بررسی اثر ضد باکتریایی عصاره هیدروالکلی برگ گیاه مورد (myrtus communis L.)بر روی باکتری استرپتوکوکوس موتانس

Evaluation of antibacterial effect of myrtus communis leaf hydro alcoholic extract on stereptococos mutans.


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
مجری و همکاران
مجری و همکاران
اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی
دانلود
دانلود
علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: سمیه حسینی طباطبایی

کلمات کلیدی: -

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 7290
عنوان فارسی طرح بررسی اثر ضد باکتریایی عصاره هیدروالکلی برگ گیاه مورد (myrtus communis L.)بر روی باکتری استرپتوکوکوس موتانس
عنوان لاتین طرح Evaluation of antibacterial effect of myrtus communis leaf hydro alcoholic extract on stereptococos mutans.
نوع طرح بنیادی-کاربردی
محل اجرای طرح دانشکده دندانپزشکی
رسته مطالعاتی تحلیلی(مطالعه کمی)
دانشکده/مرکز دانشکده دندانپزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز 365

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
سمیه حسینی طباطباییاستاد راهنمای اول پایان نامه دانشجوییاستاد راهنمادکترای تخصصی so_tabatabaei@yahoo.com
محمد بکائیاناستاد راهنمای دوم پایان نامه دانشجوییاستاد راهنمادکترای تخصصی bokaeian.m@gmail.com
مهدی فرید دانشجو mdd.farid@yahoo.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی اثر ضد باکتریایی عصاره هیدروالکلی برگ گیاه مورد (myrtus communis L.)بر روی باکتری استرپتوکوکوس موتانس
خلاصه طرح به لاتینEvaluation of antibacterial effect of myrtus communis leaf hydro alcoholic extract on stereptococos mutans.
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشدهان به لحاظ فلور میکروبی از تنوع زیادی برخوردار است به-طوری که حدود پانصد گونه میکروارگانیزم در حفره دهان وجود دارد1. علیرغم اینکه پوسیدگی دندان احتمالاً شایع ترین بیماری مزمن در جهان است تا به حال هیچگاه برنامه ای برای ریشه کنی این بیماری میکروبی انجام نشده است. عامل اتیولوژیک اصلی شناخته شده برای پوسیدگی دندان استرپتوکوک های موتانس و لاکتوباسیل ها هستند2. استرپتوکوکوس موتانس از باکتری های گرم مثبتی است که در دهان به سر می برد و از طریق متابولیزه کردن کربوهیدرات های مختلف محیط اسیدی ایجاد می کند. قابلیت استرپتوکوکوس موتانس برای سنتز گلوکان خارج سلولی عامل بیماری زایی اصلی این باکتری ها بوده و عامل ایجاد کننده ی پوسیدگی های دندانی در حیوانات و انسان است3.درمان و پیشگیری از پوسیدگی با آنتی بیوتیک ها و استروئیدها پتانسیل اکسیداسیون-احیا بزاق را تغییر داده، فعالیت لیزوزیم را ضعیف و شرایط ایجاد واکنش های آلرژیک را تسهیل میکنند و باعث کاهش مقاومت بدن نسبت به عوامل پاتوژنیک می گردند4. از طرفی استقبال گسترده ای از طب سنتی و داروهای گیاهی در زمینه های مختلف علوم پزشکی صورت گرفته است، که علت آن کاربرد گیاهان به عنوان دارو از قرن های پیش می باشد5. از آنجا که استفاده از آنتی بیوتیک ها و استروئیدها باعث تسهیل واکنش های آلرژیک و کاهش مقاومت بدن نسبت به فاکتورهای پاتوژنیک می شود ، لذا یکی از استراتژی های مقبول در دنیا ، استفاده از گیاهان دارویی است که از جمله این گیاهان می توان ، عصاره مریم گلی (Salvia officinalis ) ، انیسون (Pimpinella anisum )، پونه ، بومادران واستویا را نام برد6.


در مطالعه فانی و همکاران که اثر مهاری عصاره آبی سیر بر انواع استرپتوکوکوس موتان مقاوم چند دارویی بررسی شده بود همه گروه های این باکتری به عصاره سیر با حداقل غلظت مهاری در محدوده 32-4 میکروگرم بر میلی لیتر حساس بودند7.


