اثر میریسیترین بر پارامتر های اسپرم و سطح سرمی هورمون های جنسی در موش صحرایی نر تحت استرس بی حرکتی

دستگاه تناسلی نر تولید اسپرم و تولید هورمون جنسی مردانه را بر عهده دارد  .و  این  دستگاه شامل غدد تناسلی و مجاری تناسلی  می باشد . غدد تناسلی شامل بیضه , وزیکول سمینال و پروستات است .  مجاری تناسلی شامل مجاری دفران و مجرای اپیدیدیم می باشد . بیضه تولید گامت نر و تستوسترون را بر عهده دارد(1).

مراحل تولید اسپرم و مراحل سنتز هورمون جنسی مردانه تحت کنترل هورمون های محور هیپوتالاموس –هیپوفیز –بیضه می باشد(1).

ناباروری نقص در باردارشدنبه مدت یک سال  یا بیشتراست  علی رغم رابطه جنسی حفاظت نشده (2).

ناباروری مشکل رایج بالینی است و 25-15 درصد  از زوج ها  در سرتاسر جهان از این مشکل رنج می برند (3)

 علل شایع  ناباروری : اختلالات ژنتیکی , عفونت دستگاه تناسلی ,مواد سمی ,آفت کش ها , تشعشعات , مصرف الکل و سیگار گزارش شده است(4, 5). باروری مردان بستگی به تولید کافی اسپرماتوزوآ  دارد تولید اسپرم تحت تاثیر  استرسورهای مختلف از جمله گرما ,  میکروارگانیسم ها و فلزات سنگین می باشد  (6).

گزارشات تجربی نشان می دهد  که  استرس حاد (7)و  مزمن (8)هر دو قادر به ایجاد اختلال در تولید مثل جنس نر هستند (9)

استرس باعث  افزایش کورتیکوستروئیدهای غده فوق کلیه(آدرنال) می گردد (9) .ضمن اینکه شواهد تجربی نشان می دهد  که استرس مزمن باعث سرکوب تستوسترون ؛ میل جنسی و اسپرماتوژنزیزمی شود(10).

 استرس باعث کاهش حرکت اسپرم (7)کاهش در تعداد اسپرم (11)و کاهش باروری مردان می شود(12).

شواهد تجربی نشان داده است که استرس باعث تغییر فعالیت مردانه از طریق اثر بر اعصاب  پاراسمپاتیک  (واگ) ناحیه  ساکرال می گردد  (13).

گزارشات نشان داده است که در زمان بروز استرس مغز توجه خود را به عامل تهدید کننده معطوف  می کند  .برون ده قلبی , ریتم  تنفس افزایش یافته و جریان خون بیشتری   به سمت مغز,عضلات و قلب شیفت پیدا می کند 14) .

هم چنین گزارش شده است که استرس فعالیت کولینرژیک و ترشح  استیل کولین را افزایش می دهد (15).

به علاوه  عوامل استرس زای مزمن  ,ایمنی سلولی و هومورال را مهار می کنند(16) .

گزارشات تجربی نشان داده است که استرس بی حرکتی محور هیپوتالاموس –هیپوفیز –آدرنال و سیستم قلبی عروقی را تحت تاثیر قرار می دهد  (17).

شواهد تجربی در انسان و حیوانات نشان داده است  که استرس ,رشد  و گسترش  تومورها(18, 19)بیماری های اتوایمیون  (20) و عفونی را  افزایش می دهد(21, 22).

گزارش شده است که موش های صحرایی که روزانه تحت استرس بی حرکتی  به مدت 3 روز متوالی قرارگرفته بودند  ,دچار کاهش وزن شدند (23).

 مینگوتی و همکاران( Mingoti et al .2003 )در سال 2003  با آزمایشی که بر روی موش های صحرایی  انجام دادند گزارش کردند که استرس شنای اجباری روزانه به مدت  3 دقیقه و  به مدت 15 روز  موجب کاهش اسپرماتید های بالغ گردید هر چند  باروری به طور کامل قطع نشد (24).

در آزمایش دیگری  که نیروپاما و همکارانش در سال 2012 (Nirupama et al .2012 ) انجام دادند , کزارش کردند  که در موش های صحرایی که درمعرض 1 ساعت بی تحرکی واسترس شنای مزمن به مدت   15دقیقه و  60 روزمتوالی  قرارداشتند , فقدان سلول های ژرمینال ,  اسپرماتوگونی , اسپرماتوسیت اولیه و اسپرماتید مشاهده شد (25) .

 آلمیدا و همکاران در سال 1998 (َAlmeida et al .1998 ) گزارش کردند  که  موش های صحرایی را  که به طور مزمن در معرض استرس بی تحرکی 6 ساعته به مدت 60 روزمتوالی  قرار دادند  ,تعداد اسپرماتیدها و سلول های سرتولی بالغ  در آنها کاهش یافت (26) .

شواهد تجربی نشان داده است که استرس اکسیداتیو مزمن با افزایش تولید ROS و پراکسیداسیون لیپیدها موجب تغییراتی در تعداد اسپرماتوزو ئید می گردد (27).

گارسیا دیاز و همکاران در سال 2015(Garsia Diaz et al 2015 )و جورز روجاس و همکاران در سال 2015(Juarez Rojas et al 2015 )نشان دادند  که استرس اکسیداتیو با افزایش فعالیت سطح سرمی کورتیکوسترون و کاهش سطح سرمی تستوسترون رابطه مستقیم دارند (27, 28) .

شواهد تجربی نشان داده است که استرس مزمن بر محور هیپوتالاموس –هیپوفیز-بیضه اثر کرده و موجب کاهش تعداد اسپرم می شود(29).

 (30) .

استرس باعث کاهش تعداد اسپرم ها (31) وکاهش وزن بیضه ها (32) میشود.

میریسیترین یک فلاوونوئید گلیکوزیله گیاهی است که به وفور در میوه ,شاخه  , پوست و برگ گیاه میریکا سریفرا وجود دارد و  به عنوان مکمل غذایی نیز تجویز می شود گزارشات  نشان داده است که  میریسیترین خصوصیت ضد دردی (33) ضد التهابی (34) آنتی اکسیدانی (35)و محافظ سیستم عصبی (36)دارد .

مطالعات تجربی نشان داده است که مواد موجود در فلاوونوئیدها از جمله میریسیترین  دارای اثرات آندروژنیک بوده و تعداد اسپرماتوزوئید هارا افزایش می دهد (37).

سان و همکاران در مطالعه  (Sun et al 2013)  سال 2013 خود و کویین و همکاران در مطالعه   سال 2015 (Qin et al 2015) خود  گزارش کردند که میریسیترین از آسیب سلولی در برابر آپپتوز و استرس اکسیداتیو القا شده جلوگیری می کند (38, 39) .

باتوجه به اثرات ضداسترسی میریسیترین  که در بالا آمده است , هدف از این مطالعه بررسی اثر میریسیترین بر پارامترهای اسپرم و هورمون های جنسی در موش های صحرایی نر تحت استرس بی حرکتی می باشد .

1. میانگین تعداد اسپرم ها در گروه های مورد مطالعه تفاوت معنادار وجود دارد.
2. میانگین سرعت حرکت اسپرم ها در گروه های مورد مطالعه تفاوت معنادار وجود دارد.
3.  میانگین سطح سرمی تستوسترون در گروه های مورد مطالعه تفاوت معنادار وجود دارد.
4.  میانگین سطح سرمی LH در گروه های مورد مطالعه تفاوت معنادار وجود دارد.
5.  میانگین سطح سرمی FSH در گروه های مورد مطالعه تفاوت معنادار وجود دارد.
6. میانگین نسبت وزن بیضه به 100 گرم وزن بدن در گروه های مورد مطالعه تفاوت معنادار وجود دارد.
7.  میانگین نسبت وزن مجرای دفران به 100 گرم وزن بدن در گروه های مورد مطالعه تفاوت معنادار وجود دارد.
8. میانگین نسبت وزن اپیدیدیم به100 گرم وزن بدن در گروه های مورد مطالعه تفاوت معنا دار وجود دارد.

9. میانگین نسبت درصد اسپرم های نرمال به غیرنرمال در گروه های مورد مطالعه تفاوت معنادار وجود دارد.

بررسی اثر میریسیترین بر پارامترهای اسپرم وسطح سرمی هورمون های جنسی در موش های صحرایی نر تحت استرس بی حرکتی

1. تعیین و مقایسه تعداد اسپرم ها در گروه های مورد مطالعه
2. تعیین و مقایسه حرکت اسپرم ها در گروه های مورد مطالعه
3. تعیین ومقایسه سطح سرمی تستوسترون در گروه های مورد مطالعه
4. تعیین و مقایسه سطح سرمی LH در گروه های مورد مطالعه
5. تعیین و مقایسه سطح سرمی FSH در گروه های مورد مطالعه
6. تعیین و مقایسه نسبت وزن بیضه به 100 گرم وزن بدن در گروه های مورد مطالعه
7. تعیین و مقایسه نسبت وزن مجرای دفران به 100 گرم وزن بدن در گروه های مورد مطالعه
8. تعیین و مقایسه نسبت وزن اپیدیدیم به 100 گرم وزن بدن در گروه های مورد مطالعه

9.تعیین و مقایسه نسبت درصد اسپرم های نرمال به غیر نرمال در گروه های مورد مطالعه

مراکز تحقیقاتی و دانشگاه ها

تستوسترون : یک هورمون استروئیدی است که دارای یک هسته کلسترول در مرکز و گروه های هیدروکسیل قطبی در اطراف بوده و سنتز بیولوژیک آن توسط سلول های بیًضه و غده آدرنال می باشد (29).

LH :یک هورمون گلیکوپروتئینی با دو زیر واحد آلفا(89 اسید امینه)و بتا(115 )اسید امینه می باشد و از طریق پیامبر ثانویه cAMP اثرات درون سلولی خود را القا می کند و نقش اساسی در تولید استروئید های تخمدان دارد (1, 30).

FSH : هورمون محرکه فولیکولی یکی از دو گنادوتروپین هیپوفیزی می باشدهترو دایمری بادو زنجیره آلفا وبتا بوده و چندین زیرواحد الیگوساکارید هتروژنی دارد که در فعالیت های بیولوژیکی آن اهمیت ویژه ای دارند (31) .

میریسیترین : یک فلاوونوئید گلیکوزیله گیاهی بوده که در برگ گیاه میریکا سریفرا وجود دارد و ساختار شیمیایی (3-4-5-7-5 هیدروکسی فلاوونL –α-o-3 رامنوزید )دارد(32-34) .و در گرو تست ( E ) میریسیترین با دوز 2.5 میلی گرم بر کیلو گرم به صورت داخل صفاقی به مدت 7 روز یک روز در میان تزریق خواهد شد(46 )

تجربی

: جمعیت موردمطالعه موش صحرایی نر سالم نژادwistar موجود که در مرکز حیوانات آزمایشگاهی دانشگاه علوم پزشکی زاهدان نگهداری می شوند

تعدادحیوانات مورد مطالعه 50 سر موش صحرایی نر بالغ نژاد wistar با وزن 270-220 می باشند که پس از توزین در قفس جداگانه نگه داری می شوند و سپس به صورت تصادفی به 5 گروه(n=10 ) تقسیم می شوند(25) .

معیارهای ورودبه مطالعه انجام می شود و قرارگیری در گروه ها به صورت تصادفی انجام خواهد شد

این مطالعه بر روی 50 سر موش صحرایی نر نژاد ویستار در محدوده وزنی 270-220 گرم انجام خواهد شد حیوانات مورد بررسی پس از توزین (وزن اولیه )به 5 گروه مساوی (n = 10)تقسیم خواهند شد ودرهر قفس 3-2 موش صحرایی نگه داری خواهند شد اتاق نگه داری حیوانات مورد بررسی دارای سیکل( 12 :12 )روشنایی- تاریکی می باشد ودمای اتاق( 24 ± 1 C°)بوده وحیوانات دسترسی آزاد به آب وغذاخواهند داشت (14)روش انجام کار به تایید کمیته اخلاق دانشگاه علوم پزشکی زاهدان خواهد رسید.

روش ایجاد استرس :

موش های صحرایی تحت استرس بی حرکتی در یک Restrainer قرار گرفته به مدت 60 دقیقه در طی 60 روز قرار خواهند گرفت (35)

گروه های مورد مطالعه :

1. گروه کنترل(A)که دست نخورده(بدون استرس و تزیق )باقی می مانند.
2. گروه vehicle (B ) که فقط حلال میریسیترین را به مدت 7 روز به صورت  یک روز در میان داخل صفاقی دریافت می کنند.
3. گروه تست(C)که فقط به مدت 60 روز هربار به مدت min60 تحت استرس بی حرکتی قرار می گیرند.
4. گروه تست(D)که مطابق روش گروه Cدر معرض استرس بی تحرکی قرار گرفتندو علاوه بر آن حلال میریسیترین را به مدت 7 روز به صورت  یک روز در میان داخل صفاقی دریافت می کنند .
5. گروه تست(E)که حیوانات مطابق روش گروهC در معرض استرس بی تحرکی قرار می گیرندو علاوه برآن میریسیترین را با دوز ( 2.5 mg / kg ) به صورت داخل صفاقی به مدت 7 روز یک روز در میان دریافت می کنند.

نحوه تجویز میریسیترین :

میریسیترین با دوز( 2.5 mg/ kg ) به صورت داخل صفاقی ( ip ) به مدت 7 روز به صورت یک روز در میان تزریق می شود (36)

پس از پایان دوره تزریق و استرس بی حرکتی حیوانات مجددابا ترازو توزین شده و پس از بیهوشی کامل باکلرال هیدرات (350 mg/kg ) (37) و عدم پاسخ گویی به رفلکس های درد خونگیری از ورید گردنی انجام می شود .سرم گیری با دستگاه سانتریفوژ انجام می شود سرم جدا شده در فریزر در دمای 70- درجه سانتی گراد نکهداری می شود .

هورمون های تستوسترون و LH و FSH با استفاده از کیت های اختصاصی رت به روش الیزا اندازه گیری می شوند .

روش برداشتن اندام های تناسلی :

پس ازاتمام خونگیری شکاف مناسبی در ناحیه اینگوئینال دو طرف حیوان ایجاد می شود اجزای دستگاه تناسلی(بیضه و مجاری اپیدیدیم و دفران راست و چپ ) مشخص و در دسترس قرارگرفته و به ترتیب اندام ها جداو با ترازوی توزین می شوند و سپس به محیط مورد نظر برای انجام مراحل بعدی انتقال می یابندابتدا مجاری دفران راست و چپ از محفظه شکم خارج می شوند دواندام اول بعد از وزن کردن با ترازو هر کدام در یک پتری حفاظت شده حاوی یک میلی لیتر سرم فیزیولوژی که از قبل تهیه می شود قرار می گیرند (38).

شمارش اسپرماتوزوئید در مجرای دفران :

هر مجرای دفران خارج شده را در سرم فیزیولوژی بااستفاده از تیغ بیسوری به طور کامل ریز نموده و سوسپانسون هموژنیزه تهیه میشود سپس مقدارمعینی سرم فیزیولوژی به سوسپانسیون اضافه می شودتا رقت مناسب را پیدا و اسپرماتوزوئید توسط میکروسکوپ قابل شمارش شود یک قطره از این سوسپانسون راروی لام قرار می دهیم(39) .

شمارش اسپرماتوزوئید در مجرای اپیدیدیم :

مجرای اپیدیدیم راست و چپ پس از خروج از محفظه شکم حیوان وزن و به داخل یک میلی لیتر سرم فیزیولوژی(جهت پیشگیری از خشک شدن )منتقل می شود پس از آن هر مجرای اپیدیدیم به دو قسمت تقسیم و هر بخش به داخل یک پتری با حجم معیین سرم فیزیولوژی منتقل می شود پس از آن عمل ریز کردن هر بخش به دقت و مشابه مجرای دفران انجام می شود تا سوسپانسیون حاصل رقت مناسب را کسب کند(40, 41).

میکروسکوپ فاز کنتراست و سیستم آنالیز اسپرم (C.A.S.A ) :

لام مورد نظرزیر میکروسکوپ فاز کنتراست قرار گرفته (42)و تصویر فیلدها توسط یک دوربین ضبط شده وبه کامپیوتر منتقل می شود و توسط نرم افزارآنالیزگر پیچیده ای به نام C.A.S.A ( Computer Aided Sperm Analysis) مطابق دستورالعمل سازمان بهداشت جهانی پارامترهای اسپرم از قبیل حجم و شمارش و حرکت اسپرم ها و ویژگی های حرکت اسپرم ها( VCL .VAP .VSL .STR .LIN .ALH .BCF ) رزیابی می شود (42, 43).

VCL : velocity of curved line

VAP :velocity of average path

VSL :velocity of straight line

STR :straightness_ VSL / VAP ×100

LIN :linearity _ VSL /VCL × 100

ALH :laterai amplitude

BCF :beat frequency

با توجه به مقادیری که سازمان بهداشت جهانی در سال 2010 تعیین نموده اسپرم ها را در 3 کلاس حرکتیPR . NP .IM طبقه بندی می کند :

کلاس PR :اسپرم ها با حرکت رو به جلو ( Progressive )

کلاس NP :اسپرم های دارای حرکت اما نه حرکت رو به جلو progressive ) Non (

کلاس IM : اسپرم های بدون حرکت یا با حرکت درجا( Non motile )

Round cell :سایر اجزاء غیر از اسپرم غالبا WBC

اطلاعات به دست آمده با نرم افزار SPSS و تست های آماری ANOVA و توکی آنالیز می گرددنتایج به دست آمده به صورت MEAN ± SD بیان و اختلافات آماری با P< % 0.05 معنی دار تلقی می گردد .

4

طبق چک لیست و پروتوکل کار با حیوانات آزمایشگاهی طرح انجام می شود

خرید کیت انداز ه گیری هورمون ها و تامین منابع مالی و سعی بر آن شده تا با شرکت هایی رایزنی شود تا در اسرع وقت کیت را خریداری و تحویل دهند و هم چنین پرداخت به موقع منابع مالی توسط دانشگاه

Myricitrin .Stress . sex hormons

1. Hall JE. Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology E-Book: Elsevier Health Sciences; 2015.
2. Gurunath S, Pandian Z, Anderson RA, Bhattacharya S. Defining infertility—a systematic review of prevalence studies. Human Reproduction Update. 2011;17(5):575-88.
3. Cebesoy FB, Kutlar I, Dikensoy E, Yazicioglu C, Kalayci H. Morgagni hydatids: a new factor in infertility? Archives of gynecology and obstetrics. 2010;281(6):1015-7.
4. Ghahremani F, Ghaem H. A case-control study of risk factors in male infertility. Article in Persian] J GorganUniv Med Sci. 2005;7(2):42-5.
5. Koskimies A, Savander M, Ann-Marie N, Kurunmäki H. Sperm DNA damage and male infertility. Duodecim; laaketieteellinen aikakauskirja. 2009;126(24):2837-42.
6. O'donnell L, McLachlan R, Wreford N, Robertson D. Testosterone promotes the conversion of round spermatids between stages VII and VIII of the rat spermatogenic cycle. Endocrinology. 1994;135(6):2608-14.
7. Fukuda M, Fukuda K, Shimizu T, Yomura W, Shimizu S. Kobe earthquake and reduced sperm motility. Human reproduction. 1996;11(6):1244-6.
8. Sheiner EK, Sheiner E, Hammel RD, Potashnik G, Carel R. Effect of occupational exposures on male fertility: literature review. Industrial health. 2003;41(2):55-62.
9. Nicolaides NC, Kyratzi E, Lamprokostopoulou A, Chrousos GP, Charmandari E. Stress, the stress system and the role of glucocorticoids. Neuroimmunomodulation. 2015;22(1-2):6-1
10. Retana-Márquez S, Vigueras-Villaseñor R, Juárez-Rojas L, Aragón-Martínez A, Torres GR. Sexual behavior attenuates the effects of chronic stress in body weight, testes, sexual accessory glands, and plasma testosterone in male rats. Hormones and behavior. 2014;66(5):766-78.
11. Collodel G, Moretti E, Fontani V, Rinaldi S, Aravagli L, Saragò G, et al. Effect of emotional stress on sperm quality. Indian Journal of Medical Research. 2008;128(3):254.
12. Hjollund NHI, Bonde JPE, Henriksen TB, Giwercman A, Olsen J, Team DFPPS. Reproductive effects of male psychologic stress. Epidemiology. 2004;15(1):21-7.
13. GP HEGpc. neuroendocrinology of stress. endocrinol metab clin north Am. 2001;30:695-728.
14. Chrousos GP, Gold PW. The concepts of stress and stress system disorders: overview of physical and behavioral homeostasis. Jama. 1992;267(9):1244-52.
15. Kaufer D, Friedman A, Seidman S, Soreq H. Acute stress facilitates long-lasting changes in cholinergic gene expression. Nature. 1998;393(6683):373-7.
16. EG sGIGB. psychoneuroimmonology and HIV. AIDS Ann N Y Acad SCI. 2000;917:500-4.
17. .A.L.Basbaum BKYMAP. persistent cardiovascular and bihavioral nociceptive response to subcutanouse formalin require peripheral nerve input. J Neurosci 1995;15(11):7575-84.
18. .L t. personality coping style emotion and cancer towards an integrative model. canser surv. 1987;6:545-67.
19. Anisman SLSaH. stress and coping factors influence tumor growth sience. 1979;205:513-5.
20. .Cusnecov sNaAW. differential immunr reactivity to stress in Balb /Cby and C57bl/bj mice. Physiol Behav. 1998;65:95-103.
21. Kastin OGARDOALVA. Endogenouse Opiates. peptides. 1997;19(1791-1843).
22. .A.Konstantinus sJFCDJJXc. stress induced neuroendocrine modulation of viral and pathogenesis and immunity. Ann N Y Acad SCI. 1998;840:803-8.
23. .redmann HRBZJSM. over expression of augoti protein and stress responsiveness hn mice. physiol Behav. 2001;73(4):599-608.
24. Mingoti GZ, Pereira R, Monteiro CMR. Fertility of male adult rats submitted to forced swimming stress. Brazilian journal of medical and biological research. 2003;36(5):677-82.
25. Nirupama M, Devaki M, Nirupama R, Yajurvedi H. Chronic intermittent stress-induced alterations in the spermatogenesis and antioxidant status of the testis are irreversible in albino rat. Journal of physiology and biochemistry. 2013;69(1):59-68.
26. Almeida S, Petenusci S, Anselmo-Franci J, Rosa-e-Silva A, Lamano-Carvalho T. Decreased spermatogenic and androgenic testicular functions in adult rats submitted to immobilization-induced stress from prepuberty. Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 1998;31(11):1443-8.
27. García-Díaz EC, Gómez-Quiroz LE, Arenas-Ríos E, Aragón-Martínez A, Ibarra-Arias JA, Retana-Márquez MdSI. Oxidative status in testis and epididymal sperm parameters after acute and chronic stress by cold-water immersion in the adult rat. Systems biology in reproductive medicine. 2015;61(3):150-60.
28. Juárez-Rojas AL, García-Lorenzana M, Aragón-Martínez A, Gómez-Quiroz LE, del Socorro Retana-Márquez M. Intrinsic and extrinsic apoptotic pathways are involved in rat testis by cold water immersion-induced acute and chronic stress. Systems biology in reproductive medicine. 2015;61(4):211-21.
29. Rivier C, Rivest S. Effect of stress on the activity of the hypothalamic-pituitary-gonadal axis: peripheral and central mechanisms. Biology of reproduction. 1991;45(4):523-32.
30. Collu R. Effects of stress on the gonadal function. Endocrinol Invest. 1984;7:529-37.
31. Pook M, Tuschen‐Caffier B, Krause W. Is infertility a risk factor for impaired male fertility? Human Reproduction. 2004;19(4):954-9.
32. Marin MT, Cruz FC, Planeta CS. Chronic restraint or variable stresses differently affect the behavior, corticosterone secretion and body weight in rats. Physiology & behavior. 2007;90(1):29-35.
33. Meotti FC, Missau FC, Ferreira J, Pizzolatti MG, Mizuzaki C, Nogueira CW, et al. Anti-allodynic property of flavonoid myricitrin in models of persistent inflammatory and neuropathic pain in mice. biochemical pharmacology. 2006;72(12):1707-13.
34. Tong Y, Zhou X-M, Wang S-J, Yang Y, Cao Y-L. Analgesic activity of myricetin isolated from Myrica rubra Sieb. et Zucc. leaves. Archives of pharmacal research. 2009;32(4):527-33.
35. Moser BR. Efficacy of myricetin as an antioxidant in methyl esters of soybean oil. European journal of lipid science and technology. 2008;110(12):1167-74.
36. Wang Y-H, Xuan Z-H, Tian S, He G-R, Du G-H. Myricitrin attenuates 6-hydroxydopamine-induced mitochondrial damage and apoptosis in PC12 cells via inhibition of mitochondrial oxidation. Journal of Functional Foods. 2013;5(1):337-45.
37. Chauhan NS, Sharma V, Dixit V. Effect of Asteracantha longifolia seeds on the sexual behaviour of male rats. Natural product research. 2011;25(15):1423-31.
38. Qin M, Luo Y, Meng X-b, Wang M, Wang H-w, Song S-y, et al. Myricitrin attenuates endothelial cell apoptosis to prevent atherosclerosis: An insight into PI3K/Akt activation and STAT3 signaling pathways. Vascular pharmacology. 2015;70:23-34.
39. Sun G-b, Qin M, Ye J-x, Meng X-b, Wang M, Luo Y, et al. Inhibitory effects of myricitrin on oxidative stress-induced endothelial damage and early atherosclerosis in ApoE−/− mice. Toxicology and applied pharmacology. 2013;271(1):114-26.
40. Hotchkiss AK, Ankley GT, Wilson VS, Hartig PC, Durhan EJ, Jensen KM, et al. Of mice and men (and mosquitofish): antiandrogens and androgens in the environment. BioScience. 2008;58(11):1037-50.
41. Lévy DP, Navarro JM, Schattman GL, Davis OK, Rosenwaks Z. The role of LH in ovarian stimulation Exogenous LH: let's design the future. Human Reproduction. 2000;15(11):2258-65.
42. Ulloa-Aguirre A, Timossi C. Structure-function relationship of follicle-stimulating hormone and its receptor. Human reproduction update. 1998;4(3):260-83.
43. Paul B, Rao GS, Kapadia GJ. Isolation of myricadiol, myricitrin, taraxerol, and taraxerone from Myrica cerifera L. root bark. Journal of pharmaceutical sciences. 1974;63(6):958-9.
44. MATSUDA H, HIGASHINO M, Weizhong C, IINUMA M, Michinori K. Studies of cuticle drugs from natural sources. III. Inhibitory effect of Myrica rubra on melanin biosynthesis. Biological and Pharmaceutical Bulletin. 1995;18(8):1148-50.
45. Meotti FC, Luiz AP, Pizzolatti MG, Kassuya CnA, Calixto JB, Santos AR. Analysis of the antinociceptive effect of the flavonoid myricitrin: evidence for a role of the L-arginine-nitric oxide and protein kinase C pathways. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2006;316(2):789-96.
46. Sun J, Sun G, Cui X, Meng X, Qin M, Sun X. Myricitrin Protects against Doxorubicin-Induced Cardiotoxicity by Counteracting Oxidative Stress and Inhibiting Mitochondrial Apoptosis via ERK/P53 Pathway. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2016;2016.
47. Kiasalari Z, Khalili M, Shafiee S, Roghani M. The effect of Vitamin E on learning and memory deficits in intrahippocampal kainate-induced temporal lobe epilepsy in rats. Indian journal of pharmacology. 2016;48(1):11.
48. Linder RE, Klinefelter GR, Strader LF, Suarez JD, Dyers CJ. Acute spermatogenic effects of bromoacetic acids. Fundamental and applied toxicology. 1994;22(3):422-30.
49. Yamamoto M, Miyake K. Effects of alpha-blocker on sperm concentration, motility, intraluminal pressure and fluid movement in the rat cauda epididymis. The Journal of urology. 1995;154(2):606-10.
50. Pant N, Srivastava S, Prasad A, Shankar R, Srivastava S. Effects of carbaryl on the rat's male reproductive system. Veterinary and human toxicology. 1995;37(5):421-5.
51. Sinha N, Narayan R, Shanker R, Saxena D. Endosulfan-induced biochemical changes in the testis of rats. Veterinary and human toxicology. 1995;37(6):547-9.
52. Liu S-W, Li Y, Zou L-L, Guan Y-T, Peng S, Zheng L-X, et al. Chloride channels are involved in sperm motility and are downregulated in spermatozoa from patients with asthenozoospermia. Asian journal of andrology. 2016.
53. Jorsaraei SGA, Shibahara H. The in-vitro effects of nicotine, cotinine and leptin on sperm parameters analyzed by CASA system. International Journal of Reproductive BioMedicine. 2008;6(3):157-65.

ندارد