مطالعه هیستوشیمیایی گلیکوکونژوگه سطح سلول در کارسینوم کولون با استفاده از لکتین های PNA و SBA

سرطان یکی از علل مهم مرگ و میر در سراسر جهان است که بر زندگی و سلامت مردم تاثیر گذاشته است(1). سرطان کولون یک تهدید بزرگ سلامت جهانی است. این سرطان سومین سرطان شایع در مردان و دومین سرطان شایع بعد از سرطان پستان در زنان است(2). در سال 2012 حدود 4/1 میلیون مورد جدید سرطان کولون و 693.900 مرگ و میر ناشی از این بیماری وجود داشت. در حال حاضر این بیماری چهارمین علت شایع مرگ و میر ناشی از سرطان در سراسر جهان است (2). و متأسفانه، تشخیص دیرهنگام و در مراحل پیشرفته این بیماری، حدود نیمی از موارد مرگ و میر ناشی از  سرطان کولون را رقم می زند(3).که نشان دهنده اهمیت سرطان کولون در سیستم های مراقبت های بهداشتی است. سن معمول تشخیص بیماران پس از 50 سال می باشد (2, 4-6). بالاترین میزان بروز سرطان کولون در هر دو جنس مردان و زنان در ژاپن است. دیگر نرخ های بالا در اروپا، اقیانوسیه و آمریکای شمالی می باشد. پایین ترین میزان نیز در آفریقا، برخی از کشورهای آسیایی و آمریکای لاتین و کارائیب یافت می شود(7). علیرغم افزایش بروز در چندین کشور، مرگ و میر سرطان کولون در بسیاری از کشورها در سراسر جهان، احتمالا به علت غربالگری و بهبود اقدامات و شیوه های درمان، کاهش یافته است(8-10). با این حال، در برخی کشورها با افزایش میزان بروز و منابع کمتر نرخ مرگ و میر همچنان بالا می باشد(10, 11). بعلاوه سرطان کولون شایع ترین سرطان در کشورهای توسعه یافته است. گزارش هایی مبنی بر افزایش موارد این بیماری در ایران وجود دارد(12).

عوامل ژنتیکی، شیوه زندگی و عادات رژیم غذایی عوامل مرتبط با بروز سرطان کولون شناخته شده است(12-14). بعلاوه مطالعات نشان داده است بیان تغییر یافته از گلیکوکونژوگه سطح سلول ها با آسیب های متعدد، از جمله اختلالات مادرزادی، اختلالات ایمنی و سرطان، مرتبط است(15-18). به نظر می رسد تغییرات حاصل در گلیکوکونژوگه های  سطح سلولی در طول انکوژنز،  با پتانسیل بدخیمی سرطان ارتباط دارد(19).

در سلول های یوکاریوتی چندین طبقه از گلیکوکونژوگه ها یافت می شود که شامل گلیکوپروتئین ها و گلیکولیپید ها می باشند(20). این گلیکوکونژوگه ها سطح بیرونی تمام سلول های پستاندار را پوشش می دهد.کمیت و کیفیت پوشش قندی انتهایی گلیکوکونژوگه ها نقش مهمی در تعاملات سلولی،  سلولی- خارج سلولی، ارتباط، تمایز، جنین زایی، تومور زایی، پیشرفت تومور و متاستاز بازی می کند(21, 22). الگوی گلیکوکونژوگه سطح سلول و گلیکوپروتئین های ماتریکس خارج سلولی و گلیکولیپید ها عمدتا رفتار سلول ها را در شرایط طبیعی و پاتولوژیک تعیین می نماید(23).

به نظر می رسد که تنوع فیزیکی، شیمیایی، ساختاری و خواص بیولوژیکی گلیکوکونژوگه های سطح سلولی تا حد زیادی وابسته به ترکیب کربوهیدرات آن است(24). از آنجاییکه اطلاعاتی که بر روی گلیکوکونژوگه های سطح سلولی تعیین می شود بسیار مهم است، لکتین ها همیشه نقش مهمی در شناسایی این گلیکوکونژوگه های سطح سلولی ایفا می کنند(25).

