بررسی غلظت بزاقی اینترلوکین 17 دربیماران مبتلا به افت مینور .

افت عودکننده دهانی یکی از شایعترین بیماری های التهابی مخاط دهان میباشد.که 20% جمعیت عمومی را تحت تاثیر قرار میدهد> 3 فرم RAS  بر اساس سایز وتعداد ضایعات شناخته شده است که عبارتند از:نوع مینور که بیش از 80% کیس های افت ازین نوع هستند، دارای سایز کوچک (با قطر 1 سانتی متر) کم عمق و با حدود مشخص هستند.(1)

و به شکل زخم هایی گرد که با یک غشای زرد تا خاکستری پوشیده شده اند و در اطراف انها هاله ای اریتماتوز وجود دارد،هستند.(1)

این ضایعات معمولا بعد از 10_14 روز بدون باقی گذاشتن اسکار  ترمیم می یابند. نوع ماژور زخم هایی بزرگتر و عمیق تر ازنوع مینور هستند.(1)

این زخم ها روند ترمیم آهسته تری دارند و معمولا زخم و اسکار برجای میگذارند.(1)

ضایعات هرپتی فرم ضایعاتی متعدد و کوچک با قطر کوچکتر از 4 سانتی متر که در سرتاسر مخاط دهان پراکنده شدهاند و این ضایعات ممکمن است یکی شده و زخم بزرگتری را به وجود اورند.(1)

فاکتور های گونانونی مانند استعداد ژنیتیکی،اختلالات ایمونولوژِیکی،عفونت های ویروسی و باکتریایی، الرژی های غذایی،کمبود ویتامین ها،بیماری های سیتمیک،مشکلات هورمونی و استرس میتوانند اغازگر و یا مرتبط با افت عودکننده دهانی باشند .

استرس با احتمال تاثیر ان روی سیستم ایمنی میتواند یکی از موارد مرتبط با ras باشد.(1)

اخیرا سلول های TH17 (تولیدکننده ی IL_17) به صورت زیرمجموعه ی منحصر به فردی از سلول های TH(T HELPER) کشف شده اند .(2)

Shirazian و همکاران در مطالعه ای در سال 2017 به مقایسه سطح اینترلوکین 17 و اینترلوکین 22 در بیماران لیکن پلان دهانی و افراد سالم پرداختند. افراد مورد مطالعه در این مطالعه ی موردی – شاهدی شامل 26 فرد مبتلا به OLP و 26 فرد سالم بودند. این مطالعه نشان داد تفاوت معناداری در سطح بزاقی اینترلوکین 17 بیماران لیکن پلان دهانی و افراد سالم وجود ندارد. (3)

Kunikullaya و همکاران در مطالعه ای در سال 2017 اقدام به بررسی سطح استرس ، کورتیزول سرم ، کورتیزول بزاقی ، آمیلاز و الکترولیت ها در افراد مبتلا به سندروم آفت راجعه (RAS) نمود. در این مطالعه سطح اضطراب 34 فرد مبتلا به RAS و 34 فرد سالم (گروه کنترل) به کمک پرسشنامه STAI مورد ارزیابی قرار گرفت. سپس از افراد نمونه گیری بزاق و سرم صورت گرفت تا مارکر های مورد پژوهش اندازه گیری شود. نتایج این مطالعه نشان داد که الکترولیت ها (سدیم و پتاسیم سرم) تفاوت معناداری در دو گروه ندارد. همچنین نشان داده شد که مارکر های بزاقی استرس و میزان اضطراب افراد تفاوت معناداری در دو گروه ندارد. (4)

در سال 2016 ، Javvadi و همکاران در مطالعه ای به بررسی بیان ژن  IL-17 و FoxP3  به روش ایمونوهیستوشیمی و qPCR در بیماران مبتلا به لیکن پلان دهانی پرداخت . در این مطالعه 10 فرد مبتلا به OLP و 9 فرد سالم (گدوه کنترل) مورد بررسی و مقایسه قرار گرفتند . این مطالعه نشان داد که بیان ژن FoxP3 به طور معناداری در افراد مبتلا به OLP بیشتر بوده  و بیان ژن IL-17 تفاوت معناداری در دو گروه نداشت. (5)

Seifi و همکاران در مطالعه ی خود در سال 2015 به بررسی سطح بزاقی VEGF-R3 ، TNFα ، TNFβ ، و IL-17A/F در بیماران مبتلا به آفت مینور پرداختند. افراد مورد مطالعه در این پژوهش شامل 18 بیمار مبتلا به RAS و 18 فرد سالم  بودند . نتایج مطالعه نشان داد که سطح بزاقی IL-17 در بیماران مبتلا به آفت که در مرحله ی Ulcerative بودند به طور معناداری بیشتر از بیماران فاز healing و افراد سالم بود. (6)

در مطالعه ای دیگر در سال 2012 Shaker و همکاران در مصر اقدام به بررسی اینترلوکین 17 و اینترلوکین 11 موجود در GCF در بیماران پریودنتیت مهاجم و مزمن و ارتباط آن با پلاک باکتریایی موجود کردند. در این مطالعه مایع شیار لثه ای 25 فرد مبتلا به پریودنتیت مزمن ، 25 فرد مبتلا به پریودنتیت مهاجم و 15 فرد سالم به عنوان گروه کنترل مورد بررسی قرار گرفت. نتایج این مطالعه نشان داد که میزان IL-17 افراد مبتلا به پریودنتیت مزمن از این سطح در افراد مبتلا به پریودنتیت مهاجم و افراد سالم به طور معناداری بیشتر است. (7)

سلول های TH17، در برابر پاتوژن های باکتریایی همانند کاندیدا البیکانز و استافیلوکوک اورئوس حفاظت را تامین میکند؛ سلول های TH17 میتوانند سایتوکاین های متعدد را ترشح کنند از جمله IL_17،IL_21،IL_26. این سایتوکاین ها قادر به تحریک چندین نوع سلول برای ازادسازی کموکاین های ایجاد کننده ی واکنش های التهابی قوی برای ارایه حفاظت موثر هستند.یک سایتوکاین اثرگذار سلول های TH17 ، IL_17 است که در توسعه ی بیماری خودایمنی،التهابی،عفونی و تومورال دخیل است.IL_17 به صورت سایتوکاین التهابی دسته بندی شده است ، که در فعال سازی فرایند های التهابی شامل نوتروفیل ها نقش مهمی را ایفا میکند.(8)

اینترلوکین 17 به عنوان یک سایتوکاین التهاب زا ،در بیماری های مختلفی از جمله بیماری های خودایمنی مانند ارتریت روماتویید و بیماری CROHN مورد بررسی قرار گرفته و بین اینترلوکین 17 و بیماری های اخیر ارتباط دیده میشود. (9)

بزاق نقش مهمی در حفره دهان بازی میکند و هرگونه تغییری در جریان بزاق یا ترکیبات پروتینی ان ممکن است تاثیرات قابل توجهی در حفره دهان ایجاد کند. (2)

استفاده از بزاق به عنوان یک وسیله تشخیصی غیر تهاجمی و مقرون به صرفه برای غربالگری بیماران،بدن نیاز به روش های بسیار پیشرفته در حال توسعه است.جمع اوری بزاق در مقایسه با  دیگر روش های غیرتهاجمی به علت کمتر بودن ریسک عفونت(needle stick شدن هنگام خونگیری) مناسب تر است. (10)

استفاده از بزاق،به عنوان روش تشخیصی جهت تشخیص اولیه بیماری های تهدید کننده ی حیات از قبیل سرطان،اختلالات متابولیک،عفونت و بیماری های التهابی یک موقعیت منحصربه فرد است که دندانپزشک را به سمت راهی جدید برای مراقبت های بهداشتی سوق میدهد.ترکیبات قابل تغییر مفیدی در بزاق وجود دارد که درهنگام سلامت و بیماری میزان انها متفاوت است،این ترکیبات تحت عنوان بیومارکر نام گذاری میشوند. استفاده از بیومارکر به عنوان پیشگیری اولیه بیماری های کلینیکی،نه تنها روشی موثر برای پیشگیری و درمان بیماری هاست،بلکه ریسک فاکتور های سلامتی را هم ارزیابی میکند.

با توجه به این که مطالعه ای تحت این عنوان در سیستان و بلوچستان انجام نشده است ، هدف از انجام این مطالعه بررسی میزان بزاقی اینترلوکین 17 در بیماران مبتلا به آفت مینور می باشد. 

1_غلظت بزاقی il_17 در افراد مبتلا به RAS چه قدر است؟

2_غلظت بزاقی il_17 در افراد سالم  چه قدر است؟

3_غلظت بزاقی il_17 در افراد مبتلا به RAS با افراد سالم متفاوت است

تعیین غلظت بزاقی اینترلوکین 17 دربیماران مبتلا به افت مینور. 

1-تعیین غلظت بزاقی IL_17 در افراد مبتلا به RAS

2_ تعیین غلظت بزاقی IL_17 در افراد سالم

3-مقایسه غلظت بزاقی IL_17 در افراد مبتلا به RAS با افراد سالم

دندانپزشکان ، دانشگاه علوم پزشکی زاهدان

آفت: یکی از شایعترین بیماری های التهابی مخاط دهان میباشد که 20% جمعیت عمومی را تحت تاثیر قرار میدهد¹.

بزاق:بزاق کامل تشکیل شده از ترکیبات برون ریز که توسط غدد بزاقی اصلی و فرعی ترشح میشود.¹⁰

اینترلوکین 17: سایتوکاین التهابی که در فعال سازی فرایند های التهابی شامل نوتروفیل ها نقش مهمی ایفا میکند. ⁴

 توصیفی تحلیلی

جامعه مورد بررسی شامل بیماران مراجعه کننده به دانشکده دندانپزشکی که دارای افت مینور دهانی بودند و گروه کنترل شامل افراد سالم که از لحاظ سن و جنس با گروه مورد مطابقت داشته و جهت شرکت در مطالعه رضایت دارند.

معیار های ورود به مطالعه :

1-بیماران دارای آفت مینور

2- عدم وجود هرگونه پاتولوژی دهانی غیر از آفت 

3- عدم وجود خشکی دهان 

4- عدم مصرف سیگار و دخانیات 

5- عدم مصرف الکل و تنباکوی غیر تدخینی 

6-عدم ابتلا به بیماری سیستمیک 

7-عدم سابقه کموتراپی و رادیوتراپی

2-گروه کنترل : افراد سالم که جهت شرکت در مطالعه رضایت دارند و از لحاظ سن و جنس با گروه مورد هماهنگی دارند .

معیار های خروج از مطالعه :

1- عدم تمایل بیمار در هر قسمت از مطالعه جهت جهت شرکت یا ادامه ی آن 

با توجه به مطالعه ی Seifi و همکاران ( 6) و بر اساس فرمول آماری زیر ، حجم نمونه در هر گروه 30 نفر در نظر گرفته شد . 

N=S² Z² / d²

n = (1.96)² (10.89)² / (4)²

n= 3.8416 * 118.5921 / 16 = 28.47≈ 30

نمونه گیری به روش اسان در دسترس پس از تصویب طرح و اجازه کمیته اخلاق انجام خواهد شد وکلیه افراد واجد شرایط  تا رسیدن به حجم نمونه مورد نظر وارد مطالعه می شوند.

با استفاده از فرم اطلاعاتی ، اطلاعات دموگرافیک و میزان اینترلوکین 17 بزاق هر فرد در هر گروه ثبت خواهد شد.

(ضمیمه شماره1)

جامعه مورد پژوهش در این مطالعه 30 فرد مبتلا به آفت مینور و 30 فرد سالم خواهد بود که معیار های ورود به طرح را دارا بوده و جهت شرکت در مطالعه رضایت دارند و در طی سال 97 به بخش تشخیص دانشکده ی زاهدان مراجعه خواهند کرد.برای همه ی افراد رضایت نامه و پرسشنامه ای که حاوی اطلاعات و تاریخچه پزشکی باشد تهیه خواهد گردید. 2 گروه انتخاب شدند.

یک:افراد مبتلا به آفت مینور دهانی (گروه مورد case)

دو:افراد سالم(گروه شاهد Control)

دو گروه از سن و جنس هماهنگ خواهند شد. سپس از هر دو گروه نمونه بزاق غیرتحریکی در صبح(بهترین زمان جمع اوری بزاق) جمع اوری خواهد شد و برای جلوگیری از هر تحریکی،بیمار می بایست از خوردن و اشامیدن به مدت 90 دقیقه قبل از ازمایش خوددداری کند.بیمار به صورت upright نشسته و  بزاق خود را هرثانیه به مدت 2تا 5 دقیقه به درون یک تیوپ با وزن مشخص رها خواهد  کرد.(1سی سی) سپس بزاق در سانتریفیوژ با دور ده هزار در دقیقه و دمای 4 درجه سانتی گراد و به مدت 5 دقیقه به منظور جدا شدن دبری های سلولی و باکتریایی سانتریفیوژ خواهند گردید و بزاق برای انجام انالیز های بعدی در دمای منفی 20 درجه سانتی گراد نگه داری خواهد شد و اندازه گیری اینترلوکین 17 به به روش Elisa و براساس پروتوکول شرکت سازنده کیت انجام خواهد گرفت.

غلظت های مختلف با استفاده از جدول ارائه خواهند شد.داده ها به صورت میانگین و انحراف معیار بیان خواهند شد. برای مقایسه بین دو گروه از ازمون t مستقل(در صورت نرمال بودن توزیع)یا ازمون من ویتنی(در صورت نرمال نبودن) استفاده خواهد شد.سطح منحنی دارای 0.05در نظر گرفته خواهد شد. داده در نرم افزار spss.22 تحلیل خواهد شد.

