چاپ صفحه |  صفحه نخست سامانه |  مجری و همکاران |  اطلاعات تفضیلی |  دانلود | علوم پزشکی زاهدان |
| کد طرح | 7526 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثر عصاره هیدروالکلی بومادران کوتاه دشتی بر الگوی بیان ژن انزیم فسفو دی استراز 5 و نقش ان در القای تکثیر/اپوپتوز در رده سلول سرطان پستان MCF-7 |
| عنوان لاتین طرح | Effect of Achillea wilhelmsii Hydroalcohlic Extract on phosphodiesterase 5 gene expression and its role in induce apoptosis/proliferation MCF-7 cancer cell line |
| نوع طرح | بنیادی |
| محل اجرای طرح | |
| رسته مطالعاتی | مطالعه های اکولوژیک(Ecologic Studies)(مطالعه کمی) |
| دانشکده/مرکز | دانشکده پزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز | 180 |
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| رامین سراوانی | مجری | دکترای تخصصی | saravaniramin@yahoo.com | |
| حمیدرضا گلوی | همکار | کارشناسی ارشد | Zaums@Zaums.Zaums | |
| علی شهرکی | مشاور | نامعلوم | ashahraki@science.usb.ac.ir |
| عنوان | متن |
|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | بررسی اثر عصاره هیدروالکلی بومادران کوتاه دشتی بر الگوی بیان ژن انزیم فسفو دی استراز 5 و نقش ان در القای تکثیر/اپوپتوز در رده سلول سرطان پستان MCF-7 |
| خلاصه طرح به لاتین | Effect of Achillea wilhelmsii Hydroalcohlic Extract on phosphodiesterase 5 gene expression and its role in induce apoptosis/proliferation MCF-7 cancer cell line |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | سرطان یک مسئله با اهمیت در طب امروزی است و شایع ترین علت مرگ و میر بعد از بیماری های قلبی عروقی می باشد(1). سرطان مهمترین دلیل مرگ و میر در کشورهای در حال توسعه و دومین دلیل اصلی مرگ در کشورهای توسعه یافته است(2). در واقع سرطان حاصل افرایش تکثیر سلول یا کاهش مرگ سلول می باشد(3). اگر دسته ای از سلول ها به علت عدم توانایی در حذف خودشان دچار تکثر بی رویه شوند، سرطان ایجاد می شود. سرطان زمانی شروع می شود که سلولها در ژنهای کنترل کننده رشد دچار جهش می شوند. در حالتهای طبیعی سلول اگر دچار جهش جبران ناپذیر شود، خودش را می کشد ولی اگر نتواند خود را بکشد، این سلول و یا اولاد و دودمان آنها ممکن است به شکل غیرقابل کنترل شده ای با اطلاعات ژنتیکی غلط تقسیم شوند(4). بروز سرطان به عواملی مانند سن، زمینه ژنتیکی، جنسیت و فاکتورهای محیطی بستگی دارد. برای تبدیل یک سلول طبیعی به یک سلول سرطانی بروز شش تغییر ضروری می باشد عدم حساسیت به پیام های مهارکننده رشد، رشد و تکثیر نامحدود، توانایی رگ زایی و تهاجم به بافت ها، قدرت متاستاز و آپوپتوز هر کدام از این تغییرات سبب ایجاد سلول های سرطانی و تکثیر و گسترش تومور می شود(5). وقوع جهش در سلول ها سبب مقاومت سلول به محرک های مرگ و آپوپتوز می شود(3). در اغلب موارد آپوپتوز در تومور ها مهار یا مختل شده و در نتیجه میزان تکثیر سلول بسیار زیاد می شود(6). سرطان سینه دومین سرطان پس از سرطان پوست و شایع ترین علت مرگ و میر ناشی از سرطان در زنان 40 تا 44 ساله می باشد (7) . سرطان سینه 32 درصد از کل سرطان های زنان و 19 درصد مرگهای ناشی از سرطان در زنان را شامل می شود (7, 8). تومورهای سرطانی را از نظر هیستوپاتولوژیک میتوان تقسیمبندی نمود. در این راستا، میزان تمایز سلولهای سرطانی را براساس شکلشناسی سلولها، هستههای آنها و فراوانی تقسیم میتوز تعیین میکنند. از نظر بافت شناختی، تومورهای سرطان پستان میتوانند به صورتهای زیر باشند : - درجه یک که تومور دارای سلولهای سرطانی تمایز یافته است. - درجه دو که تومور دارای سلولهای سرطانی تا حدودی تمایز یافته است. - درجه سه که تومور فاقد سلولهای تمایز یافته است (7). علت سرطان پستان نیز ماند علت سایر سرطانها کاملا شناخته نشده است اما مطالعات اپیدمیولوژیک