شناسایی اختصاصی کربوهیدرات ها توسط لکتین ها بسیار چشمگیر است. بطوریکه که لکتین ها در بیشتر و حتی در تمام این رویدادهای فوق الذکر دخیل هستند. لکتین ها یک خانواده از پروتئین ها یا گلیکوپروتئین های طبیعی غیرآنزیمی، غیر ایمونوژن خاص یا گلیکوپروتئین های گیاهی یا حیوانی هستند که به طور اختصاصی قابلیت اتصال برگشت پذیر به قندهای انتهایی گلیکوکونژوگه های سطح سلولی را دارند. این خواص لکتین ها آن ها را به عنوان نشانگرهای بیولوژیکی برای مطالعه سلول های سرطانی متمایز می سازد(26-28). از این میان Soybean Agglutinin (SBA) و Peanut Agglutinin (PNA)  به طور گسترده در مطالعات مربوط به پاتولوژی تومورها کاربرد داشته و به ترتیب برای شناسایی کربوهیدرات های N-acetylgalactosamine (GalNac) و آنتی ژن Thomsen–Friedenreich ( یک دی ساکارید با ترکیب Gal-β(1–3) GalNAc) به کار می رود(29, 30).

بنابراین، تشخیص کربوهیدرات در بافت های توموری با لکتین ها و آنتی بادی های علیه آنتی ژن های کربوهیدراتی مرتبط با تومور ممکن است به تشخیص و ارزیابی رفتار تومور کمک کند. مطالعات متعدد این روش را به شکل تحلیل هیستوشیمیایی بافت های توموری با لکتین ها دنبال کرده اند(30-33) .

مطالعه Tang و همکارانش در سال 2002 نشان داد که بیان نوعی گلیکوگونژوگه سطح سلول به نام Maackia amurensis leukoagglutinin-positive در سرطان معده با رفتار سلول مرتبط است به نوعی که سطوح بالای بیان این گلیکوگونژوگه با پروگنوز ضعیف بیماری همراه بود(34).

در مطالعه عرب و همکاران در سال 2009 گزارش شد که در سلول های سرطانی، میزان و توزیع گلیکوکونژوگه های حاوی GalNac در رده های هیستوپاتولوژیک مختلف سرطان معده متفاوت است(35).

نتایج مطالعه دیگری که در سال 2013 توسط عرب و همکاران انجام شد نشان داد که میزان رنگ پذیری و توزیع GalNac و GlcNac در بافت های نئوپلاستیک و در رده های مختلف سرطان کولون اعم از انواع Well differentiated، Moderately differentiated و Poorly differentiated از نظر هیستوشیمیایی متفاوت بود(29).

با توجه به شیوع منطقه ای بالای سرطان کولون و با در نظرگرفتن هزینه های سرسام آور و طول دوره درمان بیماران سرطانی و رنج و مشقتی که این بیماران متحمل می شوند و نیز آمار کم موفقیت در درمان این بیماران که ناشی از تشخیص دیر هنگام و آگاهی از بیماری در مراحل پیشرفته بیماری است، و از سوی دیگر، با توجه به شیوع زیاد سرطان کولون در کشور مسلما نیاز به انجام مطالعات گسترده ای در زمینه تشخیص زودرس عوامل مستعد کننده برای ابتلا به سرطان کولون احساس می شود. به نظر می رسد استفاده از روش های ساده تر با امکان کاربرد بالینی، از طریق  تشخیص زودهنگام و یا به موقع و غربالگری های اولیه کم هزینه بتوان از پیشرفت بیماری های زمینه ای در جهت ابتلا به سرطان کولون جلوگیری نموده و از صرف هزینه های درمانی هنگفت توسط بیماران و مراکز درمانی کاست. لذا هدف از مطالعه حاضر بررسی هیستوشیمیایی گلیکوکونژوگه سطح سلول در کارسینوم کولون می باشد.

 واکنش به لکتین PNA  بر اساس شدت رنگ آمیزی در گرید های مختلف کارسینوم کولون(سیتوپلاسم یا غشا) متفاوت است.

واکنش به لکتین SBA بر اساس شدت رنگ آمیزی گریدهاس مختلف کارسینوم کولون (سیتوپلاسم یا غشا) متفاوت است.

تعیین بیان هیستوشیمیایی گلیکوکونژوگه سطح سلول در نمونه های کارسینوم کولون با استفاده از لکتین های PNA و SBA 

تعیین ارتباط واکنش به لکتین PNA بر اساس شدت رنگ آمیزی در گریدهای مختلف کارسینوم کولون

تعیین ارتباط واکنش به  لکتین SBA بر اساس شدت رنگ آمیزی  در گرید های مختلف کارسینوم کولون.

موسسات آموزشی، پژوهشی و درمانی مراکز خدمات بهداشتی-درمانی، آزمایشگاه های تشخیص طبی و مراکز آموزشی تحقیقاتی پزشکی

هیستوشیمی: یک تکنیک بافتی است که در آن نشانگرهای مختلف کروموژن به عنوان محصول نهایی یک واکنش آنزیمی ته نشین می شوند و بنابراین سلول ها و / یا روند های مثبت را برای برخی از مواد مشخص می کند.

آنتی ژن Thomsen–Friedenreich: ساختاری دی ساکاریدی که اخیرا به عنوان یک بیومارکر پیش آگهی در بیماران مبتلا به سرطان های کولورکتال شناخته شده است(30).

توصیفی-تحلیلی

بلوک های پارافینه مربوط به کارسینوم کولون که به تایید پاتولوژی رسیده باشد.

معیار های ورود: تایید هیستوپاتولوژی نمونه ها از نظر نوع ضایعه

معیار های خروج: عدم تایید تشخیص قبلی یا هرگونه مشکل در برش گیری مجدد بلوک ها

با عنایت به نوع کار انجام شده و تجربه قبلی استاد راهنما و شمارش سلولی در لام های تهیه شده و مقالات قبلی تعداد 10 بیمار در هر گروه هیستوپاتولوژیک کافی است(29, 35).

نمونه گیری آسان و در دسترس از بیماران مبتلا به کارسینوم کولون

اطلاعات حاصل از گریدینگ هیستوشیمی در فرم های تهیه شده برای هر بیمار و ضایعه جمع آوری می شود.

پس از تایید طرح در شورای پژوهش با مراجعه به فایل آرشیو بیمارستان علی ابن ابیطالب زاهدان و آزمایشگاه توحید اقدام به ثبت شماره بیماران و جمع آوری لام های مربوط می نماییم. در صورت تایید تشخیص قبلی بلوک های پارافینه جمع آوری شده و برش هایی به ضخامت 6 میکرون از آن ها تهیه می گردد. بعد از طی مراحل معمول پارافین زدایی و آبدهی با گزیلل و الکل های با درجه صعودی برش ها در بافر فسفات با اسیدیته 8/6 شستشو شده و به مدت 2 ساعت در اتاقک مرطوب در درجه حرارت آزمایشگاه در مجاورت لکتین های PNA و SBA قرار می گیرند. بعد از این مرحله برش ها در بافر فسفات شستشو شده و در کروموژن DAB که حاوی 200 میکرولیتر پراکسید هیدروژن می باشد به مدت 20 دقیقه قرار می گیرند. سپس برش ها برای توقف واکنش مجددا به مدت نیم ساعت در بافر فسفات شستشو می شوند. پس از این مرحله برش ها به مدت بیست دقیقه در مجاورت محلول آلسین بلو با اسیدیته 5/2 قرار می گیرند. و بعد از آن به صورت معمول در آزمایشگاه های بافت آبگیری شفاف و مونته خواهند شد پس از این مرحله اقدام به مطالعه بافت از نظر محل واکنش، شدت و نحوه توزیع آن با توجه به شدت رنگ آمیزی خواهد شد. اطلاعات جمع آوری شده در فرم های مناسب ثبت و وارد نرم افزار آماری SPSS خواهد شد و توسط همکار مشاور آمار آنالیز می گردد. در این روش رنگ آمیزی، لکتین های PNA و SBA با غلظت 10 میکروگرم در هر میلی لیتر بافر فسفات رقیق می گردند و اسیدیته 8/6 تنظیم می شود. غلظت DAB برابر 03/0 درصد و 200 میکرولیتر پراکسید هیدروژن به آن اضافه می شود.(29, 35).