در مطالعه سعیدی و همکاران که فعالیت ضد میکروبی اسانس و عصاره گیاه مورد علیه سویه های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به آنتی بیوتیک های انتخابی بررسی شده نشان داد که این گیاه در غلظت های بالا دارای اثر ضد باکتریایی میباشد8.


از طرفی از اسانس گیاه مورد به عنوان ماده ضد عفونی کننده استفاده شده است.علاوه بر اثر ضد عفونی کنندگی اسانس این گونه گیاهی از آن در مصارف داخلی و استعمال خارجی به عنوان تقویت کننده معده و قابض و هم چنین در رفع بیماری های تنفسی و مجاری ادراری استفاده میشود8.


در مطالعه عظیمی لیسار و همکاران در سال 1391، نتایج نشان داد که روغن سیاه دانه با غلظت 330 میلی گرم بر میلی لیتر بر علیه استرپتوکوکوس موتانس دارای هاله عدم رشد 22 میلی متر می باشد9.


در مطالعه کرمانشاه در سال 1389، اثر ضدمیکروبی عصاره هیدروالکلی مریم گلی و پونه مورد بررسی قرار گرفت، میزان حداقل غلظت بازدارندگی(MIC) عصاره مریم گلی و پونه برای استرپتوکوکوس موتانس به ترتیب 25/6 و 5/12 میکروگرم بر میلی لیتر به دست آمد10.


در مطالعه شعاع حسنی و همکاران در سال 1387، نتایج نشان داد که غلظت 6 میلی گرم در میلی لیتر عصاره اتیل استاتی موم زنبور عسل توقف رشد باکتری ها را به دنبال داشت و غلظت 30 میلی گرم در میلی لیتر آن برای استرپتوکوکوس موتانس باکتریوسید بود11.


از این رو هدف این مطالعه بررسی اثر ضدباکتریایی عصاره گیاه موردmyrtus communis)) بر استرپتوکوکوس موتانس خواهد بود.


سوالات و / یا فرضیات پژوهش1) کمترین غلظت مهارکنندگی(MIC)و قطر هاله عدم رشد محلول کلرهگزیدین بر روی باکتری استرپتوکوکوس موتانس به چه میزان است؟ 2) کمترین غلظت مهارکنندگی(MIC) و قطر هاله عدم رشد محلول عصاره هیدروالکلی برگگیاه مورد بر روی باکتری استرپتوکوکوس موتانس به چه میزان است؟
هدف کلی طرحتعیین اثر ضدباکتریایی عصاره هیدرو الکلی برگ گیاه مورد((myrtus communis بر استرپتوکوکوس موتانس
اهداف اختصاصی1) تعیین کمترین غلظت مهارکنندگی(MIC)و قطر هاله عدم رشد محلول کلرهگزیدین بر روی باکتری استرپتوکوکوس موتانس 2) تعیین کمترین غلظت مهارکنندگی(MIC)و قطر هاله عدم رشد محلول عصاره هیدروالکلی برگ گیاه مورد بر روی باکتری استرپتوکوکوس 3) مقایسه کمترین غلظت مهارکنندگی(MIC)و قطر هاله عدم رشد محلول عصاره هیدروالکلی برگ گیاه مورد با محلول کلرهگزیدین بر روی باکتری استرپتوکوکوس
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحوزارت بهداشت و علوم پزشکی
وزارت جهاد کشاورزی
تعریف واژه های تخصصی
نوع مطالعهتوصیفی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)کیت های باکتریایی تهیه شده از بانک میکروب ، حاوی باکتری استرپتوکوک موتانس در محیط کشت

به دلیل اینکه کیت باکتریایی بعد از تصویب پروپوزال تهیه خواهد شد، لذا کد میکروب نوشته نشده است، اما در پایان نامه حتما آورده خواهد شد.

حجم نمونه و روش محاسبه آنیک عدد کیت باکتریایی استرپتوکوکوس موتانس
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)یک عدد کیت باکتریایی استرپتوکوکوس موتانس خریداری شده
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)انجام آزمایشات آزمایشگاهی و ثبت نتایج حاصل از آنها در فرم اطلاعاتی(ضمیمه شماره 1)
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)1- تهیه ی عصاره از برگ گیاه مورد





برای تهیه عصاره از روش ماسراسیون(خیساندن)استفاده میشود.بدین منظور پس از خرد کردن برگ ها،50 گرم از هر نمونه به مدت 48 ساعت در متانول 80 درجه خیسانده و نگهداری میشود.سپس عصاره به دست آمده با کاغذ صافی معمولی صاف و با استفاده از دستگاه تقطیر در خلا چرخان،تغلیظ و در دمای 40-50 درجه سانتی گراد به مدت 2 روز خشک میگردد.





