بررسی اثر آنتی اکسیدانی نانو ذرات طلا،بر مسمومیت کبدی القاء شده با تتراکلرور کربن در موش های صحرایی نر بالغ.

The Survey of antioxidant effect of gold nanoparticle on Carbon tetrachloride induced hepatotoxicity in male adult Rats.


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: محمدرضا شهرکی

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 7355
عنوان فارسی طرح بررسی اثر آنتی اکسیدانی نانو ذرات طلا،بر مسمومیت کبدی القاء شده با تتراکلرور کربن در موش های صحرایی نر بالغ.
عنوان لاتین طرح The Survey of antioxidant effect of gold nanoparticle on Carbon tetrachloride induced hepatotoxicity in male adult Rats.
نوع طرح بنیادی
محل اجرای طرح مدیریت توسعه فناوری سلامت
رسته مطالعاتی تجربی- تجربی آزمایشگاهی
دانشکده/مرکز دانشکده پزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز 1

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
محمدرضا شهرکیمجری دکترای تخصصی mrshahrakim@gmail.com
فرشته بادینیهمکارتدوین طرحکارشناسی ارشدfereshtebadini@ymail.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی بررسی اثر آنتی اکسیدانی نانو ذرات طلا،بر مسمومیت کبدی القاء شده با تتراکلرور کربن در موش های صحرایی نر بالغ.
خلاصه طرح به لاتینThe Survey of antioxidant effect of gold nanoparticle on Carbon tetrachloride induced hepatotoxicity in male adult Rats.
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشکبد بزرگترین اندام بدن است که حدود 5-3 درصد توده ی بدن را تشکیل می دهد.کبد به دو لوب اصلی چپ و راست تقسیم می شود و دو لوب ضمیمه(مربعی،دمی) نیز دارد.یکی از مهمترین اعمال کبد علاوه بر سوخت و ساز مواد مختلف،سم زدایی مواد آلوده کننده ی محیطی و داروهای شیمیمایی می باشد،کبد مستعد استرس اکسیداتیو می باشد که این امر به دلیل واکنش زنجیره های رادیکال های آزاد می باشد (1). در اکثر موارد در طی عمل سم زدایی ،فعال سازی متابولیکی توسط آنزیم های سیتوکروم (P450)میکروزوم های کبدی باعث ایجاد متابولیت های سمی و فعال می شود که این می تواند موجب آسیب بافت های مختلف از جمله کبد شود (2). تترا کلرور کربن یک هالو آلکان کبدی است.قسمت هایی از کبد که تحت تاثیر تزریق تتراکلرور کربن (CCL4) قرار می گیرند،باعث ایجاد نکروز،فیبروز،بروز سلول های تک هسته ای ،خونریزی،تخریب ،تغییر شکل چربی ها و ایجاد تومور می گردد (3).تترا کلرور کربن ارائه شده برای القای آسیب سولی از طریق متابولیت های مربوط به سیتوکروم (P450)عمل می کند که این محصولات رادیکال های آزاد ،می توانند با ساختار غشاء و فرایند های غشایی تعامل داشته باشند و در نتیجه باعث ایجاد پراکسیداسیون لیپید ها گردد (4). استرس اکسیداتیو وضعیتی است که با آسیب های سلولی ناشی از اکسیژن و مشتقات اکسیدانی اکسیژن که عموما (ROS) نامیده می شوند، همراه است و در نهایت فعال سازی فاکتور القای آپوپتوزیس می شود که آپوپتوزیس موجب مرگ سلولها می شود(5). رادیکال های آزاد ترکیباتی هستند که رادیکال های یون سوپراکسید (-2O)، پراکسید هیدروژن (2O2H)، پراکسیل (ROO-) و هیدروکسیل به شدت فعال (OH-)، نیتریک اکسید (NO)، غیر رادیکالی (اوزون، پراکسیدهای لیپید، پراکسید هیدروژن و مشتقات اکسیژن) و گونه های نیتروژن واکنشی (نیتروس اکسید، پروکسی نیتریت، یون نیتروکسیل و غیره) می باشد که از ترکیبات اصلی و فرعی(ROS) مطرح می شوند (6). ترکیبات آنتی اکسیدانی، ترکیباتی هستند که سبب کنترل، توقف و خنثی سازی مواد واسطه حاصل از فرآیند تولید انرژی در زنجیره انتقال الکترون سلول ها (فعالیت -هوازی) شده و به انواع اکسیژن فعال،یون سوپراکسید (- 2O)، پراکسید هیدروژن (2O2H)، پراکسیل (ROO-) و هیدروکسیل به شدت فعال (-OH)) معروف بوده و در گروه رادیکال های آزاد قرار می گیرند. این آنتی اکسیدان ها اغلب منشأ غذایی دارند مانند ویتامین های A،E ، C، بتا کاروتن، کاروتنوئیدها، فلاونوئیدها و همچنین پروتئین هائی مانند: ترانسفرین، فریتین، آلبومین، سرولوپلاسمین، متالوتیونین