مقایسه فراوانی پلی مورفیسم های ژنی GPX-1 ، MnSOD و ژن Renalase در زنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل

پره اکلامپسی یک سندرم خاص بارداری است که با افزایش فشار خون و پروتئین اوری شناخته می شود. 5-8 درصد زنان با سابقه ی افزایش فشار خون مزمن به این بیماری مبتلا می گردند. پره اکلامپسی علت اصلی مرگ و میر زنان باردار در جهان است، پره اکلامپسی براساس شدت افزایش فشار خون، پروتئین اوری، سایر یافته های بالینی و ازمایشگاهی اغلب به دو دسته ی ملایم وشدید تقسیم می گردد. در حال حاضر اصطلاحات پره اکلامپسی زود بروز (Early onset) قبل از هفته 34 بارداری ، و دیر بروز (Late onset) هفته 34 بارداری یا بعد از آن، برای تقسیم بندی این بیماری بیشتر مورد توجه قرار گرفته است. پره اکلامپسی شدید اغلب با  افزایش همولیز، سطوح بالای آنزیم های کبدی و کاهش تعداد پلاکت ها  همراه است که به نام سندرم HELLP موسوم است که سهم بسیار مهمی در مرگ و میر مادر و نوزاد دارد(1-3).

مطالعات اپیدمیولوژیک نشان می دهد که ارتباطی بین  پره اکلامپسی و افزایش خطر ابتلا به بیماری های قلبی – عروقی و سندرم متابولیک در زنان در سنین پیری وجود دارد(4).

در مطالعات نشان داده شده که پره اکلامپسی و اکلامپسی با خطر سندرم مرگ ناگهانی شیر خوار همراه است(5).

اتیولوژی پره اکلامپسی هنوز مشخص نشده است و به بیماری تئوری ها معروف است، تئوری های احتمالی آن شامل پاسخ ایمنی غیر طبیعی، استعداد ژنتیکی، تغییر در فعالیت پروستاگلایندین ها، صدمه سلولهای اندوتلیال و تهاجم جفتی غیر طبیعی می باشد(6).

عوامل خطر پره اکلامپسی  شامل بیماری کلیوی مزمن، فشار خون مزمن، سابقه خانوادگی پره اکلامپسی، حاملگی چند قلو، شریک جنسی جدید، سن مادرکمتر از 19 سال و بالاتر از 40 سال، دیابت، ناسازگاریRH، چاقی، تغذیه، کمبود ویتامین ها و مواد معدنی، عفونت ها و آرترواسکلروزیس، از بین رفتن سد جفتی و ورود تروفوبلاست ها به جریان خون مادر می باشد(7-9).

میزان شیوع پره اکلامپسی در ایران براساس مطالعات پراکنده انجام شده، بین 1 تا 8 درصد گزارش شده است. عوارض پره اکلامپسی به 2 دسته مادری و جنینی تقسیم می شود. پره اکلامپسی منجر به جدا شدن زودرس جفت و اختلالات هماتولوژیک گردیده و باعث صدمه به ارگان های حیاتی می شود (10).

درحال حاضر درمان قطعی برای پره اکلامپسی وجود ندارد و زنان بارداری که پره اکلامپسی در آن ها تشخیص داده

 شده به همراه دیگر عوارض بارداری بیش از 60 درصد موارد بستری زنان در بخش مراقبت های ویژه را به خود اختصاص می دهند(1).

عوامل استرس زا روانی (اضطراب، ترس، ناامیدی، انزوا)، فیزیولوژیکی یا متابولیکی (متابولیسم غیر طبیعی)، محیطی (آلودگی هوا، تابش، میدان الکترو مغناطیس)، فیزیکی (سرما، گرما، تابش شدید، سروصدا، ارتعاش)، شیمیایی (سموم، مواد شیمیایی، داروها، مواد مخدر) آسیب شناسی (دیابت ملیتوس، التهاب، سرطان، پیری، ایسکمی، آترواسکلروز) باعث تولید ROS  ها یا گونه های فعال اکسیژن می شوند که پراکسیداسیون لیپید در سلول ها را به طور همزمان افزایش می دهد .ROS ها مولکول های بسیار واکنش پذیر هستند شامل رادیکال های آزاد مثل ، هیدروکسیل (OH^-) که دارای یک یا چند الکترون جفت نشده هستند، همچنین شامل ترکیباتی مثل H2O2 که رادیکال آزاد نیستند نیز می باشند. تولید رادیکال های آزاد و دیگر گونه های فعال اکسیژن، دفاع آنتی اکسیدانی درون زا بدن را از بین می برد و به ساختار ماکرو مولکول های سلول آسیب وارد میکند(11-14). یکی از عوامل ایجاد بیماری پره اکلامپسی میتواند استرس اکسیداتیو باشد(15). عدم تعادل بین اکسیدان ها و آنتی اکسیدان ها را استرس اکسیداتیو گویند(16). شواهد نشان میدهد که ارتباطی بین بیماری پره اکلامپسی با افزایش تولید رادیکال های ازاد و پراکسیداسیون لیپید وجود دارد(15).

