مقایسه اثر دو پانسمان پریودنتال بر سلول های فیبروبلاست لثه ای انسان

Comparison of the effect of two periodontal dressings on human gingival fibroblasts


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان:

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 7344
عنوان فارسی طرح مقایسه اثر دو پانسمان پریودنتال بر سلول های فیبروبلاست لثه ای انسان
عنوان لاتین طرح Comparison of the effect of two periodontal dressings on human gingival fibroblasts
نوع طرح بنیادی
محل اجرای طرح دانشکده دندانپزشکی
رسته مطالعاتی مطالعه تجربی (Experimental)(مطالعه کمی)
دانشکده/مرکز دانشکده دندانپزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز 120

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
فرشته اربابی کلاتیمجری اول دکترای تخصصی arbabi_92@yahoo.com
لیلا غلامیمجری دوممشاور طرحدندانپزشک متخصصl.gholami@hotmail.com
مهناز شهرکی پورمشاورمشاور آمارکارشناسی ارشدmahnaz@gmail.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی مقایسه اثر دو پانسمان پریودنتال بر سلول های فیبروبلاست لثه ای انسان
خلاصه طرح به لاتینComparison of the effect of two periodontal dressings on human gingival fibroblasts
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش
پانسمانهای پریودنتال جهت حفاظت از زخم و ناحیه جراحی از آسیب های مکانیکی در طی دوره ترمیم بکار برده میشوند. علاوه بر این می توانند به راحتی بیشتر بیمار بعد از جراحی و تطابق و جلوگیری از جابجایی فلپ جراحی کمک نماید. ١،٢
اولین پانسمان پریودنتال در سال ١٩٢٣ توسط دکتر Ward و تحت عنوان Wanderpack معرفی شد. این پانسمان از نوع پانسمان های زینک اکساید اوژنولی بود و به دلیل اوژنول موجب واکنش آلرژیک در برخی بیماران می گردید.٣ پس از آن انواع مختلفی از پانسمان ها تولید و مورد استفاده بعد از جراحی های پریودنتال قرار گرفتند. اگر چه در مورد لزوم یا عدم لزوم استفاده کلینیکی از آنها پس از جراحی هنوز هم اختلاف نظرهایی وجود دارد و به تشخیص جراح نوع جراحی و هدف آن بستگی دارد.٤،٥،٦
به طور کلی یک پانسمان خوب باید ویژگی های فیزیکی زیست سازگاری و درمانی مناسبی داشته باشد. از نظر مکانیکی باید قابل شکل دهی و نرم و انعطاف پذیر بوده و به آرامی سخت شود. همچنین باید دارای ثبات ابعادی بوده تا مانع از انقباض و فشار بیش از حد به زخم و یا نشت بزاق و تجمع پلاک شود. ٤،٧،٨ برخی از پانسمانها دارای خصوصیت سرکوبی روی میکروارگانیزم ها بوده و یا می توانند به عنوان حامل دارو و یا آنتی بیوتیک در درمانهای جراحی و یا غیر جراحی بکار روند ٩،١٠
از ویژگی های دیگر حائز اهمیت پانسمانهای پریودنتال زیست سازگاری آنها با بافت های دهان می باشد. همانند سایر مواد مختلف که در دندانپزشکی بکار برده می شوند گزارشاتی از حساسیت های آلرژیک به پانسمانهای پریودنتال تا کنون گزارش شده است ٣،١١،١٢ و از انجا که این مواد در تماس مستقیم با بافت مخاط دهان قرار میگیرند بررسی این ویژگی دارای اهمیت بوده است.