دخالت عواملی را در بروز این نوع سرطان نشان میدهد. عوامل زیادی در افزایش احتمال بروز سرطان پستان دخیل هستند از جمله: - استعداد ژنتیکی، هر چند که مارکرهای ژنتیکی کمی با گسترش سرطان پستان در ارتباط هستند - سابقه وجود سرطان پستان در افراد فامیل درجه یک - وجود سرطان پستان در یکی از پستانهای بیمار - شروع زودرس دوره ماهانه (زیر 12 سال) - تأخیر در شروع دوران یائسگی (بعد از سن 50 سال) - قرار گرفتن در معرض تابشهای سرطانزا - مصرف زیاد الکل - رژیم غذایی پرچربی به خصوص در بعد از سن یائسگی - چاقی مفرط - اولین حاملگی پس از سن 35 سالگی - مصرف طولانی مدت استروژن به عنوان درمان جایگزینی در بعد از سن یائسگی - استفاده مستمر از قرصهای ضدبارداری اگر در سنین پائین و به مدت طولانی (حدود 10 سال) استفاده گردند عوامل اشاره شده را میتوان در سه حیطه عوامل ژنتیکی، محیطی و هورمونی تقسیمبندی نمود (9-11). تاکنون پیشرفتهای قابل ملاحظهای در برنامههای چندجانبه درمانی سرطان پستان صورت گرفته است و با تکمیل روشهای درمانی امکان افزایش بقای بیماران بیشتر فراهم گردیده است. روشهای درمانی شامل موارد زیر است (7). درمان اصلی جهت این سرطان جراحی می باشد، جراحی هنوز به عنوان اولین روش انتخاب شده در مقابله با سرطان مهاجم مرحله I و II استفاده میگردد. جراحی به یکی از روشهای زیر انجام میشود (7,11, 12) : - ماستکتومی کامل یا ساده ، ماستکتومی رادیکال ، ماستکتومی رادیکال گسترش یافته ، ماستکتومی رادیکال تغییر یافته، - ماستکتومی زیرجلدی ،- ماستکتومی بخشی. علاوه بر جراحی درمان های کمکی نیز استفاده می شود، این درمانها عبارتند از: پرتودرمانی، ایمنی درمانی، ژن درمانی، شیمی درمانی و هورمون درمانی (7,11, 12). متاسفانه در اکثر موارد درمان های امروزی سرطان موثر نبوده و با اثرات جانبی نامطلوب همراه است بنابراین با در نظرگیری عدم پاسخ مطلوب به در مان و رشد سریع بیماری تلاش برای تهیه داروهایی با کارایی بیشتر و سمیت کمتر ضروری است(13). در نتیجه در سال های اخیر استفاده از داروهای طبیعی گیاهی برای پیشگیری و درمان سرطان مطرح شده است در این روش نه تنها سلول های توموری کنترل می شود بلکه به سلول سالم نیز آسیب نمی رسد(14). هدف اصلی از درمان سرطان توسط مواد طبیعی و شیمیایی کند کردن یا مهار فرایند سرطانزایی می باشد این نگرش به طور هدفمند روی مسیرهای داخلی غیر طبیعی سلولی متمرکز می باشد(15). لذا در سال های اخیر درمان های انتخابی سلول های سرطانی به وسیله القا اپوپتوز هدف اصلی تحقیقات سرطان بوده است(16). بومادران نوع کوتاه دشتی با نام علمی Achillea wilhelmsii از قبیله Anthemidea و تیره Asteruceae می باشد.(17)این گیاه در ایران در نواحی البرز مرکزی، نواحی مرکزی و شرق و شمال غرب ایران می روید(18) گیاهی نسبتا کوچک به ارتفاع 15-40 سانتی متر، علفی و چند ساله با برگ های عاری از دم برگ و پوشیده از کرک با گل های سفید یا سفید مایل به زرد می باشد(19) این گیاه حاوی ترکیبات شیمیایی زیادی از قبیل فلاونوئید، آلکالوئید، Cineol، borneol، alpha and beta pinen، camphor، monoterpenoids، rutin دارد(20)در طب سنتی این گیاه به عنوان تقویت کننده معده و همچنین به عنوان آرام بخش دردهای معده کاربرد دارد، دم کرده این گیاه در سوء هاضمه همراه با نفخ و افزایش اسید معده موثر می باشد.(19) بعلاوه بومادران از زمان قدیم توسط ایرانیان به عنوان گیاه دارویی مورد استفاده قرار میگرفت این گیاه به علت دارا بودن تانن، مواد تلخ و معطر مقوی اعصاب و قلب می باشدبه طوری که در موارد درمانی مختلف مانند خستگی عمومی، ضعف و التهاب ماهیچه های قلبی و همچنین در بیمارهای عصبی مانند ضعف اعصاب، هیستری، صرع مفید و مصرف می شود.