خط اول دفاعی در مقابل ^-O2 و H2O2 آنزیم های آنتی اکسیدان مانند سوپراکسید دیسموتاز (SOD)، کاتالاز (CAT) و گلوتاتیون پراکسیداز (GPX) می باشد. خط دوم دفاعی شامل آنتی اکسیدان هایی مثل گلوتاتیون (GSH)، ویتامین E (به طور عمده αتوکوفرول)، آلبومین، کاراتنوئید ها، فلاونوئیدها، می باشد.(17)

O₂^- در اثردریافت یک الکترون توسط اکسیژن ایجاد میشود و تحت اثر آنزیم سوپراکسید دیسموتاز تولید H2O2 می کند که آن توسط آنزیم کاتالاز یا گلوتاتیون پراکسیداز به H2O شکسته می شود. گلوتاتیون پراکسیداز با اکسید کردن گلوتاتیون به گلوتاتیون اکسید، H2O2 را به آب تبدیل می کند که گلوتاتیون اکسید توسط آنزیم گلوتاتیون ردوکتاز دوباره به شکل گلوتاتیون احیا تبدیل می شود. از طریق واکنش فنتون یا فلز کاتالیزور هابروئیدس، کم شدن یک الکترون از H2O2 منجر به تشکیل واکنش پذیر بالا و رادیکال هیدروکسیل قوی (OH^-) می شود. سوپراکسید ممکن است با  واکنش دهد و تولید پراکسی نیتریت ( ) کند که خود آن هم یک ROS  قوی است.(18)

 افزایش سطح ROS ها ممکن است باعث ایجاد آسیب های قابل توجهی به پروتیین های سلولی، غشا، و همچنین نوکلئیک اسیدها شود.ROS ها از طریق پراکسیداسیون لیپید غشا باعث ایجاد آسیب به غشا سلولی و غشا اندامک های داخل سلولی میشود.(19, 20)

تغییر پروتیین ها توسط ROS ها منجر به غیر فعال شدن و دناتوره شدن آنزیم های مهمی می شود و همچنین شکسته شدن رشته ها در DNA توسط  ROSها منجر به موتاسیون و اثرات قابل توجهی در بیان ژن میشود.(21-23)

مطالعات متعددی در مورد کاهش فعالیت آنزیم های انتی اکسیدانی MnSOD و GPX در بیماران مبتلا به پره اکلامپسی گزارش شده است.(24-26)

SOD خط اول دفاع انتی اکسیدانی در میتوکندری است که باعث تبدیل ROS به اکسیژن و هیدروژن پراکسید می شود. انزیم SOD شامل 3 ایزوفرم است یکی از ایزوفرم ها MnSOD می باشد(27-29).

MnSOD به وسیله یک ژن منفرد که شامل 5 اگزون می باشد کد می شود. این ژن بر روی کروموزم 6q25 قرار دارد(30).

یکی از پلی مورفیسم های شایع MnSOD جایگزینی آلانین 16 (GCT)با والین (GTT)می باشد که به نام پلی مورفیسم  Ala16Val شناخته می شود.این پلی مورفیسم انتقال MnSOD به داخل میتوکندری را با تغییر کانفورماسیونی تحت تاثیر قرار می دهد(31).

در مطالعه ای که در سال 2005 توسط kim و همکاران  بر روی زنان کره ای مبتلا به پره اکلامپسی انجام گرفت ارتباط معناداری بین پلی مورفیسم …………..ژنی MnOSD با ریسک ابتلا به بیماری پره اکلامپسی مشاهده نشد(32).

در مطالعه دیگری که توسط Jun و همکاران بر روی پلی مورفیسم ژنی MnSOD درجفت زنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی انجام گرفت ارتباط معناداری مشاهده نگردید(33).

 آنزیم گلوتاتیون پراکسیداز شامل 6 ایزوفرم است .(34)(GPX-1-6) که ایزوفرم GPX-1 به میزان فراوان در سلولهای انسانی  شامل اندوتلیوم عروقی یافت می شود(35).

GPX-1  یک سلنوپروتئین بین سلولی که پراکسیدازهایی مانند H2O2 و ROOH  را به اب و الکل تبدیل می کند (36).

ژن کد کننده GPX-1 بر روی کروموزم  3p21.3 قرار دارد که شامل 2 اگزون به طول kb1.42 می باشد(37, 38). تا کنون چندین پلی مورفیسم در ژن GPX-1 شناسایی شده است یکی از این پلی مورفیسم های بر روی کدون 198 (C>T) واقع شده است که منجر به جابجایی اسیدامینه لوسین(CCC)به اسید امینه پرولین (CTC) می شود این تغییر اسیدامینه ای منجر به تغییر ساختار کانفورماسیون جایگاه فعال انزیم میشود(39).

تا کنون مطالعه ای بر روی ارتباط پلی مورفیسم ژنی GPX-1با بیماری پره اکلامپسی انجام نشده است

در مطالعات گذشته شواهد واضحی مبنی بر ارتباط بیماری پره اکلامپسی با هایپر اکتیوی اعصاب سمپاتیک ارائه شده است(40, 41). همچنین فعالیت ادرنال سمپاتیک در بیماران پره اکلامپسی افزایش نشان داده است(42, 43).

 مشاهده شده است که غلظت کاتکول امین ها در بیماران پره اکلامپسی و اکلامپسی افزایش می یابد(44) همچنین گزارش شده است افزایش سطح پلاسمایی با افزایش فشار در بیماران پره اکلامپسی ارتباط دارد(45).

