چاپ صفحه |  صفحه نخست سامانه |  مجری و همکاران |  اطلاعات تفضیلی |  دانلود | علوم پزشکی زاهدان |
| کد طرح | 7691 |
| عنوان فارسی طرح | کاربرد و مقایسه تکنیک تکثیر هم دما به واسطه لوپ(LAMP) و Nested-PCR با استفاده از ژن B1در تشخیص آلودگی به توکسوپلاسموزیس در بیماران اسکیزوفرنی |
| عنوان لاتین طرح | Application and Comparison of Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) Technique with Nested-PCR Assays Targeting B1gene for theDiagnosis of Toxoplasmosis in Schizophrenia Patients |
| نوع طرح | بنیادی-کاربردی |
| محل اجرای طرح | مدیریت توسعه فناوری سلامت |
| رسته مطالعاتی | تجربی- آزمایشگاهی |
| دانشکده/مرکز | دانشکده پزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز | 270 |
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| محمد جعفری مدرک | استاد راهنمای اول پایان نامه دانشجویی | نظارت بر اجرای طرح | دکترای تخصصی | mjafari547547@yahoo.com |
| هادی میراحمدی | استاد راهنمای دوم پایان نامه دانشجویی | نظارت بر اجرای طرح | دکترای تخصصی | hmirahmadi59@gmail.com |
| راحله حسن زاده | دانشجو | انجام آزمایشات | کارشناسی ارشد | hasanzadeh1622@gmail.com |
| نورمحمد بخشانی | مشاور | مشاور تخصصی | دکترای تخصصی | nmbs14@yahoo.com |
| مهناز شهرکی پور | مشاور | مشاور علمی | کارشناسی ارشد | mahnaz@gmail.com |
| عنوان | متن |
|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | کاربرد و مقایسه تکنیک تکثیر هم دما به واسطه لوپ(LAMP) و Nested-PCR با استفاده از ژن B1در تشخیص آلودگی به توکسوپلاسموزیس در بیماران اسکیزوفرنی |
| خلاصه طرح به لاتین | Application and Comparison of Loop-Mediated Isothermal Amplification (LAMP) Technique with Nested-PCR Assays Targeting B1gene for theDiagnosis of Toxoplasmosis in Schizophrenia Patients |
| محل اول بکارگیری نتایج تحقیق | |
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | توکسوپلاسموزیس بیماری است که بر اثر عفونت به نوعی انگل تک یاخته ای و داخل سلولی به وجود می آید. این بیماری بین انسان و حیوان مشترک بوده و آلودگی با آن انتشار جهانی دارد به طور ی که بیش از یک سوم جمعیت جهان با آن آلوده هستند. (4-1) عامل بیماری توکسوپلاسموزیس، توکسوپلاسما گوند ی(Toxoplasma gondii) می باشد ، انگل در چرخه زندگی خود دارای اشکال تاکی زوئیت ، برادی زوئیت های موجود در کیست نسجی و اووسیست است که گربه به عنوان میزبان اصلی و سایر پستانداران و پرندگان به عنوان میزبان واسط مورد هجوم این تک یاخته قرارمی گیرند . (2، 5) راههای انتقال آلودگی به انسان از طرق خوردن اووسیست دفع شده با مدفوع گربه ، خوردن کیست نسجی همراه با گوشت خام یا نیم پز ، انتقال مادرزادی انگل از طریق جفت به جنین و انتقال اووسیست ها از طریق آب آلوده می باشد ( 10-6) توکسوپلاسموزیس در اکثر افراد سالم ، علامتی ندارد اما درافرادی که دچار نقص سیستم ایمنی هستند مانند افراد مبتلا به ویروس ایدز یا افرادی که تحت عمل پیوند عضو قرار گرفته اند و داروهای سرکوب کننده سیستم ایمنی مصرف نموده اند باعث عوارض شدید و گاه کشنده می شود ، در خانم های باردار، توکسوپلاسما گوندی می تواند منجر به عوارض شدید چشمی یا عصبی در جنین شده و حتی باعث سقط جنین نیزمی شود . (11،5) در حیوانات مزرعه مانند گوسفند و خوک و غیره نیز توکسوپلاسموزیس باعث سقط جنین می گردد ؛ بنابراین این تک یاخته باعث ضررهای اقتصادی قابل توجهی در صنعت دامپروری نیز می شود . (7،6)توکسوپلاسما باعث ایجاد کیست در مغز می گردد،که ایجاد کیست در مغز روی نروترانسمیترهای مغزی مانند دوپامین،گلوتامات و گاما آمینو بوتریک اسید اثر می گذارد و باعث ایجاد التهاب در مغز می شود.(12) نروترانسمیترها از پیام رسان های عصبی اصلی درگیر در بیماری اسکیزوفرنی هستند ، که ترشح زیاد یا کم آنها در اختلالات اسکیزوفرنی نقش دارند. اسکیزوفرنی یکی از شایعترین اختلال های شدید روانی با دلایل ناشناخته است ، که حدود 1% جمعیت جهان را تحت تاثیر قرار می دهد. عوامل عفونی در سبب شناختی اسکیزوفرنیا مطرح هستند ، یکی از این عوامل توکسوپلاسما گوندی می باشد.(13) دلایل زیادی وجود دارد که ممکن است عفونت توکسوپلاسما به اسکیزوفرنی کمک کند و در چند سال گذشته یک وابستگی بین توکسوپلاسموزیس و بیماری اسکیزوفرنی بیان شده است.برخی از علائم توکسوپلاسموزیس شامل هیدروسفالی و نارسایی های مادرزادی در برخی از افراد اسکیزوفرنی مشاهده شده است .(14) از این رو تشخیص سریع و دقیق آلودگی در افراد مذکور در پیشگیری از وخامت بیماری و صدمات جبران ناپذیر آن بسیار موثر خواهد بود. توکسوپلاسموزیس به صورت روتین به وسیله روشهای سرولوژی مثل الایزا، ایمونوفلورسنت غیر مستقیم، بافت شناسی تشخیص داده می شود که دارای معایب و محدودیتهای خاص خود می باشند(2 ، 4 ). جداسازی و تشخیص انگل به وسیله واکنش زنجیره ای پلیمراز(PCR) نیز انجام می شود . در میان این تکنیک ها Nested- PCR و بدنبال آن هیبریدیزاسیون حساسترین تکنیک تشخیصی در توکسوپلاسموزیس گزارش شده است. (9 ) با وجود این پیشرفتها تشخیص توکسوپلاسموزیس هنوز نارضایت بخش باقی می ماند چراکه تکنیک های PCR در توکسوپلاسماگوندی هنوز به سطح کافی از حساسیت دست نیافته اند و بدلیل تجهیزات گران قیمت و دوره زمانی طولانی واکنش محدودیت دارند.(4) تکثیر هم دما به واسطه لوپ(LAMP) یکی از تستهای تکثیر اسید نوکلیئک است که جهت تکثیر DNA با حساسیت و اختصاصیت بالا به منظور شناسایی پاتوژنهایی نظیر ویروسها، باکتریها، تک یاخته ها و قارچها استفاده شده است.( 20-15،4) اخیراً گزارش شده که تکنیک LAMP در تشخیص عفونتهای انگلی مانند مالاریا، تریپانوزومیازیس، دیروفیلاریازیس، بابزیوزیس بسیار قدرتمند است(19) براساس مطالعات ،آمارهای متنوعی از توکسوپلاسموزیس درکشورهای مختلف گزارش شده است که بالاترین میزان شیوع دردنیا مربوط به فرانسه باحداقل50% جمعیت،سرم مثبت است . (21 ) به طورکلی موارد مثبت سرولوژی که با بالا رفتن سن افزایش می یابد و معمولابعدازسن25سالگی درهردوجنس مشابه است . (22 )تفاوتهای آشکاربین میزان شیوع توکسوپلاسموزیس درمناطق مختلف به دلیل پراکندگی جغرافیائی آب و هوایی ، رژیم وعادات غذایی از عوامل این بیماری است، چراکه توکسوپلاسموزیس درنواحی خشک کمترین شیوع ودرنواحی گرم ومرطوب بالاترین شیوع رادارد.درایران نیزآمارهای انتشاریافته باتوجه به موقعیت جغرافیایی وسال انجام مطالعه متنوع است(23) در سال 2009 Kerasteva و همکارانش تکنیک LAMP و PCR استاندارد را با استفاده از ژن SAG1 جهت تشخیص توکسوپلاسما گوندی در ارگانهای موش آلوده استفاده کردند. نتایج آنها نشان داد که حساسیت روش LAMP نسبت به PCR استاندارد حداقل 1000برابر بالاتر است.(24) Yee Ling Lau و همکاران در سال 2010 حساسیت و ویژگی تکنیک LAMP را با استفاده از ژنهای SAG1، SAG2 و B1 در تشخیص توکسوپلاسموزیس فعال در نمونه های خون انسان با روش Nested-PCR مقایسه کردند و گزارش کردند که تکنیک LAMP در تشخیص توکسوپلاسموزیس فعال 10 برابر حساستر از Nested-PCR است. هر دو تست در تشخیص توکسوپلاسما گوندی دارای ویژگی 100% بودند.(25) Xin Hu و همکارانش در سال 2012 نمونه های ادرار را جهت تشخیص ژن B1 توکسوپلاسما گوندی در تکنیک LAMP استفاده کردند و حد تشخیصLAMP را 1pg از DNA توکسوپلاسما گوندی گزارش نمودند. LAMP قادر بودکه DNA را در ادرار موشهای درمان شده با دگزامتازون 90 روز پس از آلودگی نیز تشخیص دهد.(26) در سال 2014 Hans peter Marti در نیوزیلند به بررسی دقت کیت های تشخیصی تکنیک lamp در تشخیص مالاریا پرداخت که بر اساس نتایج تحقیق استفاده از تکنیک lamp در مناطق اندمیک یک روش با ارزش می باشد (27) در سال 2015 Morri.U و Khamis به ارزیابی روش lamp برای تشخیص و غربالگری مالاریای بدون علامت در زنگبار پرداختند که بر اساس این نتایج روش lamp به عنوان یک روش ساده و حساس مولکولی برای استفاده در غربالگری مالاریای بدون علامت با بار انگلی پایین مشخص گردید . (28) تشخیص سریع و دقیق آلودگی به توکسوپلاسما در کنترل، پیشگیری، درمان و ممانعت از پیشرفت بیماری در جوامع در معرض خطر بسیار کمک کننده و سودمند است. ایجاد تکنیک های تشخیصی ساده، سریع و کم هزینه جهت تشخیص مستقیم آلودگی به توکسوپلاسماگوندی هنوز هم مورد نیاز بوده و ضروری بنظر می رسد. تکثیر هم دما به واسطه لوپ(LAMP) یکی از تکنیک های جدید تکثیر اسیدهای نوکلئیک است که با استفاده از 4 الی 6 پرایمرمخصوص که 6 تا 8 ناحیه مشخص از DNA الگو را شناسایی می کنند و از آن میتوان بعنوان یک تست سریع و دقیق و ساده در شرایط فیلد استفاده کرد و ژن B1یکی از رایج ترین سکانسهای مورد استفاده در تشخیص توکسوپلاسماگوندی است که یک قطعه 210bp می باشد. (1و 3) در مطالعه حاضر تکنیک LAMP راه اندازی شده و با استفاده از ژن B1 با روش Nested-PCRدر تشخیص توکسوپلاسموزیس در افراد اسکیزوفرنی مقایسه می گردد . |
| مشکل جاری که سیاست گزار با آن مواجه است کدام است؟ | |
| روش های موجود کدامها هستند؟ | |
| پیشنهاد اول نحوه کاربرد | |
| محل دوم بکارگیری نتایج تحقیق | |
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش | 1-آیا تکنیکهای LAMP وNested-PCR در تشخیص ژن B1 با هم متفاوتند؟ 2-آیا حساسیت و ویژگی تکنیک LAMP، نسبت به Nested-PCR بالاتر است؟ |
| هدف کلی طرح | کاربرد و مقایسه تکنیک تکثیر هم دما به واسطه لوپ(LAMP) با Nested-PCRبا استفاده از ژن B1در تشخیص آلودگی به توکسوپلاسموزیس در بیماران اسکیزوفرنی |
| منافع و مضرات روشهای موجود کدامند؟ | |
| چرا پیام تحقیق شما حلال مشکل جاری است؟ | |
| اهداف اختصاصی | 1-مقایسه تکنیک LAMP با Nested-PCR در تشخیص ژن B1 2- تعیین حساسیت و ویژگی تکنیک LAMP، نسبت به Nested-PCR |
| پیشنهاد دوم نحوه کاربرد | |
| محل سوم بکارگیری نتایج تحقیق | |
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | مراکز خدمات بهداشتی – درمانی |
| پیام تحقیق شما چه منافعی از نظر هزینه، کارایی و بهره وری برای مدیر دارد؟ | |
| برای اجرای راه حل پیشنهادی شما چه موانع و حمایتهایی وجود دارند؟ | |
| تعریف واژه های تخصصی | تاکی زوئیت : فرم فعال و تکثیر شونده توکسوپلاسما گوندی که به تمامی سلولهای هسته دار میزبان حمله کرده ودر مرحله حاد بیماری دیده می شود. برادی زوئیت : فرم غیر فعال با تکثیر آهسته توکسوپلاسما گوندی که در داخل کیست نسجی ودر مرحله مزمن بیماری دیده می شود. اووسیست : فرم حاصل از سیکل جنسی انگل در روده گربه که با مدفوع دفع شده و باعث آلودگی میزبانان واسط می شود. الایزا (ELISA) : یک تکنیک ایمونوآنزیمی بیوشیمیایی است که بر پایه اندازه گیری کمپلکس رنگی آنتیژن و آنتیبادی استوار است. تکثیر هم دما به واسطه لوپ (LAMP) : یکی از روشهای جدید تکثیر اسیدهای نوکلئیک که DNA را با حساسیت و ویژگی بالا با استفاده از 4 الی 6 پرایمر اختصاصی تحت شرایط دمایی یکسان (°65) در مدت زمان یک ساعت تکثیر می کند واکنش زنجیره پلی مراز آشیانه ای (Nested-PCR): واکنش زنجیره پلی مراز آشیانه ای روش تغییر یافته ای از واکنش زنجیره پلی مراز است که برای کاهش آلودگی محصولات حاصله از تکثیر جایگاه های اتصال پرایمرغیر منتظره ابداع گردیده است. در این روش دو دسته پرایمر در دو مرحله متوالی واکنش زنجیره پلی مراز مورد استفاده قرارمی گیرد که دومین سری پرایمر جهت تکثیر یک هدف ثانویه در داخل اولین محصول بکار می رود . |
| پیشنهاد سوم نحوه کاربرد | |
| محل چهارم بکارگیری نتایج تحقیق | |
| نوع مطالعه | تجربی – آزمایشگاهی |
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | بیماران اسکیزوفرنی که به تشخیص پزشک متخصص اعصاب و روان بر پایه معیار های تشخیصی DSM-IV-TR ( انجمن روانپزشکی آمریکا،2004) به اسکیزوفرنی مبتلا و در بخش اعصاب و روان بیمارستان های روانپزشکی بهاران، امام علی (ع) و نبی اکرم(ص) بستری شده اند. معیار ورود و خروج بر اساس تشخیص و مطالعات پزشک متخصص اعصاب و روان می باشد. |
| پیشنهاد چهارم نحوه کاربرد | |
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | حجم نمونه با توجه به مطالعه انجام شده ( حسین حمید نژاد و همکاران ) (29) در سطح اطمینان95/0 درصد و با توجه به درصد بیماران اسکیزوفرنی مثبت به توکسوپلاسما به شرح ذیل محاسبه گردیده است : n=(Z1-α/2)2(pq)/ d2 = (1.96)2(0/57)(0/43)/(0.09)2= 116 که در آن داریم: P= اسکیزوفرنی های مثبت به توکسوپلاسما = 57/0 q= 1-p α= احتمال خطای نوع اول=05/0 d= دقت مطالعه در برآورد نسبت حساسیت = 09/0 یعنی حداقل حجم نمونه برآورد شده 116 نفر می باشد . |
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | غیر احتمالی در دسترس |
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | برای ثبت نتایج مشاهدات از یک فرم جمع آوری اطلاعات استفاده می شود . این فرم شامل نتایج الایزا ، LAMPو نتیجه Nested-PCR می باشدکه ضمیمه نموده ایم |
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | ابتدا هماهنگی های لازم با معاونت تحقیقات و فناوری دانشگاه علوم پزشکی زاهدان و بیمارستان های روانپزشکی بهاران، امام علی (ع) و نبی اکرم(ص) زاهدان جهت نمونه گیری خون ازبیماران اسکیزوفرنی صورت می گیرد و سپس پرکردن رضایت نامه توسط سرپرست یا همراهان بیمار جهت خونگیری انجام خواهد شد ودر ادامه نمونه های خون از بیماران اسکیزوفرنی جمع آوری می گردد . 106 بیمار در این مطالعه وارد خواهند شد که 5 میلی لیترنمونه خون ازهرفرد برای تجزیه و تحلیل آزمایشات سرولوژیکی جهت تشخیص توکسوپلاسموزیس گرفته می شود ، روش معمول تشخیص توکسوپلاسموزیس روش های سرولوژیکی است که متداول ترین آنها روش اندازه گیری جذب ایمنی با واسطه آنزیم (ELISA) می باشد. در توکسوپلاسموز اکتسابی اگر سطح آنتی بادی IgM بالا بوده و IgG نیز مثبت باشد و علائم بالینی وجود داشته باشد و یا اینکه افزایش آنتی بادی IgG طی سه هفته اخیر ایجاد شده باشد نشانه عفونت حاد است ولی در عفونت مزمن ، سطح آنتی بادی IgG بالا بوده و IgM منفی است . پس از تشخیص افراد مبتلا به توکسوپلاسموزیس، نمونه خون به منظورتهیه مایع بافی کوت در3000 دوردردقیقه به مدت 20 دقیقه سانتریفیوژشده وسرم در C°20 - برای انجام آزمایشات نگهداری می شود ، سپس استخراج وتخلیص DNA از نمونه های خون و تاکی زوئیتهای انگل با استفاده از کیت انجام خواهد گرفت و پس از طراحی پرایمرهای مخصوص LAMP و Nested-PCR وراه اندازی وتعیین شرایط اپتیمم جهت واکنش LAMP تکنیکهای LAMP، Nested-PCR با استفاده از ژن B1 انجام خواهد شد ، سپس حساسیت و ویژگی تست LAMP درمقایسه با Nested-PCR در تشخیص توکسوپلاسموزیس تعیین می شود . |
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | با استفاده از روش های آمار توصیفی ( تنظیم جداول توزیع فراوانی ، رسم نمودار ، تعیین شاخص های مرکزی و پراکندگی ) و روش های آمار استنباطی ( آزمون کای دو ، تعیین حساسیت و ویژگی) در سطح اطمینان 95 % و توسط نرم افزار spss داده ها تجزیه و تحلیل خواهند شد . قطعا جهت تعیین حساسیت و ویژگی در فرمول های مربوط ارزش اخباری مثبت و منفی نیز محاسبه می گردد |
| ملاحظات اخلاقی | با رضایت کامل از بیماران نمونه گیری می شود و تعهد می شود که نام و مشخصات بیماران در هیچ گزارشی قید نشود. انجام آزمایشات هیچ گونه هزینه ای برای بیمار نخواهد داشت. (دفترچه گروه های آسیب پذیر فصل اول کدهای 6،7 و 8 . فصل چهارم کدهای 3و8) کدهای مصوب در کمیته کشوری اخلاق در پژوهش های علوم پزشکی با کدهای 20،17،2،1 لحاظ شده اند. که در کمیته ی اخلاق شورای پژوهشی ثبت شده است) |
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | 1- عدم همکاری بیماران 2- دشوار بودن جمع آوری نمونه |
| کلمات کلیدی | LAMP, Nested-PCR, Toxoplasma gondii |
| فهرست منابع و مراجع | 1. Burg JL, Grover CM, Pouletty P, Boothroyd JC: Direct and sensitive detection of a pathogenic protozoan, Toxoplasma gondii, by polymerase chain reaction. J. Clin. Microbiol.1989, 27:1787-1792 2.Ling Lau Y., Meganathan P., Sonaimuthu P., et al., Specific, Sensitive, and Rapid Diagnosis of Active Toxoplasmosis by a Loop-Mediated Isothermal Amplification Method Using Blood Samples from Patients. J. Clin. Mic., Oct. 2010, 3698–3702 3. Sotiriadou I. and Karanis P., Evaluation of loop-mediated isothermal amplification for detection of Toxoplasma gondii in water samples and comparative findings by polymerase chain reaction and immunofluorescence test (IFT). Diagnostic Microbiology and Infectious Disease 62 (2008) 357–365 . 4. Zhang H., Thekisoe Oriel M.M. Aboge Gabriel O. et al., Toxoplasma gondii: Sensitive and rapid detection of infection by loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method. Experimental Parasitology 122 (2009) 47–50 5.Dubey, J. P. Toxoplasmosis—a waterborne zoonosis. Vet. Parasitol. 2004,126:57–72. 6. Dubey JP, Hill DE, Jones JL, Hightower AW, Kirkland E, Roberts JM, Marcet PL, Lehmann T, Vianna MC, Miska K, Sreekumar C, Kwok OC, Shen SK, Gamble HR. Prevalence of viable Toxoplasma gondii in beef, chicken, and pork from retail meat stores in the United States: risk assessment to consumers. J Parasitol 2005; 91(5): 1082-93. 7. Meerburg BG, Van Riel JW, Cornelissen JB, Kijlstra A, Mul MF. Cats and goat whey associated with Toxoplasma gondii infection in pigs. Vector Borne Zoonotic Dis 2006; 6(3): 266-74. 8. Switaj K, Master A, Skrzypczak M, Zaborowski P: Recent trends in molecular diagnostics for Toxoplasma gondii infections. Clin.Microbiol. Infect. 2005, 11:170-176. 9. Pujol-Rique M, Derouin F, Garcia-Quintanilla A, et al., Design of a one-tube hemi-nested PCR for detection of Toxoplasma gondii and comparison of three DNA purification methods. J. Med. Microbiol. 1999, 48:857-862. 10. Muhammadi P. Seroepidemiology of toxoplasmosis in women attending pre-marriage counseling center in Sanandaj city in 1385. Journal of Infectious Diseases, Infectious Disease Specialists Association. 2005:25-9. 11. ZangiAbadi M. Serological study of toxoplasmosis in pregnant women. Journal of East Physician. 2001:149-53. 12 .Brown AS. Further evidence of infectious insults in the pathogenesis and pathophysiology of schizophrenia. Am J Psychiatry. 2011;168(8):764–6. 13 .Alvarado-Esquivel C, Urbina-Alvarez JD, Estrada-Martinez S, Torres- Castorena A, Molotla-de-Leon G, Liesenfeld O, et al. Toxoplasma gondii infection and schizophrenia: a case control study in a low Toxoplasma seroprevalence Mexican population. Parasitol Int. 2011;60(2):151–5. 14 .Cetinkaya Z, Yazar S, Gecici O, Namli MN. Anti-Toxoplasma gondii antibodies in patients with schizophrenia--preliminary findings in a Turkish sample. Schizophr Bull. 2007;33(3):789–91. 15. Mori Y, Notomi T. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP): a rapid, accurate, and cost-effective diagnostic method for infectious diseases. J Infect Chemother 2009; 15(2): 62-9. 16. Notomi T, Okayama H, Masubuchi H, Yonekawa T, Watanabe K, Amino N, et al. Loop-mediated isothermal amplification of DNA. Nucleic Acids Res 2000; 28(12): E63. 17. Parida MM, Santhosh SR, Dash PK, Tripathi NK, Lakshmi V, Mamidi N, et al. Rapid and real-time detection of Chikungunya virus by reverse transcription loop-mediated isothermal amplification assay. J Clin Microbiol 2007; 45(2): 351-7 18.Notomi T., Okayama H., Masubuchi H., et al. Loop-Mediated Isothermal Amplification of DNA. Nucleic Acids Research, 2000, Vol.28, N.12, 19. Qing-Ming Kong, Shao-Hong Lu, Qun-Bo Tong, et al., Loop-mediated isothermal amplification (LAMP): Early detection of Toxoplasma gondii infection in mice. Parasites & Vectors 2012, 5:2. 20. Karanis P. and Ongerth J., LAMP – a powerful and flexible tool for monitoring microbial pathogens. Trends in Parasitology Vol.25 No.11. 