پس از دریافت نتایج و وارد کردن آن ها به کامپیوتر با استفاده از نرم افزار SPSS، آنالیز داده ها انجام می شود. جهت توصیف نتایج از آمارهای توصیفی مانند میانگین، میانه و نما استفاده خواهد شد. برای تحلیل نتایج از آمدن  ANOVA استفاده خواهد شد.

از مقاطع بافتی مربوط به آرشیو بخش پاتولوژی بیمارستان امام علی ابن ابیطالب(ع) و آزمایشگاه توحید استفاده می شود. اطلاعات مستخرج از پرونده نیز بدون ذکر نام مورد استفاده قرار خواهد گرفت(حفظ محرمانگی). با رعایت کدهای 1، 2، 3، 5، 6، 7، 8، از راهنمای عمومی دفترچه راهنمای اخلاق پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی در جمهوری اسلامی و همچنین کدهای 1، 3، 4، 7، 9، 10، 11، 13، 14، 17، 18، 20، 25، 28، 29، 30، 31 دفترچه راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش های علوم پزشکی دارای آزمودنی های انسانی در جمهوری اسلامی ایران .

راهنمای عمومی

1- پژوهشگر باید به این امر مهم توجه داشته باشد که بافتها و اعضای مورد استفاده، دارای منشأ انسانی اند و کرامت انسانی اقتضا میکند که جمع آوری، نگهداری، استفاده و نابودسازی آنها توأم با رعایت ملاحظات و شؤون مرتبط باشد.

2- از اجزای بدنی دارای منشأ انسانی باید تنها در پژوهشهایی استفاده شود که اهداف ارزشمندی را در راستای مبارزه با بیماریها و ارتقای سلامت انسانها دنبال میکنند.

3- تمامی پژوهشها بر روی عضو و بافت انسانی، پیش از اجرا، باید مورد تأیید کمیتهی اخلاق در پژوهش مرتبط قرار گیرد. کمیتهی اخلاق در پژوهش حق دارد که در تمامی مراحل پژوهش بر آن نظارت داشته باشد. پژوهشگران باید در این زمینه با کمیته ی اخلاق در پژوهش همکاری کنند.

4- رضایت آگاهانه ی فرد دهنده ی عضو یا بافت، یا جانشین قانونی او، شرط اساسی در تأیید اخلاقی هر پژوهش بر روی عضو و بافت انسانی است. رضایتنامه باید با رعایت تمامی اصول مرتبط تهیه و هنگام ارسال طرحنامه برای تصویب، به آن پیوست شده باشد.

5- در مواردی که اخذ رضایت آگاهانه از دهنده ی نمونه ی ذخیرهشده یا جانشین قانونی او امکانپذیر نباشد، به شرط وجود رضایت کلی اولیه بر استفاده ی پژوهشی، در صورت تأیید کمیته ی اخلاق در پژوهش میتوان از آن نمونه برای پژوهش استفاده کرد. در چنین مواردی باید از نمونه هایی استفاده شود که به نحو برگشت ناپذیر بینام شده باشد.

6- تمامی اطلاعاتی که از صاحبان عضو یا بافت مورد پژوهش، جمع آوری و ثبت میشود، راز حرفهای تلقی میشود؛ از این رو، تمامی اصول و ملاحظات مربوط به رازداری و حفظ حریم شخصی، باید در مورد آنها مراعات شود.

7- مرکز انجام دهنده ی پژوهش بر روی عضو و بافت باید مهارت و امکانات لازم برای حفظ رازداری را داشته باشد؛ در غیر این صورت، اطلاعات باید به شکل بینام و غیرقابل ردیابی ثبت و ذخیره شود.

8- پژوهشگر باید از اعضاء و بافتهایی که به منظور پژوهش در اختیار او قرار میگیرد استفادهی بهینه کرده، از هدر رفتن آنها جلوگیری کند.

9-هدف اصلی هر پژوهش‌باید ارتقای سلامت انسان‌ها توأم با رعایت کرامت و حقوق ایشان باشد.