(18) عصاره الکلی سرشاخه های گلدار این گیاه کاهش دهنده ی تری گلیسرید و همچنین فشار سیستولی و دیاستولی خون است عصاره آبی این گیاه تحریک کننده ایمنی هومولار و سلولار می باشد عصاره متانولی گل این گیاه دارای خاصیت ضد باکتری و ضد قارچی است همچنین اندام های هوایی این گیاه داری خاصیت آنتی اکسیدانی هست(21) آپوپتوز نوعی از مرگ سلولی است که در پاسخ به عامل های تنش زای گوناگون در بدن رخ می دهد(22). آپوپتوز در مراحل متفاوت تکامل زیستی یک موجود زنده ایفای نقش کرده و اگر از تنظیم خارج شود، بیماریهای گوناگونی را موجب می شود. برای نمونه، فعالیت بیش از حد آپوپتوز سبب بیماری های دژنره کننده مانند آلزایمر و پارکینسون می گردد(23). از سویی دیگر، چنان چه فعالیت آپوپتوزی کاهش یابد، سلول به سمت سرطانی شدن پیش می رود(24). مشخص شده است که این پدیده یک مرحله فعال و وابسته به انرژی در سلول بوده و سلولهایی که دچار مرگ برنامه ریزی شده می شوند دارای شاخص های ویژه ای هستند برای مثال غشا سلول دست نخورده باقی می ماند. DNA به صورت اینترنوکلئوزومی با الگویی خاص نردبانی قطعه قطعه می شود و غشا و محتویات درونش به شکل حباب در اختیار سیستم بیگانه خواری قرار می گیرد(25). در انسان آپوپتوز دارای مسیر بیرونی یا وابسته به رسپتور و مسیرداخلی یا وابسته به میتوکندری می باشد که هرکدام از این مسیرها کاسپازهای مختلفی دخالت دارند. کاسپازها جزو خانواده سیستئین - آسپارتات پروتئازها و واسطه ی مهم برای روند آپوپتوز می باشد(26). مسیر خارجی آپوپتوز از طریق گیرنده های مرگ FAS و TNF منجر به فعال شدن کاسپاز 8 می شود. کاسپاز 8 فعال شده می تواند به طور مستقیم کاسپازهای اجرایی از جمله کاسپاز 3 را فعال کند. (27). در مسیر داخلی یا میتوکندریایی با بهم خوردن نفوذپزیری غشا میتوکندری و آزاد شدن شماری از مولکول های موجود در غشا میتوکندری مانند سیتوکروم c، باعث فعال شدن کاسپاز 9 می شود و در نهایت باعث فعال شدن کاسپازهای اجرایی مانند کاسپاز3 مشوند(28). فسفودی استرازها (PDEs) تنها آنزیم های شناخته شده ای هستند که مسئول تجزیهcAMP و cGMP به 5'- AMP و 5'- GMP می باشند. مطالعات بیوشیمیایی ، فارماکولوژیکی و ساختاری ،حداقل 10 خانواده ژنی مختلف از فسفودی استرازها را در پستانداران شناسایی نموده است. هرعضو این خانواده دارای یک دمین کاتالیتیکی حفظ شده در ناحیه C- ترمینال می باشند. این دمین باعث شکسته شدن باند فسفودی استری و هیدرولیزشدن '3 و'5 – نوکلئوتید حلقوی به نوکلئوتید '5 مونوفسفات می گردد (29). خانواده های 1، 2، 3 و 10 فسفودی استرازها ، در هیدرولیز cGMP و cAMP نقش دارند؛ خانواده های 4 ،7 و 8 ، cAMP را هیدرولیز می نمایند و خانواده های 5 ،6 و9 بطور اختصاصی موجب هیدرولیز cGMP می شوند. فعالیت فسفودی استرازها برای سیگنالینگ سلولی دارای اهمیت می باشند زیرا متابولیسم نوکلئوتیدهای حلقوی موجب تنظیم غلظت درون سلولی آنها گردیده و درنتیجه بروی پاسخ های سلولی آنها اثرگذار می باشد (30, 31). فسفودی استرازها در تنظیم عملکرد قلب، سنتز استروئیدهای غده آدرنال و در پدیده انتقال نور نقش دارند. cGMP از طریق 3 مکانیسم مختلف موجب تنظیم فعالیت فسفودی استرازها می شود (1) افزایش فعالیت ( فسفودی استرازهای 6،5 و9) ،(2) تغییر در میزان هیدرولیز cAMP از طریق رقابت در مکان کاتالیتیک )فسفودی استرازهای 2،1 و3) و (3) تنظیم فعالیت آنزیمی از طریق اتصال مستقیم به مکان های آلوستریک خاص (فسفودی استرازهای 2 ، 5 ،6 و10). حضور نواحی آلوستریک غیرکاتالیتیک درفسفودی استرازها به cGMP امکان تنظیم فعالیت آنها را می دهد (32). به تازگی گزارش شده است که فعالیت PDE ها در تومورها و همچنین بیانشان در سرطان ها افزایش می یابد. مهارکننده های PDE جهت درمان شرایط غیربدخیمی از قبیل بیماری های التهابی استفاده می شود و همچنین جهت درمان انواع مختلفی از سرطان از قبیل لوکمی پرومایلوسیتیک حاد پیشنهاد می شود(33) بنابراین با توجه به شیوع بالای سرطان پستان در کشورهای در حال توسعه و روند رو به رشد آن در کشور ایران و تهاجمی بودن روش های درمانی موجود نیاز به استفاده از ترکیبات و روش های نوین به ویژه از ترکیبات موجود در طبیعت در کنترل و درمان این سرطان بیش از پیش احساس می شود. از آنجا که فعالیت برخی از PDE ها بیانشان در برخی از رده های سلولهای سرطانی افزایش می یابد هدف از مطالعه اخیر بررسی اثرات عصاره هیدروالکلی بو مادران کوتاه دشتی بر الگوی بیان انزیم فسفو دی استراز 5 و نقش ان در القای تکثیر/اپوپتوز در رده سلول سرطان پستان MCF-7 می باشد. بازنگری متون: در مطالعه Fathi و همکاران اثر آنتی اکسیدانی اندام های هوایی این گیاه نشان داده شد.