
| کد طرح | 9959 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی فعالیت آنتی باکتریال یک سیلر جدید با بیس copper doped zinc oxide nanoparticles در اندودنتیک |
| عنوان لاتین طرح | Evaluation of antibacterial activity of new copper doped zinc oxide nanoparticles sealer in endodontics |
| نوع طرح | بنیادی-کاربردی |
| محل اجرای طرح | دانشکده دندانپزشکی |
| رسته مطالعاتی | مطالعه تجربی (Experimental)(مطالعه کمی) |
| دانشکده/مرکز | دانشکده دندانپزشکی زاهدان |
| زمان اجرا -روز | 180 |

| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح | نوع همکاری | درجهتحصیلی | پست الکترونیک |
|---|---|---|---|---|
| اسحق علی صابری | استاد راهنمای اول پایان نامه دانشجویی | نظارت بر اجرای طرح | دکترای تخصصی | saberiendo@zaums.ac.ir |
| نرگس فرهاد ملاشاهی | استاد راهنمای دوم پایان نامه دانشجویی | نظارت بر اجرای طرح | دکترای تخصصی | nargesfarhadm@gmail.com |
| احمدرضا عباسیان | مشاور | تفسیر آزمایشات | دکترای تخصصی | abbasian@eng.usb.ac.ir |
| فاطمه راشکی قلعه نو | دانشجو | جمع آوری نمونه ها | دکترای تخصصی | fatemeh.rashki97@gmail.com |

| عنوان | متن | ||||||||||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| خلاصه طرح به فارسی | بررسی فعالیت آنتی باکتریال یک سیلر جدید با بیس copper doped zinc oxide nanoparticles در اندودنتیک | ||||||||||||||||||||||||||
| خلاصه طرح به لاتین | Evaluation of antibacterial activity of new copper doped zinc oxide nanoparticles sealer in endodontics | ||||||||||||||||||||||||||
| محل اول بکارگیری نتایج تحقیق | |||||||||||||||||||||||||||
| بيان مسئله تحقيق/اهمیت پژوهش | باکتری ها در محیط کانال ریشه بعد از درمان باقی می مانند یا مجددا در سیستم کانال ریشه پر شده کلونیزه می شوند که نقش مهمی در پیشرفت عفونت های اندودونتیک اولیه یا باقی مانده دارند (1-3) . میکروارگانیسم ها از طریق راه های مختلف همچون پوسیدگی ، پروسه جراحی دندان ، ترک و شکستگی ناشی از تروما و شکاف در سمان پوشاننده می توانند باعث عفونت پالپی گردند(4). عفونت اولیه کانال ریشه شامل یک گروه چند میکروبی می باشد که به اسانی از طریق درمان کانال ریشه از بین می رود. در مقابل باکتری های پایدار کانال ریشه حضور دارند مانند استرپتوکوک غیر موتانس، انتروکوک و لاکتوباسیل در مقابل درمان مقاوم ترند (5). میکروارگانیسم های کلونیزه شونده در سیستم کانال ریشه نکروزه می توانند ضایعه التهابی پری اپیکال را اغاز کنند (6) علی رغم پاکسازی، شکل دهی و کاربرد عوامل ضد میکروبی بسیار کارامد ، مطالعات بالینی تداوم حضور باکتری ها را در سیستم کانال ریشه نشان داده اند. (1, 7) محتمل ترین علت جدا از حضور پاتوژن های مقاوم، می تواند اناتومی پیچیده سیستم کانال ریشه باشد که محلی غیر قابل دسترس برای عوامل انتی باکتریال است. (8)
Entrococus Feacalis باکتری گرم مثبت بی هوازی اختیاری است که در ضایعات پری اپیکال پایدار یافت می شود. توانایی آن برای حمله به توبول های عاجی، مقاومت در شرایط سخت کانال ریشه و همچنین سازگاری در رقابت با سایر پاتوژن ها ، آن را در میان پاتوژن های دائمی و مزمن اندودونتیک قرار داده است (9).باکتری انتروکوک فکالیس قادر به سرکوب فعالیت لنفوسیت هاست که سبب شکست درمان های اندودونتیک می شود(10). Streptococcus Mutans باکتری گرم مثبتی است که در دهان انسان ساکن می باشد و به طور مشخصی در بیوفیلم چند گونه ای سطح دندان حضور دارد (11). استرپتوکوک موتانس بیشترین باکتری پوسیدگی زاست . (12, 13). توانایی زنده ماندن در محیط اسیدی در نتیجه تعدیل مسیر متابولیک قندی و اتصال غیرقابل برگشت به دندان ها یک جز کلیدی در پاتوژنز استرپتوکوک موتانس می باشد. در نهایت بیوفیلم به یک شرایط پایداری دست می یابد که تعادل زیست محیطی دهان را تغییر می دهد. (14, 15). یکی از اهداف درمان اندودونتیک، تکمیل ابچوریشن سیستم کانال ریشه می باشد. موفقیت ابچوریشن، مستقیما به حذف میکروارگانیسم ها از طریق پاکسازی ، شکل دهی مکانیکال ، استفاده از شستشودهنده های انتی باکتریال و پرکردن کافی فضای کانال وابسته می باشد.(16, 17) از انجا که ریشه کنی کامل میکروارگانیسم ها از فضای اندودونتیک قابل پیش بینی نیست فعالیت ضد میکروبی سیلر های کانال ریشه، ممکن است میکروارگانیسم های باقیمانده ای که پس از مراحل اماده سازی شیمیایی ومکانیکی تحت تاثیر قرار نگرفته اند را کاهش دهد. (18) بنابراین استفاده از روت کانال سیلر با فعالیت انتی باکتریال بالا سبب کاهش یا پیشگیری از رشد میکروارگانیسم ها می گردد و به روند ترمیم بافت اپیکالی و پری اپیکال کمک می کند.(19)
اهداف سیلرهای کانال ریشه پیشگیری از کلونیزه شدن مجدد باکتری ها و الودگی مجدد سیستم کانال ریشه و حذف شکاف های بین مواد پرکردگی و دیواره کانال می باشد.(17, 20-22)امروزه 7 نوع سیلر کانال ریشه وجود دارد که در کار عملی استفاده می شود و با توجه به ترکیب شیمیایی شان طبقه بندی می شوند و شامل سیلر با بیس کلسیم سیلیکات ، زینک اکساید اوژنول، اپوکسی، سیلیکون، بایوسرامیک، کلسیم هیدروکساید و گلاس اینومر می باشد.(23) رایج ترین سیلر مورد استفاده در درمان کانال ریشه سیلر های با بیس زینک اکساید اوژنول می باشد. پودر این سیلرها متشکل از زینک اکساید (ZnO) می باشد که با یک مایع که به طور معمول اوژنول است ترکیب می گردد.(24) نانوپارتیکل ها به عنوان یکی از استراتژی های جدید بعلت ویژگی های فانکشنال و نواورانه خود در چند دهه گذشته مورد توجه قرار گرفته است. ذرات با ابعاد 1-1000 نانومتر (به طور معمول 5-350 نانومتر) ساخته شده از ماده زیست سازگار که می تواند به عنوان نانوپارتیکل تعریف گردد(25). بر طبق مطالعات انجام شده، فرمولاسیون های با بیس نانو باعث نفوذ بهتر و ازاد سازی کنترل شده و ارام اجزای فعال در ناحیه هدف می گردد(26, 27). نواحی سطحی بالای نانوپارتیکل ها و در نتیجه غلظت بالاتر در ناحیه هدف بیشترین فاکتورهای موثر در خواص انتی میکروبیال ان در مقایسه با همتایان معمولش می باشد(28, 29).
Entrococus Feacalis باکتری گرم مثبت بی هوازی اختیاری است که در ضایعات پری اپیکال پایدار یافت می شود. توانایی آن برای حمله به توبول های عاجی، مقاومت در شرایط سخت کانال ریشه و همچنین سازگاری در رقابت با سایر پاتوژن ها ، آن را در میان پاتوژن های دائمی و مزمن اندودونتیک قرار داده است (9).باکتری انتروکوک فکالیس قادر به سرکوب فعالیت لنفوسیت هاست که سبب شکست درمان های اندودونتیک می شود(10). Streptococcus Mutans باکتری گرم مثبتی است که در دهان انسان ساکن می باشد و به طور مشخصی در بیوفیلم چند گونه ای سطح دندان حضور دارد (11). استرپتوکوک موتانس بیشترین باکتری پوسیدگی زاست . (12, 13). توانایی زنده ماندن در محیط اسیدی در نتیجه تعدیل مسیر متابولیک قندی و اتصال غیرقابل برگشت به دندان ها یک جز کلیدی در پاتوژنز استرپتوکوک موتانس می باشد. در نهایت بیوفیلم به یک شرایط پایداری دست می یابد که تعادل زیست محیطی دهان را تغییر می دهد. (14, 15). یکی از اهداف درمان اندودونتیک، تکمیل ابچوریشن سیستم کانال ریشه می باشد. موفقیت ابچوریشن، مستقیما به حذف میکروارگانیسم ها از طریق پاکسازی ، شکل دهی مکانیکال ، استفاده از شستشودهنده های انتی باکتریال و پرکردن کافی فضای کانال وابسته می باشد.(16, 17) از انجا که ریشه کنی کامل میکروارگانیسم ها از فضای اندودونتیک قابل پیش بینی نیست فعالیت ضد میکروبی سیلر های کانال ریشه، ممکن است میکروارگانیسم های باقیمانده ای که پس از مراحل اماده سازی شیمیایی ومکانیکی تحت تاثیر قرار نگرفته اند را کاهش دهد. (18) بنابراین استفاده از روت کانال سیلر با فعالیت انتی باکتریال بالا سبب کاهش یا پیشگیری از رشد میکروارگانیسم ها می گردد و به روند ترمیم بافت اپیکالی و پری اپیکال کمک می کند.(19)
اهداف سیلرهای کانال ریشه پیشگیری از کلونیزه شدن مجدد باکتری ها و الودگی مجدد سیستم کانال ریشه و حذف شکاف های بین مواد پرکردگی و دیواره کانال می باشد.(17, 20-22)امروزه 7 نوع سیلر کانال ریشه وجود دارد که در کار عملی استفاده می شود و با توجه به ترکیب شیمیایی شان طبقه بندی می شوند و شامل سیلر با بیس کلسیم سیلیکات ، زینک اکساید اوژنول، اپوکسی، سیلیکون، بایوسرامیک، کلسیم هیدروکساید و گلاس اینومر می باشد.(23) رایج ترین سیلر مورد استفاده در درمان کانال ریشه سیلر های با بیس زینک اکساید اوژنول می باشد. پودر این سیلرها متشکل از زینک اکساید (ZnO) می باشد که با یک مایع که به طور معمول اوژنول است ترکیب می گردد.(24) نانوپارتیکل ها به عنوان یکی از استراتژی های جدید بعلت ویژگی های فانکشنال و نواورانه خود در چند دهه گذشته مورد توجه قرار گرفته است. ذرات با ابعاد 1-1000 نانومتر (به طور معمول 5-350 نانومتر) ساخته شده از ماده زیست سازگار که می تواند به عنوان نانوپارتیکل تعریف گردد(25). بر طبق مطالعات انجام شده، فرمولاسیون های با بیس نانو باعث نفوذ بهتر و ازاد سازی کنترل شده و ارام اجزای فعال در ناحیه هدف می گردد(26, 27). نواحی سطحی بالای نانوپارتیکل ها و در نتیجه غلظت بالاتر در ناحیه هدف بیشترین فاکتورهای موثر در خواص انتی میکروبیال ان در مقایسه با همتایان معمولش می باشد(28, 29). Zn برای سال های زیادی به بسیاری از مواد دندانی به دلیل توانایی برای مهار رشد باکتری ها افزوده می شود (30). ذرات ZnO در ابعاد نانو نسبت به میکرو دارای خواص ضد باکتری بیشتری می باشد(31). نانوذرات اکسید روی می تواند به دلیل واکنش با سطح باکتری یا ورود به داخل آن از رشد باکتری پیشگیری کند. (32). تعداد کمی از مطالعات پیشنهاد دادند که عامل اولیه فعالیت ضد باکتریال نانوپارتیکل ZnO ممکن است اختلال در فعالیت غشای سلولی باشد(33). احتمال دیگر می تواند القای گونه های اکسیژن فعال بین سلولی شامل هیدروژن پراکساید (H2O2 ) ، که یک ماده اکسید کننده قوی مضر برای سلول های باکتریایی می باشد، باشد(34, 35). اخیرا ZnO اصلاح شده توسط doping فلزاتی همچون : Ag ، Mn،Fe ، Cu، Cr، Al تولید شده است. نتیجه doped این فلزات به ZnO نشان دهنده تغییر در ویژگی های نوری ، مغناطیسی و الکتریکی ان می باشد. با استفاده از فرایند doping از ترکیب مجدد charge carrier (عامل محدود کننده جهت دستیابی به حداکثر اثر بخشی فتوکاتالیست) جلوگیری می شود. Cu هدایت الکترونیکی بسیار بالایی دارد و ارزان و بسیار در دسترس می باشد و یکی از مهمترین عوامل doping جهت بهبود فعالیت فتوکاتالیتیک می باشد (32). انتظار می رود doping مس در ZnO جذب و دیگر خواص فیزیکی و شیمیایی ZnO را تغییر دهد(36, 37). با تکامل فناوری نانوو استفاده از نانوذرات اکسید روی می توان گام های کلیدی برای توسعه آن به عنوان ترکیبات ضد باکتریایی برداشت. در سال 2011 مطالعه ای توسط Yanping و همکارانش درباره فعالیت انتی باکتریال و مکانیسم عمل نانوپارتیکل زینک اکساید بر علیه Campylobacter jejuni انجام شد و به این نتیجه رسیدند نانوپارتیکل ZnO طیف وسیع اثرآانتی باکتریال دارد و مکانیسم انتی باکتریال ان با احتمال زیاد به علت اختلال در یکپارچگی غشا سلول و ایجاد استرس اکسیداتیو در Campylobacter می باشد (38). در سال 2012 مطالعه ای توسط hajipour و همکاران جهت بررسی خواص انتی باکتریال نانوپارتیکل ها صورت گرفت که در ان اشاره به اثر انتی باکتریال نانوپارتیکل ها از طریق اتصال ان ها به غشای باکتری توسط تداخل الکترواستاتیک و در نتیجه تداخل در یکپارچگی غشای سلولی شده است. و مکانیسم سمیت نانوپارتیکل بستگی به ترکیب ان، تغییر سطح ایجاد شده، خواص درونی و گونه باکتری که تحت تاثیر قرار میگیرد دارد(39). یک مرور سیستماتیک توسط samiei و همکاران در سال 2016 در ارتباط با اهداف انتی باکتریال نانوپارتیکل ها در اندودونتیک انجام گرفت و به این نتیجه رسیدند که کلیه سیستم های نانوپارتیکل نسبت به روشهای معمول انتی میکروبیال باعث بهبود خواص ضد باکتریایی در عفونت سیستم کانال ریشه می شود با این وجود درک نقاط ضعف و اثرات سلولی و سمیت و اثرات محیطی بسیار مهم است (40). یک مرور سیتماتیک توسط Manal Mohamed و همکاران در سال 2018 جهت بررسی فعالیت آنتی باکتریال زینک بر علیه استرپتوکوک موتانس صورت گرفت و اثر آنتی باکتریال زینک را در مطالعات صورت گرفته در سالهای 1990 تا 2016 که از روش های MIC, MBC, ZOI, CFU استفاده شده بود مورد بررسی قرار داد. کاهش قابل توجه تعداد باکتری ها پس از افزودن زینک حتی در غلظت های کم مشاهده شده بود. بجز دو مطالعه که اثر پیشگیری کننده زینک در آن ها مشاهده نشد(41). یک مطالعه ازمایشگاهی توسط zarei و همکاران در سال 2018جهت بررسی اثر انتی میکروبیال نانو زینک اکساید اوژنول انجام شد. در این مطالعه اثر انتی میکروبیال 3 نوع سیلر(نانو زینک اکساید اوژنول ، Pulpdent ، AH26 ) توسط Direct Contact Test در زمان های مختلف مورد ارزیابی قرار گرفت. هر سه نوع سیلر اثر انتی باکتریال بر علیه میکروارگانیسم های مورد استفاده در مطالعه داشتند. نانو زینک اکساید اوژنول عمل انتی باکتریال قابل توجهی در مقایسه با دو نوع سیلر دیگر در حذف موثر کلونی های کاندیدا البیکنس نشان داد. (24) با وجود انجام مطالعات بر روی سیلر نانو زینک اکساید اوژنول، تاکنون مطالعه مشابهی که به بررسی نانوپارتیکل های اکسید روی که توسط doping مس تولید شده باشد به چشم نمی خورد. از این رو هدف از این مطالعه بررسی فعالیت آنتی باکتریال یک سیلر جدید با بیس copper doped zinc oxide nanoparticles در اندودنتیک بر روی باکتری های استاندارد انتروکوکوس فکالیس و استرپتوکوک موتانس می باشد. | ||||||||||||||||||||||||||
| مشکل جاری که سیاست گزار با آن مواجه است کدام است؟ | |||||||||||||||||||||||||||
| روش های موجود کدامها هستند؟ | |||||||||||||||||||||||||||
| پیشنهاد اول نحوه کاربرد | |||||||||||||||||||||||||||
| محل دوم بکارگیری نتایج تحقیق | |||||||||||||||||||||||||||
| سوالات و / یا فرضیات پژوهش |
| ||||||||||||||||||||||||||
| هدف کلی طرح | تعیین اثرات آنتی باکتریال سیلر جدید با بیس copper doped zinc oxide nanoparticles بر روی باکتری استاندارد انتروکوکوس فکالیس و استرپتوکوک موتانس | ||||||||||||||||||||||||||
| منافع و مضرات روشهای موجود کدامند؟ | |||||||||||||||||||||||||||
| چرا پیام تحقیق شما حلال مشکل جاری است؟ | |||||||||||||||||||||||||||
| اهداف اختصاصی |
| ||||||||||||||||||||||||||
| پیشنهاد دوم نحوه کاربرد | |||||||||||||||||||||||||||
| محل سوم بکارگیری نتایج تحقیق | |||||||||||||||||||||||||||
| سازمانها، مراکز و موسسات و سایر بهره برداران بالقوه دستاوردهای طرح | دانشجویان و دندانپزشکان | ||||||||||||||||||||||||||
| پیام تحقیق شما چه منافعی از نظر هزینه، کارایی و بهره وری برای مدیر دارد؟ | |||||||||||||||||||||||||||
| برای اجرای راه حل پیشنهادی شما چه موانع و حمایتهایی وجود دارند؟ | |||||||||||||||||||||||||||
| تعریف واژه های تخصصی |
ZOI (zone of inhabitation) قطر هاله عدم رشد باکتری ها در اطراف ماده انتی باکتریال مورد بررسی CFU (Colony forming unit) در میکروبیولوژی، یک واحد تشکیل کلنی، واحدی است که برای تخمین تعداد سلولهای باکتریایی یا قارچی زنده در یک نمونه بکار میرود. هدف از شمارش کلنیهای پلیت، تخمین تعداد سلولها بر اساس توانایی آنها برای رشد و ایجاد کلنی تحت شرایط تغذیه ای، دمایی و زمانی خاص است (42, 43). | ||||||||||||||||||||||||||
| پیشنهاد سوم نحوه کاربرد | |||||||||||||||||||||||||||
| محل چهارم بکارگیری نتایج تحقیق | |||||||||||||||||||||||||||
| نوع مطالعه | آزمایشگاهی | ||||||||||||||||||||||||||
| جامعه مورد مطالعه(معرفی مشارکت کنندگان)/ محیط پژوهش(معیارهای ورود و خروج ذکر شوند) | محیط کشت حاوی باکتری های انتروکوک فکالیس و استرپتوکوک موتانس | ||||||||||||||||||||||||||
| پیشنهاد چهارم نحوه کاربرد | |||||||||||||||||||||||||||
| حجم نمونه و روش محاسبه آن | با توجه به این که کلیه مراحل 3 نوبت تکرار خواهد شد ، در این مطالعه 200 پلیت استفاده خواهد شد. | ||||||||||||||||||||||||||
| روش نمونه گیری(نحوه تخصیص تصادفی و همسانسازی در صورت لزوم ذکر شود) | آسان و در دسترس | ||||||||||||||||||||||||||
| روش و ابزار جمع آوري داده ها / صحت و استحکام داده ها (پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی ضمیمه شود) | انجام فرایند ازمایشگاهی و ثبت درفرم اطلاعاتی ضمیمه | ||||||||||||||||||||||||||
| روش اجرای طرح(با جزئیات بطور کامل شرح داده شود) | تست انتشار اگار: دراین مطالعه از باکتری استرپتوکوک موتانس (IBRC-M 10682) وانتروکوک فکالیس (ATCC-29212) که از شرکت ایران کیت خریداری می گردد، استفاده می شود. برای تعیین zone of inhibition از روش انتشار اگار استفاده می گردد. در ابتدا باید سوسپانسیون باکتریایی با غلظت خاصی از سوش های استاندارد باکتری انتروکوکوس فکالیس و استرپتوکوک موتانس با محلول سالین تهیه کنیم، غلظت باکتری مطابق با 05 McFarland (تقریبا× 108 CFU 1.5)تنظیم می شود. بعد از تهیه پلیت های محتوی محیط کشت اگار مولر هینتون (از شرکت Merck کشور آلمان) ، 01 میلی لیتر سوسپانسیون حاوی میکروارگانیسم های مورد نظر به صورت چمنی بروی پلیت های حاوی محیط کشت تلقیح می شود. در هر پلیت 3 چاهک به قطر 5 میلی متر با استفاده از یک پیپت پاستور استریل پانچ می شود. سیلرهای تازه مخلوط شده بلافاصله پس از اماده سازی درون چاهک هر پلیت جهت ارزیابی، قرار میگیرد. 2 پلیت که یکی محیط کشت حاوی سوسپانسیون باکتریایی فاقد سیلر به عنوان کنترل مثبت و دیگری محیط کشت حاوی سیلر بدون سوسپانسیون باکتریایی به عنوان گروه کنترل منفی در نظر گرفته می شود . تمام پلیت ها در دمای اتاق به مدت 2 ساعت جهت نفود مواد نگهداری می شوند. سپس در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 48 ساعت در شرایط هوازی انکوبه می شوند. تمامی تست ها 3 بار تکرار میگردد و قطر مناطق مهار شده اطراف هر چاهک به وسیله یک خط کش با دقت 0̸5 میلی متر توسط همان اپراتور اندازه گیری می شود و میانگین نواحی اندازه گیری شده جهت ارزیابی فعالیت انتی باکتریال هر سیلر انالیز اماری می گردد. در نهایت داده های بدست آمده در چک لیست ثبت اطلاعات برای هر پلیت ثبت می گردد.
Direct contact test (DCT) DCTبرای ارزیابی خواص انتی باکتریال سیلر های کانال ریشه توسط شمارش تعداد کلونی های باکتریال پس از قرارگیری روی پلیت های اگار استفاده می شود. سیلر ها همانند روش انتشار اگار مخلوط می شوند و در بلوک های پلاستیکی استوانه ای شکل با قطر 5 میلی متر و عمق 5 میلی متر قرار داده می شوند نمونه ها به دو گروه تقسیم می شوند و در انکوباتور در دمای 37 درجه سانتی گراد و رطوبت 100% به مدت 2 روز( گروه 1) و 7 روز (گروه 2) قرار می گیرند. بلوک های سیلر به دست امده با استفاده از ceramic mixer (coor Tek , USA)اسیاب و پودر می شوند. پودر ها در پک های استریل مخصوص قرار داده می شوند و توسط گاز اتیلن اکساید استریل می شوند.50 میلی گرم از هر پودر سیلر توسط ترازوی دقیق (Mettler-Toledo ، مدل AE1633 ، دقت اندازه گیری 001 میلی گرم) اندازه گیری می شود و 1 میلی لیتر محلول سالین استریل به هر سیلر پودری با استفاده از پیپت استریل اضافه می شود به طوریکه یک سوسپانسیون با غلظت 50 میلی گرم بر میلی لیتر تولید شودسوسپانسیون باکتریایی 05 McFarland (تقریبا× 108 CFU 1.5) تهیه می شود. حجم های مساوی از سوسپانسیون باکتری و سوسپانسیون سیلر (1 میلی لیتر) با استفاده از یک همزن Bench mixer vortexer (sigma , USA) مخلوط می شوند. سوسپانسیون سالین بدون سیلر به عنوان کنترل منفی و سوسپانسیون باکتریایی به عنوان گروه کنترل مثبت در نطر گرفته می شود. 15 و 60 دقیقه پس از مخلوط کردن ، سوسپانسیون ها ده هزار بار رقیق می شوند و 001 میلی لیتر از سوسپانسیون رقیق شده در 3 نوبت بروی محیط کشت اگار مولر هینتون (شرکت Merck کشور آلمان) از قبل اماده شده قرار می گیرد. پس از انکوباسیون در دمای 37 درجه برای48 ساعت، کلونی های تشکیل شده بروی پلیت های اگار شمارش می شود. بنابراین تعداد کلونی های تشکیل شده (CFU) برای هر سیلر در دو زمان مختلف 48 ساعت و 7 روز محاسبه می شود. این ازمایشات 3 بار تکرار می گردد | ||||||||||||||||||||||||||
| روش تجزیه، تحليل و توصیف دادهها (نمونهاي از جدول توخالي ضميمه شود و روش هاي آماري مورد استفاده به طور كامل توضيح داده شود)(کیفی و کمی) | اطلاعات حاصل از بررسی های ازمایشگاهی، داده ها توسط روش های اماری یعنی میانگین ، فراوانی ، انحراف معیار و با استفاده از جداول و نمودار ها توسط نرم افزار SPSS نسخه 25 و با استفاده از ازمون Mann-whitney توصیف می گردد. در نهایت داده ها به صورت زیر توصیف می شود جدول شماره1- تعداد کلونی های باکتریال انتروکوک فکالیس و استرپتکوک موتانس پس از قرارگیری انواع سیلر در زمان های مختلف
جدول شماره 2- تعیین قطر هاله عدم رشئ باکتری های انتروکوک فکالیس و استرپتوکو موتانس با انواع سیلر ها
| ||||||||||||||||||||||||||
| ملاحظات اخلاقی |
کد 9 ,22 و28و 29و 30 و 31از دفترچه راهنمای عمومی اخلاق در پژوهش های علوم پزشکی دارای ازمودنی انسانی | ||||||||||||||||||||||||||
| محدودیتهای اجرائی طرح و پیش بینی جهت حل آنها | احتمال آلودگی محیط کشت به میکروارگانیسم های دیگر | ||||||||||||||||||||||||||
| کلمات کلیدی | اثر آنتی باکتریال، نانوذرات ، سیلر Antibacterial effects, nanoparticles | ||||||||||||||||||||||||||
| فهرست منابع و مراجع |
1. Nair P, Henry S, Cano V, Vera J. Microbial status of apical root canal system of human mandibular first molars with primary apical periodontitis after “one-visit” endodontic treatment. Oral Surgery, Oral Medicine, Oral Pathology, Oral Radiology, and Endodontology. 2005;99(2):231-52. 2. Shrestha A, Fong S-W, Khoo B-C, Kishen A. Delivery of antibacterial nanoparticles into dentinal tubules using high-intensity focused ultrasound. Journal of endodontics. 2009;35(7):1028-33. 3. Nair P. Pathogenesis of apical periodontitis and the causes of endodontic failures. Critical Reviews in Oral Biology & Medicine. 2004;15(6):348-81. 4. Skučaitė N, Pečiulienė V, Mačiulskienė V. Microbial infection and its control in cases of symptomatic apical periodontitis: a review. Medicina. 2009;45(5):343. 5. Allaker R. The use of nanoparticles to control oral biofilm formation. Journal of dental research. 2010;89(11):1175-86. 6. Zehnder M. Root canal irrigants. Journal of endodontics. 2006;32(5):389-98. 7. Zakaria M, Takeshita T, Shibata Y, Maeda H, Wada N, Akamine A, et al. Microbial community in persistent apical periodontitis: a 16S r RNA gene clone library analysis. International endodontic journal. 2015;48(8):717-28. 8. Ricucci D, Loghin S, Siqueira Jr JF. Exuberant biofilm infection in a lateral canal as the cause of short-term endodontic treatment failure: report of a case. Journal of endodontics. 2013;39(5):712-8. 9. Siqueira Jr JF, Rôças IN. Polymerase chain reaction–based analysis of microorganisms associated with failed endodontic treatment. Oral Surgery, Oral Medicine, Oral Pathology, Oral Radiology, and Endodontology. 2004;97(1):85-94. 10. Lee W, Lim S, Son H-H, Bae K-S. Sonicated extract of Enterococcus faecalis induces irreversible cell cycle arrest in phytohemagglutinin-activated human lymphocytes. Journal of endodontics. 2004;30(4):209-12. 11. Zero DT, Fontana M, Martínez-Mier EA, Ferreira-Zandoná A, Ando M, González-Cabezas C, et al. The biology, prevention, diagnosis and treatment of dental caries: scientific advances in the United States. The Journal of the American Dental Association. 2009;140:25S-34S. 12. Lemos JA, Quivey Jr RG, Koo H, Abranches J. Streptococcus mutans: a new Gram-positive paradigm? Microbiology. 2013;159(Pt 3):436. 13. Falsetta ML, Klein MI, Lemos JA, Silva BB, Agidi S, Scott-Anne KK, et al. Novel antibiofilm chemotherapy targets exopolysaccharide synthesis and stress tolerance in Streptococcus mutans to modulate virulence expression in vivo. Antimicrobial agents and chemotherapy. 2012;56(12):6201-11. 14. Islam B, Khan SN, Khan AU. Dental caries: from infection to prevention. Medical Science Monitor. 2007;13(11):RA196-RA203. 15. Raja M, Hannan A, Ali K. Association of oral candidal carriage with dental caries in children. Caries research. 2010;44(3):272-6. 16. Al-Khatib ZZ, Baum RH, Morse DR, Yesilsoy C, Bhambhani S, Furst ML. The antimicrobial effect of various endodontic sealers. Oral Surgery, Oral Medicine, Oral Pathology. 1990;70(6):784-90. 17. Grossman L. Antimicrobial effect of root canal cements. Journal of endodontics. 1980;6(6):594-7. 18. Pizzo G, Giammanco GM, Cumbo E, Nicolosi G, Gallina G. In vitro antibacterial activity of endodontic sealers. Journal of dentistry. 2006;34(1):35-40. 19. Poggio C, Lombardini M, Colombo M, Dagna A, Saino E, Arciola CR, et al. Antibacterial effects of six endodontic sealers. The International journal of artificial organs. 2011;34(9):908-13. 20. Abdulkader A, Duguid R, Saunders E. The antimicrobial activity of endodontic sealers to anaerobic bacteria. International Endodontic Journal. 1996;29(4):280-3. 21. Mickel AK, Nguyen TH, Chogle S. Antimicrobial activity of endodontic sealers on Enterococcus faecalis. Journal of Endodontics. 2003;29(4):257-8. 22. Lai C-C, Huang F-M, Yang H-W, Chan Y, Huang M-S, Chou M-Y, et al. Antimicrobial activity of four root canal sealers against endodontic pathogens. Clinical oral investigations. 2001;5(4):236-9. 23. Pawińska M, Łuczaj-Cepowicz E, Kierklo A, Marczuk-Kolada G, Hołownia A. Assessment of cytotoxic potential of root canal sealers after hardening-an ex vivo study. Advances in Hygiene & Experimental Medicine/Postepy Higieny i Medycyny Doswiadczalnej. 2015;69. 24. Zarei M, Javidi M, Gharechahi M, Joybari M, Tajzadeh P, Arefnejad M. An In vitro Evaluation of Antimicrobial Efficacy of new Nano-zinc Oxide Eugenol (NZOE). Journal of Dental Materials and Techniques. 2018;7(4):167-73. 25. Abeylath SC, Turos E. Drug delivery approaches to overcome bacterial resistance to β-lactam antibiotics. Expert opinion on drug delivery. 2008;5(9):931-49. 26. Gold K, Slay B, Knackstedt M, Gaharwar AK. Antimicrobial activity of metal and metal‐oxide based nanoparticles. Advanced Therapeutics. 2018;1(3):1700033. 27. Hallaj-Nezhadi S, Valizadeh H, Baradaran B, Dobakhti F, Lotfipour F. Preparation and characterization of gelatin nanoparticles containing pDNA encoding IL-12 and their expression in CT-26 carcinoma cells. Future Oncology. 2013;9(8):1195-206. 28. Sawai J, Igarashi H, Hashimoto A, Kokugan T, Shimizu M. Effect of particle size and heating temperature of ceramic powders on antibacterial activity of their slurries. Journal of chemical engineering of Japan. 1996;29(2):251-6. 29. YAMAMOTO O, HOTTA M, SAWAI J, SASAMOTO T, KOJIMA H. Influence of powder characteristic of ZnO on antibacterial activity. Journal of the Ceramic Society of Japan. 1998;106(1238):1007-11. 30. Daugela P, Oziunas R, Zekonis G. Antibacterial potential of contemporary dental luting cements. Stomatologija. 2008;10(1):16-21. 31. Liu W, Su P, Chen S, Wang N, Ma Y, Liu Y, et al. Synthesis of TiO 2 nanotubes with ZnO nanoparticles to achieve antibacterial properties and stem cell compatibility. Nanoscale. 2014;6(15):9050-62. 32. Cao F-F, Xin S, Guo Y-G, Wan L-J. Wet chemical synthesis of Cu/TiO 2 nanocomposites with integrated nano-current-collectors as high-rate anode materials in lithium-ion batteries. Physical Chemistry Chemical Physics. 2011;13(6):2014-20. 33. Hojati ST, Alaghemand H, Hamze F, Babaki FA, Rajab-Nia R, Rezvani MB, et al. Antibacterial, physical and mechanical properties of flowable resin composites containing zinc oxide nanoparticles. Dental materials. 2013;29(5):495-505. 34. Jones N, Ray B, Ranjit KT, Manna AC. Antibacterial activity of ZnO nanoparticle suspensions on a broad spectrum of microorganisms. FEMS microbiology letters. 2008;279(1):71-6. 35. Sawai J. Quantitative evaluation of antibacterial activities of metallic oxide powders (ZnO, MgO and CaO) by conductimetric assay. Journal of microbiological methods. 2003;54(2):177-82. 36. Karimi M, Ezzati M, Akbari S, Lejbini MB. ZnO microparticles, ZnO nanoparticles and Zn0. 9Cu0. 1O nanoparticles toward ethanol vapor sensing: A comparative study. Current Applied Physics. 2013;13(8):1758-64. 37. Choudhary B, Chawla S, Jayanthi K, Sood K, Singh S. Synthesis and surface modification of ZnO: Cu nanoparticles by silica and PMMA. Current Applied Physics. 2010;10(3):807-12. 38. Xie Y, He Y, Irwin PL, Jin T, Shi X. Antibacterial activity and mechanism of action of zinc oxide nanoparticles against Campylobacter jejuni. Appl Environ Microbiol. 2011;77(7):2325-31. 39. Hajipour MJ, Fromm KM, Ashkarran AA, de Aberasturi DJ, de Larramendi IR, Rojo T, et al. Antibacterial properties of nanoparticles. Trends in biotechnology. 2012;30(10):499-511. 40. Samiei M, Farjami A, Dizaj SM, Lotfipour F. Nanoparticles for antimicrobial purposes in Endodontics: A systematic review of in vitro studies. Materials Science and Engineering: C. 2016;58:1269-78. 41. Almoudi MM, Hussein AS, Hassan MIA, Zain NM. A systematic review on antibacterial activity of zinc against Streptococcus mutans. The Saudi dental journal. 2018;30(4):283-91. 42. Hernández-Sierra JF, Ruiz F, Pena DCC, Martínez-Gutiérrez F, Martínez AE, Guillén AdJP, et al. The antimicrobial sensitivity of Streptococcus mutans to nanoparticles of silver, zinc oxide, and gold. Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine. 2008;4(3):237-40. 43. Wikler MA. Methods for dilution antimicrobial susceptibility tests for bacteria that grow aerobically: approved standard. CLSI (NCCLS). 2006;26:M7-A. | ||||||||||||||||||||||||||
| معرفی پژوهش/ اهداف پژوهش (عین عبارت هدف پروپوزال را کپی نکنید. بلکه با جملاتی که برای مردم قابل فهم باشد (برای سواد حدود پنجم ابتدایی )هدف را برای شرکت کنندگان توضیح دهید.) در تمام این متن در صورتیکه شرکت کننده کودک یا فرد فاقد ظرفیت تصمیم گیری است باید مواردیکه منظور از "من"، فرد شرکت کننده بوده است به "کودک" یا "فرد تحت سرپرستی من" اصلاح شود و مواردیکه منظور از "من"، رضایت دهنده است به من به عنوان "ولی" یا "قیم قانونی" اصلاح شود. | مطالعه حاضر بررسی اثر انتی باکتریال ماده ای جدید در ازمایشگاه بروی باکتری های استاندارد خریداری شده از شرکت ایران کیت میباشد. مطالعه ازمایشگاهی است و بر انسان یا حیوانات صورت نمیپدیرد. و نیاز به فرم رضایت اگاهانه نیست. | ||||||||||||||||||||||||||
| خون گیری (آیا طرح شما نیاز به خونگیری دارد یا خیر) | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| نحوه همکاری/ مزایا ی طرح (در این بخش برای شرکت کنندگان به زبان ساده توضیح دهید که: چه مداخله ای بر روی آنها صورت میگیرد. چه اقدامات پاراکلینیکی بر روی آنها انجام میشود. چه نمونه ای و با چه حجمی از آنها میگیرید در این مدت چند نوبت مراجعه باید داشته باشند و به چه فواصلی چه اقداماتی را در پیگیری آنها انجام میدهید. (حتی میتوانید سود بالقوه ای که شرکت کنندگان میتوانند از شرکت در این پژوهش ببرند بنویسید. این سود میتواند شرح احتمال درمان یا تشخیص بهتر بیماریشان، دریافت خدمات سلامت رایگان و یا پرداخت مشوق مالی در ازای جبران همکاریشان باشد) | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| عوارض جانبی (منظور عوارض و میزان احتمال بروز آنها در این مطالعه است) | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| جبران عوارض احتمالی (برای آنکه شرکت کننده بتواند ارزیابی مناسبی از سود و زیان شرکت در پژوهش شما داشته باشد لازم است بتواند سود و زیان مداخلات معمول و مداخلات این پژوهش را مقایسه کند. به عنوان مثال میزان موفقیت و میزان عوارض هریک را مقایسه کند.) - او باید بداند كه اگر در حين و بعد از انجام پژوهش هم هر مشكلي اعم از جسمي و روحي به علت شرکت در اين پژوهش برایش پيش آمد درمان عوارض، و هزينههاي آن و غرامت مربوطه بر عهده مجري خواهد بود. | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| هزینه های مربوط به انجام طرح تحقیقاتی (تمام مداخلات پژوهشی باید برای بیمار رایگان باشد و بیمار بداند شامل چه مواردی هستند. ) | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| روش های جایگزین در صورت عدم تمایل به شرکت در مطالعه چه روش های درمانی برای بیمار ارائه خواهد شد | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| محرمانه بودن بیمار باید بداندکه دست اندر كاران اين پژوهش، كليه اطلاعات مربوط به او را نزد خود به صورت محرمانه نگهداشته و فقط اجازه دارند نتايج كلي و گروهي اين پژوهش را بدون ذکر نام و مشخصات بیمار منتشر كنند. و كميته اخلاق در پژوهش با هدف نظارت بر رعایت حقوق وی ميتواند به اطلاعات ایشان دسترسي داشته باشد. | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| پاسخگویی به پرسش ها در این بخش نام و اطلاعات دسترسی فردی از عوامل پژوهش را که بتواند اطلاعات صحیح و کافی در اختیار شرکت کنندگان قرار دهند و در مورد عوارض و نگرانیها راهنمایی لازم را ارائه دهند ذکر شود | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| حق نپذیرفتن یا انصراف بیمار باید بداند که شرکت اودر اين پژوهش کاملاً داوطلبانه است و مجبور به شرکت در اين پژوهش نيست و در صورت عدم شرکت از مراقبتهاي معمول تشخيصي و درماني محروم نخواهد شد او باید بداند كه حتي پس از موافقت با شركت در پژوهش ميتواند هر وقت كه بخواهد، پس از اطلاع به مجري، از پژوهش خارج شود و خروج اواز پژوهش باعث محرومیت از دریافت خدمات درمانی معمول برای اونخواهد شد. | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| رضایت او باید بداند که اگر اشکال يا اعتراضي نسبت به دست اندركاران يا روند پژوهش دارد مي تواند با كميته اخلاق در پژوهش دانشگاه تماس گرفته و مشکل خود را به صورت شفاهي يا كتبي مطرح نمايد. در انتهای فرم قید گردد : اينجانب موارد فوقالذکر را خواندم و فهميدم و بر اساس آن رضايت آگاهانه خود را براي شركت در اين پژوهش اعلام ميکنم. اينجانب ……………… خود را ملزم به اجراي تعهدات مربوط به مجري در مفاد فوق دانسته و متعهد ميگردم در تأمين حقوق و ايمني شركت كننده در اين پژوهش تلاش نمايم | ندارد | ||||||||||||||||||||||||||
| پرسشنامه یا فرم اطلاعاتی |
چک لیست ثبت داده های آزمایشگاهی
ماده مورد مطالعه □سیلر با بیس new copper doped zinc oxide nanoparticles
□سیلربا بیس new zinc oxide nanoparticles □سیلر زینک اکساید اوژنول Zno
نوع باکتری Entrococus feacalis□ Streptococcus mutans □ زمان 0 □ 48 ساعت 7روز□ قطر هاله .......... .......... ..........
تعداد کلنی های تشکیل شده پس از 2 روز:
تعداد کلنی های تشکیل شده پس از7 روز: |

| نام فایل | تاریخ درج فایل | اندازه فایل | دانلود |
|---|