مقایسه سطح گلوتاتیون پر اکسیداز و مالون دی آلدئید بزاق در بیماران مبتلا به بتا تالاسمی ماژور با افراد سالم

Comparison of Salivary Glutathione peroxidase (GPX) and Malon dealdehyde (MDA) levels in patients with Major B thalassemia with Healthy persons


چاپ صفحه 		پژوهان
صفحه نخست سامانه		 مجری و همکاران
مجری و همکاران		 اطلاعات تفضیلی
اطلاعات تفضیلی		 دانلود
دانلود 		علوم پزشکی زاهدان
علوم پزشکی زاهدان

مجریان: معصومه شیرزائی

کلمات کلیدی:

اطلاعات کلی طرح
hide/show

کد طرح 7388
عنوان فارسی طرح مقایسه سطح گلوتاتیون پر اکسیداز و مالون دی آلدئید بزاق در بیماران مبتلا به بتا تالاسمی ماژور با افراد سالم
عنوان لاتین طرح Comparison of Salivary Glutathione peroxidase (GPX) and Malon dealdehyde (MDA) levels in patients with Major B thalassemia with Healthy persons
نوع طرح کاربردی
محل اجرای طرح دانشکده دندانپزشکی
رسته مطالعاتی مورد شاهدی
دانشکده/مرکز دانشکده دندانپزشکی زاهدان
زمان اجرا -روز 489

اطلاعات مجری و همکاران
hide/show

نام و نام‌خانوادگی سمت در طرح نوع همکاری درجه‌تحصیلی پست الکترونیک
معصومه شیرزائیاستاد راهنمای اول پایان نامه دانشجوییاستاد راهنمادکترای تخصصی shirzaiy@gmail.com
علیرضا نخعیاستاد راهنمای دوم پایان نامه دانشجوییاستاد راهنمادکترای تخصصی alireza_nakhaee@yahoo.com
نرجس سرگلزاییمشاورمشاور آماردکترای تخصصی sargolzaeinarges@gmail.com
مهدی اسماعیل پور دانشجودندان پزشکی عمومیmehdi_6570@yahoo.com