از همان سالهای اولیه تولید پانسمانهای پریودنتال تا کنون جهت مطالعه این خصوصیت زیست سازگاری آنها تحقیقات مختلف invitro و invivo برروی سلولهای بدن انسان و یا حیوانات انجام شده است. در سال ١٩٧٨ Haugen و همکاران با بررسی نمونه های تهیه شده از چند پانسمان مختلف مشاهده نمودند که بیشترین تحریک ایجاد شده توسط wander pack و سپس به ترتیب coe pak و peri pacبود. ١٣ همچنین Nezwek و همکاران و سپس Wennberg و همکاران مطالعات invitro مشابهی بر روی پانسمانهای پریودنتال انجام دادند که در آنها نیز wonderpak بیشترین شدت واکنش التهابی را ایجاد نمود. در مطالعه wennbeW و همکاران گزارش شد که زمانی که دوره تماس بافتی با پانسمان از ٣ روز بیشتر می شد peripac واکنش شدیدتری نسبت به wonderpack نشان میداد. ١٤،١٥
در سال ١٩٩٢ در مطالعه ای روی مدل حیوانی Smeeken و همکاران نشان دادند که محصولاتی که دارای اژنل بودند واکنش های التهابی شدیدتری را ایجاد می نمایند.١٦ در سال ١٩٩٣ Su و همکاران با استفاده از میکروسکوپ الکترونی و محیط سلولهای L-929 سمیت برخی از پانسمان های پریودنتال را مورد بررسی قرار دادند و مشاهده نمودند که همه این مواد اثر سمیت سلولی غیر معنی داری داشتند. و سمیت Coepak و Snepack کمتر از ZOE بود.١٧
در سال ١٩٩٩ Alpar و همکاران با استفاده از محیط سلولی استئوبلاست انسانی و فیبروبلاست های موش و انسان به مقایسه سمیت سلولی پانسمانهای مختلف پرداختند. نتایج آنها نشان داد که Baricaid بهترین سازگاری سلولی را نسبت به مواد دیگر دارا می باشد. همچنین مشاهده شد که سلولهای فیبروبلاست موش نسبت به انسان حسایت بیشتری به مواد مورد آزمایش نشان دادند.١٨
در مطالعه ای هیستولوژیک در سگ Petelin و همکاران در ٢٠٠٣ Resopak به عنوان مناسب ترین پانسمان با توجه به میزان ایجاد واکنش التهابی گزارش شد.١٩
satio و همکاران در ٢٠٠٨با بررسی التهاب ایجاد شده توسط پانسمان های پریودنتال گزارش نمودند که این پانسمانها واکنش التهابی بیشتری را روی استخوان ایجاد نموده خصوصا زمانی که مستقیما بر روی استخوان قرار داده میشوند در مقایسه با قرارگیری روی پریوست. ٢٠ با توجه به بررسی متون ما مطالعه جدید تری در این زمینه صورت نگرفته است.
امروزه پانسمان های با ترکیب اکسید های فلزی و اسید چرب بدون اوژنول به طور رایج در دندانپزشکی مورد کاربرد قرار دارند. از جمله این مواد پانسمان Coe-Pak است که یکی از شایع ترین و متداول ترین انواع پانسمان مورد استفاده روتین کلینیکی خصوصا در ایران می باشد و از ترکیب یک اکسید فلزی با اسیدهای چرب تولید می گردد. 2
Reso-pac پانسمانی نسبتا جدید است که اخیرا وارد بازار ایران نیز شده است. ساختاری متفاوت از Coepak دارا می باشد و از جمله پانسمانهای با بیس سلولز با قوامی نرم می باشد و محتوی Myrrh است که ماده ای با خاصیت ضدعفونی کنندگی و هموستاتیک است. این پانسمان محلول و هیدروفیل است و بنابراین ظرف مدتی خود بخود رد دهان شسته و حل میشود که از ویژگی های منحصر به فرد آن میباشد. ٢١ با وجود ویژگی های مناسب و با توجه به بررسی ما در متون علمی به نظر میرسد هنوز نیاز به مطالعات بیشتر در مورد ویژگی های کلینیکی و خصوصا زیست سازگاری این پانسمان در انسان وجود دارد.
بنابراین در راستای یافتن پانسمانی با ویژگی های مناسب جهت استفاده کلینیکی و نیز در ادامه مطالعه قبلی این مجری و همکاران که به بررسی مقایسه ای ویژگی ها و کاربردهای کلینیکی پانسمان Resopak با پانسمان متداول Coe pac پرداخته شده بود ، در این مطالعه ما به بررسی مقایسه ای تاثیرات سمیت سلولی دو پانسمان pac Coe و Resopak بر روی فیبروبلاتهای لثه ای انسان از نظر زنده ماندن سلولی و نیز میزان نکروز و آپوپتوز سلولها در تماس با عصاره تهیه شده از این پانسمانها خواهیم پرداخت.


