بررسی پلی مورفیسم های ژنrs929271) LIF )، CREBL1 (rs8283) ، KIF26B ,(rs12407427)(rs1816072,rs12187676) GABRB2 وP2RX4(rs1169727,rs256414)در افراد مبتلا به اسکیزوفرنی و مقایسه با افراد سالم

اسکیزوفرنی به عنوان یکی از مهمترین اختلالات روانی، بخش عمده ای از تحقیقات روانپزشکی را به خود اختصاص داده است. بیماران مبتلا به این اختلال شامل طیف وسیعی می گردند که از نظر عوامل ایجاد کننده بیماری، علائم و نشانه های وسیع پیش آگهی تفاوت هایی با هم دارند. شیوع اسکیزوفرنی در تمام طول عمر 1-1.5 درصد است علی رغم اینکه شیوع این اختلال در تمام جوامع بشری یکسان است ولی تفاوت های قابل ملاحظه ای از نظر علائم و نشانه های بیماری در اجتماعات و فرهنگ های مختلف دیده می شود .(1)شیوع اسکیزوفرنی در مردان و زنان مساوی است ولی شروع و سیر بیماری در دو جنس تفاوت دارد. حداکثر شیوع در مردان 15-25 سالگی و در زنان 25-35 سالگی است. حدود 90% مبتلایان بین سنین 15-50 سالگی قرار دارند. در برخی مناطق جغرافیای جهان شیوع اسکیزوفرنی به نحو نامعمولی بالا است. در شهرهایی که بیش از یک میلیون سکنه دارند، بین شیوع اسکیزوفرنی و تراکم همبستگی دیده شده است. این همبستگی در شهر های که بین 100000 تا 500000 سکنه دارند ضعیفتر است و در شهرهایی با جمعیت کمتر از 100000 این همبستگی وجود ندارد.ریسک فاکتورهای ابتلا به این بیماری به چند دسته تقسیم می شوند: فاکتورهای دموگرافیک، سن، جنس، نژاد و طبقه اجتماعی، فاکتور های تسریع کننده مثل وقایع زندگی و مهاجرت (که قبل از بروز اسکیزوفرنی ایجاد شوند) و فاکتور های زمینه ساز مثل ژن ها، عفونت . مشکلات قبل از تولد و فاکتور های مثل طبقه اجتماعی، وضعیت زناشویی و گروه خونی وغیره .(2)اسکیزوفرنی با رنج وسیعی از بیماری های خود ایمنی ارتباط دارد بطوری که افراد با تاریخچه بیماری های خودایمنی ریسک ابتلا به اسکیزوفرنی را تا 45% افزایش می هد. شواهد حاکی از آن است که در این بیماری غلظت چندین سایتوکاین التهابی در خون افزایش می یابد(3).در اسکیزوفرنیماننددیگربیماریهایچندعاملیوپیچیده عاملهایژنتیکیازجملهژنهایمستعدبیماری،اپیژنتیک وعاملهایمحیطیمشارکتدارند. مطالعاتخانوادگیوبه ویژهبررسیدوقلوها،نقشعاملهایژنتیکیدرپیشرفتای بیماریونیزچندینژنباخطربالاراکهبااینبیماری هتروژن همراهیدارند،نشاندادهاست. پژوهشهایگستردهنشان داده اند ژنهایی همچون Nerugulin1،(Dysbindin)و GABRB2 از مهمترینآنهاست(4). از آنجا که عوامل ژنتیکی از عوامل مداخله گر در بروز یا افزایش استعداد ابتلا به این بیماری هستند بررسی آنها می تواند در شناخت، تشخیص و پیشگیری از بیماری موثر باشد. همینطور در میان عوامل ژنتیکی مستعد کننده افراد به اسکیزوفرنی، می توان از مجموعه اصلی سازگاری بافتی(MHC)انسان(HLA)نام برد  .(5)

فاکتور مهاری لوکمی یا Leukemia inhibitory factor(LIF) در واقععضوی از خانواده ی اینترلوکین 6 سایتوکاینها بوده که فنوتیپ نورونهای مغزی را تنظیم نموده با سایر سلولهای مغزی از جمله آستروسیت ها، اولیگودندروسیت ها و میکروگلیا ها در ارتباط است و از طرفی در تنظیم پاسخ های ایمنی دخالت مستقیم دارد.ژن این فاکتور مهاری لوکمی روی کروموزوم 22q12.1–q12.2, انسان قرار دارد و ارتباط پلی مورفیسم های شایع این ژن از جمله rs929271, rs737812 و rs929273با بروز و شیوع اسکیزوفرنی در مطالعات گذشته به اثبات رسیده است. مسیر پیام رسانی LIF باعث القاء و فعال شدن کینازی به نام Janus kinase–signal transducer و همینطور فاکتور های رونویسی JAK و STAT می شود که به نوعی در تمایز سلولهای عصبی به آستروسیت ها دخالت دارند(6, 7).طی مطالعاتی مشاهده شد در موش هایی که LIF در آنها ناک اوت شده بود، اختلالات تحریکی و عصبی قابل ملاحظه ای مشاهده شد که البته بروز این اختلالات به عنوان یک فنوتیپ حد واسط در مبتلایان به اسکیزوفرنی نیز در نظر گرفته می شود. (8) همچنین Okahisa و همکاران در سال 2010 ارتباط بین rs929271 و بیماری های نقصان عملکرد حافظه از جمله اسکیزوفرنی را گزارش نمودند(9).

ناحیه کروموزومی کد کننده ی کمپلکس سازگاری نسجی انسانی (MHC) در بازوی کوتاه کروموزوم شماره 6 قرار گرفته است و حاوی حدود 200 ژن می باشد.CYP21A2 وTNXB  وCREBL1 از ژن های مهم این ناحیه محسوب شده و مطالعات مشابه حاکی از ارتباط تنگاتنگی بین جهش های این ناحیه و بروز انواع سندرم های ژنتیکی بوده است .از طرفی rs8283 در ناحیه ی 3’UTR از ژن CREBL1قرار گرفته است که در مطالعات قبلی ارتباط بروز جهش های حذفی در این ژن و ابتلا به لوپوس اریتروماتوز در جمعیت های آمریکایی و اروپایی گزارش شده است(10). به علاوه، Wei و همکاران در سال 2003 پس از بررسی 123 بیمار مبتلا به اسکیزوفرنی، ارتباط معنی داری بین rs8283 واقع در ژن CREBL1و بروز این بیماری مستعد ژنتیکی پیدا کردند (P = 0.015)(11).

KIF26B یکانکوژنازسوپرخانوادهی Kinesin ها (KIFs) میباشدکهافزایشبیانآندربسیاریازتومورهایجامدازجملهسرطانپستان،تخمدانوکولونبهاثباترسیدهاستومطالعاتینیزحاکیازارتباطبیاناینژنومیزانبدخیمیسلولهایتوموریمنتشرشدهاست. مطالعاتوسیعیکهبررویجایگاههایاینژنانجامشدهاست،ارتباطپلیمورفیسماینژنوبروزبرخیازتغییراتنورولوژیکراتوضیحدادهاست.(12) به دلیل نقش آنزیم هایKIFدر نقل و انتقالات آکسونی، پیشنهادشدهاستکهجهشدراینژنهای کد کننده ی این پروتئین درریسکابتلابهبیماریهای روانی اثرگذاراست(4)،  مطالعات زیادی در این زمینه انجام نشده است.در مطالعه ای که بر روی 222 فرد مبتلا به کراتوکونوس و 3324 فرد سالم انجام شد، مشخص شد موتاسیون در rs12407427 مستقر در ژن KIF26B به طور معنی داری (p Value<0.0001) با استعداد ابتلا به این بیماری مرتبط و با سیستم بینایی در ارتباط است(12) ولی گزارشی از میزان تاًثیر این موتاسیون بر استعداد  ابتلا به اسکیزوفرنی در دست نیست.

GABA مهمترین انتقال دهنده ی عصبی مهاری در سیستم اعصاب مرکزی مهره داران است. ضمن باز شدن کانالهای انتقال دهنده ی کلر که در واقع رسپتورهای A از گیرنده ی GABA تلقی می شوند، مهار سریع سیناپسی اتفاق می افتد. مطالعات نشان داده است که عدم تنظیم سیستم GABAergic می تواند به عنوان یک عامل ایدیوپاتولوژیک مهم در بروز شیزوفرنی نقش داشته باشد. مطالعات گذشته ارتباط معنی داری بین وقوع جهش در کروموزوم 5 ( در مجاورت ژن کد کننده ی زیر واحد های a1, a6, b2, g2 از رسپتور GABA) و وقوع اسکیزوفرنی را به نشان داده اند(13). Lo و همکاران در سال 2004 اذعان داشتندجهش های تک نوکلئوتیدی متعددی در جایگاهAlu-Yi6 از پروموتر ژن کد کننده ی زیر واحد بتا 2 از رسپتور GABA_A(GABRB2) در ارتباط تنگاتنگی با ریسک ابتلا به این بیماری می باشد(14). دو جایگاه اینترونی rs1816072و  rs12187676به ترتیب با فراوانی 45/0 و 27/0 روی کروموزوم 5 و بر روی ژن کد کننده ی GABRB2 قرار دارند. در مطالعه ی ارتباط rs12187676 و افزایش ریسک ابتلا به بیماری اوتیسم گزارش شده است (15) ولی جهش احتمالی در این جایگاه در مبتلایان به اسکیزوفرنی بررسی نشده است. ولی ارتباط معنی داری بین وقوع جهش در rs1816072 و بروز انواع بیماری های روانی مشاهده شده است  . (16)

گیرندههایp2xکانالهاییونیدریچهدارلیگاندیهستند.کانالیونیدریچه-لیگاندیگروهیازکانال‌هاییونیازجنسپروتئینغشایسلولهستندکهتوسطلیگاندهاکنترلشدهومعمولاًنسبتبهبعضییون‌هامثل⁺Na،K⁺،Ca⁺⁺و^-Clبسیارگزینشیرفتارمی‌کند(چنینگیرنده‌هاییکهدرسیناپسقرارگرفته‌اند)،پیغامشیمیاییپیش‌سیناپسیآزادشدهرابهطورمستقیموبهسرعتبهپیغامعصبیپس‌سیناپسیتبدیلمی‌کنند وتابهامروزهفتژنجداگانهبرایزیرواحد)p2xازp2x1تا(p2x7شناساییشدهاند(17)و پروتئینهای  p2xمشابههمهستندامادارای380 تا 1000 اسیدآمینهبازیرواحدهایمتنوعهستند(18).

گیرنده p2x4   یک عضو از خانواده p2x ازکانالکاتیونلیگاندیاست کهدرپاسخبهATP بازمیشود وبهغلظتبالایکلسیمحساسپذیراستکهمنجربهدپلاریزاسیونغشایسلولی می شودوسایرفرآیندهایداخلسلولیحساسبهکلسیمرافعالمیکنداین ژن بر روی کروموزوم 12قرار دارد (19). گیرنده های P2X4 در لیزوزوم ها ذخیره شده و در پاسخ به سیگنالهای خارج سلولی به سطح سلول می آید. (20)مطالعات نشان از ارتباط این ژن با دیابت نوع 2 دارد و افراد دیابتی با ژنوتیپ های مختلف p2x4 سطح ترشح انسولین متفاوتی دارند که این عامل نشان از اهمیت این ژن در ترشح انسولین است. دو جایگاه ژنی rs1169727  و rs256414 از جمله شناخته شده ترین نواحی محتمل موتاسیون در ژن P2RX4 هستند که ارتباط معنی داری بین پلی مورفیسم این جایگاه ها و تغییر در همئوستاز گلوکز گزارش شده است.(21) همچنین Barden و همکاران بیان کردند پلی مورفیسم های تک نوکلئوتیدی در ژن P2RX7 با بروز انواع بیماری های روانی از جمله سندرم دو قطبی در ارتباط است(22)ولی تا به حال مطالعه ای مبنی بر ارتباط بین استعداد افراد اسکیزوفرنیک و پلی مورفیسم در جایگاه های ذکر شده از ژن P2RX4 گزارش نشده است.

با توجه به شیوع نسبتاً بالای بیماری اسکیزوفرنی در بین بیماریهای مرتبط با اعصاب و روان، بر آن شدیم تا پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی احتمالی در 4 ژن LIF, CREBL1,P2RX4, KIF26B, GABRB2 را در جمعیتی از بیماران مراجعه کننده به کلنیک روانپزشکی بهاران (در شهر زاهدان) بررسی گردد.

فراوانی پلی مورفیسمrs929271ژن LIF درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی و افراد سالم متفاوت است.

فراوانی پلی مورفیسم rs8283 ژن CREBL1 درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی و افراد سالم متفاوت است.

فراوانی پلی مورفیسم rs12407427 ژنKIF26B درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی و افراد سالم متفاوت است.

فراوانی پلی مورفیسم rs1816072 ژنGABRB2 درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی و افراد سالم متفاوت است.

فراوانی پلی مورفیسم rs12187676 ژنGABRB2 درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی و افراد سالم متفاوت است

فراوانی پلی مورفیسم rs256414 ژنP2RX4 درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی و افراد سالم متفاوت است

فراوانی پلی مورفیسم rs1169727 ژنP2RX4 درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی و افراد سالم متفاوت است

تعیین فراوانی پلی مورفیسم های ژنrs929271) LIF )، CREBL1 (rs8283) ، KIF26B ,(rs12407427)(rs1816072,rs12187676) GABRB2 وP2RX4(rs1169727,rs256414)در افراد مبتلا به اسکیزوفرنی و مقایسه با افراد سالم

تعیین توزیع  فراوانی پلی مورفیسم rs929271 ژنLIF درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی با افراد سالم

تعیین توزیع    فراوانیپلی مورفیسم rs8283 ژن CREBL1 در افراد مبتلا به اسکیزوفرنی با افراد سالم

تعیین توزیع    فراوانی پلی مورفیسم rs12407427 ژنKIF26B درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی با افراد سالم

تعیین توزیع    فراوانی پلی مورفیسم rs1816072 ژنGABRB2 درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی با افراد سالم

تعیین توزیع    فراوانی پلی مورفیسم rs12187676 ژنGABRB2 درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی با افراد سالم

تعیین توزیع    فراوانی پلی مورفیسم rs1169727ژنP2RX4 درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی با افراد سالم

تعیین توزیع    فراوانی پلی مورفیسم rs256414ژنP2RX4 درافراد مبتلا به اسکیزوفرنی با افراد سالم

مراکز تحقیقاتی و دانشگاه های علوم پزشکی

اسکیزوفرنی : یک اختلال روانی شایع است که از ویژگی‌های بارز آن فقدان توانایی در اندیشیدن، عاطفه ضعیف، انجام رفتارهای نامعقولو ناتوانی در درک واقعیت است.

پلی‌مورفیسم: اختلاف توالی بازهای DNA در افراد یا گروه­های مختلف

پلی‌مورفیسم تک نوکلئوتیدی (single nucleotide polymorphism: SNP): اختلاف فقط یک باز در DNA. ساده­ترین و شایع­ترین نوع پلی‌مورفیسم می­باشد.

موردی – شاهدی (case-control)

گروه مورد: افراد بیمار اسکیزوفرنی که به تشخیص پزشک متخصص اعصاب و روان بر پایه معیار های تشخیصی DSM-IV-TR (انجمن روانپزشکی آمریکا،2004) به اسکیزوفرنی مبتلا و در بخش اعصاب و روان بیمارستان روانپزشکی بهاران و مرکز درمان و توانبخشی بیماران روانی مزمن، گلبرگ و یاس شهرزاهدان بستری شده اند.

گروه شاهد: افراد سالم که برای انجام آزمایشات پیش از ازدواج به آزمایشگاه کلینیک رزمجومقدم زاهدان مراجعه می کنند.

معیار های ورود به مطالعه : تأیید تشخیص اسکیزوفرنی حداقل توسط دو روانپزشک بر اساس معیار های تشخیصیDSM-IV-TR

معیار های خروج از مطالعه : داشتن سابقه ی بیماریهای ژنتیکی یا سابقه ی بیماری های روانی و یا هر بیماری مرتبط با سیستم اعصاب مرکزی در افراد کنترل . همچنین اگر افراد هر دو گروه کیس و کنترل مورد مطالعه دارای سابقه ی بیماری های التهابی یا سرطان باشند، از مظالعه حذف خواهند شد.

برای بررسی پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدیازافراد مبتلا به اسکیزوفرنی در زاهدان که هم اکنون تحت درمان می باشندبه تعداد ۱۰۰ نفر با توجه به هزینه طرح خون گرفته شده و در طول اجرای طرح افراد جدید اضافه می شوند .

نمونه گروه شاهد این پژوهش شامل افرادسالمکهبرایانجامآزمایشاتپیشازازدواجبه آزمایشگاه کلینیک رزمجو مقدم زاهدانمراجعهمیکنند که پس از  همسان سازی ۱۰۰ نفررا به روش نمونه گیری در دسترس انتخاب شده و در طول اجرای طرح نیز به این تعداد اضافه می شود .

به صورت سر شماریو آسان در دسترس

مشاهده و بررسی‌های آزمایشگاهی

بعد از کسب رضایت از بیماران و گروه کنترل برای بررسی  پلی مورفیسم  نمونه خون تام تحت شرایط استریل به مقدار 2 سی سی گرفته و در لوله حاوی ماده ضد انعقادEDTA ریخته و  در 20- درجه سانتیگراد تا زمان ازمایش نگهداری می‌شود. DNA نمونه خون افراد گروه شاهد و مورد به روش salting out تخلیص می‌شود. پرایمرهای اختصاصیجهت تعیین پلی مورفیسم ژنی به روش PCR-RFLP و ARMS-PCRطراحی می شود.در مرحله بعد شرایط PCR برای تعیین این پلیمورفیسم ها بهینه شده و پس از انکوبه کردن نمونه ها در روش PCR-RFLP به مدت 16 ساعت با آنزیم های Hinf1 (برش دهنده ی rs929271 ) و MSP1 (برش دهنده ی rs8283 ) ، نمونه ها در ژل اگارز 2 درصد بررسی می شوند و  فراوانی ژنوتیپ های مختلف برای هر دو جایگاه  ژنی با این مورد ارزیابی قرار می‌گیرد. برای جایگاه های دیگر مورد مطالعه ( rs1169727,rs12407427,rs256414, rs12187676 و rs1816072) از روش ARMS-PCR استفاده می شود که به طور کلی پروتوکل مشابهی داشته و عمده ترین تفاوت آن با روش PCR-RFLP، عدم نیاز به زمان انکوباسیون است.

پس از گردآوری اطلاعات لازم، یافته هادر نرم افزار آماری SPSS 16  وارد گشته و داده ها بااستفاده  از آزمون آماری  Chi square   ، independent sample T testداده‌هامورد تجزیه و تحلیل قرار خواهند گرفت.   

راهنمای عمومی ازمودنی انسانی 

{کدهای 1(هدف اصلی پژوهش ارتقای سلامت انسان‌ها توأم با رعایت کرامت و حقوق ایشان است)

2(در پژوهش بر آزمودنی انسانی، سلامت و ایمنی فرد فرد آزمودنی‎ها در طول و بعد از اجرای پژوهش، بر تمامی مصالح دیگر اولویت دارد. هر پژوهشی که بر روی آزمودنی انسانی انجام می‌گیرد، باید توسط افرادی طراحی و اجرا شود که تخصص و مهارت بالینی لازم و مرتبط را داشته باشند. در کارآزمایی‌های بالینی  بر روی بیماران یا داوطلب‌های سالم نظارت پزشک دارای مهارت و دانش متناسب الزامی است.)

13(کسب رضایت آگاهانه و آزادانه در هر پژوهشی که بر روی آزمودنی انسانی اجرا می‌شود، الزامی است. این رضایت باید به شکل کتبی باشد. در مواردی که اخذ رضایت آگاهانه‌ی کتبی غیر ممکن یا قابل صرف‌نظر باشد، باید موضوع با ذکر دلایل به کمیته‌ی اخلاق منتقل شود. در صورت تأیید کمیته‌ی اخلاق، اخذ رضایت کتبی قابل تعویق یا تبدیل به رضایت شفاهی یا ضمنی خواهد بود.)

14(اگر در طول اجرای پژوهش تغییری در نحوه اجرای پژوهش داده شود یا اطلاعات جدیدی به دست آید که احتمال داشته باشد که بر تصمیم آزمودنی مبنی بر ادامه‌ی شرکت در پژوهش تاثیر گذار باشد، باید موضوع به اطلاع کمیته‌ی اخلاق رسانده شود و در صورت موافقت کمیته با ادامه‌ی پژوهش، مراتب به اطلاع آزمودنی رسانده شود و رضایت آگاهانه مجددا اخذ گردد.)

15(پژوهشگر باید از آگاهانه بودن رضایت اخذشده اطمینان حاصل کند. برای این منظور، در تمامی پژوهش‌های پزشکی، اعم از درمانی و غیردرمانی، پژوهشگر موظف است فرد در نظر گرفته شده به‌عنوان آزمودنی را از تمامی اطلاعاتی که می‌توانند در تصمیم‌گیری او مؤثر باشند، به‌نحو مناسبی آگاه سازد. این اطلاعات مشتملند بر: عنوان و اهداف پژوهش، طول مدت پژوهش، روشی که قرار است به‌کار گرفته شود (شامل احتمال تخصیص تصادفی به گروه‌مورد یا شاهد)، منابع تأمین بودجه، هر گونه تعارض منافع احتمالی، وابستگی  سازمانی پژوهشگر، و فواید و زیان‌هایی که انتظار می‌رود مطالعه در بر داشته باشد. هم‌چنین، هر آزمودنی باید بداند که می‌تواند هر لحظه که بخواهد از مطالعه خارج شود و باید درباره‌ی خطرات و زیان‌های بالقوه‌ی ناشی از ترک زودرس پژوهش آگاه و پشتیبانی شود. پژوهشگر هم‌چنین باید به تمامی سؤالات و دغدغه‌های این افراد، با حوصله و دقت پاسخ بدهد. این موارد باید در رضایت‌نامه‌ی آگاهانه منعکس شود.)

16(پژوهشگر باید از آزادانه بودن رضایت اخذ شده اطمینان حاصل کند. رفتارهایی که به هر نحوی متضمن تهدید، اغوا، فریب و یا اجبار باشد موجب ابطال رضایت آزمودنی می‌شود. به فرد باید فرصت کافی برای مشاوره با افرادی که مایل باشد – نظیر اعضای فامیل یا پزشک خانواده - داده شود. هم‌چنین، در پژوهش‌هایی که پژوهشگر مقام سازمانی بالاتری نسبت به آزمودنی  داشته باشد، دلایل این شیوه‌ی جذب آزمودنی، باید توسط کمیته‌ی اخلاق  تأیید شود، در این موارد شخص ثالث و معتمدی باید رضایت را دریافت کند.)

17(پژوهشگر ارشد مسؤول مستقیم ارائه‌ی اطلاعات کافی و به زبان قابل فهم برای آزمودنی ، اطمینان از درک اطلاعات ارائه شده، و اخذ رضایت آگاهانه است. در مواردی که بنا به‌دلیلی، نظیر زیاد بودن تعداد آزمودنی‌ها، این اطلاع‌رسانی از طریق شخص دیگری انجام می‌گیرد، این پژوهشگر ارشد است که مسؤول انتخاب فردی آگاه و مناسب برای این کار و حصول اطمینان از تأمین شرایط مذکور در این بند است.)

25(پژوهشگر مسؤول رعایت اصل رازداری و حفظ اسرار آزمودنی‌ها و اتخاذ تدابیر مناسب برای جلوگیری از انتشار آن است. هم‌چنین، پژوهشگر موظف است که از رعایت حریم خصوصی آزمودنی‌ها در طول پژوهش اطمینان حاصل کند. هرگونه انتشار داده‌ها یا اطلاعات به‌دست آمده از بیماران باید بر اساس رضایت آگاهانه انجام گیرد. )

26- 27-28-29-30-31 نیز استفاده خواهد شد .

راهنمای عمومی دفترچه عضو و بافت 

کدهای 1 الی 12 مد نظر قرار میگیرد .

-عدم همکاری بیمار که با توضیح بیشتر درباره این طرح و توضیح این مطلب که هیچ خطری انها را تهدید نمی کند برطرف می شود.

مشکل تهیه مواد وامکان طولانی شدن زمان دریافت آنها

که با وقت گذاشتن وپیگیری بیشتر حل می شود.

اسکیزوفرنی، پلی مورفیسم، LIF، ATF6B

1.       کوروش س, مریم ب. بررسی عوامل موثر در بروز اسکیزوفرنی در بیماران اسکیزوفرن شهرستان ایلام سال 81.

2.       Kaplan HI, Sadock BJ. Synopsis of psychiatry: Behavioral sciences clinical psychiatry: Williams & Wilkins Co; 1988.

3.       Kapelski P, Skibinska M, Maciukiewicz M, Wilkosc M, Frydecka D, Groszewska A, et al. Association study of functional polymorphisms in interleukins and interleukin receptors genes: IL1A, IL1B, IL1RN, IL6, IL6R, IL10, IL10RA and TGFB1 in schizophrenia in Polish population. Schizophrenia research. 2015;169(1-3):1-9.

4.       Okada Y, Yamazaki H, Sekine-Aizawa Y, Hirokawa N. The neuron-specific kinesin superfamily protein KIF1A is a uniqye monomeric motor for anterograde axonal transport of synaptic vesicle precursors. Cell. 1995;81(5):769-80.

5.       Bergen S, O'dushlaine C, Ripke S, Lee P, Ruderfer D, Akterin S, et al. Genome-wide association study in a Swedish population yields support for greater CNV and MHC involvement in schizophrenia compared with bipolar disorder. Molecular psychiatry. 2012;17(9):880.

6.       Barnabé-Heider F, Wasylnka JA, Fernandes KJ, Porsche C, Sendtner M, Kaplan DR, et al. Evidence that embryonic neurons regulate the onset of cortical gliogenesis via cardiotrophin-1. Neuron. 2005;48(2):253-65.

7.       Bonni A, Sun Y, Nadal-Vicens M, Bhatt A, Frank DA, Rozovsky I, et al. Regulation of gliogenesis in the central nervous system by the JAK-STAT signaling pathway. Science. 1997;278(5337):477-83.

8.       Watanabe Y, Hashimoto S, Kakita A, Takahashi H, Ko J, Mizuno M, et al. Neonatal impact of leukemia inhibitory factor on neurobehavioral development in rats. Neuroscience research. 2004;48(3):345-53.

9.       Okahisa Y, Ujike H, Kunugi H, Ishihara T, Kodama M, Takaki M, et al. Leukemia inhibitory factor gene is associated with schizophrenia and workingmemory function. Progress in Neuro-Psychopharmacology and Biological Psychiatry. 2010;34(1):172-6.

10.     Barcellos LF, May SL, Ramsay PP, Quach HL, Lane JA, Nititham J, et al. High-density SNP screening of the major histocompatibility complex in systemic lupus erythematosus demonstrates strong evidence for independent susceptibility regions. PLoS genetics. 2009;5(10):e1000696.

11.     Wei J, Hemmings G. TNXB locus may be a candidate gene predisposing to schizophrenia. American Journal of Medical Genetics PartB: Neuropsychiatric Genetics. 2004;125(1):43-9.

12.     Li X, Bykhovskaya Y, Haritunians T, Siscovick D, Aldave A, Szczotka-Flynn L, et al. A genome-wide association study identifies a potential novel gene locus for keratoconus, one of the commonest causes for corneal transplantation in developed countries. Human molecular genetics. 2011;21(2):421-9.

13.     Lichtshtein D, Dobkin J, Ebstein R, Biederman J, Rimon R, Belmaker R. Gamma-aminobutyric acid (GABA) in the CSF of schizophrenic patients before and after neuroleptic treatment. The British Journal of Psychiatry. 1978;132(2):145-8.

14.     Lo W-S, Harano M, Gawlik M, Yu Z, Chen J, Pun FW, et al. GABRB2 association with schizophrenia: commonalities and differences between ethnic groups and clinical subtypes. Biological psychiatry. 2007;61(5):653-60.

15.     Ma D, Whitehead P, Menold M, Martin E, Ashley-Koch A, Mei H, et al. Identification of significant association and gene-gene interaction of GABA receptor subunit genes in autism. The American Journal of Human Genetics. 2005;77(3):377-88.

16.     Zhao C, Wang F, Pun FW, Mei L, Ren L, Yu Z, et al. Epigenetic regulation on GABRB2 isoforms expression: developmental variations and disruptions in psychotic disorders. Schizophrenia research. 2012;134(2-3):260-6.

17.     Gever JR, Cockayne DA, Dillon MP, Burnstock G, Ford AP. Pharmacology of P2X channels. Pflügers Archiv. 2006;452(5):513-37.

18.     North RA. Molecular physiology of P2X receptors. Physiological reviews. 2002;82(4):1013-67.

19.     Pelegrin P, Surprenant A. P2RX7 (purinergic receptor P2X, ligand-gated ion channel, 7). 2008.

20.     Biber K, Tsuda M, Tozaki‐Saitoh H, Tsukamoto K, Toyomitsu E, Masuda T, et al. Neuronal CCL21 up‐regulates microglia P2X4 expression and initiates neuropathic pain development. The EMBO Journal. 2011;30(9):1864-73.

21.     Todd JN, Poon W, Lyssenko V, Groop L, Nichols B, Wilmot M, et al. Variation in glucose homeostasis traits associated with P2RX7 polymorphisms in mice and humans. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 2015;100(5):E688-E96.

22.     Barden N, Harvey M, Gagné B, Shink E, Tremblay M, Raymond C, et al. Analysis of single nucleotide polymorphisms in genes in the chromosome 12Q24. 31 region points to P2RX7 as a susceptibility gene to bipolar affective disorder. American Journal of Medical Genetics Part B: Neuropsychiatric Genetics. 2006;141(4):374-82.

ندارد

برای بررسی فراوانی این دو جایگاه ژنی بعد از کسب رضایت از بیماران مبتلا به اسکیزوفرنی و گروه کنترل   نمونه خون تام تحت شرایط استریل به مقدار 3  سی سی گرفته و در لوله حاوی ماده ضد انعقادEDTA ریخته و  در 20- درجه سانتیگراد نگهداری می‌شود. DNA نمونه خون افراد گروه شاهد و مورد به روش salting out تخلیص می‌شود. پرایمرهای اختصاصی جهت تعیین پلی مورفیسم ژنی به روش PCR-RFLP طراحی می شود. در مرحله بعد شرایط PCR برای تعیین این پلی مورفیسم ها بهینه شده و پس از انکوبه کردن نمونه ها به مدت 16 ساعت با آنزیم های Hinf1  (برش دهنده ی rs929271 ) و MSP1 (برش دهنده ی rs8283 ) ، نمونه ها در ژل اگارز بررسی می شوند و  فراوانی ژنوتیپ های مختلف GT,TT و GG برای هر دو جایگاه  ژنی با این مورد ارزیابی قرار می‌گیرد.

جهت انجام آزمایش(شمارش سلولی) CBC افراد مورد مطالعه، در پایان ماه اول و سوم پس از درمان حداقل به میزان ۳ سی سی خون اخذ میگردد.

در صورت شرکت فعالانه در مطالعه ( انجام آزمایش شمارش سلولهای خونی)، پزشک معالج از وجود یک جهش ژنتیکی در محتوای ژنتیکی فرد مبتلا مطلع شده و این اطلاعات حاصل از مطالعه و همچنین کارهای تحقیقاتی مشابه می تواند زمینه ساز درک بهتری از سازکار این ژنها و دخالت آن در پاتوژنر اسکیزوفرنی در جمعیت های مختلف شود.

ندارد

ندارد

تمامی هزینه های مرتبط با اخذ نمونه ی CBC توسط مجری یا مجریان پرداخت خواهد شد و بیمار هزینه ای را پرداخت نخواهد کرد.

ندارد

نتایج آزمایشها و روشهای به کار رفته به اطلاع بیمار خواهد رسید و این نتایج بصورت کاملاً محرمانه و صرفاً جهت مقاصد پژوهش به کار خواهد رفت و هویت بیمار در چارچوب قانون محرمانه خواهد ماند.

آدرس و شماره تلفن تماس مجری یا مجریان طرح به صورت زیر بوده و در اختیار بیماران قرار خواهد گرفت :

دکتر رامین سراوانی : ۰۹۱55432609(دانشکده پزشکی ، دانشگاه علوم پزشکی زاهدان)

سامان سرگزی : 09103161030(مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی زاهدان)

شرکت در مطالعه کاملاً اختیاری است و بیمار مبتلا به اسکیزوفرنی آزاد خواهد بود که از شرکت در مطالعه امتناع نموده یا هر زمان  که مایل بود بدون آنکه تغییری در نحوه رفتار پزشک درمانگر یا نحوه درمان و مراقبت از بیماری وی ایجاد شود از پژوهش مذکور خارج شود.

با توجه به اطلاعات موجود در این فرم و توضیحات حضوری مجری یا همکاران طرح موافقت خود را با شرکت در این مطالعه اعلان می نمایم. یک نسخه از این فرم به من داده شده و فرصت خواندن آن را داشته ام.