(21) در بررسی خانم Dalali و همکاران اثر سمیت سلولی عصاره و اسانس برگ گیاه بومادران برضد سلولهای سرطانی HT-29(سرطان کولون انسان) نشان داده شد(21) در مطالعه ای که توسط salar bashi و همکاران انجام گرفت خاصیت آنتی اکسیدانی عصاره این گیاه مشاهده شدد.(34) در بررسی که توسط خانم Shahani و همکاران انجام گرفت مشخص گردید عصاره Achillea millefolium اثر مهاری بر رشد سلولهای سرطانی رده سلولی DU-145 پروستات دارد(35) در مطالعه ای که توسط ozgen و همکاران جهت بررسی خاصیت آنتی اکسیدانی گونه های مختلف گیاه بومادران صورت گرفت مشخص گرید که عصاره گونه wilhelmsii این گیاه دارای خاصیت آنتی اکسیدانی است(36) در مطالعه ای که توسط Loffler و همکاران جهت ارزیابی خاصیت ضد سرطانی عصاره Achillea millefolium انجام گرفت مشخص گرید عصاره این گیاه واجد خاصیت ضد سرطانی بر روی رده MCF7 و HeLa است.(37) در بررسی توسط خانم hoshyar و همکاران برروی سلولهای سرطان پستان رده ی MCF-7 و MCF-10A انجام گرفت مشخص گردید عصاره Achillea wilhelmsii دارای خاصیت انتی اکسیدانی هست.(38) |
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 1- درصد القا مرگ سلولی در رده سلول سرطان پستان MCF-7 تیمار شده با عصاره هیدروالکلی گیاه بومادران کوتاه دشتی در مقایسه با سلول های تیمار نشده در یک الگوی وابسته به دوز متفاوت است. 2- درصد القا مرگ سلولی در رده سلول سرطان پستان MCF-7 تیمار شده با عصاره هیدروالکلی گیاه بومادران کوتاه دشتی در مقایسه با سلول های تیمار نشده در یک الگوی وابسته به زمان متفاوت است. 3- عصاره هیدروالکلی گیاه بومادران کوتاه دشتی باعث مهار رشد و القای اپوپتوز د در یک الگوی وابسته به دوز و زمان در رده سلول سرطان پستان MCF-7 می شود. 4-میزان بیان ژن فسفو دی استراز 5 رده سلول سرطان پستان MCF-7 تیمار شده با عصاره هیدروالکلی گیاه بومادران کوتاه دشتی در مقایسه با سلول های تیمار نشده متفاوت است. |
| هدف کلی طرح | تعیین اثرات عصاره هیدروالکلی بو مادران کوتاه دشتی بر الگوی بیان ژن انزیم فسفو دی استراز 5 و نقش ان در القای تکثیر/اپوپتوز در رده سلول سرطان پستان MCF-7 |
| اهداف اختصاصی | 1- مقایسه میزان مرگ سلولی در یک الگوی وابسته به دوز عصاره هیدروالکلی گیاه بومادران کوتاه دشتی در ردهسلول سرطان پستانMCF-7 تیمار شده با سلول های تیمار نشده 2- مقایسه میزان مرگ سلولی در یک الگوی وابسته به زمان عصاره هیدروالکلی گیاه بومادران کوتاه دشتی در ردهسلول سرطان پستانMCF-7 تیمار شده با سلول های تیمار نشده 3-مقایسه در صد مهار رشد و القای اپوپتوز در رده سلول سرطان پستان-7 MCF تیمار شده با عصاره هیدروالکلی گیاه بومادران کوتاه دشتی با سلول های تیمار نشده در یک الگوی وابسته به زمان و دوز 4-مقایسه میزان بیان ژن فسفو دی استراز 5در رده سلول سرطان پستان MCF-7 تیمار شده با عصاره هیدروالکلی گیاه بومادران کوتاه دشتی با سلول های تیمار نشده |
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | مراکز درمانی و داروسازی |
| تعریف واژه های تخصصی | سرطان پستان : سرطان پستان، ناشی از رشد خارج از قاعده سلولهای غیرطبیعی در پستان است. فسفو دی استراز 5 : آنزیم های شناخته شده ای هستند که مسئول تجزیه cGMP به 5'- GMP می باشند. گیاه بومادران کوتاه دشتی : بومادران نوع کوتاه دشتی با نام علمی Achillea wilhelmsii از قبیله Anthemidea و تیره Asteruceae می باشد. این گیاه در ایران در نواحی البرز مرکزی، نواحی مرکزی و شرق و شمال غرب ایران می روید گیاهی نسبتا کوچک به ارتفاع 15-40 سانتی متر، علفی و چند ساله با برگ های عاری از دم برگ و پوشیده از کرک با گل های سفید یا سفید مایل به زرد می باشد. مرگ سلولی: مرحله نهایی آسیب سلول است. درصورت تداوم آسیب به سلول، آسیب غیرقابل برگشت می شود. در این حالت امکان بهبودی سلول وجود نداشته و سلول می میرد. مهار رشد:کاهش میزان رشد تومور یا سلول های سرطانی توسط ترکیبات شیمیایی و ... می باشد. |
| نوع مطالعه | مداخله ای invitro |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | سلولهای رده MCF-7 در محیط کشت RPMI |
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | در پلیت با 96 چاهک که برای هر چاهک 5000 سلول MCF7 در حجم 200 میکرولیتر از محیط کشت |
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | ندارد |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | جهت بررسی میزان مرگ سلولی رده MCF7 تیماره شده با عصاره هیدروالکی گیاه بومادران دشتی از تست MTT استفاده خواهد شد . جهت بررسی میزان آپوپتوز رده MCF7 تیماره شده با عصاره گیاه هیدروالکی بومادران دشتی از تست فلوسیتومتری استفاده خواهد شد. جهت بررسی میزان بیان ژن آنزیم فسفودی استراز 5 از تکنیک Real-Time PCR استفاده خواهد شد. |
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | گیاه بومادران کوتاه دشتی که توسط مرکز پژوهشی گیاهان دارویی و زینتی دانشگاه سیستان و بلوچستان مورد شناسایی قرار گرفت. با استفاده از دستگاه سوکسله عصاره هیدروالکلی گرفته خواهد شد به صورتی که قسمت های هوایی این گیاه ابتدا آسیاب شده سپس به مقدار 20 گرم از گیاه مربوطه درون محفظه شیشه ای دستگاه سوکسله تحت ثر الکل 70 % جهت عصاره گیری قرار میگیرد. سپس جهت تبخیر حلال از دستگاه Rotary evaporator استفاده می شود. سلول های MCF7در محیط کشت RPMI1640 کشت داده شدند و در انکوباتور حاوی CO2 5% و دمای 37 درجه سانتی گراد قرار داده می شوند. و پس از پاساژ ، سلول ها برای تیمار با عصاره هیدرو الکلی گیاه بومادران آماده می شوند. 1-سنجش مرگ سلولی با استفاده ازMTT assay: سلول ها به دو گروه تیمار شونده و بدون تیمار تقسیم می شوند و سلول های mcf7در غلظت (0-100 μg/ml) و زمان های مختلف (24-72 ساعت) تیمار می شوند تا دوز موثر بر مرگ سلولی مشخص شود. برای این کار از تست MTT استفاده می شود بدین صورت که : MTT نمک زرد تترازولیوم محلول در آب است که توسط سوکسینات دهیدروژناز میتوکندری های سلولهای زنده و فعال، احیا و به ترکیب رنگی فورمازان نامحلول تبدیل می شود که این رنگ با حلال آلی حل میگردد. شدت رنگ حاصله در طول موج 570 نانومتر متناسب با میزان سلولهای زنده است. 1. 2. بررسی اپوپتوز: بررسی آپوپتوز با استفاده از روش Flow Cytometry: استفاده از فلوسایتومتری روش متداول در آنالیز سلولها از لحاظ آپوپتوز و تعیین درصد سلول های آپوپتوزی می باشد. در این مرحله از کیت تشخیص آپوپتوز Annexin استفاده خواهد شد. 2. بمنظور بررسی بیان ژن٬ ابتدا mRNA از سلول با استفاده از کیت اختصاصی تخلیص می شود، پس از تخلیص با استفاده از کیت اختصاصی٬ cDNA ساخته می شود. سپس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن مورد نظر و تکنیک Real-time PCR بیان نسبی ژن فسفو دی استراز 5 در مقایسه با House keeping gene برای هر نمونه محاسبه می شود |
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | به منظور تجزیه و تحلیل داده ها از آزمون واریانس دو طرفه نان پارامتریکANOVA و Post Hoc Tukey استفاده خواهد شد. نتایج به صورت Mean ± SD گزارش می شود و p<0.05 معنی دار در نظر گرفته می شد. |
