مقایسه بیان HER2 در ادنتوژنیک کراتوکیست، کیست رادیکولر و کیست دنتی ژروس.

ادنتوژنیک کراتوکیست(OKC) یک کیست ادنتوژنیک تکاملی با ویژگی های هیستوپاتولوژیک خاص، میزان عود بالا و رفتار تهاجمی در مقایسه با دیگر کیست های ادنتوژنیک تکاملی است. بدلیل ویژگیهای کلینیکوپاتولوژیک آن، نامش به کراتوادنتوژنیک تومور در طبقه بندی جدیدWorld Health Organization تغییر یافته است.(1)

کیست های رادیکولر جز کیست های التهابی فک و در ارتباط با دندان عفونی و نکروز پالپ هستند و از سلول های باقیمانده مالاسز منشا گرفته که به عنوان منبع اپیتلیوم اطراف کیست می باشد. در مردان بیشتر از زنان دیده می شود و از لحاظ آناتومیکی در ناحیه ای که دندان هست، دیده می شود. در  ماگزیلا شایعتر از مندیبل است. در قدام ماگزیلا و در ناحیه پره مولر های مندیبل بیشتر اتفاق می افتد.(2)

کیست دنتی ژروس یا کیست فولیکولار دومین نوع شایع کیست های ادنتوژنیک و جز کیست های تکاملی فک ها است. این کیست بواسطه جداسازی فولیکول از اطراف تاج دندان رویش نیافته مشخص می شود. این کیست در مردان و در سن 30-10 سالگی بیشتراتفاق می افتد. اغلب مولر سوم مندیبل نهفته و کانین ماگزیلا را درگیر می کند.(3)

 پروتئین (HER2(Human Epidermal Reseptor2 یا2 ErbB- یک گیرنده داخل غشای سلولی با خاصیت تیروزین کینازی می باشد که بر روی بازوی بلند کروموزوم17 قرار گرفته است و در حالت عادی در سطح همه  سلول های طبیعی وجود دارد. پروتئین  HER2  به طور طبیعی در مسیر های انتقال سیگنالی که منجر به رشد و تمایز می شوند نقش دارد.(4) نقش اولین عضو خانواده HER بعبارتی Epidermal growth factor receotor) EGFR( و لیگاندهای آن در طی تکامل ادنتوژنز انسانی و مورفوژنز دندانی تا حدودی مشخص شده است. (5)

در گزارشی از Asareh و همکاران در سال 2016 در اهواز 13 نمونه بلوک پارافینی ادنتوژنیک کراتوکیست به روش ایمونوهیستوشیمی برای مارکر Her2/neu رنگ آمیزی شدند. در نتایج حاصله فقط یک مورد از ادنتوژنیک کراتوکیست ها رنگ پذیری متوسط(2+) و سه مورد رنگ پذیری خفیف(1+)  را در سلول های سنگفرشی نشان دادند و در سایر موارد ( %69)ادنتوژنیک کراتوکیست ها رنگ پذیری در بافت اپیتلیالی منفی بود. با توجه به عدم رنگ پذیری Her2/neu در اغلب نمونه های ادنتوژنیک کراتوکیست به نظر می رسد این مارکر در ایجاد و پیشرفت این کیست نقش تعیین کننده ای ندارد.(6)

در مطالعهOikawa در ژاپن در سال 2013 بیان HER2 روی غشای سلولی و سیتوپلاسم همه 11 نمونه کیست دنتی ژروس به طور ضعیف تا متوسط مشخص شد.(7)

در مطالعه منصف اصفهانی و ایرانی در همدان در سال 1391 که به منظور تعیین بیان HER2 در کیست های ادنتوژنیک صورت گرفته بود، 3 نمونه از میان 24 نمونه ( %12/5)ادنتوژنیک کراتو کیست و 7 نمونه از 29 نمونه  (%24/1)کیست دنتی ژروس نمره صفر گرفتند اما هیچ یک از 17 نمونه کیست رادیکولر نمره صفر را کسب نکردند. 88/2 % نمونه های کیست رادیکولر افزایش بیان HER2 را نشان دادند که به طور معنی دار بیشتر از ادنتوژنیک کراتو کیست و کیست دنتی ژروس بود.(8)

 در گزارش دیگری از Kolar  وهمکاران در سال 2006 در جمهوری چک میانگین بیان HER2 در کیست رادیکولر، کیست دنتی ژروس، OKC منفرد و OKC مرتبط با Nevoid Basal Cell Carcinoma Syndrome به ترتیب 18/3، 24/4، 30/5، 61/7 درصد بود. بیان HER2 در مجموع ادنتوژنیک کراتوکیست ها به طور معنی دار بیشتر از سایر کیست های ادنتوژنیک(کیست دنتی ژروس و کیست رادیکولر) بود (0/29 = p).(9)

با توجه به درصدهای متناقض به دست امده در ارتباط با بیان مثبت HER2  در ادونتوژنیک کراتوکیست و مطالعات محدود بررسی HER2 در کیست رادیکولر و کیست دنتی ژروس، بر آن شدیم تا در این مطالعه به بررسی بیان HER2 در ادونتوژنیک کراتوکیست و کیست رادیکولر و کیست دنتی ژروس بپردازیم تا نقش این فاکتور رشدی در تکامل این کیستهای ادنتوژنیک مشخص شود.   

1. میزان نمره کل بیان HER2 در ادنتوژنیک کراتو کیست چقدر است؟
2. میزان نمره کل بیان HER2  در کیست دنتی ژروس چقدر است؟
3. میزان نمره کل بیان HER2 در کیست رادیکولر چقدر است؟
4. میزان بیان HER2 در ادنتوژنیک کراتو کیست، کیست دنتی ژروس و کیست رادیکولر با هم متفاوت است.

مقایسه بیان HER2در ادنتوژنیک کراتوکیست، کیست رادیکولر و کیست دنتی ژروس.

1. 1. تعیین میزان نمره کل HER2  در ادنتوژنیک کراتوکیست
2. تعیین میزان نمره کل HER2  در کیست رادیکولر
3. تعیین میزان نمره کل HER2  در کیست دنتی ژروس 
4. مقایسه بیان HER2 در ادنتوژنیک کراتوکیست،کیست رادیکولر و کیست دنتی ژروس.                 

مرکز تحقیقات دندانپزشکی، دانشکده های دندانپزشکی

HER2: یک گیرنده داخل غشایی سلولی با خاصیت تیروزین کینازی می باشد و در حالت عادی در سطح همه سلول های طبیعی وجود دارد که در رشد و تمایز سلولها نقش دارد و یکی از عوامل مهم پیش آگهی در سرطان محسوب می شود.(4)

مقطعی(توصیفی-تحلیلی)

نمونه های تهیه شده از ادنتوژنیک کراتوکیست و کیست رادیکولر و کیست دنتی ژروس موجود در آرشیو بخش پاتولوژی دانشکده دندانپزشکی زاهدان.

معیار ورود: بلوک های پارافینی که بافت کافی از نمونه های مورد نظر را جهت بررسی داشته باشند، حاوی نکروز و التهاب نباشند و به درستی فیکس شده باشند.

تمام نمونه های بیوپسی مناسب بخش پاتولوژی دهان دانشکده دندانپزشکی زاهدان است که طی سالهای 1378 تا 1396 جمع اوری شده اند و شامل 30 نمونه ادنتوژنیک کراتوکیست و 30 نمونه کیست دنتی ژروس و 30 نمونه کیست رادیکولر و در مجموع 90 نمونه می باشد.

سرشماری

فرم ثبت اطلاعات(ضمیمه1)

از بین نمونه های موجود در آرشیو بخش پاتولوژی دهان دانشکده دندانپزشکی زاهدان لامهای مربوط به نمونه های ادنتوژنیک کراتوکیست، کیست دنتی ژروس و کیست رادیکولر توسط پاتولوژیست دهان، فک و صورت مورد بازبینی مجدد قرار می گیرند. سپس از بلوکهای مربوطه برش های 3 تا 5 میکرونی زده شده وکلیه مراحل آزمایشگاهی طبق دفترچه راهنمای موجود در کیت رنگ آمیزی HER2 انجام می گیرد.

 بیان  HER2 براساس درصد سلول های رنگ امیزی شده مثبت و شدت واکنش ارزیابی می شود. لام ها پس از اتمام رنگ امیزی ایمونوهیستوشیمی با استفاده از میکروسکوپ نوری(Nikon type 4) مورد ارزیابی قرار می گیرند. ارزیابی رنگ آمیزی در سیتوپلاسم و غشا به رنگ قهوه ای است، به روش IRS بدین صورت میباشد؛ رنگ پذیری بر اساس شدت الگوی رنگ امیزی: عدم رنگ پذیری سلولها= صفر، رنگ پذیری خفیف= 1، رنگ پذیری متوسط= 2، رنگ پذیری شدید= 3 و بر اساس درصد سلولهای رنگ گرفته: عدم رنگ پذیری سلولها= صفر، رنگ پذیری کمتر از ده درصد سلولها= 1، رنگ پذیری 10 تا 50 درصد سلولها=2، رنگ پذیری 51 تا 80 درصد سلول ها= 3، رنگ پذیری بیشتر از 80 درصد سلولها= 4 برآورد می شوند. سپس در هر نمونه درصد سلولهای مثبت و شدت واکنش در هم ضرب می شوند(10و11)و نتایجی(score) بین 0 تا 12 بدست می دهد که score کمتر از 3 بعنوان بیان کم و score 4 و بالاتر بعنوان بیان زیاد در نظر گرفته می شود.

داده های بدست امده از مطالعه بصورت جدول توزیع فراوانی توصیف می شوند و اطلاعات استخراج شده با استفاده از Wallis Test Kruskal مورد تحلیل قرار خواهد گرفت. در این راستا از نرم افزار آماری SPSS نسخه 21 استفاده می شود.

جدول- مقایسه میزان بیان HER2 در گروه های مورد مطالعه

کدهای راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش: کدهای 1، 10، 13، 25، 28، 29، 30، 31  وکدهای اخلاقی پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی(فصل 4-زیست بانک ها):کدهای1، 2، 3، 4(ضمیمه2)

ندارد.

 HER2, Odontogenic Keratocyst, Dentigerous Cyst, Radicular Cyst

 HER2، ادنتوژنیک کراتوکیست، کیست دنتی ژروس، کیست رادیکولر

1. Jamshidi S, Zargaran M, Roshanaei G, Hadadi F, Dehghani Nazhvani  A. Comparison of the exprassioran immunohistochemical n of CD34 and CD105 in odontogenic keratocyst and dentigerous cyst. J Dent Shiraze Univ Med Sci 2017; 18(1): 43-9.
2. Nair P. New perspective on radicular cysts: do day heal?  Int Endo J 1998; 31: 155-160.
3. Vosough Hosseini S, Moradzadeh M, Lotfi M, Aghbali A, Fattahi S. Dentigerous cyst associated with a mesiodens: a case report. J Dent Res Dent Clin Dent Prospect 2011: 5(2): 76-8.  
4. نصیری س، شایانفر ن، اسدی کنی ز، یونس پور ش. «میزان بروزغشایی پروتئین HER2 در سرطان سلول قاعده‌ای پوست در مقایسه با پوست طبیعی حاشیه‌ی تومور به روش ایمونوهیستوشیمی». مجله علوم پزشکی رازی.1392;20(115):1-7.
5. Mohan BC, Angadi PV. Role of epidermal growth factor receptor in odontogenic epithelium and development of odontogenic lesions. Receptors Clin Investig 2015; 2(4): e824.
6. Asareh F, Hashemi A, Haghighi zadeh M. The immunohistochemichal expression of Her2/neu in odontogenic keratcyst (OKC( and dental follicle. Int J Curr Res Chem Pharma Sci 2016; 3(1):34-9.
7. Oikawa M, Miki Y, Shimizu Y, Kumamoto H. Assessment of protein expression and gene status of human epidermal growth factor receptor (HER) family moleclues in ameloblastomas. J Oral Phatol Med 2013; 42(5):424-34.
8.  منصف اصفهانی، ف؛ ایرانی، س. «تعیین افزایش بیان HER2/neu  در سیست های ادنتوژنیک». مجله پزشکی ارومیه،1391؛ دوره (5)23، شماره صفحه 520-513.
9. Kolar Z, Geierova M, Bouchal J, Pazdera J, Zboril V, Tvrdy P. Immunohistochemical analysis of  the biological potential of odontogenic keratocyst. J Oral Pathol Med 2006; 35(2): 75-80.
10. Specht E, Kaemmerer D, Sanger J, Wirtz RM, Schulz S, Lupp A. Comparison of immunoreactive score, HER2/ neu score and H score for the immunohistochemical evaluation of somatostatin receptors in bronchopulmonary neuroendocrine neoplasms. Histopathology 2015; 67(3): 368–377.
11. Meulendijks D, Jacobw W, Martinez-Garcia M, Taus A, Lolkema MP, Voest EE, et al. First-in-human phase I study of lumretuzumab, a glycoengineered humanized anti-HER3 monoclonal antibody, in patients with metastatic or advanced HER3-positive solid tumors. Clin Cancer Res 2016; 22(4): 877-85.

مقایسه بیان HER2 در ادنتوژنیک کراتوکیست، کیست رادیکولر و  کیست دنتی ژروس

ندارد.

در این مطالعه با مقایسه بیان HER2 در ادنتوژنیک کراتوکیست، کیست رادیکوار و کیست دنتی ژروس، نقش این مارکر در پیشرفت وتکامل این ضایعات مشخص می گردد.

ندارد .

ندارد .

هزینه به عهده مجری یا مجریان طرح خواهد بود و بیمار هزینه ای پرداخت نخواهد کرد.

ندارد .

اطلاعات شخصی مربوط به هر یک از شرکت کنندگان به صورت محرمانه نگهداری خواهد شد.

مجری موظف است پاسخگوی کلیه پرسش ها باشد. 

شرکت من در مطالعه کاملاً اختیاری است و آزاد خواهم بود که از شرکت در مطالعه امتناع نموده یا هر زمان  که مایل بودم بدون آنکه تغییری در نحوه رفتار پزشک درمانگر یا نحوه درمان و مراقبت از بیماری اینجانب ایجاد شود از پژوهش مذکور خارج شوم.

با توجه به اطلاعات موجود در این فرم و توضیحات حضوری مجری یا همکاران طرح موافقت خود را با شرکت در این مطالعه اعلان می نمایم. یک نسخه از این فرم به من داده شده و فرصت خواندن آن را داشته ام.

مقایسه بیانHER2 در ادنتوژنیک کراتوکیست، کیست رادیکولر و کیست دنتی ژروس

کد........

سن:.......سال

جنس:       مرد□             زن□

گروه مورد مطالعه: ادنتوژنیک کراتوکیست □      کیست رادیکولر □     کیست دنتی ژروس □

نمره کل بیان HER2 :              زیاد □                کم □