بررسی بیان ایمونو هیستوشیمیSurvivin درنمونه های بیوپسی بیماران مبتلابه سرطان کولورکتال با پلی مورفیسم ژنیSurvivin-31 G/C

سرطان کولورکتال بیماری است که از سلول های اپیتلیال مخاط روده ی بزرگ منشا می گیرد و در نتیجه رشدتوده ی سرطانی در نواحی آپاندیس، کولون و رکتوم ایجاد می شود(1,2).این نئوپلاسم فراوانترین بدخیمی دستگاه گوارش محسوب می شود؛ که عامل اصلی آن هنوز بطور دقیق شناخته نشده است، بطوریکه میزان مرگ و میر ناشی از آن بسیار شایع و بیش از 665000 نفر در سراسر جهان می باشد. از نظر فراوانی چهارمین سرطان در ایالات متحده و سومین سرطان منجر به مرگ در کشورهای غربی است(3, 4). در مردان ایرانی سومین سرطان شایع پس از سرطان های ریه و پروستات می باشد و در زنان ایرانی پس از سرطان پستان چهارمین سرطان شایع محسوب می شود(5).سرطان کولورکتال دارای توزیع نژادی است به گونه ای که نژادهای آفریقایی-آمریکایی در معرض خطر بالاتری از نظر ابتلا به آن هستند و میزان مرگ و میر در آنها نسبت به سایر نژادها بیشتر است. خطرابتلابه سرطان کولورکتال باافزایش سن بالا می رود؛بیشترین موارد ابتلا به این بدخیمی در سن70-60 سالگی اتفاق می افتد وابتلا به این سرطان در سنین کمتر بدون داشتن سابقه فامیلی نادراست(6).سرطان کولورکتال دارای توزیع جغرافیایی متفاوتی می باشد که احتمالا به نوع رژیم غذایی هر منطقه مربوط می شود.درمطالعات زیادی ارتباط بین عوامل تغذیه ای وسرطان کولورکتال به اثبات رسیده است؛رژیم های غذایی پر فیبر،غنی از کلسیم، ویتامین Dوکم چرب همراه با مصرف میوه و سبزیجات و داشتن فعالیت های بدنی منظم،خطر ابتلا به سرطان کولورکتال را کاهش می دهند.در مقابل رژیم غذایی سرشار از  کالری، چربی وکم فیبر به همراه فعالیت بدنی محدود، مصرف دخانیات و الکل موجب طولانی تر شدن زمان عبور وانتقال مواد در روده می شوند؛درنتیجهآن سلول های اپیتلیال کولون و رکتوم مدت زمان بیشتری در معرض اثر ترکیبات جهش زا قرار گرفته و از این طریق خطر ابتلا به سرطان کولورکتال درافرادافزایش می یابد(4, 6, 7).عقیده براین است که کانسر کولون در نتیجه جهش ژن های مهارکننده تومور اتفاق می افتد(4, 8, 9).ژنSurvivinاز جمله ژنهایی است که در رشد خارج از کنترل تعدادی ازسرطان هااز جمله سرطان کولورکتال شرکت می کند(10, 11). 
Survivinکوچکترین عضوخانواده پروتئین های مهارکننده  آپوپتوز میباشد.این ژن برروی کروموزوم شماره17q25واقع شده وبا نامهایBIRC5, EPR-1, API4 نیز شناخته میشود(10, 12).ازلحاظ ساختاریSurvivinدرمیان خانواده Inhibitor of apoptosis) IAp)که ازعمل کاسپازهای فعال ممانعت می کنند یک عضومنحصربه فرداست،که تنها یک دامینBIR داردوفاقد دامین(CARD(Caspase Activation Recruitment Domainمی باشد.وجوددامین BIR دراین ژن به آن خاصیت مهارکنندگی  کاسپازهاراداده ومنجربه مهارآپوپتوزالقاشده با BaxوFasمی گردد(13-15).عمل Survivin بااتصال ویژه آن به کاسپازهای 3، 7 و 9 مشخص می شود(10, 16, 17).Survivin درطول میتوزباتوبولین برهمکنش داده ودردوک میتوزی قرار می گیرد. بنا براین،گفته میشود نقش مهمی درتنظیم میتوزدارد. بیان این ژن توسط چرخه سلولی تنظیم شده ودرمیتوز به اوج خودمی رسد؛دارای چهاراگزوژن اصلیE3 ,E2 , E1 و E4 وچهاراگزوژن مخفی2a , 2B 3a , 3Bوسه اینترون می باشد(12, 18, 19). ژن Survivinپروتئینی درون سلولی 142  آمینواسیدی باوزن مولکولی 16/5KDaرا کد بندی می کند.بیان بالای آن دربافتهای جنینی درمقایسه باعدم بیان آن دربافتهای بالغ تمایزیافته نرمال(غیر ازتیموس،مغزاستخوان،اپیتلیوم های سلولهای بنیادیCD+34کولون انسان،همچنین غشاءمخاطی معده انسان ورت)دیده شده است(16, 20). باتوجه به اینکه بافتهای توموری ازلحاظ تمایزیافتگی به سطوح جنینی برگشت می کنند.الگوهای بیان اختصاصی ومتفاوت Survivinپیشنهادمیکنند،که این ژن نقش مهمی درتکوین،تومورزایی وقابلیت بقاء سلولهای توموری بازی میکند. باتوجه به اینکه اطلاعات کمی درباره  مکانیسمهای تنظیم کننده بیان این ژن وجودداردوازآنجاییکه تعدادی ازپلی مورفیسمها وجایگاههای آن در پروموتور ژنSurvivin ممکن است فعالیت این ژن را تحت تأثیرقراردهند.دراین مطالعه پلی مورفیسم(31G/C(rs9904341 -و نقش آن در بروز سرطان را بررسی می کنیم (10). Yamakو همکاران وضعیت پلی مورفیسمSurvivin رادر سرطان کولورکتال بررسی کردند؛نتایج حاصل از مطالعه آنها نشان داد که افراد با آلل  31C-وژنو تیپ241CC ریسک بالاتری برای ابتلا به کانسر کولون رادارند،اما تفاوت بین واریانت 625C/G -و ریسک افزایش کانسر کولون معنادار نبود.در نهایت ارتباط معناداری بین پلی مور فیسمSurvivinبا رفتارهای تهاجمی سرطان کولورکتال و پیش آگهی بیماران یافتند (6).
در مطالعه حسین پور فیضی وهمکاران از لحاظ آماری هیچ ارتباط معناداری بین پلی مورفیسم ژنتیکی31GC–پروموتورSurvivinوسرطان پستان مشاهده نشد(14).
درمطالعهyandongوهمکاران افزایش بیان (overexpression) ژن Survivinدر65 درصد بیماران مبتلا به آدنوکارسینومای معده مشاهده شد(13).
درمطالعه Borbelyوهمکاران هیچ ارتباط معناداری بین پلی مورفیسم ژنتیکی31G/Cژن Survivinو افزایش ریسک سرطان گردن رحم دیده نشد(21).
Gazouli و همکاران در مطالعه خود وضعیت پلی مورفیسم ژن Survivin در سرطان کولورکتال رادر دو گروه بررسی کردند؛نتایج مطالعه آنها نشان دادکه افراد باژنوتیپ31CC - ریسک بالاتری برای ابتلا به کانسر کولون داشتند،امادرواریانت -31GCخطر افزایش کانسر کولون معنادار نبود ومشخص شد که این پلی مور فیسم بیشتر نقش واسطه ای دارد(1).
درمطالعه Barbaraوهمکاران که به بررسی وضعیت پلی مورفیسم Survivinدرسرطان معده پرداختند افراد با آلل C با ژنوتیپ31G/C-ریسک بالاتری برای ابتلا به کانسر معده داشتند(22).
در مطالعه YanLiuوهمکاران ارتباط معناداری بین ژنوتیپ 31G/C – پروموتور Survivin وافزایش ریسک سرطانهای لوله گوارش  یافت شد(4).
در مطالعه FuchaoMa و همکارانش ارتباط معناداری بین ژنوتیپ 31G/C– پروموتور Survivin وافزایش ریسک سرطان نازوفارنژیال مشاهده نشد(23).
درمطالعه نورایی وهمکاران که به بررسی وضعیت ژنSurvivin وواریانت های آن در سرطان مثانه  پرداختند، میزان بیان بیش از حد این پروتئین در گروه مبتلایان برابر با 6/66درصد گزارش نمودند. طبق یافته‌هایاین مطالعه بیان Survivinبا افزایش درجه و بدخیمی تومور همراه است(20). 
Marioni و همکاران در مطالعه خوددریافتند که بین بیان هسته ای ژنSurvivinوعودمجددسرطان حنجره ارتباط معناداریوجوددارد.بنابراین بیان Survivin درسرطان حنجره می تواند نشانگر احتمالی مفیدی برای تشخیص و شناسایی بیماران با ریسک بالا در عود مجدد بیماری بعد از درمان باشد(12).
در مطالعه Malhotra وهمکاران میزان بروزSurvivinدر بیماران مبتلا به آدنوکارسینوم مری به طور معناداری بیشتر از میزان بروزآن درسرطان اپی تلیوم سنگفرشی مجاوردر همان افرادبود،همچنین میزان بروز این پروتئین با افزایش میزان مرگ و عود بیماری ارتباط داشت(17).
درمطالعهXia-Bin Liوهمکاران ارتباط معناداری بین ژنوتیپ 31G/C –پروموتورژنSurvivinوافزایش ریسک سرطان کولورکتال یافت شد(24).
از آنجایی که بسیاری از تصمیمات کلیدی در درمان های فعلی سرطان وابسته به اطلاعات دقیق از پیش آگهی و انتخاب صحیح روش درمانی بر مبنای شاخص های پیش آگهی دهنده میباشد. لذا،در مطالعه حاضر ارتباط بیان ایمونوهیستوشیمیایی Survivinبا پلی مورفیسم 31G/C -ژن Survivinدر نمونه های کانسر کولورکتال در مقایسه با موارد آدنومای خوش خیم و کنترل تعیین می شود.
بادرنظرگرفتن هزینه های سرسام آورو طول دوره درمان بیماران سرطانی و رنج و مشقتی که این بیماران متحمل می شوندونیزآمار کم موفقیت درمان این بیماران که ناشی از تشخیص دیر هنگام و آگاهی از بیماری در مراحل پیشرفته بیماری است واز سوی دیگر،با توجه به شیوع زیاد سرطان کولورکتال دراین منطقه مسلما نیاز به انجام مطالعات گستردهای درزمینه تشخیص زودرس عوامل مستعد کننده برای ابتلا احساس می شود.به نظرمی رسد استفاده ازروشهای ساده تر با امکان کاربردبالینی،ازطریق  تشخیص زودهنگام ویا به موقع وغربالگری های اولیه کم هزینه بتوان ازپیشرفت بیماری های زمینهای درجهت ابتلا به کانسرکولورکتال جلوگیری نموده واز صرف هزینه های درمانی هنگفت توسط بیماران و مراکز درمانی بکاهد.ازطرف دیگرباتوجه به تاثیری که ویژگی های  ایمونوهیستوشیمیایی  تومور در رفتار آن وپاسخ به درمان های دارویی خاص دارد، لازم است بر روی نمونه های کولورکتال در مراحل مختلف سیر بیماری به طرف سرطانی شدن و نقش این تغییرات مطالعات بیشتری صورت گیرد.لذاهدف از مطالعه حاضربررسی ایمونوهیستوشیمیایی بیان ژنSurvivinوپلی مورفیسم31G/C - آن در نمونه های بیوپسی مربوط به بیماران مبتلابه سرطان کولورکتال می باشد. به این ترتیب امید است که با کسب اطلاعات جدیددراین مورد گامی در جهت انجام اقدامات پیشگیرانه،تشخیصی و درمانی مناسب، تعدیل هزینه ها در روند درمان این بیماران و سلامت هرچه بیشتر جامعه  برداشته شود.