| ملاحظات اخلاقی | راهنمای اخلاقی پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی 1- پژوهشگر باید به این امر مهم توجه داشته باشد که بافتها و اعضای مورد استفاده، دارای منشأ انسانیاند و کرامت انسانی اقتضا میکند که جمعآوری، نگهداری، استفاده و نابودسازی آنها توأم با رعایت ملاحظات و شؤون مرتبط باشد. 2- از اجزای بدنی دارای منشأ انسانی باید تنها در پژوهشهایی استفاده شود که اهداف ارزشمندی را در راستای مبارزه با بیماریها و ارتقای سلامت انسانها دنبال میکنند. 3- تمامی پژوهشها بر روی عضو و بافت انسانی، پیش از اجرا، باید مورد تأیید کمیتهی اخلاق در پژوهش مرتبط قرار گیرد. کمیتهی اخلاق در پژوهش حق دارد که در تمامی مراحل پژوهش بر آن نظارت داشته باشد. پژوهشگران باید در این زمینه با کمیتهی اخلاق در پژوهش همکاری کنند. 4- رضایت آگاهانهی فرد دهندهی عضو یا بافت، یا جانشین قانونی او، شرط اساسی در تأیید اخلاقی هر پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی است. رضایتنامه باید با رعایت تمامی اصول مرتبط تهیه و هنگام ارسال طرحنامه برای تصویب، به آن پیوست شده باشد. 5- در مواردی که اخذ رضایت آگاهانه از دهندهی نمونهی ذخیرهشده یا جانشین قانونی او امکانپذیر نباشد، بهشرط وجود رضایت کلی اولیه بر استفادهی پژوهشی، در صورت تأیید کمیتهی اخلاق در پژوهش میتوان از آن نمونه برای پژوهش استفاده کرد. در چنین مواردی باید از نمونههایی استفاده شود که به نحو برگشتناپذیر بینام شده باشد. 6- تمامی اطلاعاتی که از صاحبان عضو یا بافت مورد پژوهش، جمعآوری و ثبت میشود، راز حرفهای تلقی میشود؛ از این رو، تمامی اصول و ملاحظات مربوط به رازداری و حفظ حریم شخصی، باید در مورد آنها مراعات شود. 7- مرکز انجام دهندهی پژوهش بر روی عضو و بافت باید مهارت و امکانات لازم برای حفظ رازداری را داشته باشد؛ در غیر این صورت، اطلاعات باید به شکل بینام و غیرقابل ردیابی ثبت و ذخیره شود. 8- پژوهشگر باید از اعضاء و بافتهایی که به منظور پژوهش در اختیار او قرار میگیرد استفادهی بهینه کرده، از هدر رفتن آنها جلوگیری کند 9- پژوهشگر موظف است که تمهیدات لازم ایمنی، از جمله آزمونهای غربالگری و وسایل محافظتکننده را برای جلوگیری از انتقال آلودگی از اجزای بدنی مورد استفاده به هر فرد دیگر، اعم از پژوهشگران، آزمودنیها یا سایر افرادی که در فرایند پژوهش با این مواد سروکار خواهند داشت، پیشبینی و تأمین کند. 10- پژوهش بر روی عضو و بافت ممکن است به ایجاد روشها و محصولاتی منجر شود که به استفادهی تجاری از آنها بینجامد. حقوق مالکیت معنوی نتایج حاصل از اینگونه پژوهشها باید مورد تأیید و حمایت قرار گیرد. احتمال استفادهی تجاری از نتایج پژوهش و اشخاصی که احتمالاً از آن منتفع خواهند شد باید در رضایتنامهآورده شود. 11- زمان، نحوه و میزان اطلاع آزمودنیها از نتایج پژوهش باید در رضایتنامه آورده شود. در هر حال، آزمودنی یا نمایندهی قانونی او باید به تمامی اطلاعاتی که در طول پژوهش دربارهی او بهدست میآید، دسترسی داشته باشد. 12- در صورت کمبود بافت یا عضو، باید استفادههای درمانی بر استفادههای پژوهشی اولویت داده شود. - زیستبانکها 1- ذخیرهسازی اعضاء، بافتها یا اجزای بدنی با منشأ انسانی باید با اخذ رضایت آگاهانه باشد. در رضایتنامه باید نحوه و مدت نگهداری و استفادههای احتمالی آتی آورده شود. 2- فرد حق دارد هر وقت که بخواهد درخواست کند که نمونههایش از زیستبانک خارج شوند. این در صورتی است که هویت دهنده ی نمونه مشخص یا قابل ردیابی باشد. 3- در صورتی که هویت فرد دهندهی نمونه، مشخص یا قابل ردیابی باشد، برای هر پژوهش جدید باید از فرد یا نمایندهی قانونی او رضایت آگاهانه گرفته شود. 4- در مورد نمونههایی که هویت دهندهی آنها قابل ردیابی نباشد، میتوان با استناد به رضایتنامهی کلی اولیه، پژوهشهای جدید را بدون اخذ رضایتنامه انجام داد. 5- در استفاده از بافتهای ذخیره شده در زیستبانکها - در صورتی که امکان استفادهی درمانی و پژوهشی وجود داشته باشد - باید اولویت به مصارف درمانی داده شود. در هر حال، انجام پژوهش نباید به میزان و کیفیت استفادههای درمانی لطمهای وارد کند. |