هستند که از تولید رادیکال های آزاد جلوگیری می کنند(7). آنتی اکسیدانهای آنزیمی: این آنتی اکسیدان ها شامل: سوپراکسید دسموتاز، کاتالاز، گلوتاتیون پراکسیداز و گلوتاتیون ردوکتاز هستند که موجب کاهش میزان پراکسیدها می شوند (8). آنتی اکسیدان های غیر آنزیمی شامل ویتامین های C، 12B، E، سلنیوم، روی، تائورین، هیپوتائورین، سیستئین، آلبومین سرم گاوی، بتاکاروتن و لیکوپن از آنتی اکسیدان های خنثی کننده و شاخه شکن قوی پراکسیدها هستند. گلوتاتیون فراوان ترین آنتی اکسیدان است که نقش مهمی در محافظت از لیپیدها، پروتئین ها، قندها و اسیدهای نوکلئیک در برابر استرس اکسیداتیو ایفا کرده و همراه با سلنیوم در ساختمان گلوتاتیون پراکسیداز وجود دارد.روی و مس بخشی از آنزیم سوپر اکسید دسموتاز هستند. کاروتنوئیدهائی مانند بتاکاروتن و لیکوپن از ترکیبات آنتی اکسیدانی دفاعی محسوب شده و غشای پلاسمایی را در برابر پراکسیداسیون لیپید محافظت می کنند (9). ویتامین E، A، اسکوربیک اسید، گلوتاتیون رودوکتاز، سوپراکسید دسموتاز، گلوتاتیون پراکسیداز و کاتالاز، که سیستم های پاک سازی کننده نامیده می شوند. عدم تعادل بین سیستم های تولید کننده رادیکال آزاد و سیستم های پاکسازی کننده منجر به استرس اکسیداتیو شده وضعیتی که با آسیب سلولی در بسیاری از حالت های پاتولوژیک و بیماری ها همراه می شود (10). آسیب های کبدی یکی از بزرگترین بیماری های جدی می باشد که به همراه اتخاذ حالت های غذایی مدرن،در معرض آلاینده های محیطی ومصرف شدید دارو ها قرار می گیرند،ایجاد می گردد.بسیاری از ترکیبات زیستی خارجی(Xenobiotics)،شناخته شده اندکه باعث مسمومیت کبدی می گردد(12 و 11). آسیب های کبدی همیشه مرتبط با نکروز سلولی،افزیش لیپوپراکسیداسیون و تنظیم کاهشی گلوتاتیون کبدی است.علاوه بر ان بالا بودن سطح سرمی آنزیم های کبدی نشان دهنده ی نشت سلولی این بافت است(13). در میان ترکیبات زیستی خارجی،تترا کلرور کربن، نشان دهنده ی مهمترین علت ایجاد صدمات بافتی حاد از طریق فعالیت های زیستی رادیکال های آزاد ،تری کلرومتیل که باعث پراکسیداسیون لیپید ها و ایجاد صدمات سلولی بافتی کبدی می گردد(15 و14). القاء تزریق زیاد تترا کلرور کربن باعث صدمات کبدی می گردد و سطح سرمی بالایی از آنزیم های کبدی از جمله آنزیم ها آلانین آمینو ترانسفراز (ALT)، آسپارتات آمینو ترانسفراز (AST)، آلکالین فسفاتاز (ALP)و لاکتات دهیدروژناز (LDH) هستند که باعث صدمات شدید کبدی می گردد. اثرات آن با استرس اکسیداتیو کبدی و آسیب شناسی،بافت کبدی همراه است(16).استرس اکسیداتیو بوسیله ی کاهش مقدار آنتی اکسیدان های بافت کبدی گلوتاتیون سوپرهیدروژناز (GSH) و کاهش سوپراکسید دسموتاز (SOD)، گلوتاتیون پراکسیداز (GPX)، گلوتاتیون ردوکتاز (GR)وگلوتاتیونS –ترانسفراز (GST)به همراه است و باعث افزایش تولید مالون دی آلدئید(MDA)می گردد.یکی از بزرگترین آنزیم های آنتی اکسیدانی GSH می باشدو نقش بسیار مهمی را در دفاع سلولی بازی می کند.در حالی که نقش تعیین کنندگی آن بسیار سخت می باشد،برای بافت هایی که مستعد آسیب های اکسیداتیو می باشد(و17 18). تخلیه ی (GSH)در نتیجه ی مسمویت القا شده توسط تتراکلرور کربن اتفاق می افتد(19). با افزایش سطح(MAD)،مقدار(LP) لیپوپرواکسیدازها در بافت آسیب دیده افزایش می یابدو مکانیسم های دفاعی آنتی اکسیدانی از بین می رود و از تشکیل بیش از اندازه ی رادیکال های آزاد جلوگیری می کند(20). نانو ذرات طلا (Au Nanoparticle) ذرات کوچک آب گریز ی هستند (کمتر از 2nm پوشیده با دودکانتیول برای آب گریزی)که می تواند در مناطق آب گریز غشاء لیپیدی دولایه سلول مستقر و به عنوان وسیله ای برای تعامل لیپید های آب گریز باشد. این ذرات جهت انتقال داروها، ،تشخیص پزشکی،انتقال ژن ، درمان وترمیم سوختگی ها و درمان سرطان استفاده می شوند (21). از نانو ذرات طلا، می توان به عنوان تقویت دز در پرتو درمانی اشاره کرد(22). نانوذرات طلا به عنوان یک شاخص رنگ بسیار حساس و خواص نوری قوی وابسته به مسافت مورد استفاده قرار می گیرند(23). نانو ذرات