سوالات و / یا فرضیات پژوهش
1. تاثیر عصاره ١،٣،٧ روزه پانسمان Coepak بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان زنده ماندن (Vitality) سلولهای فیبروبلاست لثه ای چگونه است
2. تاثیر عصاره ١،٣ روزه پانسمان Resopac بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان زنده ماندن (Vitality) سلولهای فیبروبلاست لثه ای چگونه است
3. تاثیر عصاره ١،٣،٧ روزه پانسمان Coepak بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان آپوپتوز و نکروز سلولهای فیبروبلاست لثه ای چگونه است
4. تاثیر عصاره ١،٣ روزه پانسمان Resopac بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان آپوپتوز و نکروز سلولهای فیبروبلاست لثه ای چگونه است
5. تاثیر عصاره ١،٣ روزه پانسمان Coepak و Resopac بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان زنده ماندن (Vitality) سلولهای فیبروبلاست لثه ای با هم دارای تفاوت معنی دار است
6. تاثیر عصاره ١،٣ روزه پانسمان Coepak و Resopac بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان آپوپتوز و نکروز سلولهای فیبروبلاست لثه ای با هم دارای تفاوت معنی دار است

هدف کلی طرحمقایس اثر دو پانسمان پریودنتال بر سلولهای فیبروبلاست لثه ای انسان
اهداف اختصاصی
1. تعیین اثر عصاره ١،٣،٧ روزه پانسمان Coepak بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان زنده ماندن (Vitality) سلولهای فیبروبلاست لثه ای
2. تعیین اثر عصاره ١،٣ روزه پانسمان Resopac بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان زنده ماندن (Vitality) سلولهای فیبروبلاست لثه ای
3. تعیین اثر عصاره ١،٣،٧ روزه پانسمان Coepak بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان آپوپتوز و نکروز سلولهای فیبروبلاست لثه ای چگونه است
4. تعیین اثر عصاره ١،٣ روزه پانسمان Resopac بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان آپوپتوز و نکروز سلولهای فیبروبلاست لثه ای چگونه است

5. مقایسه اثر عصاره ١،٣ روزه پانسمان Coepak و Resopac بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان زنده ماندن (Vitality) سلولهای فیبروبلاست لثه ای
6. مقایسه اثر عصاره ١،٣ روزه پانسمان Coepak بعد از ٢٤ و ٤٨ ساعت بر روی میزان آپوپتوز و نکروز سلولهای فیبروبلاست لثه ای

سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحدانشجویان دندانپزشکی، دندانپزشکان، متخصصین پریودانتیکس
تعریف واژه های تخصصیآزمون MTT : جهت بررسی سمیت سلولی و در حقیقت زنده ماندن سلولی از آزمایش سنجش MTT استفاده میشود. MTT یک نمک تترازولیم زرد محلول در آب است. در اثر آنزیمهای دهیدروژناز میتوکندریایی که فقط در سلولهای زنده فعال میباشند، در حلقه MTT محلول شکستی ایجاد شده و به بلورهای آبی- بنفش رنگ فورمازان غیر محلول تبدیل میشود و میزان آن توسط دستگاه اسپکتروفتومتر اندازه گیری می شود.22
نوع مطالعهتجربی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)سلولهای فیبروبلاست لثه ای انسانی تهیه شده از انستیتو پاستور ایران