2- تعیین وزن خشک عصاره:





ابتدا وزن یک لوله آزمایش تعیین و پس از آن ml1 از عصاره در آن ریخته میشود، سپس محتوی لوله در دمای اتاق خشک میگردد. بعد از خشک شدن عصاره، وزن لوله آزمایش مجددا تعیین میشود. اختلاف وزن لوله معادل با وزن خشک عصاره محاسبه میشود.این مراحل توسط کارشناس آزمایشگاه شیمی انجام میشود.





3- تهیه باکتری:





میکرواورگانیسم مورد استفاده سویه های بالینی و استاندارد خواهند بود.





4- آزمون ضد میکروبی عصاره:





حساسیت جدایه های باکتری نسبت به عصاره مورد با روش رقیق سازی در محیط مایع در پلیت های 96 خانه ای ته گرد بررسی میشود. به خانه های ردیف اول پلیت فقط محیط کشت و سوسپانسیون باکتری اضافه میگردد.در ردیف بعدی به 6 خانه از پلیت ها،مقدار 100 میکرولیتر از محیط مایع مغذی مولر هینتون (MHB) اضافه میشود. به چاهک اول 100 میلی لیتر از محلول رقیق شده عصاره به غلظت 10 میلی گرم در میلی لیتر اضافه خواهد شد و تا چاهک ششم به ترتیب غلظت های 3/0-62/0-25/1-5/2-5 میلی گرم در میلی لیتر با روش رقیق سازی تهیه میگردد.به هر چاهک مقدار 20 میکرو لیتر از سوسپانسیون باکتری معادل 5/. مک فارلند اضافه میشود.(غلظت نهایی باکتری در هر چاهک 105×5)محتویات هر چاهک 2 دقیقه بوسیله دستگاه plate reader مجهز به تکان دهنده با هم مخلوط میشود و در زمان صفر عمل طیف سنجی با طول موج 630 نانومتر اندازه گیری میشود.پلیت ها بمدت 24 ساعت در دمای 35 درجه سانتی گراد گرمخانه داری میشوند و کدورت یا عدم کدورت چاهک ها بصورت چشمی مورد ارزیابی قرار میگیرد وعمل طیف سنجی مربوط به هر چاهک در طول موج 630 نانومتر اندازه گیری میشود.اولین رقتی که بتواند کمترین میزان کدورت را نشان دهد به عنوان حداقل غلظت کشنده(MBC:mimimum Bactericidal concentration)در نظر گرفته میشود.این آزمایش در سه تکرار جداگانه انجام و میانگین سه تکرار برای هر چاهک برای تعیین کمترین غلظت بازدارنده(MIC:minimum inhibitory concentration)مورد استفاده قرار میگیرد8.





کنترل ها نیز به شرح زیر خواهند بود:





-محیط کشت و عصاره بدون باکتری عدم رشد





-محیط کشت و آب مقطر با باکتری رشد





-محیط کشت و کلرهگزیدین(شاهد مثبت) با باکتری عدم رشد







تهیه کیتهای باکتری توسط دانشجو و انجام مراحل آزمون ضد میکروبی توسط کارشناس میکروب شناسی خواهد بود.تجزیه تحلیل داده ها توسط دانشجو و اساتید راهنما انجام میشود.
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)در پایان مطالعه اطلاعات حاصل از بررسی های آزمایشگاهی، داده ها توسط روش های آماری یعنی میانگین، فراوانی، انحراف معیار و با استفاده از جداول و نمودار ها توسط نرم افزار آماری SPSS نسخه ی 20 توصیف می گردد. در نهایت داده ها به صورت زیر توصیف میگردند:


تعیین حداقل غلظت عصاره برگ گیاه مورد بر بازدارندگی و کشندگی باکتری استرپتوکوک موتانس
ملاحظات اخلاقی ندارد
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهاندارد
کلمات کلیدیعصاره هیروالکلی،استرپتوکوکوس موتانس،برگ گیاه مورد stereptococosmutans,myrtuscommunisleaf,hydro alcoholic extract
فهرست منابع و مراجع1. Schuster GS, Topazian RG, Goldberg HG, Hupp JR. Oral & Maxillofacial infections. 4th ed. Philadelphia: WB Saunders Co; 2002.P 30-31.