10-پژوهش بر انسان فقط در صورتی توجیه‌پذیر است که منافع بالقوه‌ی آن برای هر فرد آزمودنی بیش‌تر از خطرهای  آن باشد. در پژوهش‌های دارای ماهیت غیر درمانی، سطح آسیبی که آزمودنی در معرض آن قرار می‌گیرد نباید بیش‌تر از آن‌چه باشد که مردم عادی در زندگی روزمره‌ی خود با آن مواجه می‌شوند. حصول اطمینان از این امر برعهده‌ی طراحان، مجریان و همکاران پژوهش و تمامی شوراهای بررسی یا پایش‌کننده‌ی پژوهش از جمله کمیته‌ی اخلاق در پژوهش‌ است.

11-مواردی از قبیل سرعت، سهولت کار، راحتی پژوهشگر، هزینه‌ی پایین‌تر و/ یا صرفاً عملی بودن آن به هیچ وجه نباید موجب قرار دادن آزمودنی در معرض خطر یا زیان افزوده یا تحمیل هر گونه محدودیت اختیار اضافی به وی شود.

12-گر در حین اجرای پژوهش مشخص شود که خطرات شرکت در این پژوهش برای آزمودنی‌ها بیش از فواید بالقوه‌ی آن است، باید آن پژوهش بلافاصله متوقف شود.

13-در پژوهش‌های پزشکی که ممکن است به محیط زیست آسیب برسانند، باید احتیاط‌های لازم در جهت حفظ و نگهداری و عدم آسیب رسانی به محیط ریست انجام گیرد.

14-هر پژوهشی باید بر اساس و منطبق بر یک طرح‌نامه (پروپوزال) به انجام برسد. در کارآزمایی‌های بالینی باید علاوه بر طرح نامه، دستورالعمل (پروتکل) نیز تهیه و ارائه شود. طرح‌نامه و دستورالعمل باید شامل تمامی اجزای ضروری باشد. از جمله بخش ملاحظات اخلاقی، اطلاعات مربوط به بودجه، حمایت کننده‌ها، وابستگی‌های سازمانی، موارد تعارض منافع بالقوه‌ی دیگر، مشوق‌های شرکت کنندگان، پیش بینی درمان و یا جبران خسارت افراد آسیب دیده در پژوهش .در مواردی که لازم است رضایت‌نامه‌ی آگاهانه به‌صورت کتبی اخذ شود، فرم رضایت‌نامه باید تدوین و به طرح‌نامه پیوست شده باشد. پیش از تصویب یا تأیید طرح‌نامه از سوی کمیته‌ی مستقل اخلاق در پژوهش، نباید اجرای پژوهش شروع شود.

15-کمیته‌ی اخلاق در پژوهش علاوه بر بررسی و تصویب طرح‌نامه و دستورالعمل، این حق را دارد که طرح‌‌ها را در حین و بعد از اجرا را از نظر رعایت ملاحظات اخلاقی مورد پایش قرار دهد. اطلاعات و مدارکی که برای پایش از سوی کمیته‌ی اخلاق درخواست می‌شود، باید از سوی پژوهشگران در اختیار این کمیته گذاشته شود.   

16-کسب رضایت آگاهانه و آزادانه در هر پژوهشی که بر روی آزمودنی انسانی اجرا می‌شود، الزامی است. این رضایت باید به شکل کتبی باشد. در مواردی که اخذ رضایت آگاهانه‌ی کتبی غیر ممکن یا قابل صرف‌نظر باشد، باید موضوع با ذکر دلایل به کمیته‌ی اخلاق منتقل شود. در صورت تأیید کمیته‌ی اخلاق، اخذ رضایت کتبی قابل تعویق یا تبدیل به رضایت شفاهی یا ضمنی خواهد بود.

17-اگر در طول اجرای پژوهش تغییری در نحوه اجرای پژوهش داده شود یا اطلاعات جدیدی به دست آید که احتمال داشته باشد که بر تصمیم آزمودنی مبنی بر ادامه‌ی شرکت در پژوهش تاثیر گذار باشد، باید موضوع به اطلاع کمیته‌ی اخلاق رسانده شود و در صورت موافقت کمیته با ادامه‌ی پژوهش، مراتب به اطلاع آزمودنی رسانده شود و رضایت آگاهانه مجددا اخذ گردد.