همه سلولهای کشت داده شده
حجم نمونه و روش محاسبه آنبا توجه به اینکه مداخله بر روی نمونه های یکسان ودر شرایط آزمایشگاهی یکسان انجام می شود ونیز با توجه به مقالات نسبتا مشابه18 در هر گروه مورد بررسی در آزمون MTT ٦چاهک محیط کشت و در بررسی فلوسیتومتری یک چاهک کشت سلول اختصاص داده میشود در نظر گرفته خواهد شد
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)آسان
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)پرسشنامه ضمیمه 1
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)
فیبروبلاست های لثه ی انسانی از انستیتو پاستور ایران خریداری شده. این رده‌ی سلولی در محیط کشت αMEM حاوی 10% سرم گاوی (FBS) در فلاسک استریل کشت سلول کشت داده شده و پس از 2 تا 3 روز به تعویض محیط شده و بعد از یک هفته نیاز به پاساژ دادن دارند.

از هر نوع پانسمان پریودنتال COE-PAKTM (GC AMERICA INC) و Reso Pac (Hager Worldwide INC) دیسک هایی با ابعاد یکسان با قطر ٥mm و ضخامت ٢mm طبق دستور کارخانه سازنده تهیه شده و در محیط ٣٧ و ١٠٠٪ رطوبت ست شده سپس در محیط کشت سلولی ٥ml αMEM قرار داده شده و دو عصاره ١و ٣ روز بعد از resopak و عصاره های ١،٣،٧ روز پس از ست شده coepak تهیه شده و پس از عبور دادن از فیلتر ٠/٢میکرون روی سلولهای فیبروبلاست لثه کشت داده شده ریخته خواهد شد. جهت بررسی های سمیت سلولی برای هر گروه از عصاره ها در زمانهای ٢٤ و ٤٨ ساعت بعد از تاثیر هر نوع عصاره ٦ چاهک کشت سلول جهت ٦بار تکرار آزمایش MTT ویک چاهک برای هر گروه تحت آزمایش فلوسیتومتری در نظر گرفته خواهد شد. تعداد 5000 سلول در هر خانه ی پلیت 96 خانه کشت می‌دهیم و طبق شماره گذاری نوع درمان دریافتی را مشخص می نماییم.

برای ارزیابی سمیت سلولی از آزمایش سنجش MTT استفاده می‌شود. MTT یک نمک تترازولیم زرد رنگ محلول در آب است. در اثر آنزیم‌های دهیدروژناز میتوکندریایی که فقط در سلول‌های زنده فعال می‌باشند، در حلقه MTT محلول شکستی ایجاد شده و به بلورهای آبی رنگ فورمازان غیر محلول تبدیل می‌شود؛ لذا با استفاده از روش نور سنجی در طول موج 540-570 نانومتر میزان فورمازان که توسط دی متیل سولفوکساید یا حلال‌های دیگر به شکل محلول درآمده اندازه گیری شده و از طول موج 690 نانومتر رفراندوم کم شده و بدین وسیله میزان توده سلول‌های زنده تعیین می‌گردد. در این آزمایش شدت رنگ تولید شده با تعداد سلول‌های زنده در ارتباط می‌باشد که به صورت در صد گزارش می شود. کنترل این آزمون ١٠٠در صد در نظر گرفته میشود

جهت آماده سازی سلولها جهت این آزمایش سلول‌ها را به مدت 24 ساعت در انکوباتور قرار می‌دهیم. سپس آن‌ها را از انکوباتور خارج کرده و تعویض محیط کرده و مواد مورد آزمایش را به محیط کشت اضافه می کنیم. پس از 24 و در گروه دیگر ٤٨ ساعت پلیت را از انکوباتور خارج و به هر چاهک 10 میکرو لیتر محلول MTT و 90 میکرو لیتر محیط کشت αMEM حاوی FBS10%اضافه کرده و سپس به مدت 4-3 ساعت در دمای ˚C37 انکوبه می‌شود. در این مرحله می‌توان بلورهای فورمازان را توسط میکروسکوپ معکوس در سلول‌های زنده مشاهده نمود. سپس محیط روئی هر چاهک را به آرامی خارج کرده و به هر چاهک 100 میکرو لیتر دی متیل سولفوکساید اضافه نموده و بعد از چندین بار پیپت کردن هر چاهک به منظور حل شدن بلورهای فورمازان، جذب نوری توسط دستگاه الایزا ریدر در طول موج 690-540 نانومتر خوانده می‌شود.

جهت بررسی آپوپتوز و نکروز سلولی یعنی میزان مرگ سلولی و نوع آن بعد از تاثیر عصاره ها از روش فلوسایتومتری و رنگ آمیزی با پروپیدیوم یدید و ترکیب annexin ν استفاده خواهد شد. ترکیب annexin ν تمایل بالایی برای فسفاتیدیل‌سرین موجود در سطح داخلی غشا دارد ولی در سلول‌های زنده این ترکیب توانایی ورود به سلول را نداشته و وارد سلول نمی‌شود. در سلول‌هایی که دچار آپاپتوز شده اند فسفاتیدیل‌سرین موجود در سطح داخلی غشا در سطح بیرونی غشا قرار گرفته و annexin ν می‌تواند به آن متصل شود. ترکیب پروپیدیوم یدید به DNA متصل می‌شود و در سلول‌هایی که دچار نکروز شده اند وارد سلول شده و به DNA متصل می‌شود. سلول‌ها در مرحله های پایانی آپاپتوز نفوذ پذیر شده و ترکیب annexin ν می‌تواند وارد سلول شود. در نتیجه در رنگ آمیزی با این دو ترکیب سه حالت وجود دارد که در حالت اول سلول در مراحل اولیه ی آپاپتوز قرار داشته در نتیجه annexin ν به فسفاتیدیل‌سرین سطحی متصل می‌شود ولی پروپیدیوم یدید توانایی ورود به سلول را ندارد. در نکروز چون غشای سلولی دچار آسیب شده پروپیدیوم یدید وارد سلول شده و به DNAمتصل می‌شود. در مراحل نهایی آپاپتوز هم annexin ν و هم پروپیدیوم یدید وارد سلول شده و برای هر دو ترکیب جواب مثبت است.

برای آماده سازی سلول‌ها بعد از تیمار کردن سلول‌ها را تریپسینه نموده سپس آن‌ها را در دور g1200 ساتریفیوژ نموده و دوباره این کار را با ml5 بافر فسفات انجام داده بعد از سانتریفیوژ مجدد ml1 از بافر مخصوص کیت اضافه نموده و بعد از پیپتاژ شدید µl5 از annexin νاضافه نموده و 15 دقیقه در محیط تاریک انکوبه می‌شود. در آخر هم µl4 محلول پروپیدیوم یدید اضافه کرده و با دستگاه فلوسایتومتری آنالیز می‌گردد و به صورت درصد گزارش میشود.



روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)با استفاده از روشهای آمار توصیفی (تنظیم جداول توزیع فراوانی، تعیین شاخص های مرکزی پراکندگی، رسم نمودار) و روشهای آمار تحلیلی (آزمون t زوجی، t مستقل و یا معادل ناپارامتریک آنها یعنی آزمون ویلکاکسون و من ویتنی یو)داده ها در سطح اطمینان 95% و با استفاده از نرم افزار SPSS تجزیه و تحلیل خواهند شد.
ملاحظات اخلاقی طبق آیین نامه اخلاق پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی ، فصل ٤ (زیست بانکها)، کد ٤ در مورد نمونه‌هایی که هویت دهنده‌ی آن‌ها قابل ردیابی نباشد، می‌توان با استناد به رضایت‌نامه‌ی کلی اولیه، پژوهش‌های جدید را بدون اخذ رضایت‌نامه انجام داد.
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهااحتمال مرگ و آلودگی سلولهای در طی مراحل کشت و آزمایش. بدین منظور از افراد متخصص و با تجربه که سابقه انجام این کار را دارند استفاده خواهد شد
کلمات کلیدیPeriodontal dressing-Cytotoxicity-Gingival fibroblasts پانسمان پریودنتال، سمیت سلولی، فیبروبلاست لثه
فهرست منابع و مراجع• مراجع مورد استفاده براساس رفرانس نویسی ونکوور تنظیم گردد. 1- Harpenau LA. Periodontal dressings.In:Prichard JF,ed. advanced periodontal disease, 2nd ed. WB Saunders Co: Philadelphia;1972.p.280 2- Klokkevold PK, Takei HH, Carranza FA. General Principles of periodontal surgery. In: Carranza's clinical periodontology. Newman MG, Takei HH, Klokkvod PA, Carranza FA. 2006, 10 th ed. Elsevier Philadelphia. 3- koch G, Magnusson B, Nyquist G. Contact allergy to medicaments and materials used in dentistry (II). Sensitivity to eugenol and colophony. Odontol Rev. 1971;22:275-289 4-Baghani Z, Kadkhodazadeh M. Periodontal dressings: A review article. J Dent Res.2013 ;7(4):183-191. 5-Haugen E, Gjermo P, Orstavik D. Some antibacterial proper- ties of periodontal dressings. J Clin Periodontol 1977;4:62- 8. 6-Checchi L, Trombelli L. Postoperative pain and discomfort with and without periodontal dressing in conjunction with 0.2% chlorhexidine mouthwash after apically positioned flap procedure. J Periodontol 1993;64:1238-42. 7-Huaugen E, Espevik S, Mjor IA. methods for evaluation of working and setting times of periodontal dressings. Acta Odontol Scand. 1979;37:309-15 8-Gjerdet NR, Haugen E. Dimensional changes of periodontal dressings. J Dent Res 1977;56:1507-10. 9-O'neil TC.Antibacterial properties of periodontal dressings. J periodontol. 1975;46:469. 10-haugen E,Gjermo P, Orstavik D. Some antibacterial properties of periodontal dressings. J Clin Periodontol 1977; 4:62-8 11-Poulsom RC. An anaphylactoid reaction to periodontal surgical dressing. Report of case. J Am Dent Assoc. 1974;89:895-6 12-lysell L. Contact allergy to rosin in periodontal dressing. A case report. J Oral Med.1976;31:24-5 13- Haugen E, Hensten-Pettersen A. In vitro cytotoxicity of pe- riodontal dressings. J Dent Res 1978;57:495-9. 14-. Nezwek RA, Caffesse RG, Bergenholtz A, Nasjleti CE. Connective tissue response to periodontal dressing. J Perio- dontol 1980;51:521-9. 15-Wennberg A, Mjor IA. Short term implantation studies of periodontal dressings. J Periodontal Res 1983;18:306-10. 16-Smeekens JP, Maltha JC, Renggli HH. Histological evalua- tion of surgically treated oral tissues after application of a photocuring periodontal dressing material. An animal study. J Clin Periodontol 1992;19:641-5. 17-Su R, Huang ZR, Zhang B. [The cytotoxicity of Sne-Pack periodontal dressing and scanning electron microscopic study]. Shanghai Kou Qiang Yi Xue 1993;2:80-3. [Abstract] 18-Alpar B, Gunay H, Geurtsen W, Leyhausen G. Cytocom- patibility of periodontal dressing materials in fibroblast and primary human osteoblast-like cultures. Clin Oral Investig 1999;3:41-8. 19- Petelin M, Pavlica Z, Batista U, Stiblar-Martincic D, Skaler- ic U. Effects of periodontal dressings on fibroblasts and gin- gival wound healing in dogs. Acta Vet Hung 2004;52:33-46. 20-Haugen E, Mjor IA. Bone tissue reactions to periodontal dressings. J Periodontal Res 1979;14:76-85. 21-http://www.hagerwerken.de/_uploads/media/22303_ResoPac-Anwenderb-GB.pdf. last accessed: Apryl 2015 22-https://en.wikipedia.org/wiki/MTT_assay. Last accessed: June 2015
پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
4- fibro pack edi.docx1394/02/20584762دانلود
4- fibro pack edi shora.doc1394/04/10778240دانلود
4- fibro pack edi shora BARGASHT.doc1394/04/21337920دانلود
komite akhlagh.doc1394/05/03342016دانلود