مطالعه الگوی گلیکوکونژگه های سلولی حاوی قند انتهایی فوکوز و GLUNAC در سلول های کارسینوم معده

پژوهش گران  آینده

به دلایل نامشخص، میزان بروز و مرگ و میر در سرطان معده در 80 سال گذشته در ایالات متحده کاهش یافته است، اگرچه این بیماری هنوز دومین علت مرگ و میر ناشی از سرطان در جهان است. میزان مرگ و میر ناشی از سرطان معده در ایالات متحده در مردان از 28 به 5.8 در 100000 نفر کاهش یافته است، در حالی که در زنان میزان آن از 27 به 2.8 در 100000 کاهش یافته است. با این وجود، در سال 2014، 22202 مورد جدید سرطان معده در ایالات متحده تشخیص داده شد و 10990 آمریکایی در اثر این بیماری جان باختند. اگر چه میزان بروز سرطان معده در سراسر جهان کاهش یافته است، در مناطق مختلف جغرافیایی همچون ژاپن، چین، شیلی و ایرلند باقی می ماند. خطر ابتلا به سرطان معده در بین طبقات اجتماعی پایین اقتصادی بیشتر است. مهاجران از کشورهای با شدت بالا و پایین بروز حساسیت خود را نسبت به سرطان معده حفظ می کنند، در حالی که خطر فرزندانشان تقریبا برابر با سرزمین جدید است. این یافته ها نشان می دهد که قرار گرفتن در معرض محیط زیست، احتمالا در اوایل زندگی، با پیشرفت سرطان معده مرتبط است، زیرا سرطان های رژیم غذایی به عنوان قوی ترین فاکتور ها شناخته می شوند.

سرطان معده توسط گسترش مستقیم از طریق دیواره معده به بافت های پری گاستریک وگاهی اوقات به اندام های مجاور مثل پانکراس، روده بزرگ یا کبد گسترش می یابد. این بیماری همچنین از طریق عقده های لنفاوی یا  سطوح صفاقی پخش می شود. متاستاز به گره های لنفاوی داخل شکمی و سوپراکلوویکول اغلب رخ می دهد.کبد شایع ترین محل برای انتشار هماتوژن تومور است.(1)

سرطان معده یکی از دلایل اصلی مرگ و میر  در ژاپن و همچنین کشورهای غربی است . پیش آگهی این گروه از بیماران به طور مستقیمی با Stage  آن در زمان تشخیص اولیه ارتباط پیدا می کند .بنابر این نوع ضایعه ، محل آن در معده و مهم تر از این دو حضور و عدم حضور متاستاز های عقده های لنفاوی از مهمترین عوامل پروگنوز بیماران می باشد .مطالعات نشان داده اند که تغییرات مولکول های سطحی سلول در واکنش به لکتین ها یکی از مهمترین شاخص های میزان پیشرفت بیماری و متاستاز در آن می باشد.(2)

کبد یک ارگان بسیار متاستازپذیر می باشد. اکثر بدخیمی های شایع، شامل سرطان های دستگاه گوارش، سرطان سینه و پروستات، ملانوم یوئال، تومورهای نورونی آندروژنیک و سارکوم به کبد متاساز می دهند .  علاوه بر این، متاستاز کبد بسیار شایعتر از تومورهای اولیه کبدی است.  با این حال، دخالت کبدی در متاستاز اغلب نادیده گرفته می شود و کمتر مورد بررسی قرار می گیرد، زیرا ضایعات اغلب بدون علامت هستند - حتی نفوذ وسیع تومورهای متاستاتیک ممکن است تا  مراحل انتهایی  بیماری تغییر نکنند.به طور معکوس، متاستاز به ارگان های دیگر به علت محل علائم بیشتر آنها، به راحتی شناسایی می شود، به عنوان مثال مشکلات تنفسی برای متاستاز ریه یا درد در مورد متاستازهای استخوانی. در حال حاضر شیوع واقعی متاستاز کبد ناشناخته است، اما بین 30 تا 70 درصد مرگ و میر بیماران مبتلا به سرطان متاستاز کبدی است و بیشتر بیماران مبتلا به متاستاز کبد از بیماری خود می میرند. (3)

آدنوکارسینومای کولون که تقریبا 95 درصد بدخیمی های روده بزرگ را به خود اختصاص میدهد بیماری با توزیع جهانی است که متاسفانه مرگ ومیر بالایی را نیز به علت سرطان به خود اختصاص میدهد.از نظر هیستولوژیک 3 گرید برای سرطان کولون معرفی شده است.یکی از مهمترین جنبه های رفتارهای بیولوژیک سلولهای سرطان قابلیت متاستاز آن به اندام های دور مثل کبد میباشد.این فرایند(متاستاز)یک فرایند چند مرحله ای است که بعنوان یکی از مسایل اصلی شکست درمان در سرطان ها معرفی شده است.مطالعات نشان داده است که تغییر ماهیت قندهای انتهایی گلیکوکونژوگه ها یکی از مهمترین عوامل موثر در تشکیل سلولهای متاستاتیک میباشد.گلیکوکونژوگه های سطح سلولی گروهی از ترکیبات گلیکوپروتینی یا گلیکولیپیدی سلولی هستند که واسطه عملکردی سلولها برای اتصال آنها به هم یا به ماتریکس خارج سلولی و یا رسیدن به اندامهای هدف میباشند.لکتین ها گروهی از گلیکوپروتیین های گیاهی یا جانوری هستند که با دقت و حساسیت بسیار بالایی مولکول های قندی ترکیبات سلولی را ردیابی کرده و همین ویژگی آنها را برای ردیابی سلول های متاستاتیک بعنوان یک ابزار ارزشمند در پزشکی مطرح کرده است.(4)

یکی از مهمترین عملکرد های پوشش سلول های اپی تلیال علاوه بر محافظت از لایه های زیرین تولید ترکیبات موکوسی  است که این ترکیبات موکوسی گروه هتروژن را از نظر بیوشیمیایی بوجود می آورند .نشان داده شده است  که تغییر ماهیت  این ترکیبات موکوسی می تواند ارتباط مستقیم با بیماری های دستگاه گوارش داشته باشد از مهمترین این تغییرات ماهیت سولفاته یا کربوکسیله از ترکیبات گلیکو پروتئینی موکوس های سطحی دستگاه گوارش است. لکتین های برای ردیابی تغییرات مولکول های قندی سطحی سلول ابزاری دقیق و حساس می باشند .مطالعات کاهش و افزایش بعضی از این ترکیبات سطحی را در پاسخ به لکتین ها نشان داده است.(5)

تغییر میزان اسید سیالیک پوشاننده مولکول های سطحی یکی از مهمترین عوامل مربوط به عملکرد گلیکوکونژوگه های سطح سلول در فرایند هایی همچون اتصالات سلولی به یکدیگر و انتقال پیام درآن ها است آنچنان که تغییر میزان اسید سیالیک می تواند عملکرد گلیکوکونژوگه های سطح سلولی را تغییر دهد .(6)

گلیکوزیلیشن غیرمعمول و ناکامل در سلول های سرطانی یکی از جنبه های شناخته شده تغییرات آناپلازی تهاجم و متاستاز در سلول های سرطانی است.(7)از آنجا که شناسایی سرطان معده در مراحل اولیه اهمیت فوق العاده ای در بهبود بقای عمر 5 ساله دارد بنابراین استفاده از لکتین ها بعنوان یک بیومارکر به لکتین HPA در سرطان معده نشان داده شده است.(8)

در مطالعه عرب و همکارانش در 2013 با هدف مطالعه هیستوشیمی لکتین Glanac و GlcNac حاوی گلیکوکونژوگه های در آدنوکارسینوم کلون برروی  مقاطع بافتی آماده شده از بلوک های پارافینی متعلق به 30 بیمار مبتلا به آدنوکارسینوم کولون صورت گرفت مشخص گردید که الگوی رنگ آمیزی سلول های نئوپلاستی به WGA و lectin SBA با افزایش درجه های هیستوپاتولوژیک تغییر می یابد.(9)

بررسی متون

در مطالعه عرب وهمکارانش در سال 1387 با هدف الگوی انتشار گلیکوکونژوگه های حاوی قند انتهایی ال فوکوز در سلول های نئوپلاستیک گریدهای مختلف کارسینوم اینتراداکتال پستان برروی بلوک های پارافینی 15 بیمار با تشخیص اولیه کارسینوم اینتراداکتال مشخص گردید پاسخ سلول های تومورال برای قند انتهایی ال فوکوز پاسخی بسیار ضعیف تا منفی بوده و در سیر تغییرات نئوپلاستیک پستان،گلیکوکونژوگه های حاوی این قند انتهایی کمتر تغییر می نمایند.(10)

در مطالعه Reese   و همکارانش در سال 1992 با هدف بررسی افزایش SBA ( Soybean Agglutinin Lectin)  در افزایش بیان لکتین اختصاصی N-acetylgalactosamine و پتانسیل متاستاز کبدی صورت گرفت مشخص گردید ، این داده ها نشان می دهند گیرنده ی شبه لکتینی خاص ساکاریدی روی  سلول های تومور نقش دارند و باعث  افزایش متاستاز تجربی کبدی می شوند .علاوه بر این، افزایش  بیان D-GalNAc مهار کننده سایت های اتصال SBA   ، اتصال homotypic را با گیرنده های لکتین مشابه خاص D-GalNAc بر روی سلول های تومور افزایش می دهد و مشاهده می شود میان اتصال  SBA و  پتانسیل متاستاتیک را افزایش می یابد .(11)

در مطالعه Slawson  و همکارانش در سال 2011 با هدف  پیامد های بیولوژیک سلول های سرطانی در قند انتهایی O-GlcNAc  صورت گرفت مشخص گردید که اصلاح O-GlcNAc مکانیسم حیاتی برای پاسخ دادن به محرک های مختلف است.اصلاح O-GlcNAc به سلول ها برای اتصال مواد مغذی و متابولیسم سلولی برای تنظیم فرآیندهای سلولی حیاتی مانند تنظیم چرخه سلولی، پاسخ استرس و بیان ژن اجازه می دهد(12)

در مطالعه KelloKumpu و همکارانش در 1986  با هدف تفاوت واکنش های لکتین گلیکوکونژوگه های سلولی بین کارسینوم های اولیه کولورکتال اولیه و متاستاز های آنها صورت گرفت ، مشخص گردید که بسیاری از کارسینوم های اولیه کولورکتال شامل زیر جمعیت های متمایز فنوتیپیک سلول های سرطانی هستند. بیشتر تومورهای متاستاتیک ناشی از ظهور انتخابی سلولهای کارسینومای تولید کننده گلیکوکونژوگه ها بودند که در پروفیل های لکتین مرتبط با آنها در کارسینوم های اولیه کولونکتومی آنها متفاوت بود.(13)

استفاده از نتایج طرح در پژوهش های آینده

بیمارستان علی ابن ابیطالب زاهدان

شدت واکنش سلول های تومورال به لکتین های SBA در گریدهای مختلف کارسینوم معده با همدیگر متفاوت است

شدت واکنش سلول های تومورال به لکتین های UEA در گریدهای مختلف کارسینوم معده با همدیگر متفاوت است

تعیین الگوی گلیکوکونژگه های سلولی حاوی قند انتهایی فوکوز و GLUNAC در سلول های کارسینوم معده

تعیین و مقایسه شدت واکنش سلول های تومورال در گریدهای مختلف سرطان معده به لکتین  SBA

تعیین و مقایسه شدت واکنش سلول های تومورال در گریدهای مختلف سرطان معده به لکتین UEA

استفاده از نتایج این طرح در جهت درمان بیماران سرطان معده

مراکز تحقیقاتی سرطان

دانشگاه علوم پزشکی زاهدان

بیمارستان علی ابن ابیطالب

GLUNAC

 FUCOSE

Glycoconjugate ترکیبات کربوهیدراتی هستند که با پیوند کووالانسی به مواد شیمیایی دیگر همچون پروتئین‌ها، پپتیدها، لیپیدها و ساکاریدها متصلند. این اتصال از طریق فرایندی موسوم به گلیکولیزاسیون انجام می‌شود.

Carcinoma  رشد بدخیم  سلولهای اپیتلیال را گویند که به بافتهای اطراف نفوذ نموده و توانایی متاستاز نیز دارد.

استفاده از نتایج طرح در جهت ارزیابی علل بوجود آورنده سرطان معده

بخش علوم تشریح دانشگاه علوم پزشکی زاهدان

توصیفی تحلیلی (مقطعی)

بلوک های محتوی آدنوکارسینوم معده از بیماران مبتلا در آرشیو بیمارستان علی ابن ابیطالب که تشخیص هیستوپاتولوژیک آن به تایید همکار محترم آسیب شناس رسیده باشد

استفاده از نمونه های آزمایشگاهی تهییه شده جهت آموزش دانشجوییان

مطابق رفرنس های مقالات قبلی استاد راهنما و محققان دیگر و محدودیت نمونه از هر کدام ازگریدها 10نمونه  انتخاب می گردد(رفرنس شماره 10)

با مراجعه به آرشیو بیمارستان علی ابن ابیطالب طی بررسی پرونده های بیماران سرطانی،مشخصات پاتولوژی بیماران مربوط به آدنوکارسینوم معده ثبت گردید و طی هماهنگی انجام شده بلوک ها و لامهای مربوط به آن استخراج گردید و از هر بلوک دو برش برای نمونه تهیه گردید

فرم ثبت اطلاعات براساس تشخیص های هیستوپاتولوژیک و گریدینگ هیستوشیمیایی برای حداقل 5میدان دید و شمارش 100سلول تهیه شده و اطلاعات مربوطه درآن ثبت میگردد

از بلوک های محتوی تومور برش های 6 میکرومتری با دستگاه میکروتوم بریده شده و با لکتین ها رنگ آمیزی می گردد.

برش های بافتی گرفته شده پس از تایید هیستوپاتولوژی به روش spicer با لکتین های گفته شده رنگ آمیزی خواهند شد اطلاعات حاصل از گریدینگ هیستوشیمیایی با نرم افزار spss آنالیز می گردد. در روش spicer لکتین ها با غلظت 10  رقیق شده و لام ها به مدت 2 ساعت در مجاورت لکتین قرار می گیرد. برای ردیابی از محلول 0/03درصد DAB بعنوان کروموژن استفاده می شود برای رنگ آمیزی زمینه در صورت لزوم از محلول Alcian blue با ph=2/5 استفاده خواهد شد.

برای حل کردن 1mg  لکتین PNA،ابتدا یک میلی لیتر محلول PBScرا به داخل ظرف لکتین تزریق نمودیم.بایدعمل حل کردن لکتین درمحلول به آرامی صورت گیردوازبه هم زدن سریع و خشن آن جداٌ اجتناب کرد.پس از اطمینان ازحل شدن لکتین،یک سی سی محلول فوق را به حجم بیست سی سی رساندیم.غلظت حاصله درمحلول فوق50  است.برای جلوگیری از خراب شدن لکتین،بیست میلی لیتر فوق رابه چهل لوله آزمایش در حجم های 5/0میلی لیترتقسیم می کنیم وآنها را در درون فریزرFreezerنگهداری می کنیم.

توجه:برای تهیه محلول کارلکتین پس از خارج کردن یکی از لوله های 0/5 میلی لیتری حاوی لکتین از یخچال(Freezer)آن را با محلول PBSc به حجم 5 میلی لیتر می رسانیم.غلظت لکتین در محلول کار 10 است.باید بلافاصله بعد از استفاده از لکتین مجدداٌ آن را به یخچال برگردانیم محلول فوق را باید در قسمت فوقانی یخچال نگهداری کنیم.

برای ساخت محلول DAB/H2O2 به کمک دستکش و ماسک در زیر هود آزمایشگاه،مقدار 0/03gr از DAB را در صد میلی لیتر محلول PBSc حل می کنیم.پس از حل شدن کامل DAB،محلول را باید فیلتر نمود.بلافاصله قبل از استفاده به کمک میکروپی پت مقدار دویست میکرولیتر محلول H2O2 را به آن اضافه می کنیم.رنگ محلول با گذشت زمان حاصله قهوه ای بسیار کم رنگی خواهد شد که به مرور زمان بر شدت رنگ آن اضافه می شود.از آنجا که این ماده 'DAB' شدیداٌ سرطانزا است،باید دقت کنیم در تمام مدت کار با این محلول از دستکش و ماسک در زیر هود استفاده کرد.محلول اضافی پس از کار بایستی بلافاصله تخلیه شود و به کمک آب اضافی محل تخلیه محلول در آزمایشگاه بطور کامل شستشو شود.لازم به ذکر است در آزمایشگاههای پیشرفته دنیا مواد سمی از قبیل DAB در تانکهای مخصوصی جمع آوری می شوند و آنگاه به شرکتهای خاصی تحویل می گردند.

از تست ضریب همبستگی اسپیرمن وآزمون کای دو  استفاده خواهد شد.سطح معنی داری از آزمونها 0/05 در نظر گرفته می شود.

مجریان طرح خود را موظف به رعایت تمام اصول تحقیق در علوم پزشکی از محرمانه بودن نام بیماران تا انتشار نتایج می دانند.

در این پژوهش از کد های 1 الی 12 راهنمای اخلاقی پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی در جمهوری اسلامی ایران استفاده می گردد

1 پژوهشگر باید به این امر مهم توجه داشته باشد که بافت هت و اعضای مورد استفاده ، دارای منشا انسانی اند و کرامت اقتضا می کند که جمع آوری ، نگه داری ، استفاده و نابود سازی آن ها توام با رعایت ملاحضات و شوون مرتبط باشد

2.از اجزای بدنی دارای منشا انسانی باید تنها در پژوهش هایی اسنتفاده شود که اهداف ارزشمندی را در راستای مبارزه با بیماری ها و ارتقای سلامت انسان ها دنبال می کنند .

3تمامی پژوهش ها بر روی عضو و بافت انسانی ، پیش از اجرا ، باید مورد تایید کمیته اخلاق در پژوهش مرتبط قرار گیرد

4 رضایت آگاهانه فرد دهنده ی عضو یا بافت ، شرط اساس در تایید اخلاقی هر پژوهش  بر روی عضو و بافت انسانی است.

5 در مواردی که اخذ رضایت آگاهانه از دهنده ی نمونه ذخیره شده یا جانشین قانونی او امکان چذیر نباشد به شرط وجود رضایت کلی اولیه بر استفاده ی پژوهشی ، در صورت تایید کمیته اخلاق در پژوهش می توان از آن نمونه برای پژوهش استفاده کرد

6 تمامی اطلاعاتی که از صاحبان عضو یا بافت مورد پژوهش ، جمع آوری وثبت می شود راز حرفه ای تلقی می شود

7 مراکز انجام دهنده یپژوهش بر عضو و بافت باید مهارت و امکانات لازم برای حفظ رازداری را داشته باشند

8پژوهشگر باید از اعضا و بافت هایی که به منظور پژوهش در اختیار او قرار میگیرد

9پژوهشگر موظف است که تمهیدات لازم ایمنی ، از جمله آزمون های غربالگری و وسایل محافظت کننده را برای جلوگیری از انتقال آلودگی از اجزای بدنی مورد استفاده به هر فرد دیگر ،پیش بینی و تامیین کند

10 حقوق مالکیت معنوی نتایج حاصل از اینگونه پژوهش ها باید مورد تایید و حمایت قرار گیرد

11 زمان ، نحوه و میزان اطلاع آزمودنی ها از نتایج باید در رضایت نامه آورده شود

12 در صورت کمبود بافت یا عضو ، باید استفاده های درمانی بر استفاده های پژوهشی اولویت داده شود.

راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش‌های علوم پزشکی 

دارای آزمودنی انسانی  در جمهوری اسلامی ایران

1392

مقدمه

در طبابت باید از پزشکی مبتنی بر شواهد استفاده شود. این شواهد از راه پژوهش به‌دست می‌آیند. بنابراین پیشرفت دانش پزشکی بر پژوهش مبتنی است.  بخش بزرگی از پژوهش‌ها برای رسیدن به نتایج معتبر، در نهایت باید بر روی انسان به انجام برسند.

راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش‌های دارای آزمودنی انسانی در جمهوری اسلامی ایران، دربردارنده‌ی اصول و مقررات اخلاقی‎ است که تمامی پژوهشگرانی که اقدام به پژوهش بر روی آزمودنی‌های انسانی (که شامل داده‌ها یا مواد بدنی به‌دست آمده از انسان‌ها نیز می‌شود) می‌کنند، و تمامی مدیران پژوهشی و کمیته‌های اخلاق در پژوهش کشور، باید آن را مبنا و راهنمای عملکرد خود قرار دهند و تمامی تلاش خود را برای تضمین رعایت حداکثری آن در عملکرد پژوهشی خود - و تا جای ممکن دیگر پژوهشگران - به عمل آورند. این راهنما بر اساس اصول اخلاقی، به‌ویژه کرامت انسانی، مبانییی و ارزش‌های اسلامی و ملی تدوین یافته است. تقدم و تأخر بندهای این راهنما، بر اساس اهمیت نیست. این راهنما باید به‌صورت یک کل واحد دیده شود و هیچ‌کدام از بندهای آن نباید بدون توجه کافی به مقدمه و سایر بندهای مرتبط تفسیر شود. هر پژوهشگر باید علاوه بر این راهنما، از دیگر قوانین و راهنماهای مرتبط که از سوی مراجع رسمی ابلاغ شده‌اند مانند راهنماهای اختصاصی اخلاق در پژوهش کشور  آگاهی داشته باشد و آن‌ها را رعایت کند.

1. هدف اصلی هر پژوهش‌باید ارتقای سلامت انسان‌ها توأم با رعایت کرامت و حقوق ایشان باشد.
2. در پژوهش بر آزمودنی انسانی، سلامت و ایمنی فرد فرد آزمودنی‎ها در طول و بعد از اجرای پژوهش، بر تمامی مصالح دیگر اولویت دارد. هر پژوهشی که بر روی آزمودنی انسانی انجام می‌گیرد، باید توسط افرادی طراحی و اجرا شود که تخصص و مهارت بالینی لازم و مرتبط را داشته باشند. در کارآزمایی‌های بالینی  بر روی بیماران یا داوطلب‌های سالم نظارت پزشک دارای مهارت و دانش متناسب الزامی است.
3. پژوهش بر انسان فقط در صورتی توجیه‌پذیر است که منافع بالقوه‌ی آن برای هر فرد آزمودنی بیش‌تر از خطرهای  آن باشد. در پژوهش‌های دارای ماهیت غیر درمانی، سطح آسیبی که آزمودنی در معرض آن قرار می‌گیرد نباید بیش‌تر از آن‌چه باشد که مردم عادی در زندگی روزمره‌ی خود با آن مواجه می‌شوند. حصول اطمینان از این امر برعهده‌ی طراحان، مجریان و همکاران پژوهش و تمامی شوراهای بررسی یا پایش‌کننده‌ی پژوهش از جمله کمیته‌ی اخلاق در پژوهش‌ است.
4. مواردی از قبیل سرعت، سهولت کار، راحتی پژوهشگر، هزینه‌ی پایین‌تر و/ یا صرفاً عملی بودن آن به هیچ وجه نباید موجب قرار دادن آزمودنی در معرض خطر یا زیان افزوده یا تحمیل هر گونه محدودیت اختیار اضافی به وی شود.
5. قبل از آغاز هر پژوهش پزشکی ، باید اقدامات  اولیه جهت به حداقل رساندن زیان احتمالی وارده به آزمودنی‌ها و تامین سلامت آن‌ها انجام گیرد.
6. در کارآزمایی های بالینی دوسوکور  که آزمودنی از ماهیت دارویی یا مداخله‌ای که برای وی تجویز شده بی‌اطلاع است، پژوهشگر باید تدابیر لازم جهت کمک‌رسانی به آزمودنی در صورت لزوم و در شرایط اضطراری را تدارک ببیند.
7. اگر در حین اجرای پژوهش مشخص شود که خطرات شرکت در این پژوهش برای آزمودنی‌ها بیش از فواید بالقوه‌ی آن است، باید آن پژوهش بلافاصله متوقف شود.
8. طراحی و اجرای پژوهش‌هایی که بر روی آزمودنی انسانی انجام می‌گیرند، باید منطبق با اصول علمی پذیرفته شده بر اساس دانش روز و مبتنی بر مرور کامل منابع علمی موجود و پژوهش‌های قبلی آزمایشگاهی، و  در صورت لزوم،  حیوانی مناسب باشد. مطالعات حیوانی باید با رعایت کامل اصول اخلاقی کار با حیوانات آزمایشگاهی انجام شوند.
9. در پژوهش‌های پزشکی که ممکن است به محیط زیست آسیب برسانند، باید احتیاط‌های لازم در جهت حفظ و نگهداری و عدم آسیب رسانی به محیط ریست انجام گیرد.
10. هر پژوهشی باید بر اساس و منطبق بر یک طرح‌نامه (پروپوزال) به انجام برسد. در کارآزمایی‌های بالینی باید علاوه بر طرح نامه، دستورالعمل (پروتکل) نیز تهیه و ارائه شود. طرح‌نامه و دستورالعمل باید شامل تمامی اجزای ضروری باشد. از جمله بخش ملاحظات اخلاقی، اطلاعات مربوط به بودجه، حمایت کننده‌ها، وابستگی‌های سازمانی، موارد تعارض منافع بالقوه‌ی دیگر، مشوق‌های شرکت کنندگان، پیش بینی درمان و یا جبران خسارت افراد آسیب دیده در پژوهش .در مواردی که لازم است رضایت‌نامه‌ی آگاهانه به‌صورت کتبی اخذ شود، فرم رضایت‌نامه باید تدوین و به طرح‌نامه پیوست شده باشد. پیش از تصویب یا تأیید طرح‌نامه از سوی کمیته‌ی مستقل اخلاق در پژوهش، نباید اجرای پژوهش شروع شود.
11. کمیته‌ی اخلاق در پژوهش علاوه بر بررسی و تصویب طرح‌نامه و دستورالعمل، این حق را دارد که طرح‌‌ها را در حین و بعد از اجرا را از نظر رعایت ملاحظات اخلاقی مورد پایش قرار دهد. اطلاعات و مدارکی که برای پایش از سوی کمیته‌ی اخلاق درخواست می‌شود، باید از سوی پژوهشگران در اختیار این کمیته گذاشته شود.    
12. انتخاب آزمودنی‌های بالقوه از میان جمعیت بیماران یا هر گروه جمعیتی دیگر، باید منصفانه باشد، به‌نحوی که توزیع بارها (خطرات یا هزینه‌ها) و منافع شرکت در پژوهش، در آن جمعیت و کل جامعه، تبعیض‌آمیز نباشد.
13. کسب رضایت آگاهانه و آزادانه در هر پژوهشی که بر روی آزمودنی انسانی اجرا می‌شود، الزامی است. این رضایت باید به شکل کتبی باشد. در مواردی که اخذ رضایت آگاهانه‌ی کتبی غیر ممکن یا قابل صرف‌نظر باشد، باید موضوع با ذکر دلایل به کمیته‌ی اخلاق منتقل شود. در صورت تأیید کمیته‌ی اخلاق، اخذ رضایت کتبی قابل تعویق یا تبدیل به رضایت شفاهی یا ضمنی خواهد بود.
14. اگر در طول اجرای پژوهش تغییری در نحوه اجرای پژوهش داده شود یا اطلاعات جدیدی به دست آید که احتمال داشته باشد که بر تصمیم آزمودنی مبنی بر ادامه‌ی شرکت در پژوهش تاثیر گذار باشد، باید موضوع به اطلاع کمیته‌ی اخلاق رسانده شود و در صورت موافقت کمیته با ادامه‌ی پژوهش، مراتب به اطلاع آزمودنی رسانده شود و رضایت آگاهانه مجددا اخذ گردد.
15.  پژوهشگر باید از آگاهانه بودن رضایت اخذشده اطمینان حاصل کند. برای این منظور، در تمامی پژوهش‌های پزشکی، اعم از درمانی و غیردرمانی، پژوهشگر موظف است فرد در نظر گرفته شده به‌عنوان آزمودنی را از تمامی اطلاعاتی که می‌توانند در تصمیم‌گیری او مؤثر باشند، به‌نحو مناسبی آگاه سازد. این اطلاعات مشتملند بر: عنوان و اهداف پژوهش، طول مدت پژوهش، روشی که قرار است به‌کار گرفته شود (شامل احتمال تخصیص تصادفی به گروه‌مورد یا شاهد)، منابع تأمین بودجه، هر گونه تعارض منافع احتمالی، وابستگی  سازمانی پژوهشگر، و فواید و زیان‌هایی که انتظار می‌رود مطالعه در بر داشته باشد. هم‌چنین، هر آزمودنی باید بداند که می‌تواند هر لحظه که بخواهد از مطالعه خارج شود و باید درباره‌ی خطرات و زیان‌های بالقوه‌ی ناشی از ترک زودرس پژوهش آگاه و پشتیبانی شود. پژوهشگر هم‌چنین باید به تمامی سؤالات و دغدغه‌های این افراد، با حوصله و دقت پاسخ بدهد. این موارد باید در رضایت‌نامه‌ی آگاهانه منعکس شود.
16. پژوهشگر باید از آزادانه بودن رضایت اخذ شده اطمینان حاصل کند. رفتارهایی که به هر نحوی متضمن تهدید، اغوا، فریب و یا اجبار باشد موجب ابطال رضایت آزمودنی می‌شود. به فرد باید فرصت کافی برای مشاوره با افرادی که مایل باشد – نظیر اعضای فامیل یا پزشک خانواده - داده شود. هم‌چنین، در پژوهش‌هایی که پژوهشگر مقام سازمانی بالاتری نسبت به آزمودنی  داشته باشد، دلایل این شیوه‌ی جذب آزمودنی، باید توسط کمیته‌ی اخلاق  تأیید شود، در این موارد شخص ثالث و معتمدی باید رضایت را دریافت کند.
17. پژوهشگر ارشد مسؤول مستقیم ارائه‌ی اطلاعات کافی و به زبان قابل فهم برای آزمودنی ، اطمینان از درک اطلاعات ارائه شده، و اخذ رضایت آگاهانه است. در مواردی که بنا به‌دلیلی، نظیر زیاد بودن تعداد آزمودنی‌ها، این اطلاع‌رسانی از طریق شخص دیگری انجام می‌گیرد، این پژوهشگر ارشد است که مسؤول انتخاب فردی آگاه و مناسب برای این کار و حصول اطمینان از تأمین شرایط مذکور در این بند است.
18. در پژوهش‌هایی که از مواد بدنی (شامل بافت‌ها و مایعات بدن انسان)  یا داده‌هایی استفاده می‌شود که هویت صاحبان آن‌ها معلوم یا قابل کشف و ردیابی است، باید برای جمع‌آوری، تحلیل، ذخیره‎سازی و /یا استفاده‌ی مجدد از آن‌ها رضایت آگاهانه گرفته شود. در مواردی که اخذ رضایت غیرممکن باشد یا اعتبار پژوهش را خدشه‌دار کند، می‌توان در صورت بررسی مورد و تصویب کمیته‌ی اخلاق ، از داده‌ها یا مواد بدنی ذخیره شده، بدون اخذ رضایت آگاهانه استفاده کرد.
19. عدم قبول شرکت در پژوهش، یا ادامه ندادن به همکاری، نباید هیچ‌گونه تأثیری بر خدمات درمانی که در همان مؤسسه – نظیر بیمارستان – به فرد ارائه می‌شود، داشته باشد. این موضوع باید در فرایند اخذ رضایت آگاهانه، به آزمودنی اطلاع داده شود.
20. در مواردی که آگاه کردن آزمودنی درباره‌ی جنبه‌ای از پژوهش باعث کاهش اعتبار پژوهش می شود، ضرورت اطلاع‌رسانی ناکامل از طرف پژوهشگر باید توسط کمیته‌ی اخلاق تأیید شود. بعد از رفع عامل این محدودیت، باید اطلاع‌رسانی کامل به آزمودنی انجام گیرد.
21. برخی از افراد یا گروه‌هایی از مردم، نظیر ناتوانان ذهنی، کودکان، جنین و نوزاد، بیماران اورژانسی، یا زندانیان‌که ممکن است به‌عنوان آزمودنی در پژوهش شرکت کنند، نمی‌توانند برای دادن رضایت، آگاهی یا آزادی لازم را داشته باشند. این افراد یا گروه‌ها آسیب‌پذیر دانسته می‌شوند و باید مورد حفاظت ویژه قرار گیرند.
22.  از گروه‌های آسیب‌پذیر هیچ‌گاه نباید (به دلایلی چون سهولت دسترسی ) به عناون آزمودنی ترجیحی استفاده شود. پژوهش پزشکی با استفاده از گروه‌ها یا جوامع آسیب‌پذیر تنها در صورتی موجه است که با هدف پاسخگویی به نیازهای سلامت و اولویت‌های همان گروه یا جامعه طراحی و اجرا شود و احتمال معقولی وجود داشته باشد که همان گروه یا جامعه از نتایج آن پژوهش سود خواهد برد.
23. در پژوهش بر روی گروه‌های آسیب‌پذیر، وظیفه‌ی اخذ رضایت آگاهانه مرتفع نمی‌شود. در مورد افرادی که سرپرست قانونی دارند، پژوهشگر موظف است که علاوه بر اخذ رضایت آگاهانه از سرپرست قانونی، متناسب با ظرفیت خود فرد، از وی رضایت آگاهانه اخذ کند. در هر حال، باید به امتناع این افراد از شرکت در پژوهش احترام گذاشته شود.
24. اگر در حین اجرای پژوهش، آزمودنی دارای ظرفیت، ظرفیت خود را از دست بدهد یا آزمودنی فاقد ظرفیت، واجد ظرفیت شود، باید با توجه به تغییر حاصله، رضایت آگاهانه برای ادامه‌ی پژوهش از سرپرست قانونی یا خود فرد اخذ شود. 
25. پژوهشگر مسؤول رعایت اصل رازداری و حفظ اسرار آزمودنی‌ها و اتخاذ تدابیر مناسب برای جلوگیری از انتشار آن است. هم‌چنین، پژوهشگر موظف است که از رعایت حریم خصوصی آزمودنی‌ها در طول پژوهش اطمینان حاصل کند. هرگونه انتشار داده‌ها یا اطلاعات به‌دست آمده از بیماران باید بر اساس رضایت آگاهانه انجام گیرد.
26. هر نوع آسیب یا خسارت ناشی از شرکت در پژوهش باید بر طبق قوانین مصوب جبران خسارت شود. این امر باید در هنگام طراحی پژوهش لحاظ شده باشد. نحوه‌ی تحقق این امر ترجیحاً به‌صورت پوشش بیمه‌ای نامشروط باشد.
27. در پایان پژوهش، هر فردی که به‌عنوان آزمودنی به آن مطالعه وارد شده است، این حق را دارد که درباره‌ی نتایج مطالعه آگاه شود و از مداخلات یا روش‌هایی که سودمندی‌شان در آن مطالعه نشان داده شده است، بهره‌مند شود.
28. پژوهشگران موظفند که نتایج پژوهش‌های خود را صادقانه ، دقیق، و کامل منتشر کنند. نتایج، اعم از منفی یا مثبت، و نیز منابع تأمین بودجه، وابستگی  سازمانی، و تعارض منافع – در صورت وجود – باید کاملاً آشکارسازی شوند. پژوهشگران نباید در هنگام عقد قرارداد انجام پژوهش، هیچ  گونه شرطی را مبنی بر حذف یا عدم انتشار یافته‌هایی که از نظر حمایت کننده‌ی پژوهش  مطلوب نیست، بپذیرند.
29. نحوه‌ی گزارش نتایج پژوهش باید ضامن حقوق مادی و معنوی تمامی اشخاص مرتبط با پژوهش، از جمله خود پژوهشگر یا پژوهشگران، آزمودنی‌ها و مؤسسه‌ی حمایت کننده‌ی  پژوهش باشد.
30. گزارش‌ها و مقالات حاصل از پژوهش‌هایی که مفاد این راهنما را نقض کرده‌اند، نباید برای انتشار پذیرفته شوند.
31. روش پژوهش نباید با ارزش‌های احتماعی، فرهنگی و دینی  جامعه در تناقض باشد.

در صورتی که برای هرکدام از گریدها تعداد بیماران کمتر از 10 بود به 5 بیمار اکتفا خواهیم کرد.

GLUNAC

 FUCOSE

Glycoconjugate

carcinoma

1.            Kasper D, Fauci A, Hauser S, Longo D, Jameson J, Loscalzo J. Harrison’s principles of internal medicine, 19e. USA2015. 2015:534.

2.            Lotan R, Ito H, Yasui W, Yokozaki H, Lotan D, Tahara E. Expression of a 31‐kDa lactoside‐binding lectin in normal human gastric Mucosa and in primary and metastatic gastric carcinomas. International journal of cancer. 1994;56(4):474-80.

3.            Clark AM, Ma B, Taylor DL, Griffith L, Wells A. Liver metastases: Microenvironments and ex-vivo models. Experimental Biology and Medicine. 2016;241(15):1639-52.

4.            Arab MR, Salari S, Karimi M, Mofidpour H. Lectin histochemical study of cell surface glycoconjugate in gastric carcinoma using helix pomatia agglutinin. Acta Medica Iranica. 2010;48(4):209.

5.            Fischer J, Klein PJ, Vierbuchen M, Skutta B, Uhlenbruck G, Fischer R. Characterization of glycoconjugates of human gastrointestinal mucosa by lectins. I. Histochemical distribution of lectin binding sites in normal alimentary tract as well as in benign and malignant gastric neoplasms. Journal of Histochemistry & Cytochemistry. 1984;32(7):681-9.

6.            Keppler OT, Hinderlich S, Langner J, Schwartz-Albiez R, Reutter W, Pawlita M. UDP-GlcNAc 2-epimerase: a regulator of cell surface sialylation. Science. 1999;284(5418):1372-6.

7.            Arab M, IMANI H, KARIMI M, SARGOLZAEI AF. Histochemical study of N-acetylgalactosamine containing glycoconjugate in intraductal carcinoma of the breast by HPA lectin. 2006.

8.            Myllykangas S, Junnila S, Kokkola A, Autio R, Scheinin I, Kiviluoto T, et al. Integrated gene copy number and expression microarray analysis of gastric cancer highlights potential target genes. International journal of cancer. 2008;123(4):817-25.

9.            Arab MR, Rojhan AR, Jahantigh M, Mohammadi M. Lectin Histochemical Study of GalNac and GlcNac Containing Glycoconjugates in Colon Adenocarcinoma. Anatomical Sciences Journal. 2013;10(4):29-33.

10.          عرب, اعلایی, کریمی, مهربد, اول س, حیدری, et al. الگوی انتشار گلیکوکونژوگه‌های حاوی قند انتهایی ال فوکوز در سلول‌های نئوپلاستیک گرید‌های مختلف کارسینوم اینتراداکتال پستان. دانشگاه علوم پزشکی بوشهر، طب جنوب. 2008;11(1):15-20.

11.          Reese MR, Chow DA. Tumor progression in vivo: increased soybean agglutinin lectin binding, N-acetylgalactosamine-specific lectin expression, and liver metastasis potential. Cancer research. 1992;52(19):5235-43.

12.          Slawson C, Hart GW. O-GlcNAc signalling: implications for cancer cell biology. Nature Reviews Cancer. 2011;11(9):678-84.

13.          Kellokumpu IH. Differences in lectin reactivities of cellular glycoconjugates between primary human colorectal carcinomas and their metastases. Cancer research. 1986;46(9):4620-5.

در این مطالعه خون گیری صورت نمی گیرد

بهبود روند درمانی بیماران مبتلا به سرطان معده

فاقد عوارض جانبی

فاقد عوارض جانبی

توسط معاونت فناوری و تحقیقات دانشگاه علوم پزشکی زاهدان تامیین می گردد

فاقد روش جایگزین

تمامی اطلاعات به صورت محرمانه نگه داشته می شوند ودر صورت ئرخواست در اختیار ان ها قرار خواهد گرفت

علی مرادی

09150137949

در صورت عدم تمایل می توانند از شرکت در این پروژه خودداری  کنند

این طرح به صورت یک بررسی آزمایشگاهی صورت می گیرد و نیازمند به رضایت مستقیم از فرد دهنده نمونه نمی باشد

ندارد