طلا ،با توجه به طیف منحصر به فرد خود،خواص نوری و الکتروشیمیایی یکی از سیستم های فناوری نانو هستند که به طور گسترده برای تشخیص مولکولی استفاده می شود (24). نانو ذرات طلا(./8nm) ، یک کلاس جدید از مهار کننده های کانال های یونی هستند که کانال های پتاسیمی را بلوکه می کنند (27و26و25). شواهد تجربی نشان می دهد که درمان داخل سلولی با نانوذرات طلا باعث افزایش مقاومت ورودی و کاهش زمان تاخیر وآستانه ی پتانسیل های عمل در نورون های(CA1)هیپوکامپ می گردد(28). مطالعات انجام شده مشخص می کند که نانو ذرات طلا از طریق G-protein های غشا موجب تغییر فعالیت آن می شود ودرتشخیص سرطان نقش دارند(30 و29). مطالعات میکروسکوپی نشان داده است که نانو ذرات طلا (17nm)وارد (Cornu Ammonis/CA)هیپوکامپ صدمه دیده می شوند و بر سطح سرمی دوپامین وسروتونین در مغز اثر افزایندگی دارند (nm37و17) (31).شواهد تجربی نشان می دهد که نانوذرات طلا در اندازه های مختلف با بار سطحی منفی ومثبت هستند که جذب آنها تابع بارواندازه است (33و32). مطالعات نشان داده است که نانوذرات طلا(AuNp) بسیاری از پارامتر های استرس اکسیداتیو،(SOD/Super Oxide dismutase) و(GPX/Glutathione peroxidase) و ظرفیت آنتی اکسیدان های پلاسما وپروفایل چربی را نسبت به سایر پارامترها بهبود می بخشد علاوه بر آن هم می توان اشاره داشت که برگشت ظاهری سلول های(Bبتای)پانکراس ممکن است در نتیجه ی ظرفیت احیاء کنندگی نانو ذرات طلا باشد. (Karger AG,Basel,2015). (34). نتایج نشان داده که تاثیرات وابسته به درمان که با دوز های پایین نانو ذرات طلا رقیق وفشرده شده اند، مستقل از استرس اکسیداتیو و یا فعالیت های مهاری آنها می باشد(35).) Barathmanikanthو همکاران )،پتانسیل نانو ذرات طلا را برای درمان دیابت شرح دادند و همچنین آن را یک عامل آنتی اکسیدانی معرفی کردند و از مزایای نانو ذرات طلا برای مهار رادیکال های آزاد و ایجاد یک شرایط پایدار بر روی بیماری قند بیان کردند(36).طبق تحقیقات انجام شده در گذشته بیانگر این است که نانو ذرات طلا که تقریبا به اندازه ی 100و3،5،50 (nm)هستند ،نشانی از تاثیرات سمی را نمایان نمی کنند(37).همچنین گزارش شده است که نانو ذرات طلا به اندازه ی (50nm)رادیکال آزاد اکسیژن را جدا می کنند و از پراکسیداسیون لیپید ها جلوگیری نموده و از درشت مولکول های سلولی که شامل (DNA) می باشد،در مقابل آسیب های اکسیداتیو محافظت می کنند(38).از جمله شاخص های زیستی استرس اکسیداتیو بیو مولکول های کوچک چون گلوتاتیون و سوپر اکسید دهیدروژناز هستند که در حضور رادیکال های زیستی و پراکسید ها تجزیه می شوند(39).و از آنجائی که نانو ذرات طلا ،فعالیت آنتی اکسیدانی بالایی را در برابر گونه های اکسیژن فعال ناشی از سلول های تومور کبدی نشان می دهند (40) ، هدف این مطالعه بررسی اثر آنتی اکسیدانی نانوذرات طلا، بر مسمویت کبدی القاء شده با تترا کلرور کربن در موش های صحرایی نر می باشد.
سوالات و / یا فرضیات پژوهش1. تزریق تک دز نانو ذرات طلاموجب تغییر آسپارتات ترانس میناز (AST) گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا در مقایسه سایر گرو ه میشود.
2. تزریق تک دز نانو ذرات طلاموجب تغییر سطح سرمی آلانین ترانس میناز (ALT)گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا در مقایسه سایر گرو ه میشود
.3. تزریق تک دز نانو ذرات طلاموجب تغییر سطح سرمی آلکالن فسفاتاز (ALP)گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا در مقایسه سایر گرو ه میشود
4. تزریق تک دز نانو ذرات طلاموجب تغییر سطح سرمی لاکتات دهیدروژناز (LDH)گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا در مقایسه سایر گرو ه میشود
5. تزریق تک دز نانو ذرات طلاموجب تغییر سطح سرمی آنتی اکسیدان مالون دی آلدئید(MDA)گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا در مقایسه سایر گرو ه میشود.
6. تزریق تک دز نانو ذرات طلاموجب تغییر سطح سرمی آنتی اکسیدان (GSH)گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا در مقایسه سایر گرو ه میشود.