18-پژوهشگر ارشد مسؤول مستقیم ارائه‌ی اطلاعات کافی و به زبان قابل فهم برای آزمودنی ، اطمینان از درک اطلاعات ارائه شده، و اخذ رضایت آگاهانه است. در مواردی که بنا به‌دلیلی، نظیر زیاد بودن تعداد آزمودنی‌ها، این اطلاع‌رسانی از طریق شخص دیگری انجام می‌گیرد، این پژوهشگر ارشد است که مسؤول انتخاب فردی آگاه و مناسب برای این کار و حصول اطمینان از تأمین شرایط مذکور در این بند است.

19-در پژوهش‌هایی که از مواد بدنی (شامل بافت‌ها و مایعات بدن انسان)  یا داده‌هایی استفاده می‌شود که هویت صاحبان آن‌ها معلوم یا قابل کشف و ردیابی است، باید برای جمع‌آوری، تحلیل، ذخیره‎سازی و /یا استفاده‌ی مجدد از آن‌ها رضایت آگاهانه گرفته شود. در مواردی که اخذ رضایت غیرممکن باشد یا اعتبار پژوهش را خدشه‌دار کند، می‌توان در صورت بررسی مورد و تصویب کمیته‌ی اخلاق ، از داده‌ها یا مواد بدنی ذخیره شده، بدون اخذ رضایت آگاهانه استفاده کرد.

20-در مواردی که آگاه کردن آزمودنی درباره‌ی جنبه‌ای از پژوهش باعث کاهش اعتبار پژوهش می شود، ضرورت اطلاع‌رسانی ناکامل از طرف پژوهشگر باید توسط کمیته‌ی اخلاق تأیید شود. بعد از رفع عامل این محدودیت، باید اطلاع‌رسانی کامل به آزمودنی انجام گیرد.

21-پژوهشگر مسؤول رعایت اصل رازداری و حفظ اسرار آزمودنی‌ها و اتخاذ تدابیر مناسب برای جلوگیری از انتشار آن است. هم‌چنین، پژوهشگر موظف است که از رعایت حریم خصوصی آزمودنی‌ها در طول پژوهش اطمینان حاصل کند. هرگونه انتشار داده‌ها یا اطلاعات به‌دست آمده از بیماران باید بر اساس رضایت آگاهانه انجام گیرد.

22-پژوهشگران موظفند که نتایج پژوهش‌های خود را صادقانه ، دقیق، و کامل منتشر کنند. نتایج، اعم از منفی یا مثبت، و نیز منابع تأمین بودجه، وابستگی  سازمانی، و تعارض منافع – در صورت وجود – باید کاملاً آشکارسازی شوند. پژوهشگران نباید در هنگام عقد قرارداد انجام پژوهش، هیچ  گونه شرطی را مبنی بر حذف یا عدم انتشار یافته‌هایی که از نظر حمایت کننده‌ی پژوهش  مطلوب نیست، بپذیرند.

23-نحوه‌ی گزارش نتایج پژوهش باید ضامن حقوق مادی و معنوی تمامی اشخاص مرتبط با پژوهش، از جمله خود پژوهشگر یا پژوهشگران، آزمودنی‌ها و مؤسسه‌ی حمایت کننده‌ی  پژوهش باشد.

24-گزارش‌ها و مقالات حاصل از پژوهش‌هایی که مفاد این راهنما را نقض کرده‌اند، نباید برای انتشار پذیرفته شوند.

25-روش پژوهش نباید با ارزش‌های اجتماعی، فرهنگی و دینی  جامعه در تناقض باشد.

در صورت داشتن محدودیت در یافتن هرکدام از ضایعات کارسینوم کولون به پنج بیمار برای همان ضایعه اکتفا می گردد و شمارش سلولی در این گروه برای شدت واکنش دو برابر می گردد.

هیستوشیمی، گلیکوگونژوگه، کارسیتوم کولون، لکتین

Histochemistry, glycoconjugate, Colon Carcinoma, Lectin

1.            Aliabadi A, Eghbalian E, Kiani A. Synthesis and Evaluation of the Cytotoxicity of a Series of 1,3,4-Thiadiazole Based Compounds as Anticancer Agents. Iranian journal of basic medical sciences. 2013;16(11):1133-8.

2.            Ferlay J, Soerjomataram I, Dikshit R, Eser S, Mathers C, Rebelo M, et al. Cancer incidence and mortality worldwide: sources, methods and major patterns in GLOBOCAN 2012. International journal of cancer Journal international du cancer. 2015;136(5):E359-86.

3.            Ostendorff HP, Awad A, Braunschweiger KI, Liu Z, Wan Z, Rothschild KJ, et al. Multiplexed VeraCode bead-based serological immunoassay for colorectal cancer. Journal of immunological methods. 2013;400:58-69.

4.            Torre LA, Siegel RL, Ward EM, Jemal A. Global cancer incidence and mortality rates and trends—an update. Cancer Epidemiology and Prevention Biomarkers. 2016;25(1):16-27.

5.            Siegel R, Ma J, Zou Z, Jemal A. Cancer statistics, 2014. CA: a cancer journal for clinicians. 2014;64(1):9-29.

6.            Bray F, Jemal A, Grey N, Ferlay J, Forman D. Global cancer transitions according to the Human Development Index (2008–2030): a population-based study. The lancet oncology. 2012;13(8):790-801.

7.            Torre LA, Siegel RL, Ward EM, Jemal A. Global Cancer Incidence and Mortality Rates and Trends—An Update. Cancer Epidemiology Biomarkers & Prevention. 2016;25(1):16.

8.            Edwards BK, Ward E, Kohler BA, Eheman C, Zauber AG, Anderson RN, et al. Annual report to the nation on the status of cancer, 1975‐2006, featuring colorectal cancer trends and impact of interventions (risk factors, screening, and treatment) to reduce future rates. Cancer. 2010;116(3):544-73.

9.            Bosetti C, Levi F, Rosato V, Bertuccio P, Lucchini F, Negri E, et al. Recent trends in colorectal cancer mortality in Europe. International journal of cancer. 2011;129(1):180-91.

10.          Bosetti C, Bertuccio P, Malvezzi M, Levi F, Chatenoud L, Negri E, et al. Cancer mortality in Europe, 2005–2009, and an overview of trends since 1980. Annals of oncology. 2013;24(10):2657-71.

11.          Chatenoud L, Bertuccio P, Bosetti C, Malvezzi M, Levi F, Negri E, et al. Trends in mortality from major cancers in the Americas: 1980–2010. Annals of oncology. 2014;25(9):1843-53.

12.          Haggar FA, Boushey RP. Colorectal Cancer Epidemiology: Incidence, Mortality, Survival, and Risk Factors. Clinics in Colon and Rectal Surgery. 2009;22(4):191-7.

13.          Shinya H, Wolff WI. Morphology, anatomic distribution and cancer potential of colonic polyps. Ann Surg. 1979;190(6):679-83.

14.          Lai L-R, Hsieh S-C, Huang H-Y, Chou C-C. Effect of lactic fermentation on the total phenolic, saponin and phytic acid contents as well as anti-colon cancer cell proliferation activity of soymilk. Journal of Bioscience and Bioengineering. 2013;115(5):552-6.

15.          Freeze HH, Aebi M. Altered glycan structures: the molecular basis of congenital disorders of glycosylation. Current opinion in structural biology. 2005;15(5):490-8.

16.          Pinho SS, Reis CA. Glycosylation in cancer: mechanisms and clinical implications. Nature Reviews Cancer. 2015;15(9):540.

17.          Reis CA, Osorio H, Silva L, Gomes C, David L. Alterations in glycosylation as biomarkers for cancer detection. Journal of clinical pathology. 2010;63(4):322-9.

18.          Dube DH, Bertozzi CR. Glycans in cancer and inflammation—potential for therapeutics and diagnostics. Nature reviews Drug discovery. 2005;4(6):477.

19.          Tang W, Guo Q, Usuda M, Kokudo N, Seyama Y, Minagawa M, et al. Histochemical expression of sialoglycoconjugates in carcinoma of the papilla of vater. Hepato-gastroenterology. 2005;52(61):67-71.

20.          Costa J. Glycoconjugates from extracellular vesicles: Structures, functions and emerging potential as cancer biomarkers. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Reviews on Cancer. 2017;1868(1):157-66.

21.          Xu XC, Brinck U, Schauer A, Gabius HJ. Differential binding activities of lectins and neoglycoproteins in human testicular tumors. Urological research. 2000;28(1):62-8.