1-میزان بیان ایمونوهیستوشیمیایی Survivinدربافت کولورکتال بیماران مبتلا به کارسینوم کولورکتال،آدنوم کولورکتال وکولون غیر نئوپلاستیک متفاوت است.   

2-فراوانی پلی مورفیسم31G/C –پروموتورژنSurvivinدربیماران مبتلا به کارسینوم کولورکتال،آدنوم کولورکتال و کولون غیر نئوپلاستیک متفاوت است.

1-بررسی بیان ایمونو هیستوشیمیSurvivin درنمونه های بیوپسی بیماران مبتلابه سرطان کولورکتال با پلی مورفیسم ژنیSurvivin-31 G/C

1- تعیین ومقایسه میزان بیان ایمونوهیستوشیمی Survivinدربافت کولورکتال بیماران مبتلا به کارسینوم کولورکتال،آدنوم کولورکتال وکولون غیرنئوپلاستیک
2-تعیین ومقایسه فراوانی پلی مورفیسم31G/C– پروموتورژنSurvivinدربیماران مبتلا به کارسینوم کولورکتال،آدنوم کولورکتال وکولون غیر نئوپلاستیک
3-تعیین ارتباط پلی مورفیسم31G/C–پروموتورژن Survivinواستعداد ابتلا به سرطان کولورکتال

موسسات آموزشی – پژوهشی – ود رمانی مراکز خدمات بهداشتی-درمانی، آزمایشگاه های تشخیص طبی- مراکز آموزشی تحقیقاتی پزشکی

1. Polymerase chain reaction (PCR):PCR« واکنش زنجیره پلیمراز» به روش ازدیاد مقادیر جزئی DNA یا RNA تا حد مشاهده ی آنها توسط روش‌های ساده و رایج آزمایشگاهی اطلاق می‌شود.
2.بیوپسی: عملی است که طی آن پزشکان قطعه ی کوچکی از بافت زنده موجود زنده را برداشته و زیر میکروسکوپ به بررسی آن می‌پردازند.
3. ایمونوهیستوشیمی:یا بافت‌ شیمی ایمنی نام فرآیندی برای مکان‌یابی پروتئین‌ها در سلول های یک بافت است.
4.آدنوم: به  نئوپلاسم های خوش خیم مشتق شده از بافت پوششی اطلاق می گردد.
5.سرطان کولورکتال: سرطان کولورکتال بیماری است که از سلول های اپیتلیال مجرای روده ی بزرگ منشا می گیرد و سبب رشد توده ی سرطانی در نواحی آپاندیس، کولون و رکتوم می شود

مورد – شاهدی(Case-Control)

معیار های ورود: نمونه بیوپسی بیماران مبتلا به کارسینوم کولورکتال، آدنوم کولورکتال و کولون غیر نئوپلاستیک موجود در بخش پاتولوژی بیمارستان علی ابن ابیطالب (ع) زاهدان مربوط به 5 سال اخیرمورد بررسی قرار میگیرند. در مجموع 3 گروه، کارسینوم کولورکتال، آدنوم کولورکتال و کولون غیر نئوپلاستیک خواهیم داشت.  
معیار های خروج:نمونه های مربوط به افراد با سابقه اختلال ایمنی، نمونه های آتروفی و نمونه های فاقد اطلاعات لازم از مطالعه خارج خواهند شد.

از بین نمونه های بیوپسی مربوط به سرطان کولورکتال موجود در آرشیو بخش پاتولوژی بیمارستان علی ابن ابیطالب(ع) زاهدان مربوط به سال 1390 تا کنون با اطلاعات مورد نیاز ثبت شده در پرونده، مورد شناسایی و گروه بندی قرار گرفته اند انجام می شود. تعداد حداقل 30 نمونه در هر گروه وارد مطالعه خواهند شد.

نمونه گیری آسان و در دسترس، از کل نمونه های بافتی کارسینوم کولورکتال، آدنوم کولورکتال و کولون غیر نئوپلاستیک مربوط به 5 سال اخیر که اطلاعات مربوطه در پرونده آنها موجود است، تعداد 30 نمونه از هر گروه انتخاب می شوند. همه نمونه ها توسط یک پاتولوژیست مجرب مورد بررسی مجدد تشخیصی قرار گرفته اند. در مجموع سه گروه به شرح فوق داریم. از هر بلوک یک مقطع با ضخامت 4 میکرومتر برش زده شده و مورد رنگ آمیزی و بررسی ایمونوهیستوشیمیایی قرار خواهند گرفت. برای بررسی میزان بروز پلی مورفیسم31G/C-ژن مورد نظر ابتدا ژنوم افراد از مقاطع بافتی توسط کیت و طبق دستورالعمل استخراج شده و سپس با استفاده از تکنیک RFLP(restriction fragment length polymorphism)-PCR، ژنوتیپ ها بررسی شوند.

استفاده ازروش ایمونوهیستوشیمی و میزان بیان یا بروز ایمونوهیستوشیمیایی بر اساس شدت رنگ پذیری است. در کلیه لام ها، شدت رنگ پذ یری توسط دو هیستولوژیست بر روی لام های کد بندی بصورت Blind تعیین می شود. 
جهت استخراج ژنوم از مقاطع بافتی از کیت Rocheاستفاده می کنیم. سپس  براساس نتایج حاصل از الگوی الکتروفورزی و روش PCR ژنوتیپ های مربوطه را تعیین کرده و میزان آنها را در هریک از گروههای مورد مطالعه بررسی می کنیم و مورد مقایسه قرار خواهیم داد.

برای چک کردن صحت تشخیص، تمام نمونه های بیوپسی مربوط به سرطان کولو رکتال ابتدا توسط یک پاتولوژیست مجرب مورد بررسی مجدد قرار گرفته است. پس از تایید تشخیص از نمونه های انتخابی مربوط به گروه های مطالعه برشهای 4 میکرومتری تهیه می شود.سپس با استفاده از روش ایمونوهیستوشیمی بر اساس دستورالعمل کیت ایمونوهیستوشیمی مربوط به Survivinرنگ آمیزی و مورد بررسی قرار خواهند گرفت.
برای بررسی پلی مورفیسم ابتدا باید ژنوم افراد از مقاطع بافتی با استفاده از کیت مربوطه استخراج شده و سپس با استفاده از تکنیکPCR-RFLP، ژنوتیپ ها در همه نمونه ها مشخص گردند. بررسی ایمونوهیستوشیمی لام های کدبندی شده توسط دو متخصص بافت شناسی مجرب بصورتblind انجام می شود.سپس، ارتباط بین میزان بیان ایمونوهیستوشیمی و نوع ژنوتیپ در هر گروه بررسی شده و در نهایت مقایسه بین گروه ها انجام خواهد شد.

پس از دریافت نتایج و وارد کردن آن ها به کامپیوتر با استفاده از نرم افزار SPSS نسخه 20، آنالیز داده ها انجام می شود. جهت مقایسه ایمونوهیستوشیمی گروه ها از تست های آماری کروسکال والیس و من ویتنی یو، جهت مقایسه فراوانی ژنوتیپ ها و آلل ها در گروههاآزمون Chi-square استفاده خواهد شد. از آنالیز رگرسیون لجستیک برای تعیین odds ratio)OR)  و95%confidence intervals )CI)ریسک ابتلا به سرطان کولورکتال استفاده خواهد شد.سطح معنی داری آزمون ها p<0.05در نظر خواهد شد

از مقاطع بافتی مربوط به آرشیو بخش پاتولوژی بیمارستان امام علی ابن ابیطالب(ع) استفاده می شود. اطلاعات مستخرج از پرونده نیز بدون ذکر نام مورد استفاده قرار خواهد گرفت(حفظ محرمانگی). با رعایت کدهای 1، 2، 3، 5، 6، 7، 8، از راهنمای عمومی دفترچه راهنمای اخلاق پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی در جمهوری اسلامی.
پژوهشگر باید به این امر مهم توجه داشته باشد که بافتها و اعضای مورد استفاده، دارای منشأ انسانی اند و کرامت انسانی اقتضا میکند که جمعآوری، نگهداری، استفاده و نابودسازی آنها توأم با رعایت ملاحظات و شئون مرتبط باشد. (کد 1)
از اجزای بدنی دارای منشأ انسانی باید تنها در پژوهشهایی استفاده شود که اهداف ارزشمندی را در راستای مبارزه با بیماریها و ارتقای سلامت انسانها دنبال میکنند. (کد 2)
تمامی پژوهشها بر روی عضو و بافت انسانی، پیش از اجرا، باید مورد تأیید کمیته ی اخلاق در پژوهش مرتبط قرار گیرد. کمیته ی اخلاق در پژوهش حق دارد که در تمامی مراحل پژوهش بر آن نظارت داشته باشد. پژوهشگران باید در این زمینه با کمیته ی اخلاق در پژوهش همکاری کنند. (کد 3)
در مواردی که اخذ رضایت آگاهانه از دهنده ی نمونه ی ذخیره شده یا جانشین قانونی او امکانپذیر نباشد، به شرط وجود رضایت کلی اولیه بر استفاده ی پژوهشی، در صورت تأیید کمیته ی اخلاق در پژوهش می توان از آن نمونه برای پژوهش استفاده کرد. در چنین مواردی باید از نمونه هایی استفاده شود که به نحو برگشت ناپذیر بی نام شده باشد. (کد 5)
تمامی اطلاعاتی که از صاحبان عضو یا بافت مورد پژوهش، جمع آوری و ثبت میشود، راز حرفهای تلقی میشود؛ از این رو، تمامی اصول و ملاحظات مربوط به رازداری و حفظ حریم شخصی، باید در مورد آنها مراعات شود. (کد 6)
مرکز انجام دهندهی پژوهش بر روی عضو و بافت باید مهارت و امکانات لازم برای حفظ رازداری را داشته باشد؛ در غیر این صورت، اطلاعات باید به شکل بی نام و غیرقابل ردیابی ثبت و ذخیره شود. (کد 7)
پژوهشگر باید از اعضاء و بافت هایی که به منظور پژوهش در اختیار او قرار میگیرد استفاده ی بهینه کرده، از هدر رفتن آنها جلوگیری کند (کد 8)

1. نقص اطلاعاتی بعضی پرونده ها که با بررسی تعداد بیشتر مواردی که دارای اطلاعات کامل باشند، انتخاب خواهد شد.

2. در صورتی که تعداد مورد نظر بدست نیامد محدوده زمانی مورد بررسی سالهای بیشتری خواهد شد.

3. مشکلات مربوط به تهیه مواد اولیه و تجهیزات آزمایشگاهی مورد نیاز که می توان زودترجهت سفارش و تهیه مواد مورد نیاز اقدام کرد و برای استفاده از برخی تجهیزات به آزمایشگاههای دیگر دانشگاه مراجعه کرد.