جدول : مقایسه میزان اینترلوکین 17 بزاقی در دو گروه مورد مطالعه

راهنمای اخلاقی پژوهشی حفاظت از ازمودنی انسانی در جمهوری اسلامی ایران،راهنمای عمومی:کد های 1،2،3،4،5،6،7،8،9،10،11

راهنمای اخلاقی پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی در جمهوری اسلامی ایران: کد های 1 تا 12 از قسمت راهنمای عمومی و کد های 1 تا 4 از فصل چهارم

عدم همکاری بیمار جهت شرکت در طرح یا به حد نصاب نرسیدن بیماران

راه حل:جایگزینی بیمار با استفاده از مراجعه کنندگان به سایر مراکز درمانی

افت عودکننده _اینترلوکین 17_بزاق

Recurrent aphthous stomatitis_saliva-interlukin

1. Glick M. Burket's Oral Medicine, 12e: PMPH-USA; 2015.
2. Kakareko M, Jabłońska E, Ratajczak-Wrona W. Role of rhIL-17 in regulating the mitochondrial pathway proteins in peripheral blood neutrophils. Clinical laboratory. 2015;61(3-4):345-51.
3. Shirazian S, Aghahosseini F, Salehi E, Vatanpour M, Banijamali SN, Pourshahidi S. Comparison of interleukin 17 and 22 in saliva of oral lichen planus patients with healthy people. An International Peer Reviewed Open Access Journal For Rapid Publication. 2017:587.
4. Kunikullaya U, Kumar M, Ananthakrishnan V, Jaisri G. Stress as a Cause of Recurrent Aphthous Stomatitis and Its Correlation with Salivary Stress Markers. Chin J Physiol. 2017;60:226-30.
5. Javvadi L, Parachuru V, Milne T, Seymour G, Rich A. Regulatory T-cells and IL17A+ cells infiltrate oral lichen planus lesions. Pathology. 2016;48(6):564-73.
6. Seifi S, Maliji G, Motallebnejad M, Maliji E, Samani MK, Farokhi R, et al. Salivary VEGF-R3, TNF-α, TGF-β and IL-17A/F Levels in Patients with Minor Aphthous. Research in Molecular Medicine. 2015;3(4):35-40.
7. Shaker OG, Ghallab NA. IL-17 and IL-11 GCF levels in aggressive and chronic periodontitis patients: relation to PCR bacterial detection. Mediators of inflammation. 2012;2012.
8. Wang K, Miao T, Lu W, He J, Cui B, Li J, et al. Analysis of oral microbial community and Th17‐associated cytokines in saliva of patients with oral lichen planus. Microbiology and immunology. 2015;59(3):105-13.
9. Wang H, Han Q, Luo Z, Xu C, Liu J, Dan H, et al. Oral lichen planus may enhance the expression of Th17-associated cytokines in local lesions of chronic periodontitis. Clinical oral investigations. 2014;18(6):1647-54.
10. Liu J, Duan Y. Saliva: a potential media for disease diagnostics and monitoring. Oral oncology. 2012;48(7):569-77.

این مطالعه به بررسی سطح بزاقی اینترلوکین 17 در بیماران مبتلا به آفت راجعه دهانی می پردازد.

ندارد

در این مطالعه با بررسی سطح بزاقی اینترلوکین 17 نقش این مارکر در تکامل و پیشرفت آفت مینور مشخص می گردد.

ندارد

ندارد

هزینه به عهده مجری یا مجریان طرح خواهد بود و بیمار هزینه ای را پرداخت نخواهد کرد.

ندارد

اطلاعات شخصی مربوط به هر یک از شرکت کنندگان به صورت محرمانه نگهداری خواهد شد.

مجری موظف است پاسخگوی کلیه پرسش ها باشد. 

شرکت من در مطالعه کاملا اختیاری است و آزاد خواهم بود که از شرکت در مطالعه امتناع نموده یا هر زمان که مایل بودم بدون آن که تغییری در رفتار پزشک درمانگر یا نحوه درمان و مراقبت از بیماری اینجانب ایجاد شود از پژوهش خارج شوم .

با توجه به اطلاعات موجود در این فرم و توضیحات حضوری مجری یا همکاران طرح موافقت خود را با شرکت در این مطالعه اعلان می نمایم. یک نسخه از این فرم به من داده شده و فرصت خواندن آن را داشته ام.

ضمیمه شماره 1

فرم اطلاعاتی

شماره :

گروه :  مورد  ....  شاهد ... 

سن : .......... سال

جنس : مرد ..... زن .........

غلظت براقی Il-17 :....................