اطلاعات تفضیلی
hide/show

عنوان متن
خلاصه طرح به فارسی مقایسه سطح گلوتاتیون پر اکسیداز و مالون دی آلدئید بزاق در بیماران مبتلا به بتا تالاسمی ماژور با افراد سالم
خلاصه طرح به لاتینComparison of Salivary Glutathione peroxidase (GPX) and Malon dealdehyde (MDA) levels in patients with Major B thalassemia with Healthy persons
بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهشاختلالات ژنتیکی در تولید زنجیره آلفا یا بتا گلوبین موجب بروز گروه هتروژنی از آنمی های ارثی به نام سندرم تالاسمی
می شود.در مبتلایان به بتاتالاسمی، فقدان کامل تولید ژن بتاگلوبین(β) یا کاهش نسبی آن(β+) وجود دارد.1
در بتاتالاسمی ماژور ، فقدان یا کاهش شدید سنتز زنجیره بتاگلوبین رخ می دهد که ناشی از موتاسیون ژنی می باشد.2این امر موجب تولید مقادیر زیادی زنجیره آلفاگلوبین می شود که موجب نقص در ایجاد تترامر هموگلوبین می گردد.2
بیماری تالاسمی، شایع ترین بیماری ژنتیک در دنیا به شمار می رود و حدود 200 میلیون نفر در دنیا به سندرم های تالاسمی مبتلا هستند. 3 کمربند تالاسم از جنوب اروپا و شمال آفریقا تا خاورمیانه و خاور دور گسترش دارد و ایران نیز بر روی آن قرار دارد.4 میزان شیوع ناقل ژن تالاسمی در جهان در حدود 3درصد است. 15000 مورد شناخته شده تالاسمی در ایران وجود دارد. برآورد می شودکه 20000 بیمار تالاسمیک در ایران وجود داشته باشد و 3000000 نفر نیز ناقل ژن تالاسمی باشند .
بر اساس آمار موجود، شیوع تالاسمی در ایران بسیار بالاست.
بیشترین میزان آن در استان های شمالی،سیستان و بلوچستان و هرمزگان گزارش شده است 5.
مشکلات ناشی از خونسازی غیرموثر و تجمع نامتعادل زیر واحدهای گلوبین در گلبول های قرمز و همولیز مزمن در بتا تالاسمی ماژور بروز می کند 3. افت شدید هموگلوبین جنینی پس از 6 ماهگی و تشدید مداوم آن واز طرفی همولیز گلبول های قرمز تازه تشکیل شده، موجب آشکار شدن علایم آنمی شدید می شود . با تشدیدآنمی، نوزاد نیازمند ترانسفوزیون مکرر خون می گردد و بدنبال ترانسفوزیونهای متعدد ، به تدریج علایم over load آهن ایجاد می شود. آسیب های بافتی ناشی از over load آهن در اعضای مختلف مثل کبد ، پانکراس ،هیپوفیز، تیروئید و پاراتیروئید، استخوان ها ، پوست و قلب بتدریج علایم نارسایی و نقص عملکرد را نشان خواهد داد .7،6
آسیب بافتی ناشی از استرس اکسیداتیو در پاتوژنز بیماری تالاسمی دخیل می باشد که ناشی از over load آهن در بدن فرد
مبتلا می باشد. اکسیداسیون خودبه خودی زنجیره های آلفاگلوبین جفت نشده، منجر به تولید سوپراکسید و پراکسید هیدروژن می گردد. 8همچنین مقادیر بالایی از آهن، جهت جبران خونسازی غیرموثر از لوله گوارش جذب می گردد.در این حالت ، آهن غیرمتصل به ترانسفرین (فرم غیر عادی آهن )تولید می شود، که سمیت بافتی داشته ونقش محوری در اکسیداسیون غشاهای سلولی دارد و نیز در تشکیل رادیکال های آزاد و افزایش فرایند همولیز دخالت می کند، این فرایند در پاتوژنز بیماری تالاسمی مطرح است. 9
سطوح (Thiobarbituric Acid Reactive- Substance) TBARS که نشانگر پراکسیداسیون چربی ها است، در تالاسمی افزایش می یابد که نشاندهنده افزایش استرس اکسیداتیو در این بیماری می باشد. برعکس میزان Total Peroxyl Radical Trapping Capacity (TRAP)که نشان دهنده کاهش مکانیسم های دفاعی آنتی اکسیدانی است، در این بیماری کاهش می یابد. 9
برداشت متابولیت های سمی اکسیژن توسط آنزیم های آنتی اکسیدانی نظیر گلوتاتیون پراکسیداز(GPX)و سوپر اکسید دسموتاز(SOD)
صورت می گیرد. SOD به طور مستقیم با H2O2 واکنش می دهد و پس از آن، آنزیم های کاتالاز و GPX وارد عمل می شوند.به این ترتیب، این سه آنزیم علاوه بر فانکشن های خاص، علیه عوامل اکسیدانی عمل می کنند.. 9-11
سیستم آنتی اکسیدانی بدن شامل عوامل آنزیمی و غیرآنزیمی می باشد،از عوامل آنزیمی می توان به گلوتاتیون پراکسیداز (GPX)اشاره نمود. 9 نتایج بررسی های انجام یافته در مورد فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی نظیر گلوتاتیون پراکسیداز((GPX
در بیماران بتاتالاسمیک متفاوت است. Kassab-Cheki و همکاران (2003) طی مطالعه ای با هدف بررسی وضعیت سیستم اکسیدانی- آنتی اکسیدانی در بیماران تالاسمیک به این نتیجه رسیدند که فعالیت GPX در این بیماران افزایش می یابد.9
در مطالعه Meral و همکاران نیز، فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی از جمله GPX افزایش یافته بود. 12 برعکس مطالعات فوق، در مطالعه ای دیگر روی بیماران تالاسمی گزارش شده است، فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی کاهش می یابد که به نوعی فعالیت جبرانی در مقابل افزایش پراکسیداسیون لیپیدی (MDA ا (در این بیماران می باشد.13
Naithanj و همکاران طی مطالعه ای با هدف بررسی سیستم اکسیدانی-آنتی اکسیدانی در کودکان مبتلا به بتا تالاسمی ماژور دریافتند، میزان مالون دی آلدئید(مارکر تعیین کننده استرس اکسیداتیو) در افراد مبتلا به تالاسمی به طور بارز افزایش یافته و میزان گلوتاتیون پراکسیداز (یک نوع آنتی اکسیدان)در این افراد در مقایسه با گروه کنترل کاهش می یابد.14
Carpino و همکاران طی یک بررسی دیگر روی این بیماران دریافتند علی رغم افزایش فعالیت آنزیم سوپراکسید دسموتاز،ظرفیت آنتی اکسیدان تام مبتلایان به تالاسمی، اختلاف چندانی با افراد طبیعی نداشت15.
مطالعات نشان داده اند ،تجمع استرس های اکسیداتیو در بدن، موحب تخریب سلول گشته که این امر موجب اختلال در فانکشن سلولی می گردد.در افراد مبتلا به تالاسمی ماژور نیز فقدان سیستم آنتی اکسیدانی کارآمد ،موجب تجمع مواد آنتی اکسیدان می گردد که این امر مشکلات سیستمیک عدیده ای را برای فرد بوجود می آورد. با توجه به اینکه سیستم اکسیدانی و آنتی اکسیدانی بدن نقش بسزایی در بروز و تشدید عوارض بیماری های مختلف دارد، مطالعه حاضر با هدف مقایسه سطح گلوتاتیون پر اکسیداز و مالون دی آلدئید بزاق در بیماران مبتلا به تالاسمی ماژور و افراد سالم طراحی شده است
سوالات و / یا فرضیات پژوهش1-سطح گلوتاتیون پر اکسیداز بزاق در بیماران مبتلا به بتا تالاسمی ماژور و افراد سالم متفاوت است .
2- سطح مالون دی آلدئید بزاق در بیماران مبتلا به بتا تالاسمی ماژور و افراد سالم متفاوت است .
هدف کلی طرحمقایسه سطح گلوتاتیون پر اکسیداز و مالون دی آلدئید بزاق در بیماران مبتلا به بتا تالاسمی ماژور با افراد سالم
اهداف اختصاصی1- تعیین و مقایسه سطح گلوتاتیون پر اکسیداز بزاق در بیماران مبتلا به بتا تالاسمی ماژور و افراد سالم

