.
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)آسان و در دسترس
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)در این مطالعه جهت جمع آوری اطلاعات از تکنیک مشاهده ای (observational) استفاده می شود و اطلاعات کلی و مشخصات دموگرافیک فرد شامل: جنس، سن، سابقه خانوادگی ابتلا به بیماری سل و نتایج آزمایشگاهی با استفاده از معاینه، شرح حال و اطلاعات پرونده در فرم های اطلاعاتی ثبت می شود.
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)• برای بررسی پلی مورفیسم ژنی و نمونه خون در 20- درجه سانتی گراد نگه داری می شود. DNA نمونه خون افراد گروه شاهد و مورد به روش salting out تخلیص می شود. پرایمرهای اختصاصی جهت تعیین پلی مورفیسم ژنی به روش PCR-RFLP طراحی می شود. در مرحله بعد شرایط PCR برای تعیین این پلی مورفیسم ها بهینه می شود و پس از بهینه سازی شرایط PCRمحصول PCR توسط Restriction ENzyme هضم شده و سپس روی ژل آگاروز الکتروفورز می شود و ژنوتیپ گروه شاهد و مورد با این روش مورد ارزیابی قرار می گیرد.
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)پس از گرد آوری اطلاعات لازم، یافته ها در نرم افزار آماری SPSS وارد گشته و داده ها با استفاده از آزمون های آماری خی دو و تی تست مستقل و آزمون رگرسیون لجستیک مورد تجزیه و تحلیل قرار خواهند گرفت.
ملاحظات اخلاقی کدهای1,2,3,4,5,6,7و8 از راهنمای اخلاق پژوهش بر گروههای آسیب پذیر وکدهای 1و2و3و4و6و7و8و9و11و12 از راهنمای اخلاقی پژوهش در روی عضو وبافت انسانی در این طرح رعایت خواهد شد.
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهامحدودیت های طرح شامل عدم همکاری بیماران می باشد.
کلمات کلیدیTuberculosis- FTO polymorphism
فهرست منابع و مراجع1. Murray M, Oxlade O, Lin HH: Modeling social, environmental and biological determinants of tuberculosis.
Int J Tuberc Lung Dis 2011, 15(Suppl 2):S64-S70.

2.World Health Organization factsheet no. 104 – Tuberculosis at Available: http://www.who.int/ mediacentre/factsheets/fs104/en/index.html (Accessed January 2008)
3. Tuberculosis status, Center for Disease Control and Prevention (Division of TB and Leprosy Elimination), ministry of health and medical education, Iran, Available at: http://www.cdc.hbi.ir (Accessed March 2011). (Persian)
4. Metanat M, Sharifi-Mood B, Alavi-Naini R, Aminianfar M. The epidemiology of tuberculosis in recent years: Reviewing the status in south-eastern Iran. Zahedan
5- Faurholt-Jepsen D, Range N, Praygod G, Jeremiah K, Faurholt-Jepsen M, Aabye MG, Changalucha J, Christensen DL, Pipper CB, Krarup H, Witte DR, Andersen AB, Friis H:Diabetes is a risk factor for pulmonary tuberculosis: a case–control study from Mwanza, Tanzania.
PLoS One 2011, 6(8):e24215.

6. Wang J, Shen H: Review of cigarette smoking and tuberculosis in China: intervention is needed for smoking cessation among tuberculosis patients. BMC Public Health 2009, 9:292.

7. Kenchaiah S, Evans JC, Levy D, Wilson PW, Benjamin EJ, Larson MG, Kannel WB, Vasan RS:Obesity and the risk of heart failure. N Engl J Med 2002, 347(5):305-313

8. Sanada H, Yokokawa H, Yoneda M, Yatabe J, Sasaki Yatabe M, Williams SM, Felder RA, Jose PA: High body mass index is an important risk factor for the development of type 2 diabetes. Intern Med 2012, 51(14):1821-1826.

9. Karlsson EA, Beck MA: The burden of obesity on infectious disease. Exp Biol Med (Maywood) 2010, 235(12):1412-1424.

10. de Heredia FP, Gomez-Martinez S, Marcos A: Obesity, inflammation and the immune system.
Proc Nutr Soc 2012, 71(2):332-338.

11. Thye T, Vannberg FO, Wong SH, Owusu-Dabo E, Osei I, Gyapong J, Sirugo G, Sisay-Joof F, Enimil A, Chinbuah MA, Floyd S, Warndorff DK, Sichali L, Malema S, Crampin AC, Ngwira B, Teo YY, Small K, Rockett K, Kwiatkowski D, Fine PE, Hill PC, Newport M, Lienhardt C, Adegbola RA, Corrah T, Ziegler A, African TBGC, Wellcome Trust Case Control C, Morris AP,et al.: Genome-wide association analyses identifies a susceptibility locus for tuberculosis on chromosome 18q11.2.
Nat Genet 2010, 42(9):739-741.

12. Thye T, Owusu-Dabo E, Vannberg FO, van Crevel R, Curtis J, Sahiratmadja E, Balabanova Y, Ehmen C, Muntau B, Ruge G, Sievertsen J, Gyapong J, Nikolayevskyy V, Hill PC, Sirugo G, Drobniewski F, van de Vosse E, Newport M, Alisjahbana B, Nejentsev S, Ottenhoff TH, Hill AV, Horstmann RD, Meyer CG: Common variants at 11p13 are associated with susceptibility to tuberculosis.
Nat Genet 2012, 44(3):257-259.

13. Hennig BJ, Fulford AJ, Sirugo G, Rayco-Solon P, Hattersley AT, Frayling TM, Prentice AM:FTO gene variation and measures of body mass in an African population. BMC Med Genet 2009, 10:21.

14. Hotta K, Nakata Y, Matsuo T, Kamohara S, Kotani K, Komatsu R, Itoh N, Mineo I, Wada J, Masuzaki H, Yoneda M, Nakajima A, Miyazaki S, Tokunaga K, Kawamoto M, Funahashi T, Hamaguchi K, Yamada K, Hanafusa T, Oikawa S, Yoshimatsu H, Nakao K, Sakata T, Matsuzawa Y, Tanaka K, Kamatani N, Nakamura Y: Variations in the FTO gene are associated with severe obesity in the Japanese. J Hum Genet 2008, 53(6):546-553.

15. Tung YC, Yeo GS: From GWAS to biology: lessons from FTO. Ann N Y Acad Sci 2011, 1220:162-171.

16. Coll AP, Yeo GS, Farooqi IS, O’Rahilly S: SnapShot: the hormonal control of food intake.
Cell 2008, 135(3):572 e571-572.

17. Gerken T, Girard CA, Tung YC, Webby CJ, Saudek V, Hewitson KS, Yeo GS, McDonough MA, Cunliffe S, McNeill LA, Galvanovskis J, Rorsman P, Robins P, Prieur X, Coll AP, Ma M, Jovanovic Z, Farooqi IS, Sedgwick B, Barroso I, Lindahl T, Ponting CP, Ashcroft FM, O'Rahilly S, Schofield CJ: The obesity-associated FTO gene encodes a 2-oxoglutarate-dependent nucleic acid demethylase.
Science 2007, 318(5855):1469-1472.

18. Tung YC, Ayuso E, Shan X, Bosch F, O’Rahilly S, Coll AP, Yeo GS: Hypothalamic-specific manipulation of Fto, the ortholog of the human obesity gene FTO, affects food intake in rats. PLoS One 2010, 5(1):e8771.

19. Li X, Song F, Jiang H, Zhang M, Lin J, Bao W, Yao P, Yang X, Hao L, Liu L: A genetic variation in the fat mass- and obesity-associated gene is associated with obesity and newly diagnosed type 2 diabetes in a Chinese population. Diabetes Metab Res Rev 2010, 26(2):128-132.

20. Dooley KE, Chaisson RE: Tuberculosis and diabetes mellitus: convergence of two epidemics. Lancet Infect Dis 2009, 9(12):737-746.

21. Yew WW, Lange C, Leung CC: Treatment of tuberculosis: update 2010. Eur Respir J 2011, 37(2):441-462.

22. Maurice J: WHO framework targets tuberculosis-diabetes link. Lancet 2011, 378(9798):1209-1210.

23. Frayling TM, Timpson NJ, Weedon MN, Zeggini E, Freathy RM, Lindgren CM, Perry JR, Elliott KS, Lango H, Rayner NW, Shields B, Harries LW, Barrett JC, Ellard S, Groves CJ, Knight B, Patch AM, Ness AR, Ebrahim S, Lawlor DA, Ring SM, Ben-Shlomo Y, Jarvelin MR, Sovio U, Bennett AJ, Melzer D, Ferrucci L, Loos RJ, Barroso I, Wareham NJ, et al.: A common variant in the FTO gene is associated with body mass index and predisposes to childhood and adult obesity. Science 2007, 316(5826):889-894.

24. Cheung CY, Tso AW, Cheung BM, Xu A, Ong KL, Law LS, Wat NM, Janus ED, Sham PC, Lam KS: Genetic variants associated with persistent central obesity and the metabolic syndrome in a 12-year longitudinal study. Eur J Endocrinol 2011, 164(3):381-388.

25. Joanne E.Cecil,Ph.D, : An Obesity-Associated FTO Gene variant and Increased Enrgy Intake in Childeren

26. Yan Feng, Fengliang Wang, Honogqiu Pan, Sangsang Qiu : Obesity Obesity-associated gene FTO rs9939609 polymorphism in relation to the risk of tuberculosis

27. Chen G, Xu Y, Lin Y, Lai X, Yao J, Huang B, Chen Z, Huang H, Fu X, Lin L, Lai S, Wen J:Association study of genetic variants of 17 diabetes-related genes/loci and cardiovascular risk and diabetic nephropathy in the Chinese She population.
J Diabetes 2013, 5(2):136-145.

28. Chen G, Xu Y, Lin Y, Lai X, Yao J, Huang B, Chen Z, Huang H, Fu X, Lin L, Lai S, Wen J:Association study of genetic variants of 17 diabetes-related genes/loci and cardiovascular risk and diabetic nephropathy in the Chinese She population.
J Diabetes 2013, 5(2):136-145.

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
Article 1-pro.pdf1393/12/20233857دانلود
Article 2-pro.pdf1393/12/20295533دانلود
Article 3-pro.pdf1393/12/20329351دانلود
rezayat akhlaghi.doc1393/12/2090112دانلود
proposal dastiari infection.modified.pdf1394/02/08815805دانلود
proposal-residency-dejkam.doc1394/02/16275456دانلود
nahaee.doc1394/03/05275968دانلود