در تنظیم فشار خون کاتکول امین هایی مثل دوپامین، نور اپی نفرین، و اپی نفرین نقش ضروری ایفا می کنند. مونو امین اکسیدازA  (MAO-A)، مونو امین اکسیداز B (MA0-B)و کاتکول متیل ترانسفراز (COMT)آنزیم های مسئول در تجزیه کاتکول امین ها هستند(46).  همچنین آنزیم Renalase کاتکول امین ها و مواد شبه کاتکول امین ها را متابولیزه می کند.

Renalase عمدتا در کلیه بیان می شود همچنین در قلب، روده کوچک و عضلات اسکلتی نیز وجود دارد(47). (48).

ژن کد کننده Renalase (RNLS)نام دارد که بر روی کروموزم10q23.23  قرار دارد. این ژن شامل 10 اگزون و 309،469 جفت باز می باشد.آنزیم Renalase  342 اسید امینه طول دارد و شامل دمین امین اکسیداز، ناحیه اتصال به FAD و سیگنال پپتید است(47).

کلیه مسئول اولیه حفظ حالت پایدارآنزیم Renalase در بدن می باشد.این آنزیم  در حالت غیر فعال به حالتprorenalase  در جریان خون وجود دارد. Prorenalase  از طریق به داخل خون ترشح میشود. در حالت پایه ، prorenalase  فعالیت امین اکسیدازی ندارد و با افزایش کاتکول امین ها و فشار خون به سرعت به Renalase  تبدیل می شود. آنزیم Renalase فشار خون را از طریق تجزیه کاتکول امین هایی مانند دوپامین، اپی نفرین و نوراپی نفرین کاهش می دهد(49).

چندین مطالعه ازمایشگاهی بروی حیوانات شواهد واضحی مبنی بر نقش Renalase در تجزیه کاتکول امین ها و تنظیم فشار خون ارائه داده اند(48, 50, 51). مطالعات اخیر گزارش داده اند که نقص این انزیم با افزایش فشار خون و افزایش سطح پلاسمایی کاتکول امین ها ارتباط دارد(52, 53). از آنجاییکه که مهمترین عارضه پره اکلامپسی افزایش فشار خون میباشد ، ارتباط این آنزیم با بیماری پره اکلامپسی وجود دارد.

تا کنون حد اقل دو پلی مورفیسم در ژن Renalase  گزارش شده اس: پلی مورفیسم rs2576178   در ناحیه 5´ flanking  و پلی مورفیسم rs10887800  در ناحیه اینترون 6 (54).

مطالعات متعددی در خصوص ارتباط بین پلی مورفیسم های( rs2576178 وrs10887800)  ژن RNLS با بیماری های افزایش فشار خون(55)، ESRD (56)، دیابت نوع 2(54) وPIH((57) گزارش شده است، اما تا کنون تنها یک مطالعه بر روی ارتباط پلی مورفیسم های ژنی Renalase با بیماری پره اکلامپسی انجام شده است. در این مطالعه که توسط Bagci و همکاران بر روی 102 بیمار مبتلا به پره اکلامپسی و 100 فرد سالم انجام گرفت.بین پلی مورفیسم rs2576178 با بیماری پره اکلامپسی تفاوت معنا داری مشاهده نشد.  ولی پلی مورفیسم rs10887800  ارتباط معناداری (p = 0.001)داشت(58).در نتیجه در مطالعه حاضر ما به بررسی ارتباط بین این دو پلی مورفیسم و پره اکلامپسی میپردازیم.

فراوانی پلی مورفیسم ژن GPX-1  در زنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل متفاوت است

فراوانی پلی مورفیسم  ژن MnSOD  در زنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل متفاوت است

فراوانی پلی مورفیسم)  rs2576178) ژن  Renalase درزنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل متفاوت است

فراوانی پلی مورفیسم)  rs10887800) ژن   Renalase درزنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل متفاوت است

مقایسه فراوانی پلی مورفیسم های ژنی GPX-1 ، MnSOD  و  ژن  Renalase در زنان  باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل

مقایسه فراوانی پلی مورفیسم  ژن  GPX-1  در زنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل

مقایسه فراوانی پلی مورفیسم  ژن   MnSOD در زنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل

مقایسه فراوانی پلی مورفیسم)  rs2576178) ژن Renalase  درزنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل

مقایسه فراوانی پلی مورفیسم)  rs10887800) ژن  Renalase   درزنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و گروه کنترل

دانشگاه علوم پزشکی زاهدان

مرکز تحقیقات سلولی مولکولی زاهدان

پره اکلامپسی: :سندرم خاص بارداری است که با افزایش فشار خون و پروتئین اوری شناخته می شود.

استرس اکسیداتیو: عدم تعادل بین اکسیدان ها و آنتی اکسیدان ها را استرس اکسیداتیو گویند

پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی (SNP): جابجایی ثابت یک تک باز است که فراوانی بیش از 1% در یک جمعیت داشته باشد

موردی- شاهدی(case –control   )

نمونه های مورد نظر  از بین افراد مبتلا به پره اکلامپسی و افراد با حاملگی طبیعی مراجعه کننده به بیمارستان علی ابن ابیطالب زاهدان انتخاب می شوند.

کلیه افراد مبتلا به هریک از بیماری های سیستمیک، عفونی ، قلبی، کلیوی، لوپوس  از مطالعه حذف می شوند.

برای بررسی پلی مورفیسم های ژنی 200 نمونه خون تام زنان باردار مبتلا به پره اکلامپسی و 200 کنترل در نظر گرفته می شود

نمونه گیری آسان و در دسترس برای نمونه های شاهد و کنترل

از طریق تشخیص بالینی و انجام آزمایشات واقدامات پاراکلنیک برای تشخیص بیماری و انجام pcr بر روی DNAخون افراد و شناسایی الل های موردنظر

این مطالعه مورد شاهدی بر روی مراجعین به بیمارستان علی ابن ابیطالب شهر زاهدان انجام می گیرد. کلیه زنان زایمان کرده که پس از زایمان جهت ایشان تشخیص پره اکلامپسی گذاشته شده وارد گروه مورد مطالعه، و کلیه زنان با نتیجه طبیعی حاملگی وارد گروه شاهد شده اند . تشخیص پره اکلامپسی براساس فشار خون مساوی یا بیشتر از 90/140میلی متر جیوه بعد از هفته بیست حاملگی و پروتئینوری 300 میلی گرم یا بیشتر در 24 ساعت یا +2یا بیشتر ( در تست نواری ادرار) در نمونه تصادفی ادرار می باشد .

افراد مبتلا به حاملگی 2 یا چند قلو و بیماران مبتلاء به دیابت، بیماری کلیوی، بیماری کبدی ، کلیه بیماریهای سیستماتیک و لوپوس و یا جنین مبتلا به مول هیداتیدیفرم و هیدروپس جنینی از مطالعه حذف می شوند. دوگروه بیمار وکنترل از نظر سن ،BMI و قومیت همسان سازی می گردند. پس از توجیه   بیماران در مورد مطالعه و کسب رضایت آگاهانه از ایشان ابتدا اطلاعات مربوط در فرم اطلاعاتی ثبت می شود.

از خون هر فرد مورد مطالعه DNA  استخراج گردیده و سپس با استفاده از تکنیک PCR-RFLP ،پلی مورفیسم های ژنی  GPX-1 ،  و  MnSODRenalase تعیین می گردد.

جهت مقایسه فراوانی پلی مورفیسم بین دو گروه  از ازمون های χ2    و فیشر استفاده  می گردد. برای تعیین اثر هر پلی مورفیسم بر ریسک ابتلا به پره اکلامپسی از  Logistic Regression  استفاده می شود

راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش‌های علوم پزشکی 

دارای آزمودنی انسانی  در جمهوری اسلامی ایران

کد 1: هدف اصلی هر پژوهش‌باید ارتقای سلامت انسان‌ها توأم با رعایت کرامت و حقوق ایشان باشد.

کد 2:در پژوهش بر آزمودنی انسانی، سلامت و ایمنی فرد فرد آزمودنی‎ها در طول و بعد از اجرای پژوهش، بر تمامی مصالح دیگر اولویت دارد. هر پژوهشی که بر روی آزمودنی انسانی انجام می‌گیرد، باید توسط افرادی طراحی و اجرا شود که تخصص و مهارت بالینی لازم و مرتبط را داشته باشند. در کارآزمایی‌های بالینی  بر روی بیماران یا داوطلب‌های سالم نظارت پزشک دارای مهارت و دانش متناسب الزامی است.

کد 3:پژوهش بر انسان فقط در صورتی توجیه‌پذیر است که منافع بالقوه‌ی آن برای هر فرد آزمودنی بیش‌تر از خطرهای  آن باشد. در پژوهش‌های دارای ماهیت غیر درمانی، سطح آسیبی که آزمودنی در معرض آن قرار می‌گیرد نباید بیش‌تر از آن‌چه باشد که مردم عادی در زندگی روزمره‌ی خود با آن مواجه می‌شوند. حصول اطمینان از این امر برعهده‌ی طراحان، مجریان و همکاران پژوهش و تمامی شوراهای بررسی یا پایش‌کننده‌ی پژوهش از جمله کمیته‌ی اخلاق در پژوهش‌ است.

کد 4:مواردی از قبیل سرعت، سهولت کار، راحتی پژوهشگر، هزینه‌ی پایین‌تر و/ یا صرفاً عملی بودن آن به هیچ وجه نباید موجب قرار دادن آزمودنی در معرض خطر یا زیان افزوده یا تحمیل هر گونه محدودیت اختیار اضافی به وی شود.

کد 5: قبل از آغاز هر پژوهش پزشکی ، باید اقدامات  اولیه جهت به حداقل رساندن زیان احتمالی وارده به آزمودنی‌ها و تامین سلامت آن‌ها انجام گیرد.

کد 7: اگر در حین اجرای پژوهش مشخص شود که خطرات شرکت در این پژوهش برای آزمودنی‌ها بیش از فواید بالقوه‌ی آن است، باید آن پژوهش بلافاصله متوقف شود.

کد 13: کسب رضایت آگاهانه و آزادانه در هر پژوهشی که بر روی آزمودنی انسانی اجرا می‌شود، الزامی است. این رضایت باید به شکل کتبی باشد. در مواردی که اخذ رضایت آگاهانه‌ی کتبی غیر ممکن یا قابل صرف‌نظر باشد، باید موضوع با ذکر دلایل به کمیته‌ی اخلاق منتقل شود. در صورت تأیید کمیته‌ی اخلاق، اخذ رضایت کتبی قابل تعویق یا تبدیل به رضایت شفاهی یا ضمنی خواهد بود.

کد 14:اگر در طول اجرای پژوهش تغییری در نحوه اجرای پژوهش داده شود یا اطلاعات جدیدی به دست آید که احتمال داشته باشد که بر تصمیم آزمودنی مبنی بر ادامه‌ی شرکت در پژوهش تاثیر گذار باشد، باید موضوع به اطلاع کمیته‌ی اخلاق رسانده شود و در صورت موافقت کمیته با ادامه‌ی پژوهش، مراتب به اطلاع آزمودنی رسانده شود و رضایت آگاهانه مجددا اخذ گردد.

کد 15: پژوهشگر باید از آگاهانه بودن رضایت اخذشده اطمینان حاصل کند. برای این منظور، در تمامی پژوهش‌های پزشکی، اعم از درمانی و غیردرمانی، پژوهشگر موظف است فرد در نظر گرفته شده به‌عنوان آزمودنی را از تمامی اطلاعاتی که می‌توانند در تصمیم‌گیری او مؤثر باشند، به‌نحو مناسبی آگاه سازد. این اطلاعات مشتملند بر: عنوان و اهداف پژوهش، طول مدت پژوهش، روشی که قرار است به‌کار گرفته شود (شامل احتمال تخصیص تصادفی به گروه‌مورد یا شاهد)، منابع تأمین بودجه، هر گونه تعارض منافع احتمالی، وابستگی  سازمانی پژوهشگر، و فواید و زیان‌هایی که انتظار می‌رود مطالعه در بر داشته باشد. هم‌چنین، هر آزمودنی باید بداند که می‌تواند هر لحظه که بخواهد از مطالعه خارج شود و باید درباره‌ی خطرات و زیان‌های بالقوه‌ی ناشی از ترک زودرس پژوهش آگاه و پشتیبانی شود. پژوهشگر هم‌چنین باید به تمامی سؤالات و دغدغه‌های این افراد، با حوصله و دقت پاسخ بدهد. این موارد باید در رضایت‌نامه‌ی آگاهانه منعکس شود.

کد 25 : پژوهشگر مسؤول رعایت اصل رازداری و حفظ اسرار آزمودنی‌ها و اتخاذ تدابیر مناسب برای جلوگیری از انتشار آن است. هم‌چنین، پژوهشگر موظف است که از رعایت حریم خصوصی آزمودنی‌ها در طول پژوهش اطمینان حاصل کند. هرگونه انتشار داده‌ها یا اطلاعات به‌دست آمده از بیماران باید بر اساس رضایت آگاهانه انجام گیرد.

کد 28 :پژوهشگران موظفند که نتایج پژوهش‌های خود را صادقانه ، دقیق، و کامل منتشر کنند. نتایج، اعم از منفی یا مثبت، و نیز منابع تأمین بودجه، وابستگی  سازمانی، و تعارض منافع – در صورت وجود – باید کاملاً آشکارسازی شوند. پژوهشگران نباید در هنگام عقد قرارداد انجام پژوهش، هیچ  گونه شرطی را مبنی بر حذف یا عدم انتشار یافته‌هایی که از نظر حمایت کننده‌ی پژوهش  مطلوب نیست، بپذیرند.

کد 29:نحوه‌ی گزارش نتایج پژوهش باید ضامن حقوق مادی و معنوی تمامی اشخاص مرتبط با پژوهش، از جمله خود پژوهشگر یا پژوهشگران، آزمودنی‌ها و مؤسسه‌ی حمایت کننده‌ی  پژوهش باشد.

راهنمای اخلاقی پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی

در جمهوری اسلامی ایران

1- پژوهشگر باید به این امر مهم توجه داشته باشد که بافت‌ها و اعضای مورد استفاده، دارای منشأ انسانی‌اند و کرامت انسانی اقتضا می‌کند که جمع‌آوری، نگه‌داری، استفاده و نابودسازی آن‌ها توأم با رعایت ملاحظات و شؤون مرتبط باشد.

2- از اجزای بدنی دارای منشأ انسانی باید تنها در پژوهش‌هایی استفاده شود که اهداف ارزشمندی را در راستای مبارزه با بیماری‌ها و ارتقای سلامت انسان‌ها دنبال می‌کنند.

3- تمامی پژوهش‌ها بر روی عضو و بافت انسانی، پیش از اجرا، باید مورد تأیید کمیته‌ی اخلاق در پژوهش مرتبط قرار گیرد. کمیته‌ی اخلاق در پژوهش حق دارد که در تمامی مراحل پژوهش بر آن نظارت داشته باشد. پژوهشگران باید در این زمینه با کمیته‌ی اخلاق در پژوهش همکاری کنند.

4- رضایت آگاهانه‌ی فرد دهنده‌ی عضو یا بافت، یا جانشین قانونی او، شرط اساسی در تأیید اخلاقی هر پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی است. رضایت‌نامه باید با رعایت تمامی اصول مرتبط تهیه و هنگام ارسال طرح‌نامه برای تصویب، به آن پیوست شده باشد.

