چاپ صفحه |  صفحه نخست سامانه |  مجری و همکاران |  اطلاعات تفضیلی |  دانلود | علوم پزشکی زاهدان |
| کد طرح | 7472 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرنانوذرات اکسید آهنبر رفتارهای شبه افسردگی وفاکتورهای التهابی سرم و بافت هیپوکمپ در موش صحرایی نر بالغ |
| عنوان لاتین طرح | Assessment effect of Fe2O3 Nanoparticles on depressive-like behaviors and serum infLammatory Factors and hippocampus In Male Adult Rat |
| نوع طرح | بنیادی-کاربردی |
| محل اجرای طرح | مدیریت توسعه فناوری سلامت |
| رسته مطالعاتی | مطالعه تجربی (Experimental)(مطالعه کمی) |
| دانشکده/مرکز | دانشکده پزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز | 365 |
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| محمدرضا شهرکی | مجری اول | استاد راهنما | دکترای تخصصی | mrshahrakim@gmail.com |
| نرجس سرگلزایی | مشاور | مشاور آمار | دکترای تخصصی | sargolzaeinarges@gmail.com |
| حامد فنائی | مجری دوم | مشاور تخصصی | دکترای تخصصی | fanaeih@yahoo.com |
| عنوان | متن |
|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | بررسی اثرنانوذرات اکسید آهنبر رفتارهای شبه افسردگی وفاکتورهای التهابی سرم و بافت هیپوکمپ در موش صحرایی نر بالغ |
| خلاصه طرح به لاتین | Assessment effect of Fe2O3 Nanoparticles on depressive-like behaviors and serum infLammatory Factors and hippocampus In Male Adult Rat |
| محل اول بکارگیری نتایج تحقیق | |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | تولید نانو ذرات در فناوری نانو، امیدهای تازهای را دردرمان بیماریهای مختلف ایجاد نموده است. از خصوصیات منحصربهفرد این نانو ذرات به دلیل ریز ذره بودن، حلالیت بیشتردرچربی، عبور راحتتر ازسدخونی مغزی و واکنشپذیری بیشتر هست (1).نانو ذرات دارای ویژگیهای بسیار خاص شیمیایی و فیزیکی ازنظر اندازه، شکل و نسبت بالای سطح به حجم میباشند که این صفات،کاربرد آنها را در بسیاری از موارد پزشکی و بیولوژیک مناسب ساخته است(2) .اندازه این مواد گاهی کوچکتر و یا در حد ساختارهای سلولی، ویروس، پروتئین و یا یک ژن هست. این مواد پس از تزریق به جانوران بهسرعت در اکثر اندامها و بافتها توزیع میشود و پدیده جذب سلولی آنها بسیار زیاد هست (2). آهن یکی از عناصر ضروری برای موجودات زنده است که نقش مهمی در عملکردهایی بیولوژیک دارد(3) . این ماده برای رشد، تکامل و عملکرد طبیعی دستگاه عصبی مرکزی حیاتی است (4, 5).این عنصر در سیستم نوروترانسمیتری و متابولیسم سلولهای عصبی نقشهای متنوعی دارد، که از این اعمال میتوان به وجود آن در آنزیمهای اکسید و ردوکتاز ، ، باز جذب و انتقال نوروترانسمیترها (6) ، تشکیل میلین و متابولیسم مغز اشاره کرد(4, 7) . همچنین برای سنتز نوروترانسمیترها مغزی از قبیل سروتونین، دوپامین، نور اوی نفرین و گاما آمینوبوتیریک اسید نیز آهن موردنیاز است (7) .علاوه بر این موارد مطالعات نشان دادهاند نانو ذرات آهن اثرات ضدالتهابی نیز دارند.بهعنوانمثال lee وهم کاران در سال 2014نشان دادند نانو ذرات آهن در برابر آسیبهای پوستی ایجادشده توسط اشعه فرابنفش اثرات حفاظتی دارند .این مطالعه نشان داد نانو ذرات آهن اثرات حفاظتی خود را از طریق کاهش تولید نیتریک اکسید (32%کاهش) ،کاهش ترشح اینتر لو کین 6 از سلول (72% کاهش )وکاهش ترشح TNF-α (57%کاهش) انجام میدهد (8).شواهد تجربی نشان میدهد که همه دستگاههای فوق در شکلگیری رفتار و پاسخهای فیزیولوژیک نقش دارند.گزارشها نشان می دهند برخی رفتارهای فیزیولوژیک بهطور غیرمستقیم متأثر از میزان آهن بدن است (9).شواهد علمی نشان داده اندکه مکمل آهن باعث بهبود 25 درصدی استرس و افسردگی در مادران دارای کمبود آهن میگردد(3) .استفاده تنفسی از نانو ذرات اکسید آهن باعث میشود که غلظت نانو ذرات آهن در مناطق مختلف مغز ازجمله هیپوکمپ ،کورتکس پیاز بویایی باگذشت زمان افزایش یابدکه این نشاندهنده توانایی عبورنانوذرات آهن ازسدخونی مغزی هست (10).افسردگی یکی از اختلالات جدی در دنیای امروزی است بهطوریکه سازمان جهانی بهداشت اظهار می-کند که افسردگی دومین علت رایج ،ناتوانی ناشی از بیماری تا سال 2020 خواهد بود (11). افسردگی یک اختلال خلقی است که در آن احساس غم و اندوه، احساس از دست دادن، خشم، و یا نا امیدی زندگی روزمره فرد را برای چند هفته یا بیشتر مختل می کند (12, 13).بیمارانی که فقط دورههای افسردگی دارند گفته میشود مبتلابه اختلال افسردگی اساسی یا افسردگی یکقطبی(ماژور) هستند. بیمارانی که همدورههای افسردگی دارند وهم مانی یا فقط دورههای مانی دارند دچار اختلال دوقطبی هستند (14). افسردگی اساسی(ماژور) یک اختلال ژنتیکی است که تقریباً در 8% مردان و 15% زنان تظاهر پیدا می کند. افسردگی ماژور برای بیش از 75% بیماران، یک بیماری عودکننده و مادامالعمراست که با نوسان بهبودو تشدید مشخص میشود (15) . نشانههای افسردگی در سطوح فیزیولوژیکی، بهصورت تغییر رفتار ظاهرمی شود و خود همراه با یک سری اختلالات است. اختلالات افسردگی شامل موارد زیر است (11): عملکرد غیرطبیعی محور HPA بهصورت افزایش ترشح کورتیزول و ACTH، هایپرترفی آدرنال، افزایش سطح CRF درلوکوس سرلئوس بیماران مبتلابه افسردگی ماژور، عملکرد غیرطبیعی سروتونین بهصورت حساسیت بیشازحد اتورسپتورهای 5-HT1A، افزایش رسپتورهای 5-HT2A و کاهش انتقالدهندههای سروتونین در مغزمیانی هست. همچنین تغییر در عملکرد دستگاههای نورآدرنرژیک، دوپامینرژیک، گلوتامینرژیک، گاباوماده ی P بهصورت کاهش رسپتورهای نوروکینین 1 درکورتکس ایجاد میگردد (11) . پیشرفتهای جدید در تحقیقات روانپزشکی به تئوری فرایندهای التهابی و واکنشهای ایمنی مغز در پاتوژنز افسردگی ماژور و عملکرد غیرطبیعی دستگاههای سروتونرژیک ونورآدرنژیک منجر شد (15-17) .ازجمله مهمترین مشکلاتی که افسردگی ایجاد میکند ،اختلالات سیستم ایمنی هست (18) .و از طرفی موجب التهاب مزمن و مخرب توسط سیستم ایمنی میشود (19).بهگونهای که التهاب ،خود موجب موجبات وخیمتر شدن افسردگی را فراهم میآورد.التهاب مزمن ،یکی از مشکلات جسمی ایجادشده متعاقب افسردگی هست.از طرفی محققین بر این عقیده هستند که التهاب مزمن میتواند یکی از دلایل ایجاد افسردگی باشد (20) . قرار گرفتن سیستمیک در معرض عوامل القاء کننده التهاب از قبیل لیپوپلی ساکاریدها ((LPS نهتنها باعث التهاب سیستمیک میشود بلکه این التهاب را به دستگاه عصبی مرکزی هم القاء میکند،که توسط فعالیت میکروگلیای مغزوافزایش مزمن مدیا تورهای پیش التهابی از قبیل TNF-αدر مغز خود را نشان میدهد،تحقیقات نشان داده که LPS (بهصورت محیطی یا مرکزی) التهاب عصبی را القاء میکند وسیتوکاین های پیش التهابی از قبیل IL-1B، IL-6 وTNF-α را افزایش میدهد، همچنین نشانههای مشخصی را بهصورت تغییرات رفتاری مشابه بیماران افسرده القاء میکند (15-17) . قرارگیری در معرض استرس موجب تغییرات ساختاری و کاهش تشکیل نورونهای جدید در شکنج دندانه ای (dentate gyrus) می شود. شکنج دندانهای تشکیلات هیپوکمپ نسبت به اثرات استرس و عملکرد داروهای ضدافسردگی موردتوجه قرارگرفته است (21). در حال حاضر درمانهای افسردگی در دسترس عبارتاند از: درمان دارویی: امروزه جهت درمان افسردگی از ضدافسردگیهای سه حلقهای، مهارکنندههای انتخابی باز جذب سروتونین (SSRIs)، مهارکنندههای باز جذب نور آدرنالین (NRIs)، مهارکنندههای باز جذب نور آدرنالین و سروتونین (SNRIs)، مهارکنندههای مونوآمین اکسید از (MAO)، لیتیوم و ضدافسردگیهای آتی پیک استفاده میشود. درمان غیر دارویی: غیر از درمان داروئی الکتروشوک (ECT)، تحریک مغناطیسی مغز، تحریک عصب واگ و درمانهای روانپزشکی نیز مورداستفاده قرار میگیرد (22) . مهناز کسمتی و مرضیه خورشیدی، اثرنانوذرات اکسید آهنبر رفتار اضطرابی واحساس درد در موش صحرایی نر بالغ در سال 1392 بررسی کردند و به این نتیجه رسیدند که تجویز حاد نانو ذرات اکسیدآهن رفتارهای اضطرابی را کاهش میدهدو آستانه درد را در موش صحرایی افزایش میدهد (9). Yongling Xie وهمکاران، اثرنانوذرات اکسید روی بر روی حافظه شناختی و رفتارهای شبه افسردگی در موش صحرایی در سال 2012 بررسی کردند و به این نتیجه رسیدند که نانو ذرات اکسید روی میتواند اختلالهای رفتاری، شناختی و رفتارهای شبه افسردگی در موش هارابهبود بخشد (23). جان همکارانش اثر افزایش و کاهش آهن را بر روی رفتار در سال 2002 بررسی کردند و به این نتیجه رسیدند که موشهای مبتلابه کمبود آهن بهطور قابلتوجهی کاهش فعالیت افزایش رفتارهای شبه اضطرابی نشان میدهند (4). جان بردوهمکارانش تاثیرفقرآهن و کمخونی رابرروی عواطف شناخت مادران بعدازوضع حمل در سال 2005 بررسی کردند و به این نتیجه رسیدند که رابطه قوی بین وضعیت آهن، استرس افسردگی وجود داردبطوریکه مکمل آهن باعث بهبود 25% استرس و افسردگی در مادران دارای کمبود آهن میگردد (3). lee وهمکاران در سال 2014 نشان دادند نانو ذرات آهن در برابر آسیبهای پوستی ایجادشده توسط اشعه فرابنفش اثرات حفاظتی دارند. این مطالعه نشان داد نانو ذرات آهن اثرات حفاظتی خود را از طریق کاهش تولید نیتریک اکساید (32% کاهش)، کاهش ترشح اینتر لوکین 6 از سلول (72% کاهش) و کاهش ترشح TNF-α (57% کاهش) انجام میدهد(8) . طبق جستجویی که در پایگاههای اطلاعاتی علمی انجام دادیم مقالهای مبنی بر بیاثر بودن نانو ذرات اکسید آهنبر افسردگی یافت نشد. با توجه به اثرات فوق نانو ذرات آهن که در بررسی متون آمده است، هدف این مطالعه بررسی اثرنانوذرات اکسید آهنبر رفتارهای شبه افسردگی القاء شده با لیپوپلی ساکاریدوفاکتورهای التهابی (α-TNf واینترلوکین 6) سرم و بافت هیپوکمپ موش صحرایی نر بالغ می باشد. 4- کلیدواژهها (منطبق با MeSH)) |
| مشکل جاری که سیاست گزار با آن مواجه است کدام است؟ | |
| روش های موجود کدامها هستند؟ | |
| پیشنهاد اول نحوه کاربرد | |
| محل دوم بکارگیری نتایج تحقیق | |
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 1- میانگین سطح سرمی TNF ( فاکتور نکروز بافتی)در مدل تجربی افسردگی در موش صحرایی نر بالغ به دنبال تجویز نانوذرات اکسید آهن با گروه کنترل متفاوت است. 2- میانگین سطح هیپوکامپی TNF ( فاکتور نکروز بافتی)در مدل تجربی افسردگی در موش صحرایی نر بالغ به دنبال تجویز نانوذرات اکسید آهن با گروه کنترل متفاوت است. 3- میانگین سطح سرمی اینترلوکین 6 در مدل تجربی افسردگی در موش صحرایی نر بالغ به دنبال تجویز نانوذرات اکسید آهن با گروه کنترل متفاوت است. 4- میانگین سطح هیپوکامپی اینترلوکین 6 در مدل تجربی افسردگی در موش صحرایی نر بالغ به دنبال تجویز نانوذرات اکسید آهن با گروه کنترل متفاوت است. 5- میانگین نمره رفتارهای شبه افسردگی با استفاده از تست میدان باز در گروههای مورد بررسی متفاوت است. 6- میانگین نمره رفتارهای شبه افسردگی با استفاده از تست شنای اجباری در گروههای مورد بررسی متفاوت است. |
| هدف کلی طرح | بررسی اثر نانوذرات اکسید آهن بر رفتارهای شبه افسردگی القاء شده با لیپوپلی ساکارید بر فاکتورهای التهابی(TNfواینترلوکین 6) سرم وبافت هیپوکمپ موش صحرایی نربالغ |
| منافع و مضرات روشهای موجود کدامند؟ | |
| چرا پیام تحقیق شما حلال مشکل جاری است؟ | |
| اهداف اختصاصی | 1- مقایسه میانگین سطح سرمی اینترلوکین 6 در گروههای مورد مطالعه. 2- مقایسه میانگین سطح هیپوکامپی اینترلوکین 6 در گروههای مورد مطالعه. 3- مقایسه میانگین سطح سرمی فاکتور نکروز بافتی در گروههای مورد مطالعه. 4- مقایسه میانگین سطح هیپوکامپی فاکتور نکروز بافتی در گروههای مورد مطالعه. 5- مقایسه نمره رفتارهای افسردگی در گروههای مورد مطالعه با استفاده از تست میدان باز. 6- مقایسه نمره رفتارهای افسردگی در گروههای مورد مطالعه با استفاده از آزمون شنای اجباری. |
| پیشنهاد دوم نحوه کاربرد | |
| محل سوم بکارگیری نتایج تحقیق | |
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | معاونت تحقیقات وفناوری اطلاعات،دانشگاه علوم پزشکی زاهدان ،سایر محققین |
| پیام تحقیق شما چه منافعی از نظر هزینه، کارایی و بهره وری برای مدیر دارد؟ | |
| برای اجرای راه حل پیشنهادی شما چه موانع و حمایتهایی وجود دارند؟ | |
| تعریف واژه های تخصصی | افسردگی از شایع ترین بیمارهای روانی در جامعه است. افسردگی یک اختلال خلقی است که در آن احساس غم و اندوه، احساس از دست دادن، خشم، و یا نا امیدی زندگی روزمره فرد را برای چند هفته یا بیشتر مختل می کند(12, 13). |
| پیشنهاد سوم نحوه کاربرد | |
| محل چهارم بکارگیری نتایج تحقیق | |
| نوع مطالعه | تجربی |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | جمعیت مورد مطالعه60 سر موش صحرایی نر از نژاد wistar- Albinoبا محدوده وزنی 250-200 گرم می باشند که در خانه حیوانات دانشگاه علوم پزشکی زاهدان نگهداری می شوند |
| پیشنهاد چهارم نحوه کاربرد | |
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | 6گروه موش صحرایی 10 تایی بر اساس مطالعات قبلی |
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | انتخاب 60سر حیوان با توجه به ملاک های مورد مطالعه و قرار گرفتن حیوانات در5 گروه به صورت تصادفی می باشد. |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | حیوانات پس ازالقای افسردگی از نظر رفتاری توسط تست میدان باز وتست شنای اجباری مورد ارزیابی قرار میگیرند.برای اندازه گیری اینترلوکین 6و TNF-α سرم و بافت هیپوکمپ از دستگاه و روش الایزا استفاده می گردد. |
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | در این مطالعه مجموعاً از 60 سر موش نر، نژاد ویستار سفید در محدوده وزنی 250- 200 گرم انتخاب میشوند. موشها در شرایط محیطی کنترلشده در حیوان خانه مرکز تحقیقات آزمایشگاهی با دسترسی آزاد به آب و غذا، چرخه 12 ساعت تاریکی و روشنایی و درجه حرارت 2±22 نگهداری خواهند شد. خونگیری ،جداکردن هیپوکمپ ،وزن گیری و... در فاز روشنایی 12-8 صبح انجام می گیرد.انتخاب موشهای صحرایی به روش تصادفی بوده و به 6 گروه 10 تایی تقسیم میشوند. 1-گروه کنترل C) دریافتکننده نرمال سالین که یک روزدرمیان به مدت 16 روز) 2-گروه (LPS) که فقط لیپوپلی سا کارید (i.p LPS;100μg/kg) یک روزدرمیان به مدت 16 روزدریافت می کنند (23). 3-گروه (LPS+LNP) که لیپوپلی سا کارید 100μg/kg;i.p ) ) ونانوذرات اکسید آهن (دز پایین1 mg/kg/i.p)یک روزدرمیان به مدت 16 روزدریافت میکنند (9, 23). 4- گروه( (LPS+HNP که لیپوپلی سا کارید100μg/kg;i.p )( ونانوذرات اکسید آهن (دز بالا mg/kg/i.p5 )یک روزدرمیان به مدت 16 روزدریافت میکنند(9, 23) . 5-گروه کنترل(C+HNP)که نانو ذرات اکسید آهن(mg/kg/i.p5 ) یک روزدرمیان به مدت 16 روزدریافت میکنند (9, 23). 6-گروه کنترل (C+LNP )که نانو ذرات اکسید آهن(mg/kg/i.p1) یک روزدرمیان به مدت 16 روزدریافت میکنند (9, 23). طرز تهیه محلول نانو ذرات اکسید آهن: در این تحقیق از نانو ذرات اکسید آهن (پودر سرخ قهوهای )با سایز متوسط 20 نانومتر خریداریشده از شرکت سیگما استفاده میشود .نانو ذرات اکسید آهن در سرم فیزیولوژی ایجاد سوسپانسیون میکند بنابراین ،ابتدا توسط همزن برای چند دقیقه به هم زده میشود،سپس توسط حمام نوسانساز اولتراسونیک برای 15 دقیقه پراکنده میگردد تامحلول همگنی فراهم آید ،سپس مورد تجویز قرار خواهند گرفت(9) . مطالعات رفتاری اختلالات رفتاری در روزهای17-19-21-23 پس از افسردگی توسط دستگاه میدان باز ( OFT) و آزمون شنای اجباری (FST)مورد ارزیابی قرار خواهند گرفت(23) . آزمون میدان باز(OFT): این آزمون برای فعالیت حرکتی و میزان اضطراب استفاده میشود (24).وسیله این آزمون از جعبهای با ابعاد 120×120 و دیوارههایی به ارتفاع cm50 تشکیلشده است.کف جعبه توسط رسم خطوط به 16 مربع مساوی تقسیمشده و سپس یک مربع با ابعادcm 30×30 در مرکز آن رسم میشود.پیش از شروع آزمایشها ،حیوانات برای خوگیری با محیط آزمایش در دو روز متوالی قبل از آزمایش و هرروز به مدت 5 دقیقه در داخل جعبه قرار میگیرند0در روزهای آزمایش حیوانات داخل قفسهایشان تا محیط آزمایش جابجا میشوند و کنترل و انتقال آنها از طریق گرفتن دم حیوان صورت میگیرد.سپس حیوان دریکی از چهارگوشه جعبه قرار میگیرد و مدت 5 دقیقه اجازه فعالیت داده میشود .در پایان 5دقیقه آزمون حیوان به قفس خود برگردانده میشود و کف جعبه با الکل 70%تمیز میشود تا خشکشده و سپس آزمون بعدی انجام میگیرد. - رفتارهای اندازهگیری شده و نحوه محاسبه امتیازات در آزمون میدان باز (25-29) : عبور از خط:تعداد عبور حیوان از هر خط با چهار اندام تعداد ورود به مربع مرکزی :تعداد ورود حیوان به مربع مرکزی با چهار اندام مدت حضور در مربع مرکزی:مدتزمانی که حیوان در مربع مرکزی سپری میکند. تعداد ایستادن : تعداد دفعاتی که حیوان بر روی اندامهای عقبی میایستد. کشش دادن بدن:تعداد دفعاتی که حیوان سر و شانههایش را ابتدا به جلو کشیده و سپس بهجای اول بازمیگرداند. بیحرکت بودن:مدتزمانی که حیوان کاملاً بیحرکت است. ادرار کردن:تعداد قطرات (تجمعات مایع ادرار)یار گههای ادرار دفع مدفوع:تعداد قطعات مدفوع تولیدشده آزمون OFT بهطور همزمان رفتارهای حرکتی ،اکتشافی و اضطرابی را مورد ارزیابی قرار میدهد.تعداد عبور از خطوط و ایستادن بر اندامهای عقبی برای ارزیابی هر سه رفتار استفاده میشوند و برای ارزیابی رفتارهای شبه افسردگی اختصاصی هست.افزایش امتیاز این رفتارها نشاندهنده افزایش رفتار تحرک و اکتشاف و کاهش افسردگی است. تعداد ورود به مربع مرکزی و مدتزمان حضور در این مربع جهت ارزیابی رفتار اکتشافی و اضطراب استفاده میشود.افزایش تعداد و مدت این رفتار نشاندهنده سطح بالای رفتار اکتشافی و سطح پایین اضطراب است..دفع ادرار و مدفوع نشاندهنده اضطراب در جوندگان است و افزایش دفعات آنها نشاندهنده سطح بالای اضطراب است. تست شنای اجباری(FST) : ایﻦﺗﺴﺖیکیازﻣﻌﺘﺒﺮﺗﺮیﻦورایﺞﺗﺮیﻦﺗﺴﺖﻫﺎیﺣیﻮاﻧیﺑﺮایﺑﺮرﺳیاﻓﺴﺮدﮔیﻣیﺑﺎﺷـﺪ (30, 31). ﺑـﺮاﺳـﺎسﻧﻈﺮیﺔدرﻣﺎﻧﺪﮔیآﻣﻮﺧﺘﻪﺷﺪةﻣﺎرﺗیﻦﺳـﻠیﮕﻤﻦدرﺻﻮرﺗیکﻪﺣیﻮان در معرض اﺳﺘﺮسﻣﺪاومﻗﺮارﮔیﺮدوراه ﮔﺮیﺰی ازآنﻧﺪاﺷﺘﻪﺑﺎﺷﺪ،رﻓﺘﻪرﻓﺘﻪاﻣیﺪﺑﻪﮔﺮیـﺰازایﻦﺷﺮایﻂراازدﺳﺖداده و تحرک وﻓﻌﺎﻟیـﺖﺧـﻮدراﻣﺘﻮﻗﻒﻣیﻧﻤﺎیﺪودرﻣﺎﻧﺪه وﺑیﺣﺮکﺖﻣـیﮔـﺮدد (31).روش آزﻣﺎیﺶﺑـﻪایـﻦﺻـﻮرت است کهcm35 از ظرف شیشهای استوانهای با ارتفاعcm50و قطر cm 40از آب 2±22درﺟﻪﭘﺮوﻣﻮشﻫﺎی افسرده وغیرافسردهﭘــﺲازکﺴــﺐدرﻣــﺎنﻫــﺎیﻻزم بهصورت انفرادی از ارتفاع cm 20 ﺑـﻪﻣﻼیﻤـﺖدرون آب قرار داد ه میشوند . درایﻦﺷﺮایﻂ،ﺣیﻮاﻧﺎتﺑـﺮایﺣﻔـﻆﭘﺎیـﺪاریﺧﻮددرآبﺷﻨﺎﻣیکنند. ﭘـﺲازﻣـﺪﺗی،ﺣیﻮاﻧـﺎت باﻗﻄﻊﺣﺮکﺎت دﺳﺖوﭘﺎیﺧﻮدازﺗﺤﺮک وﻓﻌﺎﻟیـﺖﺑـﺎزﻣیﻣﺎﻧﺪﻧﺪکﻪﺑﻪﻃﻮرﻗﺮاردادیﺑـﻪآنﺑـیﺣﺮکـﺖﺷـﺪن (Immobility) میﮔﻮیﻨــﺪ . برای اندازهگیری مدتزمان بیحرکتی زﻣــﺎنﺑیﺣﺮکﺘی، مدتزمان بیحرکتی حیوان درﻃـییـکﻣﺤﺪودةزﻣﺎﻧیﻣﺸﺨﺺﺗﻮﺳﻂکﺮوﻧﻮﻣﺘﺮﺛﺒﺖﻣـیشود . درایــﻦﺣﺎﻟــﺖ،اﻓــﺰایﺶزﻣــﺎنﺑــیﺣﺮکﺘــیراﻣﻌــﺎدل اﻓﺴﺮدﮔیوکﺎﻫﺶآنراﺑﻪﻋﻨﻮان اﺛﺮﺑﺨﺸیدرﻣﺎنﺿﺪاﻓﺴﺮدﮔیارزیﺎﺑیﻣیﺷود.ﺷــﺮایﻂﻣﺤــیﻂﺑــﺮایﺗﻤــﺎمﮔــﺮوهﻫــﺎیکﺴــﺎن و زمان آزمایش شنای اﺟﺒﺎری ۶دقیقه میباشد (30-33). روش تهیه خون و سرم: در پایان آزمایش حیوانات تحت بیهوشی عمیق با اتر (ساخت شرکت Merck آلمان )قرار میگیرند.نمونه خون از عروق گردن تهیه و پس از جداسازی سرم، نمونهها تا زمان اندازهگیری در دمای ۷۰- درجه نگهداری و کلیه فاکتورهای موردمطالعه با استفاده از کیتهای آزمایشگاهی اندازهگیری خواهد شد. جداسازی و هموژنیزاسیون بافت هیپوکمپ: در روز آخر مطالعه مغز حیوانات خارجشده و ناحیه هیپوکمپ جداشده و هموژنیزه میشود.جداسازی بافت هیپوکمپ براساس روش chiu وهمکاران (۲۰۰۷) انجام خواهد شد (34). ابتدا حیوانات عمیقا توسط ترکیب کتامین (mg/kg100) و زایلازین(mg/kg10) بی هوش می شوند.سپس سرحیوان توسط گیوتین جدا ومغز از داخل جمجمه خارج شده و بر بستری از یخ قرار می گیرد و مغز با نرمال سالین سرد(۵ درجه سانتیگراد)شسته خواهد شد.سپس دونیمکره مغز ازیکدیگر جداشده وهرنیمکره در وضعیتی قرارداده خواهد شد تاسطح داخلی آن قابل رویت باشد .سپس طبق تصویر شماره ۱، ازمحل برش۳ که درتصویر مشخص شده برشی ایجاد می کنیم .بااین برش پیاز بویایی ،قشربینایی وناحیه مخطط را از بقیه مغر جدا می نماییم. سپس برای جداکردن هیپوکمپ از باقیمانده مغز ابتدا مغز به شکلی قرار داده می شود که سطح شکمی(ventral)به طرف بالا قرا گیرد .برای نمایان شدن هیپوکمپ توسط پنس مغز میانی (midbrain)برداشته می شود .ودرپایان هیپوکمپ طبق تصویر 2 ازکورتکس جدا می شود. هموژنیزاسیون بافت هیپوکمپ: بدین منظور ابتدا بافر فسفات جهت هموژنیزاسیون تهیه می شود و سپس بافتها توسط دستگاه هموژنایزر هموژنیزه می شود. مراحل هموژنیزاسیون: 1- نسبت بافت به بافر برای هموژنیزاسیون، 1 به 10 می باشد. بنابراین به میزان مورد نیاز بافت وزن شده و به بافر اضافه می شود (1گرم بافت با 9cc بافر). 2- برای جلوگیری از گرم شدن مخلوط هموژنیزاسیون و تخریب پروتئین ها در طی انجام کار مقداری یخ تهیه می شود تا فرآیند در بستر یخ انجام شود. 3- با استفاده از دستگاه هموژنایزر بافت ها به طور کاملا یکنواخت، هموژنیزه می شوند. 4- محلول هموژنیزه شده به مدت 15 دقیقه در سانتریفیوژ با دور 5000 rpm و دمای 4ºC قرار می گیرد.سوپرناتانت حاصل از مرحله قبل جدا شده و برای اندازه گیری ها بعدی به میکروتیوب ها منتقل می شود و در دمای -70ºCقرار می گیرد. |
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | داده ها توسط نرم افزار SPSS ورژن17 مورد بررسی قرار خواهد گرفت.بخش توصیفی داده ها از طریق میانگین ،انحراف معیار ودامنه بیان خواهد شد.برای مقایسه گروهها از ازآزمون کروسکال والیس وبرای مقایسه گروهها در تستهای بیوشیمیایی از روش آنوای یکطرفه ودر ادامه توکی استفاده می شود .سطح معنی داری آزمونها 5% درنظر گرفته می شود. |
| ملاحظات اخلاقی | در طول مطالعه بر اساس پروتوکل کار با حیوانات آزمایشگاهی رفتار شده وانجام کار به تایید کمیته اخلاق دانشگاه علوم پزشکی زاهدان خواهد رسید،وهمچنین چک لیست کار با حیوانات آزمایشگاهی بر اساس کدهای راهنمای کار باحیوانات، ابلاغی وزارت بهداشت تکمیل وپیوست می شود. |
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | |
| کلمات کلیدی | افسردگی، نانوذرات اکسیدآهن،موش ،لیپوپلی ساکارید |
| فهرست منابع و مراجع | 1. Archakov A. Nanobiotechnologies in medicine: Nanodiagnostics and nanodrugs. Biochemistry (Moscow) Supplemental Series B: Biomedical Chemistry. 2010;4(1):2-14. 2. Berry CC, Curtis AS. Functionalisation of magnetic nanoparticles for applications in biomedicine. Journal of physics D: Applied physics. 2003;36(13):R198. 3. Beard JL, Hendricks MK, Perez EM, Murray-Kolb LE, Berg A, Vernon-Feagans L, et al. Maternal iron deficiency anemia affects postpartum emotions and cognition. The Journal of nutrition. 2005;135(2):267-72. 4. Beard JL, Erikson KM, Jones BC. Neurobehavioral analysis of developmental iron deficiency in rats. Behavioural brain research. 2002;134(1):517-24. 5. de Lima MNM, Laranja DC, Caldana F, Grazziotin MM, Garcia VA, Dal-Pizzol F, et al. Selegiline protects against recognition memory impairment induced by neonatal iron treatment. Experimental neurology. 2005;196(1):177-83. 6. Beard JL. Iron biology in immune function, muscle metabolism and neuronal functioning. The Journal of nutrition. 2001;131(2):568S-80S. 7. Elseweidy MM, Abd El-Baky AE. Effect of dietary iron overload in rat brain: oxidative stress, neurotransmitter level and serum metal ion in relation to neurodegenerative disorders. Indian journal of experimental biology. 2008;46(12):855. 8. Lee JM, Shin J-S, Lee K-J, An JH. Anti-Inflammatory and Photoprotective Effects of Magnetic Nanoparticles Against Ultraviolet-Induced Photoaging in Human Skin Cells. Science of Advanced Materials. 2014;6(11):2501-4. 9. مهناز ک, مرضیه خ. اثر نانوذرات Fe2O3 بر رفتار اضطرابی و احساس درد در موش صحرایی نر بالغ. 10. Wang B, Wang Y, Feng W, Zhu M, Wang M, Ouyang H, et al. Trace metal disturbance in mice brain after intranasal exposure of nano-and submicron-sized Fe2O3particles. Chemia Analityczna. 2008;53(6):927-42. 11. Cryan JF, Mombereau C. In search of a depressed mouse: utility of models for studying depression-related behavior in genetically modified mice. Molecular psychiatry. 2004;9(4):326-57. 12. Association AP. Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders (DSM-5®): American Psychiatric Pub; 2013. 13. Kuo DC, Tran M, Shah AA, Matorin A. Depression and the suicidal patient. Emergency medicine clinics of North America. 2015;33(4):765-78. 14. Sadock BJ, Sadock VA. Kaplan and Sadock's synopsis of psychiatry: Behavioral sciences/clinical psychiatry: Lippincott Williams & Wilkins; 2011. 15. Raison CL, Capuron L, Miller AH. Cytokines sing the blues: inflammation and the pathogenesis of depression. Trends in immunology. 2006;27(1):24-31. 16. Mössner R, Mikova O, Koutsilieri E, Saoud M, Ehlis A-C, Müller N, et al. Consensus paper of the WFSBP Task Force on Biological Markers: biological markers in depression. The World Journal of Biological Psychiatry. 2007;8(3):141-74. 17. Schiepers OJ, Wichers MC, Maes M. Cytokines and major depression. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 2005;29(2):201-17. 18. Roque S, Oliveira TG, Nobrega C, Barreira-Silva P, Nunes-Alves C, Sousa N, et al. Interplay between depressive-like behavior and the immune system in an animal model of prenatal dexamethasone administration. Frontiers in behavioral neuroscience. 2011;5. 19. Celano CM, Huffman JC. Depression and cardiac disease: a review. Cardiology in review. 2011;19(3):130-42. 20. Kubera M, Obuchowicz E, Goehler L, Brzeszcz J, Maes M. In animal models, psychosocial stress-induced (neuro) inflammation, apoptosis and reduced neurogenesis are associated to the onset of depression. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 2011;35(3):744-59. 21. Alonso R, Griebel G, Pavone G, Stemmelin J, Le Fur G, Soubrie P. Blockade of CRF1 or V1b receptors reverses stress-induced suppression of neurogenesis in a mouse model of depression. Molecular psychiatry. 2004;9(3):278-86. 22. Berton O, Nestler EJ. New approaches to antidepressant drug discovery: beyond monoamines. Nature Reviews Neuroscience. 2006;7(2):137-51. 23. Xie Y, Wang Y, Zhang T, Ren G, Yang Z. Effects of nanoparticle zinc oxide on spatial cognition and synaptic plasticity in mice with depressive-like behaviors. J Biomed Sci. 2012;19(1):14. 24. Lipsky RH, Marini AM. Brain‐derived neurotrophic factor in neuronal survival and behavior‐related plasticity. Annals of the New York Academy of Sciences. 2007;1122(1):130-43. 25. Babygirija R, Yoshimoto S, Gribovskaja-Rupp I, Bülbül M, Ludwig K, Takahashi T. Social interaction attenuates stress responses following chronic stress in maternally separated rats. Brain research. 2012;1469:54-62. 26. Françolin-Silva AL, da Silva Hernandes A, Fukuda MTH, Valadares CT, Almeida SS. Anxiolytic-like effects of short-term postnatal protein malnutrition in the elevated plus-maze test. Behavioural brain research. 2006;173(2):310-4. 27. O'Donnell KJ, Glover V, Holbrook JD, O'Connor TG. Maternal prenatal anxiety and child brain-derived neurotrophic factor (BDNF) genotype: Effects on internalizing symptoms from 4 to 15 years of age. Development and psychopathology. 2014;26(4pt2):1255-66. 28. Tsuru J, Tanaka Y, Ishitobi Y, Maruyama Y, Inoue A, Kawano A, et al. association of BDNF Val66Met polymorphism with hPa and saM axis reactivity to psychological and physical stress. Neuropsychiatric disease and treatment. 2014;10:2123. 29. Gross C, Zhuang X, Stark K, Ramboz S, Oosting R, Kirby L, et al. Serotonin1A receptor acts during development to establish normal anxiety-like behaviour in the adult. Nature. 2002;416(6879):396-400. 30. Porsolt RD. Animal models of depression: utility for transgenic research. Reviews in the Neurosciences. 2000;11(1):53-8. 31. Kroczka B, Branski P, Palucha A, Pilc A, Nowak G. Antidepressant-like properties of zinc in rodent forced swim test. Brain research bulletin. 2001;55(2):297-300. 32. Sadock BJ, Sadock VA, Sussman N. Kaplan and Sadock's pocket handbook of psychiatric drug treatment: Lippincott Williams & Wilkins; 2005. 33. O'connor J, Lawson M, Andre C, Moreau M, Lestage J, Castanon N, et al. Lipopolysaccharide-induced depressive-like behavior is mediated by indoleamine 2, 3-dioxygenase activation in mice. Molecular psychiatry. 2009;14(5):511-22. 34. Chiu K, Lau WM, Lau HT, So K-F, Chang R. Micro-dissection of rat brain for RNA or protein extraction from specific brain region. J Vis Exp. 2007;269. |
| معرفی پژوهش/ اهداف پژوهش (عین عبارت هدف پروپوزال را کپی نکنید. بلکه با جملاتی که برای مردم قابل فهم باشد (برای سواد حدود پنجم ابتدایی )هدف را برای شرکت کنندگان توضیح دهید.) در تمام این متن در صورتیکه شرکت کننده کودک یا فرد فاقد ظرفیت تصمیم گیری است باید مواردیکه منظور از "من"، فرد شرکت کننده بوده است به "کودک" یا "فرد تحت سرپرستی من" اصلاح شود و مواردیکه منظور از "من"، رضایت دهنده است به من به عنوان "ولی" یا "قیم قانونی" اصلاح شود. | |
| خون گیری (آیا طرح شما نیاز به خونگیری دارد یا خیر) | |
| نحوه همکاری/ مزایا ی طرح (در این بخش برای شرکت کنندگان به زبان ساده توضیح دهید که: چه مداخله ای بر روی آنها صورت میگیرد. چه اقدامات پاراکلینیکی بر روی آنها انجام میشود. چه نمونه ای و با چه حجمی از آنها میگیرید در این مدت چند نوبت مراجعه باید داشته باشند و به چه فواصلی چه اقداماتی را در پیگیری آنها انجام میدهید. (حتی میتوانید سود بالقوه ای که شرکت کنندگان میتوانند از شرکت در این پژوهش ببرند بنویسید. این سود میتواند شرح احتمال درمان یا تشخیص بهتر بیماریشان، دریافت خدمات سلامت رایگان و یا پرداخت مشوق مالی در ازای جبران همکاریشان باشد) | |
| عوارض جانبی (منظور عوارض و میزان احتمال بروز آنها در این مطالعه است) | |
| جبران عوارض احتمالی (برای آنکه شرکت کننده بتواند ارزیابی مناسبی از سود و زیان شرکت در پژوهش شما داشته باشد لازم است بتواند سود و زیان مداخلات معمول و مداخلات این پژوهش را مقایسه کند. به عنوان مثال میزان موفقیت و میزان عوارض هریک را مقایسه کند.) - او باید بداند كه اگر در حين و بعد از انجام پژوهش هم هر مشكلي اعم از جسمي و روحي به علت شرکت در اين پژوهش برایش پيش آمد درمان عوارض، و هزينههاي آن و غرامت مربوطه بر عهده مجري خواهد بود. | |
| هزینه های مربوط به انجام طرح تحقیقاتی (تمام مداخلات پژوهشی باید برای بیمار رایگان باشد و بیمار بداند شامل چه مواردی هستند. ) | |
| روش های جایگزین در صورت عدم تمایل به شرکت در مطالعه چه روش های درمانی برای بیمار ارائه خواهد شد | |
| محرمانه بودن بیمار باید بداندکه دست اندر كاران اين پژوهش، كليه اطلاعات مربوط به او را نزد خود به صورت محرمانه نگهداشته و فقط اجازه دارند نتايج كلي و گروهي اين پژوهش را بدون ذکر نام و مشخصات بیمار منتشر كنند. و كميته اخلاق در پژوهش با هدف نظارت بر رعایت حقوق وی ميتواند به اطلاعات ایشان دسترسي داشته باشد. | |
| پاسخگویی به پرسش ها در این بخش نام و اطلاعات دسترسی فردی از عوامل پژوهش را که بتواند اطلاعات صحیح و کافی در اختیار شرکت کنندگان قرار دهند و در مورد عوارض و نگرانیها راهنمایی لازم را ارائه دهند ذکر شود | |
| حق نپذیرفتن یا انصراف بیمار باید بداند که شرکت اودر اين پژوهش کاملاً داوطلبانه است و مجبور به شرکت در اين پژوهش نيست و در صورت عدم شرکت از مراقبتهاي معمول تشخيصي و درماني محروم نخواهد شد او باید بداند كه حتي پس از موافقت با شركت در پژوهش ميتواند هر وقت كه بخواهد، پس از اطلاع به مجري، از پژوهش خارج شود و خروج اواز پژوهش باعث محرومیت از دریافت خدمات درمانی معمول برای اونخواهد شد. | |
| رضایت او باید بداند که اگر اشکال يا اعتراضي نسبت به دست اندركاران يا روند پژوهش دارد مي تواند با كميته اخلاق در پژوهش دانشگاه تماس گرفته و مشکل خود را به صورت شفاهي يا كتبي مطرح نمايد. در انتهای فرم قید گردد : اينجانب موارد فوقالذکر را خواندم و فهميدم و بر اساس آن رضايت آگاهانه خود را براي شركت در اين پژوهش اعلام ميکنم. اينجانب ……………… خود را ملزم به اجراي تعهدات مربوط به مجري در مفاد فوق دانسته و متعهد ميگردم در تأمين حقوق و ايمني شركت كننده در اين پژوهش تلاش نمايم | |
| پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی |
| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|---|---|---|
| Depressive-like-behavior and proin amatory interleukine(1).pdf | 1394/04/20 | 186821 | دانلود |
| kesmati.pdf | 1394/04/20 | 351620 | دانلود |
| nano zink.pdf | 1394/04/20 | 526907 | دانلود |
| saeidi propozal.docx | 1394/04/20 | 4374181 | دانلود |
| form1.jpg | 1394/04/20 | 70643 | دانلود |
| form2.jpg | 1394/04/20 | 95243 | دانلود |
| form3.jpg | 1394/04/20 | 81930 | دانلود |
| nahaee.docx | 1394/07/13 | 494890 | دانلود |
| nahaee eslah shode komoite akhlagh.docx | 1394/08/23 | 476317 | دانلود |
| pasokh be davar.docx | 1394/08/23 | 12318 | دانلود |