Immunohistochemical, Survivin, polymorphism -31 G/C, Colorectal Cancer

1.Gazouli M, Tzanakis N, Rallis G, Theodoropoulos G, Papaconstantinou I, Kostakis A, et al. Survivin-31G/C promoter polymorphism and sporadic colorectal cancer. International journal of colorectal disease. 2009;24(2):145-50.
2.HOSSEINZADEH A, DARAEI A. Environmental factors associated with sporadic colorectal cancer. 2012.
3.Krieg A, Werner TA, Verde PE, Stoecklein NH, Knoefel WT. Prognostic and clinicopathological significance of survivin in colorectal cancer: a meta-analysis. PLoS One. 2013;8(6):e65338.
4.Liu Y, Li L, Qi H, Gao Y, Liu S, Xu C. Survivin− 31G> C Polymorphism and Gastrointestinal Tract Cancer Risk: A Meta-Analysis. PloS one. 2013;8(2):e54081.
5.Sadjadi A, Malekzadeh R, Derakhshan MH, Sepehr A, Nouraie M, Sotoudeh M, et al. Cancer occurrence in Ardabil: Results of a population‐based Cancer Registry from Iran. International journal of cancer. 2003;107(1):113-8.
6.Yamak N, Yaykasli KO, Yilmaz U, Eroz R, Uzunlar AK, Ankarali H, et al. Association between survivin gene polymorphisms and the susceptibility to colon cancer development in the Turkish population. Asian Pac J Cancer Prev. 2014;15(20):8963-7.
7.Fenoglio-Preiser CM, Noffsinger A, Stemmermann G, Lantz P, Listrom M, Rilke F. Carcinomas and other epithelial and neuroendocrine tumors of the large intestine. Gastrointestinal pathology an atlas and text 2nd ed Philadelphia: Lippincott-Raven Publishers. 1999:909-1068.
8.Uchida H, Ando H, Maruyama K, Kobayashi H, Toda H, Ogawa H, et al. Genetic alterations of mixed hyperplastic adenomatous polyps in the colon and rectum. Japanese journal of cancer research. 1998;89(3):299-306.
9.Babaei E, Shariat Torbaghan S, Emadi Bayegi M. Detection of survivin gene expression in formalin-fixed paraffin-embedded tissues of human osteosarcoma: its potential usefulness in diagnosis and prognosis of bone tumors. Iranian Biomedical Journal. 2006;10(1):39-45.
10.Tecleab AG. Regulation of the Tumor Suppresser p53 and Survivin by Ras and Ral GTPases: Implications for Malignant Transformation. 2013.
11.Sarela AI, Scott N, Ramsdale J, Markham AF, Guillou PJ. Immunohistochemical detection of the anti-apoptosis protein, survivin, predicts survival after curative resection of stage II colorectal carcinomas. Annals of Surgical Oncology. 2001;8(4):305-10.
12.Marioni G, Agostini M, Bedin C, Blandamura S, Stellini E, Favero G, et al. Survivin and laryngeal carcinoma prognosis: nuclear localization and expression of splice variants. Histopathology. 2012;61(2):247-56.
13.Li Y, Zhou Y, Zheng J, Niu C, Liu B, Wang M, et al. Downregulation of survivin inhibits proliferation and migration of human gastric carcinoma cells. Int J Clin Exp Pathol. 2015;8(2):1731-6.
14.Hossein Pour Feizi M, Rojhan Nejad M, Pouladi N, Azarfam P, Montazeri V, Halimi M. The Study of Survivin Gene Promoter Polymorphism (-31G/C) in Breast Cancer in North West of Iran. SSU_Journals. 2012;20(4):420-8.
15.Jang JS, Kim KM, Kang KH, Choi JE, Lee WK, Kim CH, et al. Polymorphisms in the survivin gene and the risk of lung cancer. Lung Cancer. 2008;60(1):31-9.
16.Li Y, Wang J, Jiang F, Lin W, Meng W. Association of polymorphisms in survivin gene with the risk of hepatocellular carcinoma in Chinese han population: a case control study. BMC medical genetics. 2012;13(1):1.
17.Malhotra U, Zaidi AH, Kosovec JE, Kasi PM, Komatsu Y, Rotoloni CL, et al. Prognostic value and targeted inhibition of survivin expression in esophageal adenocarcinoma and cancer-adjacent squamous epithelium. PloS one. 2013;8(11):e78343.
18.Negi A, Puri A, Gupta R, Nangia R, Sachdeva A, Mittal M. Comparison of Immunohistochemical Expression of Antiapoptotic Protein Survivin in Normal Oral Mucosa, Oral Leukoplakia, and Oral Squamous Cell Carcinoma. Pathology research international. 2015;2015.
19.Sah NK, Seniya C. Survivin splice variants and their diagnostic significance. Tumor Biology. 2015;36(9):6623-31.
20.Nouraee N, Mowla SJ, Ozhand A, Parvin M, Ziaee SAM, Hatefi N. Expression of survivin and its spliced variants in bladder tumors as a potential prognostic marker. Urology journal. 2009;6(2):101-8.
21.Borbely A, Murvai M, Szarka K, Kónya J, Gergely L, Hernádi Z, et al. Survivin promoter polymorphism and cervical carcinogenesis. Journal of clinical pathology. 2007;60(3):303-6.
22.do Nascimento Borges B, Burbano RR, Harada ML. Survivin-31C/G polymorphism and gastric cancer risk in a Brazilian population. Clinical and experimental medicine. 2011;11(3):189-93.
23.Ma F, Zhang H, Zhai Y, Huang W, Zhao C, Ou S, et al. Functional polymorphism-31C/G in the promoter of BIRC5 gene and risk of nasopharyngeal carcinoma among chinese. PLoS One. 2011;6(2):e16748.
      24.Li X-B, Li S-N, Yang Z-H, Cao L, Duan F-L, Sun X-W. Polymorphisms of survivin and its protein expression are associated with colorectal cancer susceptibility in Chinese population. DNA and cell biology. 2013;32(5):236-42.

سرطان کولورکتال بیماری است که از سلول های اپیتلیال مخاط روده ی بزرگ منشا می گیرد و در نتیجه رشدتوده ی سرطانی در نواحی آپاندیس، کولون و رکتوم ایجاد می شود().این نئوپلاسم فراوانترین بدخیمی دستگاه گوارش محسوب می شود؛ که عامل اصلی آن هنوز بطور دقیق شناخته نشده است، بطوریکه میزان مرگ و میر ناشی از آن بسیار شایع و بیش از 665000 نفر در سراسر جهان می باشد. از نظر فراوانی چهارمین سرطان در ایالات متحده و سومین سرطان منجر به مرگ در کشورهای غربی است(3, 4). در مردان ایرانی سومین سرطان شایع پس از سرطان های ریه و پروستات می باشد و در زنان ایرانی پس از سرطان پستان چهارمین سرطان شایع محسوب می شود().سرطان کولورکتال دارای توزیع نژادی است به گونه ای که نژادهای آفریقایی-آمریکایی در معرض خطر بالاتری از نظر ابتلا به آن هستند و میزان مرگ و میر در آنها نسبت به سایر نژادها بیشتر است. خطرابتلابه سرطان کولورکتال باافزایش سن بالا می رود؛بیشترین موارد ابتلا به این بدخیمی در سن70-60 سالگی اتفاق می افتد وابتلا به این سرطان در سنین کمتر بدون داشتن سابقه فامیلی نادراست().سرطان کولورکتال دارای توزیع جغرافیایی متفاوتی می باشد که احتمالا به نوع رژیم غذایی هر منطقه مربوط می شود.درمطالعات زیادی ارتباط بین عوامل تغذیه ای وسرطان کولورکتال به اثبات رسیده است؛رژیم های غذایی پر فیبر،غنی از کلسیم، ویتامین Dوکم چرب همراه با مصرف میوه و سبزیجات و داشتن فعالیت های بدنی منظم،خطر ابتلا به سرطان کولورکتال را کاهش می دهند.در مقابل رژیم غذایی سرشار از  کالری، چربی وکم فیبر به همراه فعالیت بدنی محدود، مصرف دخانیات و الکل موجب طولانی تر شدن زمان عبور وانتقال مواد در روده می شوند؛درنتیجهآن سلول های اپیتلیال کولون و رکتوم مدت زمان بیشتری در معرض اثر ترکیبات جهش زا قرار گرفته و از این طریق خطر ابتلا به سرطان کولورکتال درافرادافزایش می یابد.عقیده براین است که کانسر کولون در نتیجه جهش ژن های مهارکننده تومور اتفاق می افتد.ژنSurvivinاز جمله ژنهایی است که در رشد خارج از کنترل تعدادی ازسرطان هااز جمله سرطان کولورکتال شرکت می کند(

هدف از مطالعه حاضربررسی ایمونوهیستوشیمیایی بیان ژنSurvivinوپلی مورفیسم31G/C - آن در نمونه های بیوپسی مربوط به بیماران مبتلابه سرطان کولورکتال می باشد. به این ترتیب امید است که با کسب اطلاعات جدیددراین مورد گامی در جهت انجام اقدامات پیشگیرانه،تشخیصی و درمانی مناسب، تعدیل هزینه ها در روند درمان این بیماران و سلامت هرچه بیشتر جامعه  برداشته شود.

معاونت پژوهشی دانشگاه هزینه مربوط به طرح را تقبل نموده است