2. Theondor MR, Harold OH, Ward J, Swift JR. Art and science of operative dentistry. 5th ed. St. Louis Missouri: The CV Mosby Co; 2006.P 67-70.

3. Saswati B, Indranil B. Role of HtrA in surface protein expression and biofilm formation by Streptococcus mutans. Infec Immun 2005; 73 (10): 6923-6934.

4. Walsh LJ. The current status of low level laser therapy in dentistry. Aust Dent J 1997; 42 (9): 302–306.

5. Fabrican DS, Farnsworth NR. The value of plants used in traditional medicine for drug discovery. Environ Health Perspect (EHP) 2001; 109 (1): 69–75.

6. Sanei As, Pour esmaeel HR, Ebadifar A, Madahi A. Antimicrobial effect of 7 plants extraction on a few of pathogen microoroganism of oral cavity. Pajuhande J 2009; 76 : 22-25.

7.فانی م،کهن طب ج،مشکی ر،قطب آبادی ا،صبح نمایان ف،دیاقی م.بررسی آزمایشگاهی اثر مهاری عصاره آبی سیر بر انواع استرپتوکوک موتان مقاوم چند دارویی.مجله دانشکده دندان پزشکی اصفهان.دوره6،شماره4،زمستان 1389،356-348

8.سعیدی، سعیده؛ صباغ، سید کاظم؛ صبوری رباط، الهام «بررسی فعالیت ضدمیکروبی عصاره و اسانس مورد(Myrtus Communis ( علیه سویه های استافیلوکوکوس آرئوس مقاوم به آنتی بیوتیک های انتخابی». مجله علوم پزشکی زابل، 1392، دوره 4، شماره 3: 32-21

9.عظیمی لیسار، حمیدرضا؛ نیاکان، محمد؛ محمدتقی، گلنوش؛ جعفریان، زهرا؛ نجفی، فرهود؛ مصطفوی زاده، سید مصطفی. «مقایسه تاثیر غلظت های مختلف سیاه دانه و نانوسیلور بر میزان رشد باکتری های دهانی استرپتوکوکوس موتانس و استرپتوکوکوس سنگوئیس». مجله تحقیق در علوم دندانپزشکی، زمستان 1391؛ دوره نهم، شماره 4: 186-179.

10.کرمانشاه، حمید؛ هاشمی، صدیقه السادات؛ آرامی، سکینه؛ میر صالحیان، اکبر؛ کمالی نژاد، محمد؛ کریمی، مهرداد و همکاران. «بررسی اثر ضد باکتریایی عصاره هیدروالکلی مریم گلی و پونه بر سه باکتری عامل پوسیدگی دندان در شرایط آزمایشگاهی». مجله دندانپزشکی دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، زمستان 1389؛ دوره 28، شماره 4: 237-232.

11.شعاع حسنی، علیرضا؛ حمدی، کسری؛ قائمی، امیر. «تاثیر عصاره اتیل استاتی موم زنبور عسل بر کلونیزاسیون استرپتوکوکوس موتانس». مجله علمی پژوهشی دانشگاه علوم پزشکی اراک، سال1387؛ دوره 11، شماره4: 95-87.
معرفی پژوهش/ اهداف پژوهش
(عین عبارت هدف پروپوزال را کپی نکنید. بلکه با جملاتی که برای مردم قابل فهم باشد (برای سواد حدود پنجم ابتدایی )هدف را برای شرکت کنندگان توضیح دهید.) در تمام این متن در صورتیکه شرکت کننده کودک یا فرد فاقد ظرفیت تصمیم گیری است باید مواردیکه منظور از "من"، فرد شرکت کننده بوده است به "کودک" یا "فرد تحت سرپرستی من" اصلاح شود و مواردیکه منظور از "من"، رضایت دهنده است به من به عنوان "ولی" یا "قیم قانونی" اصلاح شود.
خون گیری
(آیا طرح شما نیاز به خونگیری دارد یا خیر)
نحوه همکاری/ مزایا ی طرح
(در این بخش برای شرکت کنندگان به زبان ساده توضیح دهید که: چه مداخله ای بر روی آنها صورت میگیرد. چه اقدامات پاراکلینیکی بر روی آنها انجام میشود. چه نمونه ای و با چه حجمی از آنها میگیرید در این مدت چند نوبت مراجعه باید داشته باشند و به چه فواصلی چه اقداماتی را در پیگیری آنها انجام میدهید. (حتی میتوانید سود بالقوه ای که شرکت کنندگان میتوانند از شرکت در این پژوهش ببرند بنویسید. این سود میتواند شرح احتمال درمان یا تشخیص بهتر بیماریشان، دریافت خدمات سلامت رایگان و یا پرداخت مشوق مالی در ازای جبران همکاریشان باشد)
عوارض جانبی
(منظور عوارض و میزان احتمال بروز آنها در این مطالعه است)
جبران عوارض احتمالی
(برای آنکه شرکت کننده بتواند ارزیابی مناسبی از سود و زیان شرکت در پژوهش شما داشته باشد لازم است بتواند سود و زیان مداخلات معمول و مداخلات این پژوهش را مقایسه کند. به عنوان مثال میزان موفقیت و میزان عوارض هریک را مقایسه کند.) - او باید بداند كه اگر در حين و بعد از انجام پژوهش هم هر مشكلي اعم از جسمي و روحي به علت شرکت در اين پژوهش برایش پيش آمد درمان عوارض، و هزينه‌هاي آن و غرامت مربوطه بر عهده مجري خواهد بود.
هزینه های مربوط به انجام طرح تحقیقاتی
(تمام مداخلات پژوهشی باید برای بیمار رایگان باشد و بیمار بداند شامل چه مواردی هستند. )
روش های جایگزین
در صورت عدم تمایل به شرکت در مطالعه چه روش های درمانی برای بیمار ارائه خواهد شد
محرمانه بودن
بیمار باید بداندکه دست اندر كاران اين پژوهش، كليه اطلاعات مربوط به او را نزد خود به صورت محرمانه نگه‌داشته و فقط اجازه دارند نتايج كلي و گروهي اين پژوهش را بدون ذکر نام و مشخصات بیمار منتشر كنند. و كميته اخلاق در پژوهش با هدف نظارت بر رعایت حقوق وی مي‌تواند به اطلاعات ایشان دسترسي داشته باشد.
پاسخگویی به پرسش ها
در این بخش نام و اطلاعات دسترسی فردی از عوامل پژوهش را که بتواند اطلاعات صحیح و کافی در اختیار شرکت کنندگان قرار دهند و در مورد عوارض و نگرانیها راهنمایی لازم را ارائه دهند ذکر شود
حق نپذیرفتن یا انصراف
بیمار باید بداند که شرکت اودر اين پژوهش کاملاً داوطلبانه است و مجبور به شرکت در اين پژوهش نيست و در صورت عدم شرکت از مراقبت‌هاي معمول تشخيصي و درماني محروم نخواهد شد او باید بداند كه حتي پس از موافقت با شركت در پژوهش مي‌تواند هر وقت كه بخواهد، پس از اطلاع به مجري، از پژوهش خارج شود و خروج اواز پژوهش باعث محرومیت از دریافت خدمات درمانی معمول برای اونخواهد شد.
رضایت
او باید بداند که اگر اشکال يا اعتراضي نسبت به دست اندركاران يا روند پژوهش دارد مي تواند با كميته اخلاق در پژوهش دانشگاه تماس گرفته و مشکل خود را به صورت شفاهي يا كتبي مطرح نمايد. در انتهای فرم قید گردد : اينجانب موارد فوق‌الذکر را خواندم و فهميدم و بر اساس آن رضايت آگاهانه خود را براي شركت در اين پژوهش اعلام مي‌کنم. اينجانب ……………… خود را ملزم به اجراي تعهدات مربوط به مجري در مفاد فوق دانسته و متعهد مي‌گردم در تأمين حقوق و ايمني شركت كننده در اين پژوهش تلاش نمايم
پرسشنامه یا فرم اطلاعاتیتاریخ آزمایش: ..../..../....... ضمیمه شماره 1 نمونه فرم اطلاعاتی شماره نمونه: ........... غلظت عصاره برگ گیاه مورد در این لوله:......... مشاهده ی قطر هاله عدم رشد: ...........میلی متر در صورت مشاهده ی رشد: آیا این غلظت اثر بازدارندگی روی سویه باکتری استرپتوکوکوس موتانس دارد؟ آیا این غلظت اثر کشندگی روی سویه باکتری استرپتوکوکوس موتانس دارد؟

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
eslahate davari.docx1394/03/05116691دانلود
ESLAHATE SHORA.docx1394/08/24116949دانلود