5- در مواردی که اخذ رضایت آگاهانه از دهنده‌ی نمونه‌ی ذخیره‌شده یا جانشین قانونی او امکان‌پذیر نباشد، به‌شرط وجود رضایت کلی اولیه بر استفاده‌ی پژوهشی، در صورت تأیید کمیته‌ی اخلاق در پژوهش می‌توان از آن نمونه برای پژوهش استفاده کرد. در چنین مواردی باید از نمونه‌هایی استفاده شود که به ‌نحو برگشت‌ناپذیر بی‌نام ‌شده باشد. ‌

6- تمامی اطلاعاتی که از صاحبان عضو یا بافت مورد پژوهش، جمع‌آوری و ثبت می‌شود، راز حرفه‌ای تلقی می‌‌شود؛ از این ‌رو، تمامی اصول و ملاحظات مربوط به رازداری و حفظ حریم شخصی، باید در مورد آن‌ها مراعات شود.

7- مرکز انجام دهنده‌ی پژوهش بر روی عضو و بافت باید مهارت و امکانات لازم برای حفظ رازداری را داشته باشد؛ در غیر این صورت، اطلاعات باید به شکل بی‌نام و غیرقابل ردیابی ثبت و ذخیره شود.

8- پژوهشگر باید از اعضاء و بافت‌هایی که به منظور پژوهش در اختیار او قرار می‌گیرد استفاده‌ی بهینه کرده، از هدر رفتن آن‌ها جلوگیری کند

9- پژوهشگر موظف است که تمهیدات لازم ایمنی، از جمله آزمون‌های غربالگری و وسایل محافظت‌کننده را برای جلوگیری از انتقال آلودگی از اجزای بدنی مورد استفاده به هر فرد دیگر، اعم از پژوهشگران، آزمودنی‌ها یا سایر افرادی که در فرایند پژوهش با این مواد سروکار خواهند داشت، پیش‌بینی و تأمین کند.

10- پژوهش بر روی عضو و بافت ممکن است به ایجاد روش‌ها و محصولاتی منجر شود که به استفاده‌ی تجاری از آن‌ها بینجامد. حقوق مالکیت معنوی نتایج حاصل از این‌گونه پژوهش‌ها باید مورد تأیید و حمایت قرار گیرد. احتمال استفاده‌ی تجاری از نتایج پژوهش و اشخاصی که احتمالاً از آن منتفع خواهند شد باید در رضایت‌نامه‌آورده شود.

عدم همکاری بیمار

 مشکل تهیه مواد وامکان طولانی شدن زمان دریافت آنها

پره اکلامپسی، استرس اکسیداتیو ، پلی مورفیسم

1.            Eiland E, Nzerue C, Faulkner M. Preeclampsia 2012. Journal of pregnancy. 2012;2012:586578.

2.            Mohaupt M. Molecular aspects of preeclampsia. Molecular aspects of medicine. 2007;28(2):169-91.

3.            Mutter WP, Karumanchi SA. Molecular mechanisms of preeclampsia. Microvascular research. 2008;75(1):1-8.

4.            Staff AC, Dechend R, Redman CW. Review: Preeclampsia, acute atherosis of the spiral arteries and future cardiovascular disease: two new hypotheses. Placenta. 2013;34 Suppl:S73-8.

5.            Mendola P, Mumford SL, Mannisto TI, Holston A, Reddy UM, Laughon SK. Controlled direct effects of preeclampsia on neonatal health after accounting for mediation by preterm birth. Epidemiology. 2015;26(1):17-26.

6.            Ahmed A. New insights into the etiology of preeclampsia: identification of key elusive factors for the vascular complications. Thrombosis research. 2011;127 Suppl 3:S72-5.

7.            Connealy BD, Carreno CA, Kase BA, Hart LA, Blackwell SC, Sibai BM. A history of prior preeclampsia as a risk factor for preterm birth. American journal of perinatology. 2014;31(6):483-8.

8.            Villar J, Belizan JM. Same nutrient, different hypotheses: disparities in trials of calcium supplementation during pregnancy. The American journal of clinical nutrition. 2000;71(5 Suppl):1375S-9S.

9.            Rajkovic A, Mahomed K, Rozen R, Malinow MR, King IB, Williams MA. Methylenetetrahydrofolate reductase 677 C --> T polymorphism, plasma folate, vitamin B(12) concentrations, and risk of preeclampsia among black African women from Zimbabwe. Molecular genetics and metabolism. 2000;69(1):33-9.

10.          Kianpour M, Norozi S, Bahadoran P, Azadbakht L. The relationship between metabolic syndrome criteria and preeclampsia in primigravid women. Iranian journal of nursing and midwifery research. 2015;20(2):263-8.

11.          Pekarkova I, Parara S, Holecek V, Stopka P, Trefil L, Racek J, et al. Does exogenous melatonin influence the free radicals metabolism and pain sensation in rat? Physiological research / Academia Scientiarum Bohemoslovaca. 2001;50(6):595-602.

12.          Gupta Y, Sharma M, Chaudhary G. Methods Findings Exp. Clin Pharmacol. 2002;24:497-500.

13.          Kale M, Bhusari K, Umathe S. Role of thyroid hormones in the generation of widespread oxidative stress. J Cell Tissue Res. 2007;7(1):871-6.

14.          Halliwell B, Gutteridge J. Role of free radical and catalytic metal ions in human disease: an overview. 1990.

15.          Toledo M, Ventrucci G, Gomes-Marcondes M. Increased oxidative stress in the placenta tissue and cell culture of tumour-bearing pregnant rats. Placenta. 2011;32(11):859-64.

16.          Weetman A, Tandon N, Morgan B. Antithyroid drugs and release of inflammatory mediators by complement-attacked thyroid cells. The Lancet. 1992;340(8820):633-6.

