بررسی میزان بیان ماتریکس متالو پروتِیناز 9 (MMP- 9) در کیست های ادونتوژنیک

کیست های ادونتوژنیک شایع ترین شکل ضایعات تخریب کننده سرو صورت هستند.(1). این ضایعات میتوانند از اجزای اپیتلیال جوانه دندان،اپیتلیوم کاهش یافته مینایی،بقایای اپیتلیوم مالاسز،بقایا ی لامینا دندان و یا لایه بازال اپیتلیوم دهان ایجاد شوند.رایج ترین کیست های ادونتوژنیک،کیست های رادیکولار ،کیست دنتی ژروس و ادونتوژنیک کراتوسیست هستند.(2) کیست رادیکولار  در اثر التهاب یا نکروز پالپ دندان درنتیجه پوسیدگی به وجود می آید .(2)

کیست دنتی ژروس کیست ادونتوژنیک پیشرفته مشتق از اپیتلیوم مینای دندان است که با بخش کرونالی دندان نهفته در ارتباط است.(2)

ادونتوژنیک کراتوسیست ،از جمله کیست های رشدی تکاملی می باشد که ممکن است رفتار کلینیکی تهاجمی نشان دهد و دارای عود بالایی می باشد .(2)

کلسیفائینگ ادونتوژنیک سیست،یک کیست نادر و ساده است که دارای طیف متنوعی از کیست های ادونتوژنیک تکاملی پیشرفته  تا تومور خوش خیم و یا احتمالا تومور بدخیم ادونتوژنیک است.(3)

عوامل مرتبط با اجزای اپیتلیال و مزانشیمی در تنظیم و رشد ضایعات و تومور های ادونتوژنیک شرکت میکنند.بیان اشکال پروتئین های خاصی از ماتریکس خارج سلولی همراه با حضور ماتریکس متالوپروتئیناز ها ممکن است رفتار این ضایعات را تحت تاثیر قرار دهد.(4)

ماتریکس متالو پروتیینازها عضوی از خانواده پروتئولیتیک وابسته به کلسیم و روی هستند که قادر به تخریب اجزای ماتریکس خارج سلولی تحت هر دو شرایط پاتولوژیک و فیزیولوژیک میباشند .(2و5)که به طور کلی ماتریکسین ها نامیده میشوند و به عنوان آنزیم کلیدی برای تخریب پروتئولیتیک ماتریکس خارج سلولی، پروسه تهاجمی و متاستاز معرفی شده اند. (6)مطالعات نشان میدهد که تخریب آنزیمی ماتریکس استخوانی و غشاء پایه توسط MMP -9 و دیگر متالوپروتئیناز ها در گسترش کیست های ادونتوژنیک مشارکت داشته است.(2)

MMP ها بر اساس ساختمان و محتویات درون آنها به 4 گروه تقسیم بندی میشوند: گروه کلاژناز شامل MMP- 1-8-13  ,گروه ژلاتیناز شامل MMP-2-9  ,گروهstromlysinکه شامل  MMP - 3-10

وگروه  membrane type که شاملMMp-14-17-24-25   می باشد.(5)

با توجه به داده های موجودMMp-9 نقش مهم و بسزایی در پیشرفت و گسترش بسیاری از تومورها دارد.(2،4،5،6،7)

  de Andrade Santos وهمکارنش با بررسیMMp-9 در عروق کیست  های ادونتوژنیک به این نتیجه رسیدند که بیشترین میزان بیان این مارکر در  بین کیست های رادیکولار و دنتیژروس و و ادونتوژنیک کراتوسیست در ادونتوژنیک کراتوسیست است.(2) همچنین  Águida Cristina   و همکارانش در بررسی میزان بیان این فاکتور در بین تومور هاو کیست های ادونتوژنیک دریافتند که  بیشترین بیان MMP -9   در ادونتوژنیک کراتوسیست و آملوبلاستوما است.(4)حال با توجه به اهمیت وجود این مارکر و تاثیر آن بر میزان  گسترش کیست های ادونتوژنیک و مطالعات اندک در زمینه کیست های رادیکولار ،دنتیژروس و ادونتوژنیک کراتوسیست و نبود مطالعه بر روی کلسیفائینگ ادونتوژنیک سیست برآن شدیم  که میزان بروز MMp-9   را در این کیست ها بررسی کنیم تا شاید با نتایج به دست آمده بتوانیم  پتانسیل  گسترش و  یا میزان تکامل هر کیست را مشخص کنیم.

1-میزان بیان MMP-9  در کیست رادیکولار  چقدراست؟

2- میزان بیان MMP-9در کیست دنتیژروس چقدراست؟

3-میزان بیان MMP-9 در ادونتوژنیک کراتوسیست چقدراست؟

4- میزان بیان MMP-9 در کلسیفائینگ ادونتوژنیک سیست چقدر است؟

5-میزان بیان MMP-9 در کیست های مورد مطالعه متفاوت است

تعیین میزان بیان MMP -9  در کیست های ادونتوژنیک

1- تعیین میزان بیان MMP -9 در رادیکولار سیست

2- تعیین میزان بیان MMP -9 در دنتیژروس سیست

3- تعیین میزان بیان MMP -9 در ادونتوژنیک کراتوسیست

4- تعیین میزان بیان MMP -9 در کلسیفائینگ ادونتوژنیک سیست

5-مقایسه  میزان بیان MMP-9 در کیست های مورد مطالعه

دندانپزشکان و پژوهشگران بیماریهای دهان و دندان

کیست ادونتوژنیک:شایعترین شکل ضایعات تخریب کننده سر و صورت هستند که  میتوانند از اجزای اپیتلیال جوانه دندان،اپیتلیوم کاهش یافته مینایی،بقایای اپستلیوم مالاسز،قایای لامینا دندان و یا لایه بازال اپیتلیوم دهان ایجاد شوند.(1،2)

ماتریکس متالوپروتییناز:عضوی از خانواده پروتئولیتیک وابسته به کلسیم و روی هستند که قادر به تخریب اجزای ماتریکس خارج سلولی تحت هر دو شرایط پاتولوژیک و فیزیولوژیک میباشند .(2،4) که به طور کلی ماتریکسین ها نامیده میشوند و به عنوان آنزیم کلیدی برای تخریب پروتئولیتیک ماتریکس خارج سلولی، پروسه تهاجمی و متاستاز معرفی شده اند(3)MMP -9 عضوی از گروه ژلاتیناز ماتریکس متالوپروتئیناز هااست که نقش مهم و بسزایی در گسترش و پیشرفت تومور ها و کیست های ادونتوژنیک دارد. .(2،4،5،6،7)

1. توصیفی_تحلیلی

نمونه ها شامل بلوک های پارافینی کیست های ادونتوژنیک که شامل ادونتوژنیک کراتوسیست، کیست دنتیژروس و کیست رادیکولار و کلسیفائینگ ادونتوژنیک سیست موجود در آرشیو  بخش آسیب شناسی دانشکده دندانپزشکی زاهدان هستند که مورد بررسی قرار می گیرند.

  معیار های ورود :

1-بلوک های پارافینی کیست های ادنتوژنیک که قابلیت انجام رنگ آمیزی ایمونوهیستوشیمی داشته باشند.

2-کیست هایی که نکروز نداشته باشند.

با توجه به نمونه های موجود در آرشیو دانشکده دندانپزشکی زاهدان تعداد 30 مورد از هر کدام از کیست های رادیکولار،دنتی ژروس و ادونتوژنیک کراتوسیت و 14 عدد از کلسیفائینگ ادونتوژنیک سیست مورد ارزیابی خواهد گرفت.

سرشماری

فرم اطلاعاتی (ضمیمه شماره 1)

تعداد97 نمونه ‌شامل 30عدد از کیست های ادونتوژنیک شامل کیست رادیکولار، دنتی ژروس کیست،ادونتوژنیک‌ کراتوسیست  و 7 عدد از کلسیفایینگ ادونتوژنیک سیست  طبق معیار های ورود و خروج از آرشیو پاتولوژی دهان و فک و صورت دانشگاه علوم پزشکی زاهدان انتخاب خواهد شد. از بلوک های پارافینی مربوط به این ضایعات برشهایی به ضخامت 4 میکرون تهیه شده و به روش ایمونوهیستوشیمی طبق کیت NOVOLINKبرای MMP -9   رنگ آمیزی میشوند،سپس نمونه ها توسط پاتولوژیست فک و صورت با میکروسکوپ نوری Nikon مورد بازبینی قرار خواهد گرفت و تعداد سلول های رنگ شده با MMP-9 در بافت همبند کیست های ادونتوژنیک در 10HPF شمرده خواهند شد و میانگین تعداد سلول های رنگ شده با MMP-9 به عنوان درصد بیان MMP-9 بیان خواهد شد.

برای توصیف داده ها از جداول و نمودار های آماری استفاده خواهد شد. برای تحلیل داده ها و میزان بیان MMP-9 در گروه ها از آزمون کروسکال والیس استفاده خواهد شد.  سطح معنی دار 0/05 در نظر گرفته میشود.

جدول 1-1 میزان بیان MMP-9 در کیستهای ادنتوژنیک

براساس راهنمای اخلاقی پژوهش بر روی عضو بافت انسانی در جمهوری اسلامی ایران، کدهای 1، 2، 3، 4، 5، 6، 7، 8، 9، 10، 11و  12 از راهنمای عمومی  و کد های 1،2،3،4، و 5 از فصل 4 رعایت شده است.

بر اساس راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش های علوم پزشکی دارای آزمودنی انسانی در جمهوری اسلامی ایران، کد های 1،2،3،4،8،9،10،11،13،16،25،27،28،29،30 و 31 رعایت شده است.

ندارد

کیست ادونتوژنیک،ماتریکس متالوپروتیناز،MMP_9

1.Nayak MT,Meghanand T,Anjali S,Abhishek S,Rohit S. Odontogenic keratocyst:what is in the name?.Journal of Natural Sciences, Biology, and Medicine2013;4(2):282_285.

2. de Andrade Santos PP1, de Aquino AR, Oliveira Barreto A, de Almeida Freitas R, Galvão HC, de Suoza LB .Immunohistochemical expression of nuclear factor KB,matrix metallo- proteins 9,and endoglin (CD105)in odontogenic keratocyst,dentigerous cyst,and radicular cyst.Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod2011 ;112(4):476-83.

3.Balaji S.M, Rooban T. Calcifying odontogenic cyst with a typical features.Annals of maxiilofacial surgery 2012 Jan;2(1):82.

4. Águida Cristina GH, Marcelo GV,Hébel CG,  Lélia BS,Roseana AF.Comparative analysis of the immunohistochemical expression of collagen IV, MMP-9, and TIMP-2 in odontogenic cysts and tumors.Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 2011;112:468_469.

5.Agata JT, Marzena M.Stanisłdrugs Matrix metalloproteinases (MMPs), the main extracellular matrix (ECM) enzymes in collagen degradation, as a target for anticancer drugs.J Enzyme Inhib Med Chem 2016; 31(S1): 177.

6.Nagase H ,Visse R,Murphy G.Structure and function of matrix metalloproteinase  and TIMPs.Cardiovascular Research 2006;69(3):562.

7.Farhadi S,Shahsavari F,Davardan M.The Possible Role of Mast Cells in the Odontogenic Cyst’s Pathogenesis: A Comparative Study between Dentigerous Cyst and Keratocystic Odontogenic Tumor.Pathology research international 2016;2016:1_2.

بررسی میزان بیان mmp-9 در کیست های ادونتوژنیک

ندارد

پتانسیل گسترش هر کیست مشخص میشود

ندارد

ندارد

 چنانچه در طرح تحقیقاتی اقدام تشخیصی یا درمانی انجام شود، هزینه به عهده مجری یا مجریان طرح خواهد بود و بیمار هزینه ای را پرداخت نخواهد کرد.

ندارد

 نتایج آزمایشها و روشهای به کار رفته به اطلاع بیمار خواهد رسید و این نتایج بصورت کاملاً محرمانه و صرفاً جهت مقاصد پژوهش به کار خواهد رفت و هویت بیماری وی در چارچوب قانون و جامعه و خانواده محرمانه خواهد ماند.

مجری موظف است پاسخگوی کلیه پرسش ها باشد. 

شرکت من در مطالعه کاملاً اختیاری است و آزاد خواهم بود که از شرکت در مطالعه امتناع نموده یا هر زمان  که مایل بودم بدون آنکه تغییری در نحوه رفتار پزشک درمانگر یا نحوه درمان و مراقبت از بیماری اینجانب ایجاد شود از پژوهش مذکور خارج شوم.

با توجه به اطلاعات موجود در این فرم و توضیحات حضوری مجری یا همکاران طرح موافقت خود را با شرکت در این مطالعه اعلان می نمایم. یک نسخه از این فرم به من داده شده و فرصت خواندن آن را داشته ام.

فرم اطلاعاتی (ضمیمه شماره 1)

سن:

جنس:

مکان ضایعه:

میزان بیان ماتریکس متالوپروتئیناز 9: