بررسی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی و فراوانی ژن های(AdeABC )پمپ های افلاکس خانواده RND درجدایه های اسینتوباکتربومانی جداشده از بیماران بیمارستان های آموزشی شهر زاهدان

بیمارستان ها

آسینتوباکتر(Acinetobacter) کوکوباسیل گرم منفی و هوازی است که می تواند برای مدتی طولانی در محیط وتجهیزات مراقبت بهداشتی زنده بماند(1) . جنس اسینتوباکتر حاوی بیش از 32 گونه مختلف است واسینتوباکتر بومانی گونه غالب میباشد (2)که عامل بیماری های مختلفی از قبیل پنومونی ،سپتی سمی ،عفونت های دستگاه ادراری ، عفونت های پوستی و زخم ،مننژیت و اندوکاردیت میباشد (3, 4) . اسینتوباکتر بومانی یک پاتوژن فرصت طلب در حال گسترش است که گروههای مختلفی از مردم ،به ویژه بیماران بستری در بخش مراقبت های ویژه([1]ICU) را تحت تاثیر قرار میدهد . ریسک فاکتور های متعدد مستعد کننده عفونت با این باکتری شامل : بستری طولانی مدت در بیمارستان ، نقص ایمنی ،اعمال جراحی ،تماس طولانی مدت با بیماران کلونیزه شده،سوختگی ، کهولت سن، مصرف عوامل آنتی باکتریال وسیع الطیف و وجود عوامل تهاجمی مثل کاتتر میباشند(5).یکی از مشکلات ایجاد شده توسط اسینتوباکتر بومانی بروز مقاومت آنتی بیوتیکی می باشد که مشکلات زیادی را در درمان و بهبود بیماران ایجاد میکند (6).مقاومت آنتی بیوتیکی اسینتوباکتر بومانی به واسطه مکانیسم های اکتسابی و ذاتی است که این مکانیسم ها شامل : موتاسیون در ژن های هدف ،تغییر نفوذپذیری غشای خارجی و افزایش بیان پمپ های افلاکس میباشد .(7, 8)شیوع سریع مقاومت گونه های آسینتوباکتربومانی به همه ی بتالاکتام ها از جمله کارباپنم ها، نشان دهنده پتانسیل این ارگانیسم برای پاسخ سریع به تغییر فشار محیط می باشد.(9) آسینتوباکتربومانی می تواند از طریق جهش در ژن های gyrA و parC نسبت به کینولون ها و با بیان آنزیم های تغییردهنده آمینوگلیکوزید در برابر آمینوگلیکوزیدها مقاوم شود.(10)

یکی از رویدادهای ژنتیکی منحصربه فرد که موجب مقاومت چنددارویی [2](MDR) می شود بیان بیش ازحد یک سیستم خروجی به نام افلاکس (efflux) است.(11) بیان بیش ازحد سیستم افلاکس چنددارویی با دفع و بیرون کردن طیف گسترده ای از داروها باعث کاهش تجمع آنتی بیوتیک شده و یک سیستم کارآمد برای مقاومت در برابر داروها می باشد.(12)سیستم های افلاکس به عنوان یکی از مهمترین مکانیسم های مقاومت ذاتی و اکتسابی در باکتری ها به حساب آمده و توانایی دفع مواد سمی مانند آنتی بیوتیکها ، داروها ،مواد شیمیایی و همچنین ترشح فراورده های سلولی را به خارج از سلول دارند . پمپ های افلاکس مانع از ایجاد غلظت مناسبی از مواد سمی برای مهار باکتری ها شده و به عنوان مکانیسم دفاعی علیه مواد مضر محیط سبب بقای باکتری در محیط های مختلف میشود (13, 14)

پمپ های افلاکس باکتریایی بر اساس تعداد واحدهای تشکیل دهنده ، منبع انرژی استفاده شده پمپ و نوع ملکول هایی که دفع میکنند به 6 خانواده تقسیم میشوند :[3]ABC ،MFS [4]،[5]MATE ،SMR [6]،[7]RND ،[8]DMT (15)که از بین آنها پمپ های خانواده RND و MATE وMFS در اسینتوباکتربومانی میباشند (16) .پمپ های افلاکس خانواده RND با توجه به ساختار با بقیه متفاوت بوده و فقط در باکتری های گرم منفی یافت میشوند . دارای ناقل های بزرگ بوده و بازدهی این ناقل ها به دلیل اینکه سوبسترا را مستقیما به محیط خارج پمپ میکنند ، بیشتر از سایر ناقل ها میباشد (17).این خانواده قادر به دفع انواعی از ترکیبات از جمله مواد باردار مانند تتراسایکلین ،کینولون ها، کلرامفنیکل و بتالاکتام میباشد .ساختار افلاکس پمپ RND شامل 12 آلفاهلیکس با دو لوپ بزرگ و 900 اسید آمینه است که یک کمپلکس 3 قسمتی را با دومین های پری پلاسمی و کانال های غشای خارجی و پروتئین های پری پلاسمی تشکیل می دهد (18, 19) این کمپلکس های انتقال دهنده چندپروتئینی انواع متنوعی از مواد شامل آنتی بیوتیک ها، رنگ ها، موادشوینده و مولکول هایی از میزبان را از پری پلاسم به فضای خارج سلولی حمل میکند(20) . در آسینتوباکتر بومانی مشخص شده است که سه پمپ RND مختلف شامل AdeABC, AdeFGH وAdeIJK بسیاری از آنتی بیوتیک ها را از باکتری خارج می کنند.(21)AdeABC یکی از مهمترین سیستم های افلاکس متعلق به خانواده RND است که از3 ژن adeC (کد کننده پروتئین غشای خارجی )، ژن adeA (کد کننده پروتئین فیوژن غشا ) و ژن adeB (کدکننده پروتئین غشای داخلی ) تشکیل شده است (22, 23)این ژن ها بر روی کروموزوم باکتری و در مجاورت هم یک اپرون را میسازند (16).اپرون adeABC در حدود 80% از سویه های اسینتوباکتر بومانی وجود دارد (24, 25) و بیان بیش از حد آن منجر به کاهش حساسیت به آمینوگلیکوزید ها ، سفپیم ، فلوروکینولون ها ، کلرامفنیکل ، تتراسایکلین و تایجسیکلین میشود(26). بیان اپرون ژن های پمپ adeABC تحت کنترل سیستم دو جزئی RS است که از ژن های (تنظیم کننده پاسخ )adeR و (کیناز حسگر )adeS ساخته شده و در بالادست ژن adeA قراردارد (27)

طی مطالعه ای که در سال 2017 در لهستان انجام شد اکثر گونه های بومانی دارای مقاومت بالا (90%) به فلوروکینولون، سفتازیدیم، پیپراسیلین/تازوباکتام بودند(28).

در پاریس سال 2013 طی مطالعه ای که روی 14 ایزوله ی اسینتوباکتر بومانی انجام شد ، ژن adeB در 13 مورد تشخیص داده شد و بیان بیش از حد AdeB در 10 سویه مشاهده شد (29).

درسال2007 در هلند از 116 سویه آسینتوباکتر بومانی ، 95 سویه دارای ژن های adeA، adeB بودند و ژن AdeC تنها در 49 سویه یافت شد.در همین مطالعه 29% سویه ها حساس به تمام عوامل ضد میکروبی ، 59% مقاوم به 3 عامل ضد میکروبی یا بیشتر و 12% از سویه ها مقاوم به یک یا دو عامل ضدمیکروبی بودند(30).

در سال2009 در کانادا ، 75% از ایزوله هایی که مقاومت چند دارویی بالایی داشتند adeABC مثبت بودند (23).

طی مطالعه ای در شهر تهران سال 1396 شیوع ژن های adeAو adeB 100% و adeC 20.4% گزارش گردید (31).

در ایران در سال 1395 فراوانی ژن adeA 88.5% ، adeB 100% و adeC 93.9% گزارش گردید (32).

درمطالعه ای که سال 1393 در اراک روی 56 ایزوله اسینتو باکتر بومانی انجام شد تمامی 56 ایزوله آسینتوباکتر بومانی نسبت به آنتی بیوتیک های سفوتاکسیم، سفتازیدیم، سفوکسیتین، سفپیم، پیپراسیلین/تازوباکتام، ازترونام و سیپروفلوکساسین مقاوم بودند و ژن های adeA و adeB در 100 درصد ایزوله ها و ژن adeC در5/96 درصد ایزوله ها یافت شدند(33).

لذا با توجه به نقش بارز این پمپ در مقاومت آنتی بیوتیکی و با توجه به اینکه در ایران مطالعات کمی در این زمینه صورت گرفته و در زاهدان نیز این نوع مطالعه تاکنون انجام نشده است ، این تحقیق با هدف بررسی فراوانی ژن های کد کننده پمپ افلاکس AdeABC در ایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی جداشده از بیماران بیمارستان های آموزشی شهر زاهدان انجام میگیرد.

[2] -Multidrug resistance

بررسی فراوانی ژن های adeABC در اسینتوباکتر بومانی

1. ایزوله های بالینی آسینتوباکتربومانی نسبت به کدام آنتی بیوتیک ها مقاوم هستند؟

2.فراوانی ژن کدکننده پمپ افلاکس AdeAدرایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی چقدر است؟

3.فراوانی ژن کدکننده پمپ افلاکس AdeBدرایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی چقدر است؟

4.فراوانی ژن کدکننده پمپ افلاکس AdeCدرایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی چقدر است؟

بررسی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی و فراوانی ژن های کد کننده افلاکس AdeABC در سویه های آسینتوباکتر بومانی جداشده از بیماران بیمارستان های آموزشی شهر زاهدان

1. تعیین الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی در ایزوله های بالینی آسینتوباکتربومانی

2.تعیین فراوانی ژن کدکننده پمپ تراوشی AdeBدرایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی

3.تعیین فراوانی ژن کدکننده پمپ تراوشی AdeCدرایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی

4 .تعیین فراوانی ژن کدکننده پمپ تراوشی AdeA درایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی

دانشکده پزشکی

آسینتوباکتر بومانی:گونه ای از باکتری های گرم منفی هوازی که عموما در آزمایشگاه بالینی یافت میشود و به طور معمول به آنتی بیوتیک ها مقاومت دارد.

AdeABC :یک نوع از RND افلاکس پمپ های جدا شده از اسینتو باکتر بومانی

RND: نوعی از افلاکس پمپ هایی که باعث کسب مقاومت ذاتی باکتری به آنتی بیوتیک میشود.

توصیفی- مقطعی

ایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی جداشده از بیماران بیمارستان های آموزشی شهر زاهدان

حجم نمونه با استفاده از فرمول کوکران وبا درنظر گرفتن 0.05=α و 0.05=d از حداقل 16 و حداکثر 384 نمونه متغیر است که با توجه به محدودیت زمانی جمع آوری نمونه ، حجم نمونه را 100 در نظر میگیریم.

نمونه گیری به صورت غیراحتمالی و در دسترس صورت میگیرد.

نمونه هایی که از بیماران بستری به آزمایشگاه ارسال میشود کشت و تعیین هویت شده سپس از نظر مقاومت دارویی و وجود ژن های AdeA و AdeB و AdeC مورد بررسی قرار میگیرند.

در این مطالعه از نمونه های مختلفی که از بیماران بیمارستان های آموزشی شهر زاهدان به آزمایشگاه ارسال شده است استفاده می گردد.این نمونه ها در محیط های کشت اولیه شامل بلاد آگار و مکانکی آگار کشت داده می شوند بعد از انکوباسیون باکتری های جدا شده با استفاده از روش های استاندارد میکروب شناسی شامل رنگ آمیزی گرم ، تست اکسیداز ، کشت روی محیط TSI و SIM و OF و رشد در دمای 42 درجه سانتی گراد تعیین هویت میشوند و تست اختصاصی گونه به کمک ژن bla OXA-51 توسط واکنش PCR انجام خواهد گردید. پس از تعیین هویت به صورت کشت ذخیره در محیط کشت BHI حاوی 15% گلیسرول وارد کرده وتا زمان استخراج DNA در دمای 70- فریز میگردند.

تست های حساسیت آنتی بیوتیکی

جهت بررسی حساسیت آنتی بیوتیکی ازتست دیسک دیفیوژن آگار به روش کربی –بایر مطابق با استاندارد (CLSI)Clinical and laboratory standard institute استفاده میگردد. به طور خلاصه سوسپانسیونی از کلنی های باکتری با کدورت نیم مک فارلند تهیه و پس از آغشته کردن سواپ استریل با سوسپانسیون ، آن را به خوبی روی محیط مولر هینتون آگار پخش نموده ، پس از قرار دادن دیسک های آنتی بیوتیک روی پلیت قطر هاله عدم رشد پس از انکوباسیون در دمای 37 درجه سانتی گراد با خط کش اندازه گیری و نتایج مطابق با دستورالعمل مربوطه ثبت خواهد شد در این آزمون از سویه کنترل ATCC25922 Ecoli به عنوان کنترل کیفی استفاده خواهد شد .

آنتی بیوتیک های مورد استفاده :

این آنتی بیوتیک ها شامل : ایمی پنم ، مروپنم ، سفتازیدیم ، سفپیم ، سیپروفلوکساسین ، تری متوپریم سولفامتوکسازول ، توبرامایسین ،جنتامایسن ، آمپیسیلین ، آمپیسیلین-سولباکتام ، مانیوسیکلین ، داکسی سایکلین ، تایجی سیکلین و ریفامپین می باشند که از شرکت MAST خریداری میگردند.

MIC :به روش E-testبرای کلستین طبق توصیه CLSI انجام و تفسیر میگردد.

استخراج DNA: به روش جوشاندنboiling ) (انجام خواهد شد .

واکنش PCR : واکنش PCR جهت بررسی ژن های adeAو adeB و adeC پمپ افلاکس استفاده خواهد شد . بدین گونه که پس از بهینه سازی شرایط ، واکنش PCR صورت خواهد گرفت و محصولات روی ژل الکترفورز شده و سپس تعدادی از آنها جهت تعیین توالی به شرکت تکاپوزیست ارسال خواهد شد . از پرایمر های زیر نیز جهت تکثیر ژن های مورد نظر استفاده خواهد شد .

برای توصیف داده ها از جداول توزیع فراوانی و نرم افزار SPSS و در صورت نیاز از سایر شاخص های آماری مرتبط استفاده خواهد شد

از دفترچه راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش‌های علوم پزشکی  دارای آزمودنی انسانی  در جمهوری اسلامی ایران کد های اخلاقی شماره 1(هدف اصلی هر پژوهش‌باید ارتقای سلامت انسان‌ها توأم با رعایت کرامت و حقوق ایشان باشد)،شماره 9(در پژوهش‌های پزشکی که ممکن است به محیط زیست آسیب برسانند، باید احتیاط‌های لازم در جهت حفظ و نگهداری و عدم آسیب رسانی به محیط ریست انجام گیرد.)،شماره 10 ،شماره13 (کسب رضایت آگاهانه) ،شماره 14 (اگر در طول اجرای پژوهش تغییری در نحوه اجرای پژوهش داده شود ، باید موضوع به اطلاع کمیته‌ی اخلاق رسانده شود)،شماره 19  (عدم قبول شرکت در پژوهش، یا ادامه ندادن به همکاری، نباید هیچ‌گونه تأثیری بر خدمات درمانی که در همان مؤسسه – نظیر بیمارستان – به فرد ارائه می‌شود، داشته باشد. این موضوع باید در فرایند اخذ رضایت آگاهانه، به آزمودنی اطلاع داده شود.) ، شماره  25،شماره 28(پژوهشگران موظفند که نتایج پژوهش‌های خود را صادقانه ، دقیق، و کامل منتشر کنند. )و شماره 31 (روش پژوهش نباید با ارزش‌های احتماعی، فرهنگی و دینی  جامعه در تناقض باشد)رعایت خواهد شد.

محدودیت ها: تهیه مواد و ابزار مورد نیاز برای آزمایش

راه حل: افزایش زمان انجام طرح

آسینتوباکتر بومانی، adeABC، RND

1. Sunenshine RH, Wright M-O, Maragakis LL, Harris AD, Song X, Hebden J, et al. Multidrug-resistant Acinetobacter Infection Mortality Rate and Length of Hospitalization. Emerg Infect Dis. 2007;13(1):97-103.
2. Zarrilli R, Giannouli M, Tomasone F, Triassi M, Tsakris A. Carbapenem resistance in Acinetobacter baumannii: the molecular epidemic features of an emerging problem in health care facilities. The Journal of Infection in Developing Countries. 2009;3(05):335-41.
3. Bou G, Cerveró G, Dominguez MA, Quereda C, Martínez-Beltrán J. Characterization of a nosocomial outbreak caused by a multiresistant acinetobacter baumannii strain with a carbapenem-hydrolyzing enzyme: high-level carbapenem resistance inA. baumannii Is Not Due solely to the presence of β-lactamases. Journal of Clinical Microbiology. 2000;38(9):3299-305.
4. Gordon NC, Wareham DW. Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii: mechanisms of virulence and resistance. International journal of antimicrobial agents. 2010;35(3):219-26.
5. Fournier PE, Richet H, Weinstein RA. The epidemiology and control of Acinetobacter baumannii in health care facilities. Clinical infectious diseases. 2006;42(5):692-9.
6. Damier-Piolle L, Magnet S, Brémont S, Lambert T, Courvalin P. AdeIJK, a resistance-nodulation-cell division pump effluxing multiple antibiotics in Acinetobacter baumannii. Antimicrobial agents and chemotherapy. 2008;52(2):557-62.
7. Poirel L, Nordmann P. Carbapenem resistance in Acinetobacter baumannii: mechanisms and epidemiology. Clinical Microbiology and Infection. 2006;12(9):826-36.
8. Quale J, Bratu S, Landman D, Heddurshetti R. Molecular epidemiology and mechanisms of carbapenem resistance in Acinetobacter baumannii endemic in New York City. Clinical infectious diseases. 2003;37(2):214-20.
9. Peleg AY, Seifert H, Paterson DL. Acinetobacter baumannii: Emergence of a Successful Pathogen. Clin Microbiol Rev. 2008;21(3):538-82.
10. L. Silvia Munoz-Price MD, Robert A. Weinstein MD. Acinetobacter Infection. N Engl J Med. 2008;358:1271-81.
11. Coyne S, Courvalin P, Perichon B. Efflux-Mediated Antibiotic Resistance in Acinetobacter spp. Antimicrobial agents and chemotherapy. 2011;55(3):947-53.
12. Nikaido H. Multidrug Resistance in Bacteria. Annual Review of Biochemistry 2009;78:119-46.
13. Schneiders T, Findlay J, Amyes SG. Efflux Pumps in Acinetobacter baumannii. Acinetobacter Biology and Pathogenesis: Springer; 2008. p. 105-27.
14. Poole K. Mechanisms of bacterial biocide and antibiotic resistance. Journal of Applied Microbiology. 2002;92(s1).
15. Soto SM. Role of efflux pumps in the antibiotic resistance of bacteria embedded in a biofilm. Virulence. 2013;4(3):223-9.
16. Higgins PG, Wisplinghoff H, Stefanik D, Seifert H. Selection of topoisomerase mutations and overexpression of adeB mRNA transcripts during an outbreak of Acinetobacter baumannii. Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 2004;54(4):821-3.
17. Wieczorek P, Sacha P, Hauschild T, Zórawski M, Krawczyk M, Tryniszewska E. Multidrug resistant Acinetobacter baumannii--the role of AdeABC (RND family) efflux pump in resistance to antibiotics. Folia Histochemica et Cytobiologica. 2008;46(3):257-67.
18. Nikaido H, Takatsuka Y. Mechanisms of RND multidrug efflux pumps. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Proteins and Proteomics. 2009;1794(5):769-81.
19. Anes J, McCusker MP, Fanning S, Martins M. The ins and outs of RND efflux pumps in Escherichia coli. Frontiers in microbiology. 2015;6.
20. Blair JM, Piddock LJ. Structure, function and inhibition of RND efflux pumps in Gram-negative bacteria: an update. Current Opinion in Microbiology. 2009;12(5):512-9.
21. Fernando D, Kumar A. Growth phase-dependent expression of RND efflux pump- and outer membrane porin-encoding genes in Acinetobacter baumannii ATCC 19606. J Antimicrob Chemother. 2012;67(3):569-72.
22. Coyne S, Courvalin P, Périchon B. Efflux-mediated antibiotic resistance in Acinetobacter spp. Antimicrobial agents and chemotherapy. 2011;55(3):947-53.
23. Lin L, Ling B-D, Li X-Z. Distribution of the multidrug efflux pump genes, adeABC, adeDE and adeIJK, and class 1 integron genes in multiple-antimicrobial-resistant clinical isolates of Acinetobacter baumannii–Acinetobacter calcoaceticus complex. International journal of antimicrobial agents. 2009;33(1):27-32.
24. Zgurskaya HI, Weeks JW, Ntreh AT, Nickels LM, Wolloscheck D. Mechanism of coupling drug transport reactions located in two different membranes. Frontiers in microbiology. 2015;6.
25. Köhler T, Pechère J-C, Plesiat P. Bacterial antibiotic efflux systems of medical importance. Cellular and Molecular Life Sciences. 1999;56(9):771-8.
26. Coyne S, Guigon G, Courvalin P, Périchon B. Screening and quantification of the expression of antibiotic resistance genes in Acinetobacter baumannii with a microarray. Antimicrobial agents and chemotherapy. 2010;54(1):333-40.
27. PiotrWieczorek, Sacha P, Hauschild T, Zórawski M, Krawczyk M, Tryniszewska E. Multidrug resistant Acinetobacter baumannii – the role of AdeABC (RND family) efflux pump in resistance to antibiotics. Folia histochemica et cytobiologica. 2008;46(3):257-67.
28. Grochowalska A, Kozioł-Montewka M, Sobieszczańska A. Analysis of Acinetobacter baumannii resistance patterns in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) in terms of choice of effective empiric antibiotic therapy. Ann Agric Environ Med. 2017;24(2):307-11.
29. Yoon E-J, Courvalin P, Grillot-Courvalin C. Mutations AdeABC Overexpression and AdeRS Acinetobacter baumannii: Major Role for Multidrug-Resistant Clinical Isolates of RND-Type Efflux Pumps in. Antimicrob Agents Chemother. 2013;57(7):2990-5.
30. Nemec A, Maixnerová M, Reijden TJKvd, Broek PJvd, Dijkshoorn L. Relationship between the AdeABC efflux system gene content, netilmicin susceptibility and multidrug resistance in a genotypically diverse collection of Acinetobacter baumannii strains J Antimicrob Chemother. 2007;60(3):483-9.
31. Savari M, Ekrami A, Shoja S, Bahador A. Plasmid borne Carbapenem-Hydrolyzing Class D β-Lactamases (CHDLs) and AdeABC efflux pump conferring carbapenem-tigecycline resistance among Acinetobacter baumannii isolates harboring TnAbaRs. Microbial Pathogenesis. 2017;104:310-7.
32. Angoti G, Bandehpour M, Goudarzi H, Hajizadeh M, Zarringhalam Moghaddam M, Kouchaki A. Detection of Efflux Pump Genes (adeA, adeB, adeC and abeM) in Acinetobacter baumannii Isolated from Hospitalize Patients, North-west of Iran. Infection, Epidemiology and Medicine. 2016;2(4):8-11.
33. ژاپونینژاد ع, صوفیان م, غزنویراد اا. در سویه های بالینی آسینتوباکتر بومانی و ارزیابی نقش آن در ایجاد مقاومت نسبت به ایمیپنم AdeABC تشخیص مولکولی ژن های پمپ تراوشی دوماهنامه طبّ جنوب. 1393;5:815-23.
34. Cherkaoui A, Emonet S, Renzi G, Schrenzel J. Characteristics of multidrug-resistant Acinetobacter baumannii strains isolated in Geneva during colonization or infection. Annals of clinical microbiology and antimicrobials. 2015;14(1):42.
35. Szabó D, Silveira F, Hujer AM, Bonomo RA, Hujer KM, Marsh JW, et al. Outer membrane protein changes and efflux pump expression together may confer resistance to ertapenem in Enterobacter cloacae. Antimicrobial agents and chemotherapy. 2006;50(8):2833-5.
36. Snelling AM, Gerner-Smidt P, Hawkey PM, Heritage J, Parnell P, Porter C, et al. Validation of use of whole-cell repetitive extragenic palindromic sequence-based PCR (REP-PCR) for typing strains belonging to the Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii complex and application of the method to the investigation of a hospital outbreak. Journal of clinical microbiology. 1996;34(5):1193-202.

آسینتوباکتر(Acinetobacter) کوکوباسیل گرم منفی و هوازی است که می تواند برای مدتی طولانی در محیط وتجهیزات مراقبت بهداشتی زنده بماند(1) . جنس اسینتوباکتر حاوی بیش از 32 گونه مختلف است واسینتوباکتر بومانی گونه غالب میباشد (2)که عامل بیماری های مختلفی از قبیل پنومونی ،سپتی سمی ،عفونت های دستگاه ادراری ، عفونت های پوستی و زخم ،مننژیت و اندوکاردیت میباشد (3, 4) . اسینتوباکتر بومانی یک پاتوژن فرصت طلب در حال گسترش است که گروههای مختلفی از مردم ،به ویژه بیماران بستری در بخش مراقبت های ویژه([1]ICU) را تحت تاثیر قرار میدهد . ریسک فاکتور های متعدد مستعد کننده عفونت با این باکتری شامل : بستری طولانی مدت در بیمارستان ، نقص ایمنی ،اعمال جراحی ،تماس طولانی مدت با بیماران کلونیزه شده،سوختگی ، کهولت سن، مصرف عوامل آنتی باکتریال وسیع الطیف و وجود عوامل تهاجمی مثل کاتتر میباشند(5).یکی از مشکلات ایجاد شده توسط اسینتوباکتر بومانی بروز مقاومت آنتی بیوتیکی می باشد که مشکلات زیادی را در درمان و بهبود بیماران ایجاد میکند (6).مقاومت آنتی بیوتیکی اسینتوباکتر بومانی به واسطه مکانیسم های اکتسابی و ذاتی است که این مکانیسم ها شامل : موتاسیون در ژن های هدف ،تغییر نفوذپذیری غشای خارجی و افزایش بیان پمپ های افلاکس میباشد .(7, 8)شیوع سریع مقاومت گونه های آسینتوباکتربومانی به همه ی بتالاکتام ها از جمله کارباپنم ها، نشان دهنده پتانسیل این ارگانیسم برای پاسخ سریع به تغییر فشار محیط می باشد.(9) آسینتوباکتربومانی می تواند از طریق جهش در ژن های gyrA و parC نسبت به کینولون ها و با بیان آنزیم های تغییردهنده آمینوگلیکوزید در برابر آمینوگلیکوزیدها مقاوم شود.(10)

ندارد

با توجه به نقش بارز این پمپ در مقاومت آنتی بیوتیکی و با توجه به اینکه در ایران مطالعات کمی در این زمینه صورت گرفته و در زاهدان نیز این نوع مطالعه تاکنون انجام نشده است ، این تحقیق با هدف بررسی فراوانی ژن های کد کننده پمپ افلاکس AdeABC در ایزوله های بالینی آسینتوباکتر بومانی جداشده از بیماران بیمارستان های آموزشی شهر زاهدان انجام میگیرد.

ندارد

ندارد

هیچ گونه هزینه ای از ابتدا تا انتهای انجام طرح از بیمار وصول نخواهد شد

ندارد

کلیه ی اطلاعات هویتی بیمار.نتایج ازمایشات.واطلاعات بدست امده در طول انجام ازمایشات کاملا محرمانه نگهداری شده و به اطلاع بیمار خواهد رسید

اقای دکترشهرام شهرکی- بیمارستان امام علی09151411339

شرکت من در مطالعه کاملاً اختیاری است و آزاد خواهم بود که از شرکت در مطالعه امتناع نموده یا هر زمان که مایل بودم بدون آنکه تغییری در نحوه رفتار پزشک درمانگر یا نحوه درمان و مراقبت از بیماری اینجانب ایجاد شود از پژوهش مذکور خارج شوم.

با توجه به اطلاعات موجود در این فرم و توضیحات حضوری مجری یا همکاران طرح موافقت خود را با شرکت در این مطالعه اعلان می نمایم. یک نسخه از این فرم به من داده شده و فرصت خواندن آن را داشته ام.

ندارد