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | تاخیر در دریافت لوازم کشت و کیت ها و برای رفع مشکل باید ثبت سفارش قبل از سال میلادی جدید (2016)انجام شود |
| کلمات کلیدی | Breast cancer, Achillea wilhelmsii ,phosphodiesterase 5, apoptosis, |
| فهرست منابع و مراجع | 1. Saffari Z, Aryapour H, Foroumadi A, Akbarzadeh A. In vitro evaluation of 4H-chromene 3-carbonitrile derivatives’ biological effects on T47D human breast cancer cell line. New Cellularand Molecular Biotechnology Journal. 2014;4(14):51-8. 2. Jemal A, Bray F, Center MM, Ferlay J, Ward E, Forman D. Global cancer statistics. CA: A Cancer Journal for Clinicians. 2011;61(2):69-90. 3. Kerr JF, Winterford CM, Harmon BV. Apoptosis. Its significance in cancer and cancer therapy. Cancer. 1994;73(8):2013-26. 4. Blagosklonny MV. A node between proliferation, apoptosis, and growth arrest. BioEssays : news and reviews in molecular, cellular and developmental biology. 1999;21(8):704-9. 5. Hanahan D, Weinberg RA. The hallmarks of cancer. Cell. 2000;100(1):57-70. 6. Thompson CB. Apoptosis in the pathogenesis and treatment of disease. Science (New York, NY). 1995;267(5203):1456-62. 7. Schwarts SI. Principles of surgery. 6 ed. New York: McGrow Hill Company; 1994. 8.Kelsey JL, Gammon MD. Epidemiology of breast cancer. Epidemiol Rev 1990;12:228-40. 9.Devita VT. Cancer: principles and practice of oncology. 3 ed: Lippincott company; 1989. 10.Morrow M. Identification and management of the woman at increased risk for breast cancer development. Breast Cancer Res Treat 1994;31(1):53-60. 11.Russo J, Rivera R, Russo IH. Influence of age and parity on the development of the human breast. Breast Cancer Res Treat 1992;23(3):211-8. 12.Townsend CM, Jr. Treatment of breast cancer. Clin Symp 1997;49(1):1-32. 13. Newman DJ, Cragg GM, Snader KM. Natural products as sources of new drugs over the period 1981-2002. Journal of natural products. 2003;66(7):1022-37. 14. Hashemi M, Nouri Lang M, Entezari M, Nafisi S, Nowrouzi H. Evaluation of induced apoptosis of apigenin in 3 lines of human B cell lymphoma in vitro. 2. 2009;19(2):87-92. 15. Aggarwal BB, Sundaram C, Malani N, Ichikawa H. Curcumin: the Indian solid gold. Advances in experimental medicine and biology. 2007;595:1-75. 16. Liamarkopoulos E, Gazouli M, Aravantinos G, Tzanakis N, Theodoropoulos G, Rizos S, et al. Caspase 8 and caspase 9 gene polymorphisms and susceptibility to gastric cancer. Gastric cancer : official journal of the International Gastric Cancer Association and the Japanese Gastric Cancer Association. 2011;14(4):317-21. 17. لیلا ا, صدیقه م. بررسی مقایسه ای ویژگی های ساختاری و پروتئین های محلول در گرده های نابالغ و بالغ گیاه بومادران (Achillea wilhelmsii C. koch). 18. علی اخ. ترکیبات شیمیایی و اثر ضدباکتریایی اسانس گیاه بومادران (Achillea wilhelmsii C. Koch) جمع آوری شده از شهرستان خوی 19. نیازمند, سعید, احمدپور ع, زاده ح, الرضا م, استاد خ, et al. اثر عصاره آبی ـ الکلی بومادران (Achillea wilhelmsii) بر میزان ترشح اسید معده موش صحرایی تحت شرایط پایه، قطع و تحریک عصب واگ. مجله علمی پژوهشی فیض::: دانشگاه علوم پزشکی کاشان. 2008;12(3):12-6 20. Amjad L, Mousavidehmourdi K, Saghazadeh M. Antifungal potential of Achillea wilhelmsii flowers methanolic extract on different strains of Candida albicans. 2012. 