7. تزریق تک دز نانو ذرات طلاموجب تغییر سطح سرمی آنتی اکسیدان (SOD)گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا در مقایسه سایر گرو ه میشود.
8- تزریق تک دز نانو ذرات طلاموجب تغییر در لبولاسیون کبدی در گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی می شود.
تزریق تک دز نانو ذرات طلاموجب تغییر در عناصر عروقی در گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی می شود.
هدف کلی طرحتعیین اثر آنتی اکسیدانی نانو ذرات طلا بر مسمویت کبدی القاء شده با تتراکلرور کربن در موش های صحرایی نر.
اهداف اختصاصی1.تعیین سطح سرمی آسپارتات ترانس میناز (AST) گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی.
2. تعیین سطح سرمی آلانین ترانس میناز (ALT) درگروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی.
3. تعیین سطح سرمی آنزیم کبدی آلکالن فسفاتاز(ALP) درگروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی.
4. تعیین سطح سرمی لاکتات دهیدروژناز (LDH) درگروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی.
5.تعیین سطح سرمی آنتی اکسیدان مالون دی آلدئید(MDA) درگروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی.
6. تعیین سطح سرمی آنتی اکسیدان (GSH) درگروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی.
7. تعیین سطح سرمی آنتی اکسیدان (SOD) درگروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی.
8- تعیین تغییرات بافتی لبولاسیون کبدی در گروه مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی.
9- تعیین تغییرات عناصر عروقی در کبد مسموم شده با تتراکلرور کربن ودریافت کننده نانو ذرات طلا با سایر گرو ه های مورد بررسی.
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحمعاونت پژوهشی دانشگاه
تعریف واژه های تخصصیNano particle ، AST ، ALT ، Liver toxicity, LDH
نوع مطالعهExprimental
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)30 سر موش صحرایی نر نژاد ویستار با میانگین وزنی 250-200گرم .
حجم نمونه و روش محاسبه آن<30 سر موش صحرایی نژاد ویستار در 3گروه 10تایی
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)تصادفی
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)تعیین اثر آنتی اکسیدانی نانو ذرات طلا بر مسمویت کبدی القاء شده با تتراکلرور کربن در موش های صحرایی نر.
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)30سر موش صحرایی نر نژاد ویستار،با میانگین وزنی 250-200 گرم از اطاق حیوانات دانشگاه علوم پزشکی زاهدان انتخاب خواهند شد.که پس از توزین ( وزن اولیه )هر کدام از حیوانات مورد بررسی در داخل یک قفس قرار خواهد گرفت.حیوانات مورد بررسی دسترسی آزاد به آب وغذا خواهند داشت. دمای اطاق نگهداری، c° 3 ±22 خواهد بود و توسط دو دما سنج جیوه ای کنترل خواهد شد. محیط زندگی حیوانات دارای تهویه مناسب و در چرخه ی 12 ساعت روشنایی و تاریکی که بطور مصنوعی با تایمر (Timer Model: SUL180a, AC220V, China, 6 Am to 6 Pm)) تنظیم خواهد شد.تاحد امکان سعی خواهد شد که حیوانات مورد بررسی تحت استرس محیطی قرار نگیرند. پس از یک هفته سازش با محیط جدید، حیوانات مورد مطالعه به 4 گروه مساوی تقسیم خواهند شد، بگونه ای که میانگین وزنی گرو هها تفاوت معنی داری نداشته باشد. گروه های مورد بررسی: 1.گروه کنترل( C) که از آب و غذای معمولی استفاده خواهد کرد و مورد تجویز پارافین مایع خواهند بود(42). 2- گروه کنترل( C) که از آب و غذای معمولی استفاده خواهد کرد و مورد تجویز پارافین مایع و سرم فیزیولوژِ یک خواهند بود 3.گروه سوم: از هفته 7 به بعد همراه تترا کلرور کربن تجویز سوسپانسیونCMC نانوذرات طلا به اندازه ی (nm20) ،را به مدت 3 روز دریافت خواهند کرد(43). درپایان آزمایش،24ساعت پس از تجویز نانو ذرات طلاو تتراکلرور کربن حیوانات مورد بررسی با اتر بی هوش و خون گیری از عروق گردنی انجام واز نمونه خون جمع آوری شده سرم گیری خواهد شد. سرم گیری با استفاده از دستگاه سانتریفیوژ بادور 3500 در دقیقه انجام خواهد شد.سرم جدا شده تا زمان انجام آزمایش در دمای زیر 70- درجه سانتی گراد نگهداری خواهد شد. پارامتر های بیوشیمیایی آنزیم های کبدی در این سرم شامل (AST)،(ALT)،(ALP) و (LDH) که به روش های متداول آزمایشگاهی اندازه گیری خواهند شد. کاهش مقدار گلوتاتیون بافتی با (GSH) مطابق متد توصیف شده به وسیله ی (Moron)مشخص می شود(44).در حالیکه تولید لیپید پر اکسیداسیون با اندازه گیری (MAD)ومقدار بافت کبدی هموژن مطابق متد(Uchiyama And Mihara)مشخص می گردد(45) ،با استفاده از نمونه ای از خون وریدی گرفته شده (ml4)ازتمام افراد مورد مطالعه بین ساعات 8 و9 صبح و بعد از 12 تا 14 ساعت ناشتا ،به منظور تعیین سطح فعالیت آنزیم آنتی اکسیدانی سوپر اکسید دسموتاز کبدی (SOD)، گلبول های قرمز خون مورد ارزیابی قرارمی گیرند(46). آنالیز کبدی : برای مطالعات بافت شناسی،بافت کبد را با فسفات بافری فرمالین طبیعی دهیدراتی 10%ثابت می کنند.(ارزش آن ها با nmol/gr پروتیین بیان می شود). سپس بافت کبدی را در الکل با درجه ی (50-10%) و در پارافین جا سازی می کنند. در این قسمت ما برش ها را انجام می دهیم و در هماتوکسلین وائوزین برای ارزیابی میکروسکوپی قرار می دهیم .این مطالعات کیفی می باشد و هدف آن تعیین آسیب های بافت کبدی است.
روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)برای تجزیه وتحلیل داده ها در این تحقیق روش آماری(Way ANOVA-One)انجام می گیرد.بنابراین به طور کلی ارزش آماری قابل توجه آن ها احتمال مقادیر کمتر از 5./. معنی دار در نظر گرقته می شود.و برای کلیه ی پارامتر های آماری وآماره ها حدود اطمینان 95./.محاسبه خواهند شد.بنابر این مقایسه ی بین گروه ها بر طبق (Tuckey,s test)انجام می گیرد.همه ی آنالیز های آماری به وسیله ی (spss v.18) انجام می گیرد
ملاحظات اخلاقی با توجه به این که این تحقیق برروی انسان انجام نمی شود بسیاری از موانع موجود در زمینه اخلاقی حل میشود. در ضمن همه موش ها در شرایط استاندارد بادمای25- 23درجه سانتی گرادورطوبت 30تا60 درجه وبا سیکل زمانی 12 ساعت روشنایی و12 ساعت تاریکی نگه داری می شوند واب وغذای کافی در اختیارشان قرار می گیرد.
در این تحقیق تمامی اصول پروتکل ژاپن در خصوص تحقیقات برروی حیوانات رعایت خواهد شد (58).
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهاتهیه کیت و نانوذرات محلول سازی
کلمات کلیدی، Nano particle ، AST ، ALT ، Liver toxicity, LDH
فهرست منابع و مراجع1. Mhashal AR, Roy S (2014) Effect of Gold Nanoparticle on Structure and Fluidity of Lipid Membrane. PLoS ONE 9(12): e114152.
2. Shaowei W, Wang X, Fuhong C, Xinyuan Z, Zhengping X, Jun Q, Sailing H.Three-Photon Luminescence of Gold Nanorods and Its Applications for High Contrast Tissue and Deep In VivoBrain Imaging.2015; 5(3): 251-266.
3. Kamiar A,Ghotalou R,and Valizadeh H. Preparation, Physicochemical Characterization and Performance Evaluation of Gold Nanoparticles in Radiotherapy.Adv Pharm Bull. Dec 2013; 3(2): 425–428.
4. Jinchuan L ,Wenhui B , Shucao N , Chao Z , Shuming Y &Ailiang C.Highly sensitive colorimetric detection of17b-estradiol using split DNA aptamers immobilized on unmodified gold nanoparticles. SCIENTIFIC REPORTS19 December 201; 4 : 75-71.
5. Colin.I. T, Perakaa S, Patrick C, Gerard M, Geordi P, D. Andrew L. A prospective study on pain score with transperineal prostatic gold seed fiducial implantation under local anesthetic alone. 2013;7:E 202-6.
6. Bruno V , Alexandra R. Fernandes and Pedro V. B. AuNPs for identification of molecular signatures of resistance.2014. doi: 10.3389/fmicb.00455.
7. Chur C. Gold nanoparticle-spermidine complex blocks the inward rectifier potassium chanel.Original Article, Am J Cardiovasc Dis 2014;4(2):34-46.
8. Astier Y, Uzun O, Stellacci F. Electrophysiologi cal study of single gold nanoparticle/alpha- Hemolysin complex formation: a nanotool to slow down ssDNA through the alpha- Hemoly sinnanopore. Small 2009; 5: 1273-1278.
9. Williams K. Interactions of polyamine with ion channels. Biochem J 1997; 325: 289-297.
10. Jung S, Bang M, Kim BS, Lee S, Kotov NA, Kim B, Jeon D. Intracellular gold nanoparticles increase neuronal excitability and aggravate seizure activity in the mouse brain. 2014 March 13;9(3).
11. Stelzer R, Hutz RJ.Gold nanoparticles enter rat ovarian granulosa cells and subcellular organelles, and alter in-vitro estrogen accumulation.2009 Dec;55(6):685-90.
12. Jayasekara P. S. Phan k, Tosh D.K, Kumar T.S, Moss S.M, Zhang G, Barchi Jr. J.J, Gao Z.G, Jacobson K.A. Modulation of G protein-coupled adenosine receptorsby strategically functionalized agonists and antagonists immobilized on gold nanoparticles.Purinergic Signalling (2013) 9:183–198.