21. Eskandarian A. Seroepidemiology of toxoplasmosis in pregnant women admitted to the maternity ward Kosar Hospital of Qazvin in 1386. iranian journal of microbiology. 2009:73-9. 22. Edrisiangh. Medical protozoology. Publication of Tehran University School of Public Health and Institute of Health Research. 1989;1:76. 23. Ghani H. Seroprevalence of IgG antibodies among students of Kerman University of Medical Sciences, 84-1383 School Year. Journal of Infectious Diseases, Infectious Disease Specialists Association. 2008:39-43. 24. Krasteva D., Toubiana M., Hartati Sri., et al., Development of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) as a diagnostic tool of toxoplasmosis. Veterinary Parasitology 162 (2009) 327–331 25.Ling Lau Y., Meganathan P., Sonaimuthu P., et al., Specific, Sensitive, and Rapid Diagnosis of Active Toxoplasmosis by a Loop-Mediated Isothermal Amplification Method Using Blood Samples from Patients. J. Clin. Mic., Oct. 2010, 3698–3702 26. Xin H., Chang-Wang P., Ya-Fei L., et al., Urine sample used for detection of Toxoplasma gondii infection by loop-mediated isothermal amplification (LAMP). Folia Parasitologica (2012) 59 21-26 27.Marti H,Stalder C,Gonzalez IJ.Diagnostic accuracy of a Lamp kit for diagnosis of imported malaria in Switzerland .Travel Med infect Dis . 2015 Mar –Apr ; 13(2):167-71 28.Morris U,Khamis M,Aydin-Schmidt B,etal.Field deployment of loop – mediated isothermal amplification for centralized mass –screening of asymptomatic malaria in Zanzibar : apre-elimination setting Malar J.2015 May 17;14:205 29. Hamidinejat H, Ghorbanpoor M, Hosseini H, Alavi SM, Nabavi L, Jalali MHR, et al. < i> Toxoplasma gondii infection in first-episode and inpatient individuals with schizophrenia. International journal of infectious diseases. 2010;14(11):e978-e81 |
| معرفی پژوهش/ اهداف پژوهش (عین عبارت هدف پروپوزال را کپی نکنید. بلکه با جملاتی که برای مردم قابل فهم باشد (برای سواد حدود پنجم ابتدایی )هدف را برای شرکت کنندگان توضیح دهید.) در تمام این متن در صورتیکه شرکت کننده کودک یا فرد فاقد ظرفیت تصمیم گیری است باید مواردیکه منظور از "من"، فرد شرکت کننده بوده است به "کودک" یا "فرد تحت سرپرستی من" اصلاح شود و مواردیکه منظور از "من"، رضایت دهنده است به من به عنوان "ولی" یا "قیم قانونی" اصلاح شود. | |
| خون گیری (آیا طرح شما نیاز به خونگیری دارد یا خیر) | |
| نحوه همکاری/ مزایا ی طرح (در این بخش برای شرکت کنندگان به زبان ساده توضیح دهید که: چه مداخله ای بر روی آنها صورت میگیرد. چه اقدامات پاراکلینیکی بر روی آنها انجام میشود. چه نمونه ای و با چه حجمی از آنها میگیرید در این مدت چند نوبت مراجعه باید داشته باشند و به چه فواصلی چه اقداماتی را در پیگیری آنها انجام میدهید. (حتی میتوانید سود بالقوه ای که شرکت کنندگان میتوانند از شرکت در این پژوهش ببرند بنویسید. این سود میتواند شرح احتمال درمان یا تشخیص بهتر بیماریشان، دریافت خدمات سلامت رایگان و یا پرداخت مشوق مالی در ازای جبران همکاریشان باشد) | |
| عوارض جانبی (منظور عوارض و میزان احتمال بروز آنها در این مطالعه است) | |
| جبران عوارض احتمالی (برای آنکه شرکت کننده بتواند ارزیابی مناسبی از سود و زیان شرکت در پژوهش شما داشته باشد لازم است بتواند سود و زیان مداخلات معمول و مداخلات این پژوهش را مقایسه کند. به عنوان مثال میزان موفقیت و میزان عوارض هریک را مقایسه کند.) - او باید بداند كه اگر در حين و بعد از انجام پژوهش هم هر مشكلي اعم از جسمي و روحي به علت شرکت در اين پژوهش برایش پيش آمد درمان عوارض، و هزينههاي آن و غرامت مربوطه بر عهده مجري خواهد بود. | |
| هزینه های مربوط به انجام طرح تحقیقاتی (تمام مداخلات پژوهشی باید برای بیمار رایگان باشد و بیمار بداند شامل چه مواردی هستند. ) | |
| روش های جایگزین در صورت عدم تمایل به شرکت در مطالعه چه روش های درمانی برای بیمار ارائه خواهد شد | |
| محرمانه بودن بیمار باید بداندکه دست اندر كاران اين پژوهش، كليه اطلاعات مربوط به او را نزد خود به صورت محرمانه نگهداشته و فقط اجازه دارند نتايج كلي و گروهي اين پژوهش را بدون ذکر نام و مشخصات بیمار منتشر كنند. و كميته اخلاق در پژوهش با هدف نظارت بر رعایت حقوق وی ميتواند به اطلاعات ایشان دسترسي داشته باشد. | |
| پاسخگویی به پرسش ها در این بخش نام و اطلاعات دسترسی فردی از عوامل پژوهش را که بتواند اطلاعات صحیح و کافی در اختیار شرکت کنندگان قرار دهند و در مورد عوارض و نگرانیها راهنمایی لازم را ارائه دهند ذکر شود | |
| حق نپذیرفتن یا انصراف بیمار باید بداند که شرکت اودر اين پژوهش کاملاً داوطلبانه است و مجبور به شرکت در اين پژوهش نيست و در صورت عدم شرکت از مراقبتهاي معمول تشخيصي و درماني محروم نخواهد شد او باید بداند كه حتي پس از موافقت با شركت در پژوهش ميتواند هر وقت كه بخواهد، پس از اطلاع به مجري، از پژوهش خارج شود و خروج اواز پژوهش باعث محرومیت از دریافت خدمات درمانی معمول برای اونخواهد شد. | |
| رضایت او باید بداند که اگر اشکال يا اعتراضي نسبت به دست اندركاران يا روند پژوهش دارد مي تواند با كميته اخلاق در پژوهش دانشگاه تماس گرفته و مشکل خود را به صورت شفاهي يا كتبي مطرح نمايد. در انتهای فرم قید گردد : اينجانب موارد فوقالذکر را خواندم و فهميدم و بر اساس آن رضايت آگاهانه خود را براي شركت در اين پژوهش اعلام ميکنم. اينجانب ……………… خود را ملزم به اجراي تعهدات مربوط به مجري در مفاد فوق دانسته و متعهد ميگردم در تأمين حقوق و ايمني شركت كننده در اين پژوهش تلاش نمايم | |
| پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی | فرم اطلاعاتی پایان نامه تحقیقاتی کاربرد و مقایسه تکنیک تکثیر هم دما به واسطه لوپ(LAMP)وNestsd pCR با استفاده از ژن B1در تشخیص آلودگی به توکسوپلاسموزیس در بیماران اسکیزوفرنی کد نمونه نتیجه الایزا نتیجه LAMP نتیجه Nested-PCR پرسشنامه طرح تحقیقاتی کاربرد و مقایسه تکنیک تکثیر هم دما به واسطه لوپ(LAMP)وPCR آشیانه ای با استفاده از ژن B1در تشخیص آلودگی به توکسوپلاسموزیس در بیماران اسکیزوفرنی مشخصات فردی: کد بیمار: 1. نام و نام خانوادگی: ......... 2. جنسیت: زن مرد 3. سن بر حسب سال؟ ......... 4. آیا مایلید از شما خون گرفته شود؟ بلی خیر 5. نوع آب مصرفی شما لوله کشی چاه و یا ........ ................. می باشد . |
| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|---|---|---|
| hasan zadeh(5).docx | 1394/10/22 | 152248 | دانلود |
| hasan zadeh_5_.pdf | 1394/10/22 | 813821 | دانلود |