2- تعیین و مقایسه سطح مالون دی آلدئید بزاق در بیماران مبتلا به بتا تالاسمی ماژور و افراد سالم
سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرحدستاوردهای طرح:دانشگاه علوم پزشکی زاهدان
تعریف واژه های تخصصیآنتی اکسیدانها: در بدن سیستم‌های خاصی برای مقابله با آسیب‌های حاصل از رادیکال‌های آزاد وجود دارد که به نام سیستم دفاعی آنتی‌اکسیدانی معروف است.6
گلوتاتیون پر اکسیداز یکی از اجزای سیستم دفاعی آنتی‌اکسیدانی بدن می باشند.6
مالون دی آلدئید محصول پرواکسیداسیون لیپیدی می باشد که افزایش آن ناشی از تجمع و آسیبهای ناشی از استرس اکسیداتیو می باشد.6


نوع مطالعهمورد-شاهدی
جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند)- جامعه مورد مطالعه(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) :
افراد سالم (فاقد بیماری سیستمیک )مراجعه کننده به بخش بیماری های دهان دانشکده دندانپزشکی زاهدان و مبتلایان به بتا تالاسمی ماژور مراجعه کننده به کلینیک تالاسمی بیمارستان علی اصغر (ع) زاهدان
حجم نمونه و روش محاسبه آنحجم نمونه و روش محاسبه آن:حجم نمونه (40 نفر در گروه مورد و 40 نفر در گروه شاهد ) بر اساس مطالعه Soliman و همکاران محاسبه شده است.16
روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود)نمونه گیری آسان بر حسب نمونه های در دسترس
روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود)اطلاعات بیمار شامل سن وجنس و تاریخچه پزشکی و دندانپزشکی در فرمهای جمع آوری اطلاعات ثبت می شود.(ضمیمه شماره 1)
بزاق غیر تحریکی از طریق روش spitting جمع آوری می شود.
معاینه داخل دهانی برای تایید عدم پریودنتیت و عدم پوسیدگی فعال دندانی انجام می شود.
ضمیمه شماره 1
فرم ثبت اطلاعات

تاریخ:
کد بیمار
جنس :
سن:
بتا تاتلاسمی ماژور دارد ندارد
میزان GPX بزاق ............... میکرو مول
میزان MDAبزاق........................ میکرو مول
روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود)در این مطالعه مورد – شاهدی، تعداد 40 بیمار تالاسمی ماژور مراجعه کننده به کلینیک تالاسمی بیمارستان علی اصغر(ع) زاهدان و 40 فرد سالم مراجعه کننده به دانشکده دندانپزشکی زاهدان واجد شرایط که معیارهای ورود به مطالعه را داشته باشند ، با روش نمونه گیری آسان انتخاب می شوند ودر صورت تمایل به همکاری فرم رضایت نامه (ضمیمه شماره 2) را امضا کرده و فرم ثبت اطلاعات(ضمیمه شماره 1) برای وی توسط دانشجوی دندانپزشکی تکمیل می گردد.
در گروه مورد افراد با تالاسمی ماژور که بیماری آنها توسط پزشک متخصص کلینیک تالاسمی تایید شده باشد، انتخاب می شوند و در گروه شاهد کسانی انتخاب می شوند که سالم بوده (فاقد بیماری سیستمیک ) و از لحاظ سن و جنس با گروه مورد هماهنگ باشند.
بعد از انتخاب صحیح افراد، بزاق غیر تحریکی به روش Spitting توسط دانشجوی دندانپزشکی جمع آوری می شود ، بدین صورت که از تمام بیماران خواسته می شود که 90 دقیقه قبل از نمونه گیری از خوردن ،آشامیدن و مسواک زدن بپرهیزند.همه نمونه ها بین ساعت9-11 صبح جمع آوری می شود .هنگام جمع آوری بزاق، بیمار باید در حالت نشسته و کاملا راحت باشد.بیمار با چشمان باز در حالیکه کمی به جلو خم شده است با روش Spitting بزاق خود را در مدت 10 دقیقه و در هر دقیقه 2-1 بار در لوله آزمایش تخلیه می کند. بعد از جمع آوری بزاق در لوله آزمایش ، در آن را با بیوفیلم محکم می بندیم تا در اسرع وقت به آزمایشگاه بیوشیمی پردیس فرستاده شود.در آزمایشگاه، بزاق در سانتریفوژ به مدت 10 دقیقه با سرعت 2000 دور در دقیقه قرارداده می شود تا دبریها از آن جدا شود. سپس در دما 70- درجه سانتیگراد نگه داشته می شود.
برای تعیین سطح گلوتاتیون پر اکسیداز از کیت GPX (Ransel; Randox) با استفاده از متد ultraviolet استفاده می شود.
همچنین MDA به روش TBARS باربیوتریک اسید اندازه گیری می شود. اساس روش اندازه گیری به این صورت است که مالون دی آلدئید که محصول پراکسیداسیون لیپیدهاست در محیط اسیدی و حرارت جوش با TBARS کمپلکس نارنجی تا قرمز ایجاد می کند که جذب آن در اسپکتروفوتومتری در 532nm قابل اندازه گیری است. در این روش از مالون دی آلدئید به عنوان استاندارد استفاده می شود. 14در ضمن آزمایشگر از بیمار بودن یا نبودن نمونه اطلاعی ندارد.