17.          Paller MS. Hypothyroidism protects against free radical damage in ischemic acute renal failure. Kidney international. 1986;29(6):1162-6.

18.          Mishra P, Samanta L. Oxidative stress and heart failure in altered thyroid States. The Scientific World Journal. 2012;2012.

19.          Rathore N, John S, Kale M, Bhatnagar D. Lipid peroxidation and antioxidant enzymes in isoproterenol induced oxidative stress in rat tissues. Pharmacological Research. 1998;38(4):297-303.

20.          Thollon C, Iliou JP, Cambarrat C, Robin F, Vilaine JP. Nature of the cardiomyocyte injury induced by lipid hydroperoxides. Cardiovascular research. 1995;30(5):648-55.

21.          Lockwood TD. Redox control of protein degradation. Antioxidants & redox signaling. 2000;2(4):851-78.

22.          Stadtman E, Levine R. Free radical-mediated oxidation of free amino acids and amino acid residues in proteins. Amino acids. 2003;25(3-4):207-18.

23.          Konat GW. H2O2-induced higher order chromatin degradation: a novel mechanism of oxidative genotoxicity. Journal of biosciences. 2003;28(1):57-60.

24.          Chamy VM, Lepe J, Catalan A, Retamal D, Escobar JA, Madrid EM. Oxidative stress is closely related to clinical severity of pre-eclampsia. Biol Res. 2006;39(2):229-36.

25.          Mutlu-Türkoglu Ü, Ademoglu E, Ibrahimoglu L, Aykac-Toker G, Uysal M. Imbalance between lipid peroxidation and antioxidant status in preeclampsia. Gynecol Obstet Invest. 1998;46(1):37-40.

26.          Padmini E, Lavanya S, Uthra V. Preeclamptic placental stress and over expression of mitochondrial HSP70. Clin Chem Lab Med. 2009;47(9):1073-80.

27.          Michiels C, Raes M, Toussaint O, Remacle J. Importance of Se-glutathione peroxidase, catalase, and Cu/Zn-SOD for cell survival against oxidative stress. Free Radic Biol Med. 1994;17(3):235-48.

28.          Valko M, Leibfritz D, Moncol J, Cronin MT, Mazur M, Telser J. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease. The international journal of biochemistry & cell biology. 2007;39(1):44-84.

29.          Bhatnagar S, Bhattacharjee J, Vaid M, Madan T, Trivedi SS, Sarma PU. Inducible nitric oxide synthase (iNOS) gene polymorphism in pre‐eclampsia: A pilot study in North India. Aust N Z J Obstet Gynaecol. 2007;47(6):477-82.

30.          Church SL, Grant JW, Meese EU, Trent JM. Sublocalization of the gene encoding manganese superoxide dismutase (MnSOD/SOD2) to 6q25 by fluorescence in situ hybridization and somatic cell hybrid mapping. Genomics. 1992;14(3):823-5.

31.          Zelko IN, Mariani TJ, Folz RJ. Superoxide dismutase multigene family: a comparison of the CuZn-SOD (SOD1), Mn-SOD (SOD2), and EC-SOD (SOD3) gene structures, evolution, and expression. Free Radic Biol Med. 2002;33(3):337-49.

32.          Kim YJ, Park HS, Park MH, Suh SH, Pang M-G. Oxidative stress-related gene polymorphism and the risk of preeclampsia. European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology. 2005;119(1):42-6.

33.          Zhang J, Masciocchi M, Lewis D, Sun W, Liu A, Wang Y. Placental anti-oxidant gene polymorphisms, enzyme activity, and oxidative stress in preeclampsia. Placenta. 2008;29(5):439-43.

34.          Beckett GJ, Arthur JR. Selenium and endocrine systems. J Endocrinol. 2005;184(3):455-65.

35.          Forgione MA, Weiss N, Heydrick S, Cap A, Klings ES, Bierl C, et al. Cellular glutathione peroxidase deficiency and endothelial dysfunction. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 2002;282(4):H1255-H61.

36.          Arthur J. The glutathione peroxidases. Cellular and Molecular Life Sciences CMLS. 2001;57(13-14):1825-35.

37.          Ishida K, Morino T, Takagi K, Sukenaga Y. Nucleotide sequence of a human gene for glutathione peroxidase. Nucleic Acids Res. 1987;15(23):10051.

38.          Moscow JA, Schmidt L, Ingram DT, Gnarra J, Johnson B, Cowan KH. Loss of heterozygosity of the human cytosolic glutathione peroxidase I gene in lung cancer. Carcinogenesis. 1994;15(12):2769-73.

39.          Ratnasinghe D, Tangrea JA, Andersen MR, Barrett MJ, Virtamo J, Taylor PR, et al. Glutathione peroxidase codon 198 polymorphism variant increases lung cancer risk. Cancer Res. 2000;60(22):6381-3.

40.          Davey D, Macnab M. Plasma adrenaline, noradrenaline and dopamine in pregnancy hypertension. BJOG. 1981;88(6):611-8.

41.          øian P, Kjeldsen SE, Eide I, Maltau JM. Increased arterial catecholamines in pre-eclampsia. Acta Obstet Gynecol Scand. 1986;65(6):613-7.

42.          Airaksinen K, Kirkinen P, Takkunen J. Autonomic nervous dysfunction in severe pre-eclampsia. European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology. 1985;19(5):269-76.