21. Isfahani LD, Monajemi R, Amjad L. Cytotoxic Effects of Extract and Essential oil Leaves of Achillea wilhelmsii C. Koch on Colon Cancers Cells. 22. Reed JC. Apoptosis-based therapies. Nature reviews Drug discovery. 2002;1(2):111-21. 23. Offen D, Elkon H, Melamed E. Apoptosis as a general cell death pathway in neurodegenerative diseases. Journal of neural transmission Supplementum. 2000(58):153-66. 24. Mahmood Z, Shukla Y. Death receptors: targets for cancer therapy. Experimental cell research. 2010;316(6):887-99. 25. Leist M, Jaattela M. Four deaths and a funeral: from caspases to alternative mechanisms. Nature reviews Molecular cell biology. 2001;2(8):589-98. 26.Francis SH, Turko IV, Corbin JD. Cyclic nucleotide phosphodiesterases: relating structure and function. Prog Nucleic Acid Res Mol Biol 2001;65:1-52. 27.Lugnier C. Cyclic nucleotide phosphodiesterase (PDE) superfamily: a new target for the development of specific therapeutic agents. Pharmacol Ther 2006 Mar;109(3):366-98. 28.Corbin JD, Francis SH. Cyclic GMP phosphodiesterase-5: target of sildenafil. J Biol Chem 1999 May 14;274(20):13729-32. 29.Juilfs DM, Soderling S, Burns F, Beavo JA. Cyclic GMP as substrate and regulator of cyclic nucleotide phosphodiesterases (PDEs). Rev Physiol Biochem Pharmacol 1999;135:67-104. 30. Saravani R, Karami‐Tehrani F, Hashemi M, Aghaei M, Edalat R. Inhibition of phosphodiestrase 9 induces cGMP accumulation and apoptosis in human breast cancer cell lines, MCF‐7 and MDA‐MB‐468. Cell proliferation. 2012;45(3):199-206. 31. Kischkel FC, Lawrence DA, Tinel A, LeBlanc H, Virmani A, Schow P, et al. Death receptor recruitment of endogenous caspase-10 and apoptosis initiation in the absence of caspase-8. The Journal of biological chemistry. 2001;276(49):46639-46. 32. Kim R, Emi M, Tanabe K, Murakami S, Uchida Y, Arihiro K. Regulation and interplay of apoptotic and non-apoptotic cell death. The Journal of pathology. 2006;208(3):319-26. 33. Jiang X, Wang X. Cytochrome C-mediated apoptosis. Annual review of biochemistry. 2004;73:87-106. 34. Bashi DS, Fazly Bazzaz BS, Sahebkar A, Karimkhani MM, Ahmadi A. Investigation of optimal extraction, antioxidant, and antimicrobial activities of Achillea biebersteinii and A. wilhelmsii. Pharmaceutical biology. 2012;50(9):1168-76. 35. Shahani S, Hamzekanlu N, Zakeri N, Hosseinimehr SJ. Synergistic effect of Achillea millefolium L. combined with bleomycin on prostate cancer cell. Research in Molecular Medicine. 2015;3(1):10-5. 36. Özgen U, Mavi A, Terzi Z, Coflkun M. Antioxidant activities and total phenolic compounds amount of some Asteraceae species. 2004. 37. Csupor‐Löffler B, Hajdú Z, Zupkó I, Réthy B, Falkay G, Forgo P, et al. Antiproliferative effect of flavonoids and sesquiterpenoids from Achillea millefolium sl on cultured human tumour cell lines. Phytotherapy Research. 2009;23(5):672-6. 38. Hoshyar R, Mostafavinia SE, Zarban A, Hassanpour M, Partovfari M, Taheri A, et al. Correlation of Anticancer Effects of 12 Iranian Herbs on Human breast Adenocarcinoma cells with antioxidant Properties. |
| پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی | ندارد |
| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|---|---|---|
| proposal eslah shode shora.doc | 1394/08/11 | 416256 | دانلود |
| nahaee.doc | 1394/08/13 | 417280 | دانلود |