22.          Thies A, Moll I, Berger J, Schumacher U. Lectin binding to cutaneous malignant melanoma: HPA is associated with metastasis formation. British journal of cancer. 2001;84(6):819.

23.          Wang P-H. Altered glycosylation in cancer: sialic acids and sialyltransferases. J Cancer Mol. 2005;1(2):73-81.

24.          Davis BG. Recent developments in glycoconjugates. Journal of the Chemical Society, Perkin Transactions 1. 1999(22):3215-37.

25.          Xie M, Hu J, Long Y-M, Zhang Z-L, Xie H-Y, Pang D-W. Lectin-modified trifunctional nanobiosensors for mapping cell surface glycoconjugates. Biosensors and Bioelectronics. 2009;24(5):1311-7.

26.          Lis H, Sharon N. Lectins: Carbohydrate-specific proteins that mediate cellular recognition. Chemical Reviews. 1998;98(2):637-74.

27.          Krogerus L, Andersson LC. Different lectin‐binding patterns in primary breast cancers and their metastases. Cancer. 1990;66(8):1802-9.

28.          Sherwani AF, Mohmood S, Khan F, Khan RH, Azfer MA. Characterization of lectins and their specificity in carcinomas—an appraisal. Indian Journal of Clinical Biochemistry. 2003;18(2):169-80.

29.          Arab MR, Rojhan AR, Jahantigh M, Mohammadi M. Lectin Histochemical Study of GalNac and GlcNac Containing Glycoconjugates in Colon Adenocarcinoma. Anatomical Sciences Journal. 2013;10(4):29-33.

30.          Nakase H, Sakuma S, Fukuchi T, Yoshino T, Mohri K, Miyata K, et al. Evaluation of a novel fluorescent nanobeacon for targeted imaging of Thomsen-Friedenreich associated colorectal cancer. International Journal of Nanomedicine. 2017;12:1747-55.

31.          Roth J, Zuber C, Komminoth P, Sata T, Li WP, Heitz PU. Applications of immunogold and lectin-gold labeling in tumor research and diagnosis. Histochemistry and cell biology. 1996;106(1):131-48.

32.          Seelentag WKF, Li W-P, Schmitz S-FH, Metzger U, Aeberhard P, Heitz PU, et al. Prognostic value of β1, 6-branched oligosaccharides in human colorectal carcinoma. Cancer research. 1998;58(23):5559-64.

33.          Brooks SA. The involvement of Helix pomatia lectin (HPA) binding N-acetylgalactosamine glycans in cancer progression. Histology and histopathology. 2000;15(1):143-58.

34.          Tang W, Mafune K, Nakata M, Konishi T, Kojima N, Mizuochi T, et al. Association of histochemical expression of Maackia amurensis leukoagglutinin‐positive glycoconjugates with behaviour of human gastric cancer. Histopathology. 2003;42(3):239-45.

35.          Arab MR, Salari S, Karimi M, Mofidpour H. Lectin histochemical study of cell surface glycoconjugate in gastric carcinoma using helix pomatia agglutinin. Acta medica Iranica. 2010;48(4):209.

مطالعه هیستوشیمیایی گلیکوکونژوگه سطح سلول در کارسینوم کولون با استفاده از لکتین های PNA و SBA

ندارد

با توجه به پیشرفت سرطان پژوهش در این رابطه دست یابی به شناسایی و درمان را هموارتر می سازد

ندارد

ندارد

ندارد

با توجه به کار بر روی نمونه های بافتی استخراج شده از آرشیو آزمایشگاه پاتولوژی بیمارستان امام علی (ع) و نداشتن ضرر و هزینه برای صاحبان نمونه های بافتی روش جایگزین ملزوم نمی باشد

اطلاعات استفاده شده جهت طرح پژوهشی بودخ و محرمانه می باشد

ندارد

انصراف و یا حذف نمونه بافی از پژوهش با نظر کمیته اخلاق صورت می پذیرد

با توجه به در دسترس نبودن صاحبان نمونه های بافتی این پژوهش با رضایت و تصویب کمیته اخلاق مبنی بر استفاده از آرشیو و بایگانی آزمایشگاه پاتولوژی بیمارستان امام علی (ع) انجام میپذیرد.

.