43.          Khatun S, Kanayama N, Sato E, Belayet HM, Kobayashi T, Terao T. Eclamptic plasma stimulates norepinephrine release in cultured sympathetic nerve. Hypertension. 1998;31(6):1343-9.

44.          Khatun S, Kanayama N, Hossain B, El Maradny E, Kobayashi T, Jahan S, et al. Increased concentrations of plasma epinephrine and norepinephrine in patients with eclampsia. European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology. 1996;69(2):61-7.

45.          ØIAN P, KJELDSEN SE, EIDE I, NORMAN N. Adrenaline and preeclampsia. Acta Med Scand. 1985;217(S693):29-32.

46.          Desir GV, Tang L, Wang P, Li G, Sampaio‐Maia B, Quelhas‐Santos J, et al. Renalase lowers ambulatory blood pressure by metabolizing circulating adrenaline. Journal of the American Heart Association. 2012;1(4):e002634.

47.          Desir GV. Regulation of blood pressure and cardiovascular function by renalase. Kidney Int. 2009;76(4):366-70.

48.          Xu J, Li G, Wang P, Velazquez H, Yao X, Li Y, et al. Renalase is a novel, soluble monoamine oxidase that regulates cardiac function and blood pressure. The Journal of clinical investigation. 2005;115(5):1275-80.

49.          Li G, Xu J, Wang P, Velazquez H, Li Y, Wu Y, et al. Catecholamines regulate the activity, secretion, and synthesis of renalase. Circulation. 2008;117(10):1277-82.

50.          Fedchenko V, Globa A, Buneeva O, Medvedev A. Renalase mRNA levels in the brain, heart, and kidneys of spontaneously hypertensive rats with moderate and high hypertension. Medical science monitor basic research. 2013;19:267.

51.          Desir GV, Peixoto AJ. Renalase in hypertension and kidney disease. Nephrology Dialysis Transplantation. 2013:gft083.

52.          Quelhas-Santos J. Is renalase a new regulator of renal dopaminergic activity? Portuguese Journal of Nephrology & Hypertension. 2014;28(1):31-9.

53.          Fava C, Montagnana M, Danese E, Sjögren M, Almgren P, Engström G, et al. The Renalase Asp37Glu polymorphism is not associated with hypertension and cardiovascular events in an urban-based prospective cohort: the Malmö Diet and cancer study. BMC Med Genet. 2012;13(1):1.

54.          Buraczynska M, Zukowski P, Buraczynska K, Mozul S, Ksiazek A. Renalase gene polymorphisms in patients with type 2 diabetes, hypertension and stroke. Neuromolecular Med. 2011;13(4):321-7.

55.          Zhao Q, Fan Z, He J, Chen S, Li H, Zhang P, et al. Renalase gene is a novel susceptibility gene for essential hypertension: a two-stage association study in northern Han Chinese population. J Mol Med. 2007;85(8):877-85.

56.          Stec A, Semczuk A, Furmaga J, Ksiazek A, Buraczynska M. Polymorphism of the renalase gene in end-stage renal disease patients affected by hypertension. Nephrology Dialysis Transplantation. 2012;27(11):4162-6.

57.          Elsetohy KA, Al-Ghussein MA, Sabry D, Nada AM, Eldaly AA, Wahba AH. Are renalase rs2576178 and rs10887800 polymorphisms associated with pregnancy induced hypertension? mother and child. 2014;2:3.

58.          Bagci B, Karakus S, Bagci G, Sancakdar E. Renalase gene polymorphism is associated with increased blood pressure in preeclampsia. Pregnancy Hypertension: An International Journal of Women's Cardiovascular Health. 2016;6(2):115-20.

در مطالعه حاضر ما به بررسی اثر احتمالی چند تغییر ژنتیکی بر احتمال ابتلا به پره اکلامپسی می پردازیم

ازکلیه افرادی که در مطالعه وارد شده اند 2 میلی لیتر خون در لوله های حاوی  جمع آوری میگردد

از نقش احتمالی تغییرات ژنتیکی بر بروز بیماری مطلع میشویم

کلیه  هزینه های طرح  به عهده مجری یا مجریان طرح خواهد بود و بیمار هزینه ای را پرداخت نخواهد کرد.

کلیه  هزینه های طرح  به عهده مجری یا مجریان طرح خواهد بود و بیمار هزینه ای را پرداخت نخواهد کرد.

نتایج آزمایشها و روشهای به کار رفته به اطلاع بیمار خواهد رسید و این نتایج بصورت کاملاً محرمانه و صرفاً جهت مقاصد پژوهش به کار خواهد رفت و هویت بیماری وی در چارچوب قانون و جامعه و خانواده محرمانه خواهد ماند.

مریم مرادی

شرکت من در مطالعه کاملاً اختیاری است و آزاد خواهم بود که از شرکت در مطالعه امتناع نموده یا هر زمان  که مایل بودم بدون آنکه تغییری در نحوه رفتار پزشک درمانگر یا نحوه درمان و مراقبت از بیماری اینجانب ایجاد شود از پژوهش مذکور خارج شوم.

با توجه به اطلاعات موجود در این فرم و توضیحات حضوری مجری یا همکاران طرح موافقت خود را با شرکت در این مطالعه اعلان می نمایم. یک نسخه از این فرم به من داده شده و فرصت خواندن آن را داشته ام.