روش تجزیه، تحليل و توصیف داده‌ها (نمونه‌اي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی)داده ها پس از جمع آوری با نرم افزار آماری SPSS19 وارد کامپیوتر شده، جهت بررسی مارکرهای بزاقی(سطح مالون دی آلدئید و گلوتاتیون پراکسیداز) در دو گروه مورد و شاهد از آزمون تی (independent sample t-test) با حد اطمینان 95 درصد استفاده می شود
ملاحظات اخلاقی تمام افراد گروه مورد و شاهد در جریان مطالعه قرار می گیرند و از بیماران جهت شرکت در پروژه رضایتنامه کتبی گرفته می شود. در این مطالعه کدهای اخلاقی بر اساس راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش های علوم پزشکی دارای آزمودنی انسانی (کد شماره 7، کد 13 ،کد 15 ،کد 16، کد 17، کد 25 کد 27،کد 31 ) راهنمای اخلاقی پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی فصل 4 (زیست بانک ها) کد 4 مورد استفاده قرار خواهد گرفت بر اساس کدهای اخلاقی ذکر شده فرم رضایت آگاهانه تهیه شده و ضمیمه می گردد.(ضمیمه شماره2)
محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنهاعدم همکاری بیمار در تهیه نمونه بزاق : جلب همکاری بیمار
کلمات کلیدیMajor B Thalassemia, Glutathione peroxidase, Malon dealdeide
بتا تالاسمی ماژور-گلوتاتیون پر اکسیداز-مالون دی آلدئید
فهرست منابع و مراجع1. Fauci AS, Braunwald E,Kasper D, Braunwald E, Jameson JL, Loscalzo J, et al. Harrison's Principles of Internal Medicine, 17th. New York: MC Grow Hill. 2008; pp:636-40.
2. Beutler B. Hemolytic anemia due to chemical and physical agents. In: Beutler B, Lichtman MA, Coller BS, Kipps TH,Seligsohn U (eds.). Williams Hematology. 6th. New York: McGraw-Hill. 2001; pp:629-32.
3. Lanzkowsky P. Manual of Pediatric Hematology and Oncology. 3rd. New York: Academic Press. 2000; pp:124-44.
4. Alphatrio A. [Thalassemia Information, A Guide for Practitioners, Patients and Families]. Translate by Abrishami D, Mirbaha M. Tehran: Institute Special Disease Organization Press. 2003; p: 116. [Persian]
5. Genetic Institute Groups. [Statistical report of beta thalassemia major patients prevention project in Iran, 1997-2003]. Tehran: Ministry of Health and Medical Education, Vice Chancelor of Health, Disease Management Center. 2004; p:28. [Persian]
6-Shazia Q, Mohammad Z,Taibur Rahman H , Uddin HS.Correlation of Oxidative Stress with SerumTrace Element Levels and Antioxidant Enzyme Status in Beta Thalassemia Major Patients: A Review of the Literature. Hindawi Publishing Corporation Anemia 2012 ;4(3):1-7 doi:10.1155/2012/270923
7. Kasper DL, Braunwald E, Fauci AS, Hauser SL, Longo DL, Jameson JL,et al. Harrison's Principles of Internal Medicine. 16th. New York: McGraw-Hill. 2005; pp: 598-9, 2059.
8. Scott MD. H2O2 injury in beta thalassemic erythrocytes: protective role of catalase and the prooxidant effects of GSH. Free Radic Biol Med. 2006 Apr;40(7):1264-72
9. Kassab-Chekir A, Laradi S, Ferchichi S, Haj Khelil A, Feki M, Amri F, et al. Oxidant, antioxidant status and metabolic data in patients with beta-thalassemia. Clin Chim Acta. 2003 Dec; 338(1-2):79-86.
10. Chan AC, Chow CK, Chiu D. Interaction of antioxidants and their implication in genetic anemia. Proc Soc Exp Biol Med. 1999 Dec; 222(3):274-82.
11. Michiels C, Raes M, Toussaint O, Remacle J. Importance of Se-glutathione peroxidase, catalase, and Cu/Zn-SOD for cell survival against oxidative stress. Free Radic Biol Med. 1994 Sep; 17(3):235-48.
12. Meral A, Tuncel P, Sürmen-Gür E, Ozbek R, Oztürk E, Günay U. Lipid peroxidation and antioxidant status in beta-thalassemia. Pediatr Hematol Oncol. 2000 Dec;17(8):687-93.
13. Cheng ML, Ho HY, Tseng HC, Lee CH, Shih LY, Chiu DT. Antioxidant deficit and enhanced susceptibility to oxidative damage in individuals with different forms of alpha-thalassaemia. Br J Haematol. 2005 Jan;128(1):119-27.
14-. Naithanj R, Chandra J ,.Bhattacharjee J, . Verma P, Naravan S., “Peroxidative stress and antioxidant enzymes in children with beta thalassemia major,” Paediatric Blood Cancer2006; 46(. 7): 780–785,.
15. Carpino A, Tarantino P, Rago V, De Sanctis V, Siciliano L. Antioxidant capacity in seminal plasma of transfusion-dependent beta-thalassemic patients. Exp Clin Endocrinol Diabetes. 2004 ; 112(3):131-4.
16- Soliman A, Adel A,Wagdy M,. Al Ali M , ElMulla N.“Calcium homeostasis in 40 adolescents with beta-thalassemiamajor: a case-control study of the effects of intramuscular injection of a megadose of cholecalciferol,” Pediatric Endocrinology
Reviews 2008.;. 6.( 1): 149–154.
پرسشنامه یا فرم اطلاعاتیضمیمه شماره 1 فرم ثبت اطلاعات تاریخ: کد بیمار جنس : سن: بتا تاتلاسمی ماژور دارد ندارد میزان GPX بزاق ............... میکرو مول میزان MDAبزاق........................ میکرو مول

پیوست ها
hide/show

نام فایل تاریخ درج فایل اندازه فایل دانلود
ESMAILPUR.doc1394/03/03304640دانلود
ESMAILPUR(2).doc1394/03/04305152دانلود
ESMAILPUR 3.doc1394/03/19305664دانلود
komite akhlagh.doc1394/07/04296448دانلود