13. Lappano R, MaggioliniM(2011) G protein-coupled receptors: novel
targets for drug discovery in cancer. Nat Rev Drug Discov 10:47–60.
14. Li WQ, Wang F, Liu ZM, Wang YC, Wang J, Sun F. Gold nanoparticles elevate Plasma testosteronelevels in male mice without affecting fertility. 2013 May 27;9(9-10):1708-14.
15. Chen YS, Hung YC, Lin LW, Liau I, Hong MY, Huang GS. Size-dependent impairmentof cognition in mice caused by the injection of gold nanoparticl. 2010 Dec 3;21(48):4851-2.
16. Carsten SM, Semmler-B, Jens L, Alexander W, Stephanie H, Martin S,Günter S, Ulrich S, and Wolfgang G. K. Size and surface charge of gold nanoparticles determine absorption across intestinal barriers and accumulation in secondary target organs after oral administration.Nanotoxicology. 2012 Feb; 6(1): 36–46.
17. Abdelhalim M.A.K. Uptake of Gold Nanoparticles in Several Rat Organs after Intraperitoneal Administration In Vivo: A Fluorescence Study.Volume 2013, Article ID 353695, 11 pages.
18. Marino L, Marino S, Wang D, Bruno E, Scaramuzza N,Nonvolatile memory effects in an orthoconic smectic liquid crystal mixture doped with polymer-capped gold nanoparticles. 2014 Jun 7;10(21):3842-9.
19. Selim ME, Abd-Elhakim YM, Al-Ayadhi LY. Pancreatic response to gold nanoparticles includes decrease of oxidative stress and inflammation in autistic diabetic model. 2015;35(2):586-600.
20. Larson JK, Carvan MJ 3rd, Teeguarden JG, Watanabe G, Taya K, Krystofiak E, Hutz RJ. Low-dose gold nanoparticles exert subtle endocrine-modulating effects on the ovarian steroidogenic pathway ex vivo independent of oxidative stress. 2014 Dec;8(8):856-66.
21. Khan HA, Abdelhalim MA, Alhomida AS, Al Ayed MS. Transient increase in IL- 1β, IL-6 and TNF-α gene expression in rat liver exposed to gold nanoparticles. 2013 Nov 22;12(4):5851-7.
22. Agarwal A, Sushil AP and Tamer MS. 2005. Prevention of oxidative stress Injury to sperm.Journal of Andrology; 26(6): 654-660.
23. Sikka SC. 2001. Relative impact of oxidative stress on male reproductive function. Curr Med Chem; 8: 851-862.‎
24. Bansal AK and Bilaspuri GS. 2010. Impacts of oxidative strees and Antioxidants one ‎ semen functions. Veterinary Medicine international; 686137: 1-7.‎
25. Sanocka D and Kurpisz M. 2004. Reactive oxygen species and sperm cells. Reprod
Biol Endocrinol; pp: 2-12.
26. Agarwal A, Nallella KP, Allamaneni SS and Said TM. 2004‎. Role of antioxidants in
‎ treatment of male ‎infertility: an overview of the literature. Reprod Bio Med Online; ‎‎8:
616-27.‎
27. Agarwal S and Rao AV. 2000. Tomato lycopene and its role in human health and
chronic ‎diseases.J.Can ‎Med Assoc; 163: 739–744.
28. Kumar V, Cortan RS, Robbins SL. 2003. Robbins Basic Pathol. 7th ed. Sunders,
USA, pp: 9 -11.
29. Kodavanti PR, Joshi UM, Young YA, Meydrech EF, Mehendale HM.protection of
hepatotoxic and lethal effects of CCl4 by partial hepatectomy.toxicology and
pathology. 1989; 17: 494–505.
30. Demirdag K, Bakcecioglu IH, Ozercan IH, Ozden M, Yilmaz S, Kalkan A. Role of
L-carnitine in the prevention of acute liver damage induced bycarbon tetrachloride
in rats. Journal of Gastroenterology and Hepatology.2004; 19: 333–338.
31. Jingyao Z, Sidong S ,Qing P, Ruiyao Z , Lei Z, Sushun L, Fandi M, Qifei W, and
Chang L. Serotonin Deficiency Exacerbates Acetaminophen-Induced Liver Toxicity
In Mice. Sci Rep. 2015; 5: 80-98.
32. Drotman RB, Lawhorn GT. Serum enzymes are indicators of chemical induced liver
damage. Drug and Chemical Toxicology. 1978; 1: 163–171.
33. Tsukamoto H, Matsuoka M, French SW. Experimental models of hepaticfi brosis: a
review. Seminars in liver disease. 1990; 10: 56–65.
34. Poli G. Pathogenesis of liver fi brosis: role of oxidative stress. Molecular aspects of
medicine. 2000; 21: 49–98.
35. Lin SC, Yao CJ, Lin CC, Lin YH. Hepatoprotective activity of Taiwan folk
medicine: Eclipta prostrate Linn. against various hapatotoxins induced medicine:
Eclipta prostrate Linn. against various hapatotoxins induced acute hapatotoxicity.
Phototherapy Research. 1996; 10: 483-490.
36. Prescott LF. Glutathione: A protective mechanism against hepatotoxicity
Biochemical Society transactions. 1982; 10: 84-85.
37. Meister A, Anderson M E. Glutathione. Annual Reviews in Biochemistry.
1983; 52: 711–760.
38. Trush MA, Mimnaugh EG, Gram TE. Activation of pharmacologic agents to
radical intermediates: Implications for the role of free radicalsin drug action and
toxicity. Biochemical pharmacology. 1982; 31: 3335-3336.
39. Souza MF, Rao VSN, Silveira ER. Inhibition of lipid peroxidation byternatin, a
tetramethoxyfl avone from Egletes viscosa L. Phytomedicine. 1997; 4: 25–29.
40. Girish SA, Sudhir GW, Avinash KD. Evaluation of hepatoprotectiv eeffect of
Amalkadi Ghrita against carbon tetrachloride-induced hepatic damage in rats.
Journal of Ethanopharmacology. 2004; 90: 229–232.
41. Wills PJ, Asha VV. Protective effect of Lygodium fl exuosum (L.) Sw.
(Lygodiaceae) against D-galactosamine induced liver injury in rats. Journal of
Ethanopharmacology. 2006; 108: 116–123.
42. Tung YT, Wu JH, Huang CC, Peng HC, Chen YL, Yang SC, Chang ST. Protective
effect of Acacia confusa bark extract and its active compound gallic acid against
carbon tetrachloride-induced chronic liver injury in rats. Food and Chemical
Toxicology. 2009; 47: 1385–1392.
43. Ahmed A. E, Fathalla M. H, Salah A. G, Ayman A. N, Salah A. G, Mansour I. S
And Essam Al-S. Antihepatotoxic effect of Marrubium Vulgare and Withania
Somnifera extracts on Carbon Tetrachloride-induced hepatotoxicity in rats. Journal
of Basic and Clinical Pharmacy.2010; Vol-001:247-254.

44. Barathmanikanth S, Kalishwaralal K ,Sriram M ,Pandian SR ,Youn HS ,Eom
S,Gurunathan S.Anti-oxidant effect of gold nanoparticles restrains hyperglycemic
conditions in diabetic mice.J Nanobiotechnol.2010;8:16.

45. Chen YS,Ching Y,Liau HI,Huang GS.Assessment of the in vivo toxicity of gold
nanoparticles.Nanoscale Res Lett 2009;4:858-864.

46. Tedesco S,Doyle H,Blasco J,Redmond G,Sheehan D.Oxidative stress and toxicity of
gold nanoparticles in Mytilus edulis.Aquat Toxicol 2010;100:178-186.

47. Droge W.Free radicals in the physiological control of cell funection.physiol Rev
2002;82:47-95
48. Martín R, Menchón C, Apostolova N, Victor VM, Alvaro M, Herance JR, García H.
Nano-jewels in biology. Gold and platinum on diamond nanoparticles as antioxidant
systems against cellular oxidative stress. ACS Nano. 2010 Nov 23;4(11):6957-65.
49. Ahmed A. E, Fathalla M. H, Salah A. G, Ayman A. N, Salah A. G, Mansour I. S
And Essam Al-S. Antihepatotoxic effect of Marrubium Vulgare and Withania
Somnifera extracts on Carbon Tetrachloride-induced hepatotoxicity in rats. Journal
of Basic and Clinical Pharmacy.2010; Vol-001:247-254.
50. Bhandarkar MR, Khan A. Antihepatotoxic effect of Nymphaea stella willd., against
Carbon tetrachloride-induced hepatic damage in albino rats. Journal of
Ethanopharmacology. 2004; 91: 61-64.
51. Balamurugan M. Restoration of histoarchitecture in the paracetamol-induced liver
damaged rat by earthworm extract, Lampito mauritii (Kinberg). European review
for medical and pharmacological sciences. 2007; 11: 407-411.
52. Siddiqi N .J. Effect of gold nanoparticles on superoxide dismutase and indoleamine
2, 3- Dioxygenase in various rat tissues. Indian J Biochem Biophys. 2014
Apr;51(2):156-9.

53. Abdelhalim. M.A. K. Uptake of Gold Nanoparticles in Several Rat Organs after
Intraperitoneal Administration In Vivo: A Fluorescence Study. BioMed Research
International. Volume 2013, Article ID 353695, 11 pages.

54. Siddiqi N .J. Effect of gold nanoparticles on superoxide dismutase and indoleamine
2, 3- Dioxygenase in various rat tissues. Indian J Biochem Biophys. 2014
Apr;51(2):156-9.
55. Moron MJ, Diperre JW, Mannerv KB. Levels of glutathione, glutathione reductase
and glutathione-s-transferase activities in rat lungs and liver. Biochemica et
Biophysica Acta. 1979; 582: 67–71.
56. Uchiyama M, Mihara M. Determination of malonaldehyde precursor in tissues by
thiobarbituric acid test. Analytical biochemistry. 1978; 86: 271-278.

57. Plestina-Borjan I, Katusic D, Medvidovic-Grubisic M, Supe-Domic D, Bucan K
Tandara L, Rogosic V. Association of Age-Related Macular Degeneration with
Erythrocyte Antioxidant Enzymes Activity and Serum Total Antioxidant Status.
Oxidative Medicine and Cellular Longevity. Volume 2015, Article ID 804054, 8
Pages.

58. Guidelines for Proper Conduct of Animal Experiments Science Council of Japan
2006.

معرفی پژوهش/ اهداف پژوهش
(عین عبارت هدف پروپوزال را کپی نکنید. بلکه با جملاتی که برای مردم قابل فهم باشد (برای سواد حدود پنجم ابتدایی )هدف را برای شرکت کنندگان توضیح دهید.) در تمام این متن در صورتیکه شرکت کننده کودک یا فرد فاقد ظرفیت تصمیم گیری است باید مواردیکه منظور از "من"، فرد شرکت کننده بوده است به "کودک" یا "فرد تحت سرپرستی من" اصلاح شود و مواردیکه منظور از "من"، رضایت دهنده است به من به عنوان "ولی" یا "قیم قانونی" اصلاح شود.
خون گیری
(آیا طرح شما نیاز به خونگیری دارد یا خیر)
نحوه همکاری/ مزایا ی طرح
(در این بخش برای شرکت کنندگان به زبان ساده توضیح دهید که: چه مداخله ای بر روی آنها صورت میگیرد. چه اقدامات پاراکلینیکی بر روی آنها انجام میشود. چه نمونه ای و با چه حجمی از آنها میگیرید در این مدت چند نوبت مراجعه باید داشته باشند و به چه فواصلی چه اقداماتی را در پیگیری آنها انجام میدهید. (حتی میتوانید سود بالقوه ای که شرکت کنندگان میتوانند از شرکت در این پژوهش ببرند بنویسید. این سود میتواند شرح احتمال درمان یا تشخیص بهتر بیماریشان، دریافت خدمات سلامت رایگان و یا پرداخت مشوق مالی در ازای جبران همکاریشان باشد)
عوارض جانبی
(منظور عوارض و میزان احتمال بروز آنها در این مطالعه است)
جبران عوارض احتمالی
(برای آنکه شرکت کننده بتواند ارزیابی مناسبی از سود و زیان شرکت در پژوهش شما داشته باشد لازم است بتواند سود و زیان مداخلات معمول و مداخلات این پژوهش را مقایسه کند. به عنوان مثال میزان موفقیت و میزان عوارض هریک را مقایسه کند.) - او باید بداند كه اگر در حين و بعد از انجام پژوهش هم هر مشكلي اعم از جسمي و روحي به علت شرکت در اين پژوهش برایش پيش آمد درمان عوارض، و هزينه‌هاي آن و غرامت مربوطه بر عهده مجري خواهد بود.
هزینه های مربوط به انجام طرح تحقیقاتی
(تمام مداخلات پژوهشی باید برای بیمار رایگان باشد و بیمار بداند شامل چه مواردی هستند. )
روش های جایگزین
در صورت عدم تمایل به شرکت در مطالعه چه روش های درمانی برای بیمار ارائه خواهد شد
محرمانه بودن
بیمار باید بداندکه دست اندر كاران اين پژوهش، كليه اطلاعات مربوط به او را نزد خود به صورت محرمانه نگه‌داشته و فقط اجازه دارند نتايج كلي و گروهي اين پژوهش را بدون ذکر نام و مشخصات بیمار منتشر كنند. و كميته اخلاق در پژوهش با هدف نظارت بر رعایت حقوق وی مي‌تواند به اطلاعات ایشان دسترسي داشته باشد.
پاسخگویی به پرسش ها
در این بخش نام و اطلاعات دسترسی فردی از عوامل پژوهش را که بتواند اطلاعات صحیح و کافی در اختیار شرکت کنندگان قرار دهند و در مورد عوارض و نگرانیها راهنمایی لازم را ارائه دهند ذکر شود
حق نپذیرفتن یا انصراف
بیمار باید بداند که شرکت اودر اين پژوهش کاملاً داوطلبانه است و مجبور به شرکت در اين پژوهش نيست و در صورت عدم شرکت از مراقبت‌هاي معمول تشخيصي و درماني محروم نخواهد شد او باید بداند كه حتي پس از موافقت با شركت در پژوهش مي‌تواند هر وقت كه بخواهد، پس از اطلاع به مجري، از پژوهش خارج شود و خروج اواز پژوهش باعث محرومیت از دریافت خدمات درمانی معمول برای اونخواهد شد.
رضایت
او باید بداند که اگر اشکال يا اعتراضي نسبت به دست اندركاران يا روند پژوهش دارد مي تواند با كميته اخلاق در پژوهش دانشگاه تماس گرفته و مشکل خود را به صورت شفاهي يا كتبي مطرح نمايد. در انتهای فرم قید گردد : اينجانب موارد فوق‌الذکر را خواندم و فهميدم و بر اساس آن رضايت آگاهانه خود را براي شركت در اين پژوهش اعلام مي‌کنم. اينجانب ……………… خود را ملزم به اجراي تعهدات مربوط به مجري در مفاد فوق دانسته و متعهد مي‌گردم در تأمين حقوق و ايمني شركت كننده در اين پژوهش تلاش نمايم
پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود